慢性心理应激大鼠下丘脑环核苷酸和不同脑区核团c-fos蛋白表达及加味四逆散的影响

目的 观察慢性心理应激反应大鼠下丘脑环核苷酸系统和不同脑区核团c -fos蛋白表达的变化以及加味四逆散(JWSNS)的影响。方法 采用束缚制动的方法建立慢性心理应激反应大鼠模型,放射免疫法和免疫组织化学法检测大鼠下丘脑cAMP、cGMP含量和不同脑区核团c -fos蛋白表达的情况。结果 慢性心理应激可使大鼠下丘脑cAMP、cGMP含量显著升高 ( 1. 309±0. 62和 0. 136±0. 05 ) (P均 <0. 01),并可诱导c- fos在大鼠海马、大脑皮质、杏仁核、下丘脑室旁核(Pa)、室周核(Pe)以及弓状核(Arc)内广泛持续表达,其中以大脑皮质、杏仁核最为密集。JWSNS可明显降低心理应激大鼠下丘脑cAMP、cGMP含量(0. 877±0. 05和 0. 051±0. 02) (P均<0. 05)和上述脑区核团fos样免疫阳性神经元的数目,减少fos蛋白的表达。结论 cAMP、cGMP和c -fos参与慢性心理应激反应的机制;而JWSNS可能通过影响环核苷酸系统和c- fos蛋白的表达对慢性心理应激反应进行调控。     

应激大鼠室旁核神经元c-fos的表达

目的：为下丘脑室旁核参与应激反应提供形态学资料。方法：对铃声刺激大鼠为应激动物模型用免疫组织化学ABC法显示下丘脑室旁核神经元即早基因c-fos的表达。结果：铃声刺激使鼠室旁核神经元。尤其是小细胞亚核神经元c-fos表达显著增加。结论：下丘脑室旁核神经元在铃声刺激下处于活动状态。参与应激反应。     

心理应激对不同行为类型者血浆环核苷酸含量影响的研究2

目的 了解不同行为类型应激者血浆环核苷酸变化，为探讨心理行为因素引起冠心病的中介机制的研究提供前瞻性资料。方法 用前瞻性方法研究高考应激高考生血浆环核苷酸含量的影响。结果 应激前，ＴＡＢＰ的高考生血浆ＣＡＭＰ含量显著高于ＴＢＢＰ的高考生；应激后，ＴＡＢＰ和ＴＢＢＰ高考生血浆ＣＡＭＰ含量和ＣＡＭＰ／ＣＧＭＰ比值均显著降低，血浆ＣＧＭＰ含量均显著升高，而且ＣＡＭＰ下降程度，ＣＧＭＰ上升程度以及ＣＡＭＰ     

心理应激对不同行为类型者血浆环核苷酸含量影响的研究1

目的 了解不同行为类型的医学生应激前后血浆ＣＮ含量变化，为探讨心理行为因素引发冠心病中介机制的研究前瞻性资料。方法 用前瞻性方法研究解剖学期终考试对不同行为 医学生血浆环核苷酸（ＣＮ）含量的影响。结果 应激前，ＴＡＢＰ医学生血浆ｃＡＭＰ含量显著高于ＴＢＢＰ医学生；应激后，ＴＡＢＰ和ＴＢＢＰ医学生血浆ｃＡＭＰ均显著下降，其下降程度前者明显大于后者，；血浆ＣＧＭＰ含量均下降，但无差异，ＣＡＭＰ／ＣＧＭ     

慢性激怒应激对大鼠血和结肠粘膜前列腺素E2,环核苷酸的影响

观察慢性激怒应激对大鼠血及结肠粘膜中前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）、ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量的影响,探讨其作用和意义。方法大鼠用夹子浆其后肢夹住,直立位挂起,并让大鼠之间出现扭打嘶咬。钳夹时间第１天为３０ｍｉｎ,以后第天增加１０ｍｉｎ,连续２周。以不作任何处理的大鼠作正常对照。造模结束后取血浆及结肠粘膜,以放免法测定血及结肠粘膜中ＰＧＥ２、ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量。结果大鼠血中ＰＧＥ２、ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含     

加味四逆散抗慢性心理应激损伤的机理研究--对下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素及环核苷酸系统的影响

[目的]观察加味四逆散(JSS)对慢性心理应激大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)及环核苷酸系统的影响.[方法]Wistar大鼠随机分为3组,即正常组、模型组和加味四逆散(JSS)组;除正常组外,其他组大鼠均采用束缚法复制慢性心理应激反应模型,JSS组于造模前1 h按3.38g/kg剂量灌胃给药,连续14 d;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测下丘脑CRH信使核糖核酸(CRH mRNA)的表达,放射免疫法检测下丘脑环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)含量.[结果]慢性心理应激大鼠下丘脑CRH mRNA表达显著增高(P＜0.05),JSS可降低下丘脑CRH mRNA的表达(P＜0.05);慢性心理应激可使大鼠下丘脑cAMP、cGMP均显著升高(P＜0.01),JSS可显著降低下丘脑cAMP含量(P＜0.05),但对cGMP无显著影响.[结论]JSS可通过影响下丘脑CRH和环核苷酸系统参与对慢性心理应激反应的调控,CRH和cAMP可能是JSS抗慢性心理应激损伤的作用环节或靶点.     

心理应激对下丘脑OT和AVP神经元的影响

采用心理应激大鼠模型，免疫组化和图像分析系统，检测下丘脑精氨酸加压素（ＡＶＰ）和催产素（ＯＴ）神经元的变化。结果表明：下丘脑ＡＶＰ神经元，尤其室旁核（ＰＶＮ）和视上核（ＳＯＮ）的ＡＶＰ神经元，是参与或调控心理应激的主要神经元；在此时，下丘脑的ＯＴ反应皆较弱，但ＰＶＮ的ＯＴ阳性神经元数目已增多。还对心理应激后正中隆起（ＭＥ）的外带处ＯＴ阳性纤维不增加而ＡＶＰ增多，以及ＯＴ阳性纤维在ＳＯＮ腹侧边缘等处密集的现象做了分析     

正常大鼠下丘脑部分核团神经元的体视学测量

下丘脑控制着机体的内脏、内分泌、情绪等多种重要机能活动，在某些生理或病理情况下，其形态结构会发生改变［１，２］，因此，对下丘脑的形态学研究一直为人们所关注。以往作者大多采用定性描述的方法，定量描述也大多局限于二维水平，从三维水平来描述下丘脑的形态结构...     

加味四逆散对心理应激损伤大鼠海马nNOS表达的影响

【目的】观察调肝治法方药——加味四逆散对慢性心理应激损伤大鼠海马神经元神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响。【方法】取W istar大鼠24只随机分为3组:正常组(不施加任何刺激)、模型组(给予21 d的随机应激刺激)、加味四逆散组(每次刺激前1 h灌胃中药1次,剂量为3.38 g/只)。正常组及模型组每次灌胃等容积生理盐水。采用免疫组织化学方法检测nNOS表达。【结果】3组大鼠海马的CA3区锥体细胞均有nNOS表达,而模型组表达的强度显著高于正常组,其阳性细胞数及阳性累积分显著性增多(P<0.01);加味四逆散可显著性降低大鼠海马nNOS表达,减少其阳性细胞数及阳性累积分(P<0.01)。【结论】加味四逆散改善慢性心理应激的作用与其能抑制大鼠海马神经元nNOS的高表达,从而避免NO升高损害细胞有关。     

迷走神经刺激对癫癎大鼠间脑部分核团c-fos蛋白表达的影响

目的：研究丘脑室旁核（PV）、下丘脑室旁核（PVN）在迷走神经刺激（VNS）抑制癫痫发作的过程中c-fos蛋白表达的变化。方法：利用海人藻酸（KA）诱发大鼠癫痫，结合c-fos免疫组化，分对照组、VNS组、KA组、VNS＋KA组观察PV、PVN内c-fos阳性细胞的数日变化。结果：VNS组PV、PVN内c-fos阳性细胞数高于对照组：VNS4-KA组PV、PVN内c-fos阳性细胞数低于KA组。结论：PV、PVN可能参与了VNS抑制癫痫过程。     

急性低温低氧对大鼠下丘脑NOS及c-fos表达的影响

目的：探讨急性低温低氧对大鼠下丘脑ＮＯＳ及ｃ－ｆｏｓ表达的影响。方法：用ｃ－ｆｏｓ免疫组化技术和ＮＡＤＰＨ－ｄ组化法研究急性低温低氧大鼠下丘脑内ｃ－ｆｏｓ原癌基因的表达,一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的分布及两者的共存。     

蜕皮甾酮对大鼠脑内c-fos表达的影响

目的观察大鼠海马内给予Aβ25-35后c-fos基因在不同脑区表达的变化以及蜕皮甾酮的影响.方法 用立体定位仪向大鼠双侧海马内微注射Aβ25-35,免疫组织化学染色观察c-fos基因的蛋白表达情况,采用BI 2000图象处理系统中的免疫组化模块进行c-fos表达的定量分析.结果对照组的c-fos在海马、丘脑及大脑皮层均有较高的表达;海马内注射Aβ25-35后,各脑区c-fos基因的表达均明显降低(P＜0.01);而蜕皮甾酮治疗组c-fos基因的表达相对增加:低剂量组,海马P＜0.05,丘脑P＜0.05;高剂量组,海马P＜0.01,丘脑P＜0.01,皮层P＜0.01.结论海马内注射Aβ25-35后可明显降低海马、丘脑及大脑皮层c-fos基因的表达;蜕皮甾酮可抑制Aβ25-35的作用,使海马、丘脑及大脑皮层的c-fos基因表达相对增加.     

丙帕他莫对福尔马林致痛大鼠行为学及脊髓c-fos蛋白表达的影响

目的通过观察比较福尔马林致痛大鼠行为学和脊髓背角c-Fos样免疫反应神经元（FLIN）数量的变化,探讨静脉注射丙帕他莫的镇痛效能与机制。方法雄性SD大鼠30只,随机均分为5组,生理盐水组（NS组）、福尔马林组（F组）、丙帕他莫组（B组）、丙帕他莫预处理组（BF组）和福尔马林丙帕他莫组（FB组）。前4组中NS组和B组在注射NS、丙帕他莫10 min后分别于右后足趾皮下注射NS 100μl,F组和BF组分别在注射NS、丙帕他莫10 min后均注射5%福尔马林100μl。FB组给予福尔马林痛刺激10 min后静脉注射丙帕他莫480 mg/kg。各组行清醒静脉穿刺,注入NS或不同剂量的丙帕他莫后,观察行为表现,注射后立即以5 min为一时间段连续记录1 h内的缩腿、舔咬时间。足底注射后2 h取一脊髓节段做c-Fos免疫组化染色,计算FLIN数量。结果①BF组第一期急性早反应时间短于F组（P〈0.0 5）;FB组第二期时间短于F组（P〈0.05）。Fos蛋白表达NS组和B组未见或偶见淡染FLIN。F组见大量FLIN主要分布在Ⅰ、Ⅱ层及Ⅴ、Ⅵ层。BF组各区FLIN均减少（P〈0.01）。FB组各区FLIN均少于F组相应区域（P〈0.01）。结论静脉注射丙帕他莫能有效抑制大鼠的伤害性行为和致痛侧脊髓背角c-fos蛋白的表达。     

电针对慢性内脏痛敏大鼠脊髓背角c-fos蛋白表达的影响

目的：针刺治疗对肠易激综合征（irritable bowel syndrome,IBS）患者的慢性腹痛具有良好疗效,然而,其神经生物学机制仍不清楚。本研究在电针缓解IBS模型大鼠慢性内脏痛敏基础上,观察和分析IBS大鼠脊髓背角中内脏反应神经元的兴奋性在针刺治疗前后的改变,探讨针刺缓解IBS模型大鼠慢性内脏痛敏的机制。方法：采用新生9d的Sprague-Dawley雄性幼鼠,通过结直肠机械扩张刺激制作IBS慢性内脏痛敏模型。饲养至648周后,观察大鼠由结直肠扩张诱发的腹部撤回反射（abdominalwithdrawreflex,AWR）评分变化。电针组穴位取双侧＂足三里＂和＂上巨虚＂,连续隔日治疗4次,假电针组不通电,其余与电针组同。治疗结束后,取材并用免疫组化方法观察各组大鼠脊髓背角中c-los蛋白表达的变化。结果：与正常大鼠比较,IBS模型大鼠AwR评分明显升高（P〈0．01）,电针治疗后AwR评分明显降低（P〈0．05）;与正常大鼠相比,IBS模型大鼠脊髓L6-S2节段浅层（superficiallaminae,SDH,laminaeⅠandⅡ）、固有层（nucleusproprius,NP,laminaeⅢandⅣ）、背角颈段（neckofdorsalhorn,NECK,laminaeVandVI）,以及T13-L2节段的NECK中,c-los阳性神经元明显高于正常对照组（P〈0．05）,而电针治疗后IBS大鼠脊髓L6-S2节段SDH、NP、NECK以及T13-L2节段的NECK亚区中,c-los阳性神经元明显下降（P〈0．05）;假电针对AWR评分、c-los蛋白表达没有影响。结论：电针可以明显抑制IBS模型大鼠脊髓背角中内脏反应神经元异常增高的兴奋性,这可能是针刺缓解慢性内脏痛敏的机制之-。     

实验性颅脑损伤早期c-fos基因表达的研究

目的探讨大鼠不同程度颅脑损伤后早期脑内c-fos基因表达情况和变化规律.方法以Feeney自由落体致伤法制作大鼠颅脑损伤模型,采用免疫组化染色法和计算机图像分析技术,观察脑内c-fos基因的表达情况.结果脑损伤后2h,损伤区皮质、损伤区周围皮质、海马齿状回中c-fos基因表达明显增加;相同损伤程度组不同部位间c-fos基因表达差别有显著性意义(P＜0.05);不同损伤程度组之间c-fos基因表达差别也有显著性意义(P＜0.05).结论颅脑损伤后,脑内c-fos基因表达增加,表达水平与损伤严重程度相关.c-fos基因表达与颅脑损伤后神经细胞病变的发生发展有密切关系.     

大鼠Meynert基底核注入海人藻酸后c-fos原癌基因蛋白在脑纹状体边缘区及边缘系统内的表达

为研究Meynert基底核与纹状体边缘区以及脑内其他跟学习记忆有关的边缘系统结构间的关系,将海人藻酸注射于大鼠Meynert基底核后,观察c－fos原癌基因蛋白在脑内的表达。海人藻酸注射4h后,脑内只有少量c－fos阳性表达：海人藻酸注射8h后,脑内c－fos原癌基因蛋白表达增至最高峰。在海马、齿状回、中央杏仁核、纹状体、边缘区中有大量密集的c－foc阳性表达。在终纹床核、丘脑网状核、外侧隔核、丘脑下部视上核、室旁核、前下托及嗅内皮质等处可见较多c－foc阳性表达。在伏隔核、视前区、丘脑底核、黑质外侧部等部位可见少量c－fos阳性表达。海人藻酸注射Meynert基底核16h后,除海马、齿状回、中央杏仁核、纹状体及边缘区中有较多表达外,其余部位阳性标记基本消失。但脑腹侧的梨状前皮质、嗅结节、杏仁皮质核及前嗅核等部位出现大量的c－fos阳性表达。大脑皮质也可见较多c－fos阳性表达。海人藻酸注射48h后,脑内各部位的c－fos阳性反应均消失。本研究结果提示Meynert基底核和纹状体边缘区以及跟脑内其它与学习记忆有关的边缘系统结构间有密切的功能联系。     

精神分裂症动物模型大鼠脑内c-fos表达和行为的变化

目的探讨精神分裂症动物模型大鼠的行为表现对中枢神经元c-fos表达的变化.方法选用Sprague-Dawley大鼠32只.将大鼠随机分为4组,每组8只,其中,实验组腹腔注射地卓西平马来酸盐(MK801)建立精神分裂症的动物模型,对照组注射等量生理盐水;分别用Norton氏行为观察量表和c-fos蛋白免疫组化的方法测量动物模型的行为变化和脑中c-fos蛋白的表达.结果用MK801建立精神分裂症的动物模型,c-fos蛋白能在模型动物大脑的额叶皮层、海马和垂体3区表达最明显,这种表达随着动物模型保持时间的延长,并有表达增加的趋势;而在边缘叶、丘脑、视前区和中脑4区表达亦明显.在c-fos蛋白表达增强的同时,模型动物的行为表现紊乱和不协调程度亦随着动物模型保持时间的延长加重.在第3,5天行为紊乱表现更为明显(9.06±0.73)分,与对照组[(5.63±0.87)分]比较差异有显著性(P＜0.01).这种行为紊乱有一定的节律性,中午、下午两时间点行为分值较低[(8.47±1.70)分;(8.33±2.18)分],而在早、晚两时间点行为分值较高[(9.56±2.72)分;(10.45±1.66)分],其中晚上的行为分值[(10.45±1.66)分]在一天中最高.结论精神分裂症动物模型大鼠脑内存在c-fos蛋白表达的增强,这种表达增强有一定的区域性.Norton氏行为观察量表分值随着动物模型保持时间的延长有明显的增加.     

全麻复合硬膜外阻滞对高血压大鼠心肌c-fos和HSP70基因表达的影响

目的 通过检测高血压大鼠心肌组织c-fos和HSP70基因的表达水平,研究全麻复合硬膜外阻滞减轻应激反应的效果.方法 18只SHR和18只SD大鼠随机分3组:气管切开全麻复合硬膜外阻滞组(A1、A2)、气管切开全麻组(B1、B2)和对照组(D1、D2).全麻以氟芬合剂(0.1～0.3 ml/kg)复合地西泮(3～6mg/kg)腹腔注射,气管切开连接简易呼吸装置.硬膜外阻滞选择T11-T12棘突间隙切开直接向头端插入硬膜外导管2 cm,缓慢注入1%利多卡因0.2 ml.A1、A2、B1、B2组施行脾脏切除术.尾动脉置管连接监护仪监测MAP、HR,同时观察呼吸改变.术后24h处死动物,取心肌组织2块,液氮保存.用RT-PCR方法检测c-fos和HSP70两基因反应产物相对于β-actin值.结果 高血压大鼠全麻复合硬膜外阻滞组(A1)的c-fos/β-actin比值显著低于单纯全麻组(B1),而HSP70/β-actin比值显著高于全麻组.结论 与单纯全麻比较,全麻复合胸段硬膜外阻滞可以减少高血压大鼠手术刺激时心肌c-fos表达、降低应激反应水平,同时增强HSP70表达,对心肌具有一定的保护作用.     

电针对慢性内脏痛觉敏感大鼠延髓头端腹内侧核c-fos蛋白和NR1受体表达的影响

目的:针刺治疗对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)患者的慢性腹痛具有良好疗效,然而,其神经生物学机制仍不清楚.本研究在电针(electroacupuncture,EA)缓解IBS模型大鼠慢性内脏痛觉敏感的基础上,观察和分析IBS大鼠延髓头端腹内侧核(rostral ventromedia medulla,RVM)中内脏反应神经元的兴奋性在针刺治疗前后的改变,以及RVM中N-甲基-D-门冬氨酸1型受体(N-methyl-D-aspartate receptor 1,NRl)在针刺缓解IBS模型大鼠慢性内脏痛敏中的参与机制.方法:采用新生9d的Sprague-Dawley雄性幼鼠,通过结直肠机械扩张刺激制作IBS慢性内脏痛觉敏感模型,持续两周.饲养6～8周后,观察大鼠由结直肠扩张(colorectal distention,CRD)诱发的痛阈压力值(pain threshold pressure,PTP)和腹部撤回反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分变化.电针组穴位取双侧“足三里”和“上巨虚”,连续隔日治疗4次,假电针组不通电,其余与电针组相同.治疗结束后,取材并用免疫组织化学方法观察各组大鼠RVM中c-fos蛋白和NR1受体的表达变化.结果:与正常大鼠相比,成年IBS模型大鼠PTP值明显降低,且AWR评分明显升高(P＜0.01);与电针治疗前相比,IBS大鼠电针治疗后PTP值明显升高(P＜0.01),AWR评分明显降低(P＜0.05);与正常大鼠相比,IBS模型大鼠RVM各个亚核包括中缝大核(nucleus raphe magnus,NRM)、网状巨细胞核α部(nucleus reticularis gigantocellularis pars alpha,GiA)、外侧旁巨细胞核(nucleus lateralis paragigantocellulari,LPGi)以及网状巨细胞旁核(nucleus reticularis gigantocellularis,Gi)中c-fos蛋白和NR1受体阳性神经元的计数明显升高(P＜0.05),而电针治疗后Gi、LPGi、GiA中c-fos蛋白,以及Gi、LPGi、GiA、NRM中NR1受体免疫阳性神经元的计数与接受电针治疗前相比明显下降(P＜0.05);假电针对PTP、AWR、c-fos蛋白和NR1受体阳性神经元的计数没有影响.结论:电针可以明显抑制IBS模型大鼠RVM中内脏反应神经元兴奋性异常增高,同时电针能明显抑制IBS模型大鼠RVM中NR1受体表达,这可能是RVM中内脏反应神经元异常增高的兴奋性下降的重要原因,同时也是针刺缓解慢性内脏痛觉敏感的机制之一.