血管紧张素Ⅱ对肝星状细胞基因表达的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ对培养肝星状细胞(HSC)株LX2细胞基因表达的影响。方法以1×10~(-5)mol/L的血管紧张素Ⅱ与LX2细胞孵育48 h,对照组不加血管紧张素Ⅱ。收集实验组和对照组细胞,分别提取mRNA及总蛋白质,进行抑制性消减杂交和蛋白质双向电泳及质谱分析。结果抑制性消减杂交产物经两轮聚合酶链反应(PCR)扩增,结果显示为200～1000 bp大小不等的插入片段,挑选36个克隆测序,应用生物信息学技术分析,发现13个克隆与未知基因序列高度同源,其中GenBank号为BC097361、BC057380的基因为具有开放读码框架的完整基因。其余23个克隆均与已知基因的部分序列高度同源(98%～100%),主要相关基因包括β肌动蛋白、亮氨酰tRNA合成酶、基础免疫球蛋白2、丙酮酸激酶,过氧化物酶1、人类白细胞抗原-B关联转录物3等。在血管紧张素Ⅱ孵育的和阴性对照HSC的双向电泳图谱中分别探测到1110、1008个点,两个图谱有504个点匹配。其中108个点和对照相比明显上调(容积比＞1．5),153个点和对照相比明显下调(容积比＜0．67),选取其中相对容积上调的10对点进行质谱分析,其中8个点在数据库中检索得到相应结果,分别为抑素、电子转移黄索蛋白亚单位、超氧化物歧化酶2、三磷酸核苷酶等。结论血管紧张素Ⅱ处理后的HSC mRNA表达上调具有增殖加速、凋亡抑制和促进分化等生物学作用,部分上调蛋白质为细胞内信号传导蛋白质、代谢调控蛋白质、细胞凋亡抑制蛋白质以及纤维化相关调控蛋白质。     

血管紧张素Ⅱ对肝星状细胞表达转化生长因子βⅠ、Ⅱ型受体及其功能的影响

血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）除可收缩血管外，还参与调节细胞生长和多种基因表达。我们以前的研究也证实，在一定浓度范围内AngⅡ对大鼠肝星状细胞（HSC）增殖和胶原合成具促进作用。肝纤维化发生中最关键的事件是HSC的激活及其功能的变化。本研究观察了AngⅡ对HSC表达生长因子及其受体的影响，以及它在基因转录水平对Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的调控作用，旨在初步探讨其促进HSC胶原合成的机制。     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对人胰腺星状细胞增殖和迁移的影响

目的 研究血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）1型受体（AT1）拮抗剂洛沙坦（losartan）对人胰腺星状细胞增殖和迁移的影响及其抗胰腺纤维化的作用。方法 组织贴壁法从人胰腺癌组织中原代分离纯化人胰腺星状细胞（hPSC），体外培养10d后细胞活化。应用放射免疫分析法测定细胞培养上清液和细胞匀浆中AngⅡ的含量，免疫细胞化学和原位杂交方法检测PSC上的AT1表达。应用AngⅡ（10^-5mol／L）和洛沙坦梯度浓度设计多种组合处理PSC细胞。BrdU掺入法和TUNEL法分别检测细胞增殖和凋亡。Wound-healing分析法观察细胞的迁移能力。Real-time PCR、Western blot和免疫荧光方法检测PSC中Ⅰ型胶原和p38的表达。结果 人PSC存在AT1的表达，而细胞培养上清和细胞匀浆中未能检测到AngⅡ。洛沙坦能够时效和量效性地诱导细胞凋亡（10^-5mol／L时最明显），能减轻AngⅡ所导致的细胞迁移和Ⅰ型胶原的分泌，抑制PSCp38的表达。结论 AngⅡ主要依靠旁分泌而并非自分泌途径，通过AT1受体对PSC发挥作用，而洛沙坦通过抑制AngⅡ同AT1结合而发挥抗纤维化效应。     

血管紧张素Ⅱ刺激肝星状细胞核酸、蛋白质及胶原合成

目的 研究不同浓度血管紧张素Ⅱ（AngⅡ)对大鼠肝星状细胞（HSC）增殖和胶原合成的影响。方法 采用酶法分离大鼠肝星状细胞（HSC），应用^3H-TdR（胸腺嘧啶核苷）、^3H-Leu(亮氨酸）、^3H-Pro（脯氨酸）掺入检测10^-9-10^-5mol/L不同浓度AngⅡ对HSC的DNA、蛋白质及脯氨酸合成的影响。结果 10^-9-10^-6mol/L AngⅡ能促进HSC对^3H-TdR的掺入率（P＜0．05），但只有10^-6mol/L和10^-7mol/L浓度的AngⅡ才能显著增加HSC对^3H-Leu的掺入率（P＜0．01）；而10^-9-10^-6mol/L AngⅡ均能促进HSC对^3H-Pro的掺入率（P＜0．05），且呈剂量依赖关系。结论 适当浓度的AngⅡ能促进HSC增殖和胶原合成。     

血管紧张素Ⅱ对肝星状细胞的作用及分子机制

研究表明肝纤维化与局部肾素血管紧张素系统(RAS)的激活有关,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)是 RAS中的核心效应分子,与肝星状细胞表面的相应受体ATl结合后,通过信号传导,发挥生物学效应,促进活化HSC的收缩和增殖,刺激TGF-β1 的大量表达,促进细胞外基质的生成,抑制其降解,并减少HSC凋亡,参与肝纤维化发生、发展的病理生理过程。现就AngⅡ对肝星状细胞作用的分子机制作一综述。     

血管紧张素 Ⅱ 受体拮抗剂对人胰腺星状细胞增殖和迁移的影响

目的 研究血管紧张素Ⅱ (AngⅡ)1型受体(AT1)拮抗剂洛沙坦(losartan)对人胰腺星状细胞增殖和迁移的影响及其抗胰腺纤维化的作用.方法 组织贴壁法从人胰腺癌组织中原代分离纯化人胰腺星状细胞(hPSC),体外培养10 d后细胞活化.应用放射免疫分析法测定细胞培养上清液和细胞匀浆中AngⅡ的含量,免疫细胞化学和原位杂交方法 检测PSC上的AT1表达.应用AngⅡ(10-8mol/L)和洛沙坦梯度浓度设计多种组合处理PSC细胞.BrdU掺入法和TUNEL法分别检测细胞增殖和凋亡.Wound-healing分析法观察细胞的迁移能力.Real-time PCR、Western blot和免疫荧光方法 检测PSC中Ⅰ型胶原和p38的表达.结果 人PSC存在AT1的表达,而细胞培养上清和细胞匀浆中未能检测到AngⅡ.洛沙坦能够时效和量效性地诱导细胞凋亡(10-5mol/L时最明显),能减轻AngⅡ所导致的细胞迁移和Ⅰ型胶原的分泌,抑制PSC p38的表达.结论 AngⅡ主要依靠旁分泌而并非自分泌途径,通过AT1受体对PSC发挥作用,而洛沙坦通过抑制AngⅡ同AT1结合而发挥抗纤维化效应.     

血管紧张素受体反义基因对肝星状细胞增殖及Ⅰ型胶原基因表达的影响

近年研究表明血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）在慢性肝纤维化及门静脉高压的形成与发展中起重要作用,使用血管紧张素转换酶抑制剂或者AngⅡⅠ型受体拮抗剂可减轻肝纤维化及降低门静脉高压。在活化过程中,HSC从一个静止的、富含维生素A的窦周细胞转化成有增殖和收缩能力的、促纤维化形成的活化的HSCs。目前研究表明,在人正常肝脏组织中可分离培养出HSCs，[第一段]     

血管紧张素Ⅱ对肝星状细胞迁移和增殖的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)对肝星状细胞(HSC)增殖、迁移活性的影响.方法:体外培养HSC,在不同浓度的ANGⅡ作用下,观察HSCs生长情况并绘制生长曲线,采用MTT法测定细胞增殖、Transwell小室检测细胞迁移.结果:1,2,4,8,10 umol/L ANGⅡ可显著促进HSC增殖,与空白对照组相比有显著差异(F= 2.305,P<0.05;F=4.003,6.833,8.855,21.066,P<0.01).随作用浓度的增加,细胞增殖活性显著提高,相关分析显示呈正相关(r=0.917,P<0.01).10,8,4μmol/L的ANGⅡ可显著诱导HSC迁移,与空白对照组相比差异显著(F= 22.084,15.155,10.392,P<0.01).随ANGⅡ浓度的增加,细胞迁移率显著升高,相关分析显示呈正相关(r=0.952,P<0.01).结论:ANGⅡ可显著诱导HSC增殖与迁移,并随剂量的增加作用加强.     

血管紧张素Ⅱ对肝星状细胞迁移和增殖的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)对肝星状细胞(HSC)增殖、迁移活性的影响.方法体外培养HSC,在不同浓度的ANGⅡ作用下,观察HSCs生长情况并绘制生长曲线,采用MTT法测定细胞增殖、Transwell小室检测细胞迁移.结果1,2,4,8,10 μmol/LANGⅡ可显著促进HSC增殖,与空白对照组相比有显著差异(F=2.305,P＜0.05;F=4.003,6.833,8.855,21.066,P＜0.01).随作用浓度的增加,细胞增殖活性显著提高,相关分析显示呈正相关(r=0.917,P＜0.01).10,8,4 μmol/L的ANGⅡ可显著诱导HSC迁移,与空白对照组相比差异显著(F=22.084,15.155,10.392,P＜0.01).随ANGⅡ浓度的增加,细胞迁移率显著升高,相关分析显示呈正相关(r=0.952,P＜0.01).结论ANGⅡ可显著诱导HSC增殖与迁移,并随剂量的增加作用加强.     

血管紧张素Ⅱ调控大鼠肝星状细胞血管紧张素Ⅱ受体表达及其功能的影响

国内外学者在心、肾、肺等脏器纤维化实验研究中发现，血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)能刺激这些脏器组织间质成纤维细胞胶原分泌，证实AngⅡ参与组织纤维化的形成。现已证实AngⅡ调节血压、水电解质平衡和细胞生长都是通过AngⅡⅠ型受体(AT1R)发挥作用。在肝纤维化发生过程中，肝星状细胞(HSC)是否也表达AT1R和AT2R，为此我们观察了AngⅡ对大鼠HSC表达AngⅡ受体(ATR)及前胶原基因的调控情况，旨在探讨AngⅡ对HSC功能的影响及其机制。     

1型血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对胰腺星状细胞的影响

目的探讨1型血管紧张素Ⅱ受体（AT1）拮抗剂氯沙坦对胰腺星状细胞（PSC）的影响及其可能机制。方法①从胰腺癌患者胰腺组织中分离PSC并检测其AT1的表达，用血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和氯沙坦干预后检测其I型胶原的表达情况。②90只雄性SD大鼠均分为正常组、对照组和治疗组。后2组胰管内注射2％三硝基苯磺酸（TNBS）制成大鼠胰腺纤维化模型。治疗组给予氯沙坦灌胃，对照组给予等容积的无菌蒸馏水。于制模后第3、7、14、21和28天分别处死大鼠，留取胰腺组织。电镜下观察胰腺组织超微结构改变；应用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测胰腺组织转化生长因子β1（TGFβ1）、Ⅰ型前胶原mRNA表达；应用免疫组化法检测胰腺组织α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）和TGFβ1蛋白表达；应用Western印迹法检测胰腺组织α—SMA动态表达水平。结果体外研究显示，AT1表达于人胰腺癌组织PSC，氯沙坦可抑制其Ⅰ型胶原的表达。体内研究表明，氯沙坦可逆转胰腺纤维化大鼠电镜下胰腺细胞异常改变；胰腺纤维化大鼠胰腺组织α-SMA、TGF61和Ⅰ型前胶原表达增加，氯沙坦可下词其表达。结论AT1拮抗剂通过阻断AT1途径抑制PSC活化及其促纤维化作用。     

血管紧张素Ⅱ与肝纤维化关系研究进展

血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)与心、肾纤维化的关系已逐步明确，但AngⅡ与肝纤维化的关系研究较少。此文综述了AngⅡ与肝星状细胞、细胞外基质及转化生长因子β之间的关系，阐明了AngⅡ在肝纤维化中的作用机理，为血管紧张素转化酶抑制剂及AngⅡ1型受体拮抗剂治疗肝纤维化提供理论依据。     

血管紧张素Ⅱ与肝纤维化关系的研究进展

目前血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)与心、肾等组织器官纤维化关系的研究已取得较大进展,研究表明其在肝纤维化的发生发展中同样发挥了重要作用.此文就其与肝纤维化关系的有关进展作一综述.     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂：芦沙坦的研究进展

芦沙坦是血管紧张素Ⅱ受体拮结剂,治疗高血压的疗效与目前一线降压药物相同。本文对其药理学特性及临床应用作一综述。     

血管紧张素Ⅱ受体在大鼠胰星状细胞上的表达及其调节

胰腺存在局部特异的肾素-血管紧张素系统(RAS)，此系统参与胰腺纤维化的发生。由于胰星状细胞(PSC)是参与胰腺纤维化发生的主要效应细胞，故推测RAS的致胰纤维化作用可能是通过直接作用于PSC实现的。为此，本研究探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的2种主要受体亚型AT1和AT2在大鼠PSC的表达情况，并在此基础上探讨其表达的调控机制。     

血管紧张素(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导肝星状细胞表达结缔组织生长因子的抑制作用

目的 探讨血管紧张素(Ang)(1-7)对Ang Ⅱ诱导的肝星状细胞(HSC)表达结缔组织生长因子(CTGF)的抑制作用及其机制.方法 培养人HSC细胞系(LX2细胞),以AngⅡ刺激24h,分别予以AngⅡl型受体阻断剂irbesartan、ROCK抑制剂Y27632预处理lh.设立AngⅡ+ Ang (1-7)处理组,观察Ang (1-7)对Ang Ⅱ的抑制作用;Mas受体拮抗剂A779阻断Mas受体,观察对Ang (1-7)抑制效应的阻断作用.利用Western blot、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和多基因定量检测系统检测RhoA、ROCK2 mRNA、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白和mRNA的表达.结果 研究结果显示Ang Ⅱ刺激后,RhoA蛋白(0.87±0.093对比0.337±0.074)、ROCK2mRNA (0.747±0.061对比0.163±0.024)、CTGF mRNA (0.578±0.028对比0.262±0.007)相对表达量与对照组相比显著增高,差异有统计学意义(P值均＜0.01);irbesartan (RhoA蛋白:0.558±0.030对比0.87±0.093 ; ROCK2 mRNA:0.368±0.023对比0.747±0.061 ; CTGFmRNA:0.309±0.019对比0.578±0.028).Y27632(RhoA蛋白:0.564±0.067对比0.87±0.093 ; ROCK2 mRNA:0.218±0.046对比0.747±0.061 ; CTGF mRNA:0.340±0.020对比0.578±0.028)预处理组上述基因或蛋白相对表达量显著减低,差异有统计学意义(P值均＜0.01);Ang (1-7)单独处理组RhoA蛋白(0.449±0.035对比0.337±0.074)及CTGF mRNA(0.256±0.008对比0.262±0.007)与对照组相比无明显改变,差异无统计学意义(P值均＞0.05);但是Ang(1-7)可抑制AngⅡ诱导的上述基因或蛋白表达的增高(RhoA蛋白:0.615 ±0.034对比0.87±0.093;ROCK2 mRNA:0.403 ±0.040对比0.747±0.061; CTGF mRNA:0.265±0.011对比0.578±0.028),差异有统计学意义(P值均＜0.01); Mas受体拮抗剂A779可以阻断Ang (1-7)对AngⅡ的抑制作用(RhoA蛋白:0.929±0.076对比0.615±0.034; ROCK2 mRNA:0.720±0.054对比0.403±0.040; CTGF mRNA:0.568±0.029对比0.265±0.011),差异有统计学意义(P值均＜0.01).结论 AngⅡ通过RhoA-ROCK通路促进人HSC表达CTGF mRNA; Ang (1-7)与其Mas受体结合后对AngⅡ激活的CTGF mRNA的表达具有抑制作用.     

血管紧张素Ⅱ受体阻断剂抗肝纤维化的实验研究

目的 探讨血管紧张素Ⅱ１型受体阻断剂对四氯化碳（ＣＣｌ４）诱导的实验性肝纤维化大鼠血清层粘连蛋白等细胞外基质水平的影响。地大鼠肝实质损伤性肝纤维化模型由ＣＣｌ４诱导。５０只雄性ＳＤ大鼠被随机分为５组：对照组、模型组及治疗组（高、中、低剂量组）,每组１０只,除对照组外所有大鼠均给予皮下注射４０％ＣＣｌ４（精制橄榄油配制,每３日１次,共６周）,对照组注射等体积的精制橄榄油。治疗组同时给予血管紧张素Ⅱ受     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂的临床研究进展

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂的临床研究进展陈鲁原林曙光由于肾素血管紧张素系统（ＲＡＳ）在血压调节机制中起着极为重要的作用，目前高血压的治疗正日益集中在抑制血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）水平上。一系列大规模临床试验表明，血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）抑制剂在治疗高血...     

心房颤动患者心房组织血管紧张素Ⅱ受体表达及血管紧张素转换酶抑制剂干预的初步研究

目的探讨心房颤动(房颤)患者心房组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体基因转录和蛋白表达的变化以及血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)干预的影响。方法45例心脏外科手术患者,其中窦性心律和房颤患者各12例,应用低剂量ACEI的窦性心律和房颤患者分别为9例和12例。取右心耳组织通过逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学技术测量血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)和血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2)mRNA和蛋白的相对表达量。结果窦性心律和房颤患者之间的心房组织AT1和AT2mRNA表达量差异无统计学意义;房颤患者心房组织AT1蛋白表达量明显低于窦性心律患者(2.63±1.00vs4.64±1.48,P<0.001),AT2蛋白表达量明显高于窦性心律患者(6.20±2.17vs3.72±0.88,P<0.05);应用低剂量ACEI的窦性心律和房颤患者分别与未应用ACEI的窦性心律和房颤患者相比,AT1和AT2的mRNA和蛋白表达量差异无统计学意义。结论房颤时AT1蛋白表达下调,AT2蛋白表达上调,相应的mRNA表达水平差异无统计学意义,提示肾素血管紧张素系统参与了房颤的心房结构重构;低剂量ACEI不能逆转房颤AngⅡ受体重构。