肾上腺髓质素对高糖培养人肾系膜细胞的作用

目的　探讨肾上腺髓质素 (AM)在糖尿病肾病中的变化及作用。　 方法　通过体外培养人肾小球系膜细胞 ,观察高糖条件对系膜细胞AMmRNA、转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA表达、分泌及血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )和细胞外基质 (层黏连蛋白和Ⅳ型胶原 )含量的影响及肾上腺髓质素干预的作用。　 结果　高糖条件培养的人肾小球系膜细胞AMmRNA、TGF β1mRNA表达和AM、TGF β1分泌较低糖对照组分别增加 1 0 1、0 5 9倍和 3 49、1 61倍 ;AngⅡ浓度升高 1 0 4倍 ,细胞外基质蛋白LN和Ⅳ型胶原含量分别升高 0 95倍和 1 13倍。用不同浓度AM(10 -7mol·L-1、10 -8mol·L-1和 10 -9mol·L-1)干预后 ,TGF β1mRNA表达分别下降 5 0 %、2 8%和 16 2 %,TGF β1含量分别下降 3 9%、2 6%和 11%;AngⅡ水平下降约 47%、46%、3 1%;LN含量分别下降 5 3 %、45 %和 18%,Ⅳ型胶原含量分别下降 2 9%、2 6%和 2 0 %。　 结论　葡萄糖水平升高是AM表达、分泌的刺激因子之一。AM的肾脏保护作用可能与抑制AngⅡ、TGF β1的表达与分泌 ,进而减少基质蛋白和胶原的过度积聚相关。     

细胞因子和氯沙坦对人α1Ⅰ型胶原基因启动子活性的调控

目的探讨转化生长因子β1(TGF β1)和血小板源生长因子(PDGF)对人α1 Ⅰ型胶原基因启动子活性的调控作用和氯沙坦药物干预的影响环节.方法将不同长度的人α1 I型胶原基因启动子片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)"报告基因"组成重组体 pCOLH 1.5和pCOLH 2.5,采用脂质体法转染至培养的大鼠肾小球系膜细胞,分别加入不同浓度的TGF β1、PDGF、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和氯沙坦,ELISA法测定CAT活性.结果 TGF β1表现为剂量依赖性地促进pCOLH 1.5和pCOLH 2.5的活性,与对照组比较差别有非常显著性意义(P＜ 0.01).PDGF(10～25 μg/L)未发现有明显影响(P＞ 0.05),AngⅡ则具有促进其活性作用.氯沙坦不但能抑制两个重组体的CAT表达,和AngⅡ共同作用时,pCOLH 2.5 CAT的升高幅度明显减少(P＜ 0.01).结论在肾小球系膜细胞中,TGF β1具有促进人α1 Ⅰ型胶原基因启动子的转录活性,PDGF则未发现有显著促进或抑制效应.氯沙坦能下调人α1 Ⅰ型胶原基因启动子的激活,并可部分拮抗AngⅡ的促进作用.     

1型血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对胰腺星状细胞的影响

目的探讨1型血管紧张素Ⅱ受体（AT1）拮抗剂氯沙坦对胰腺星状细胞（PSC）的影响及其可能机制。方法①从胰腺癌患者胰腺组织中分离PSC并检测其AT1的表达，用血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和氯沙坦干预后检测其I型胶原的表达情况。②90只雄性SD大鼠均分为正常组、对照组和治疗组。后2组胰管内注射2％三硝基苯磺酸（TNBS）制成大鼠胰腺纤维化模型。治疗组给予氯沙坦灌胃，对照组给予等容积的无菌蒸馏水。于制模后第3、7、14、21和28天分别处死大鼠，留取胰腺组织。电镜下观察胰腺组织超微结构改变；应用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测胰腺组织转化生长因子β1（TGFβ1）、Ⅰ型前胶原mRNA表达；应用免疫组化法检测胰腺组织α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）和TGFβ1蛋白表达；应用Western印迹法检测胰腺组织α—SMA动态表达水平。结果体外研究显示，AT1表达于人胰腺癌组织PSC，氯沙坦可抑制其Ⅰ型胶原的表达。体内研究表明，氯沙坦可逆转胰腺纤维化大鼠电镜下胰腺细胞异常改变；胰腺纤维化大鼠胰腺组织α-SMA、TGF61和Ⅰ型前胶原表达增加，氯沙坦可下词其表达。结论AT1拮抗剂通过阻断AT1途径抑制PSC活化及其促纤维化作用。     

氯沙坦抗大鼠肝纤维化的研究

目的 :研究血管紧张素Ⅱ 1型受体拮抗剂氯沙坦对二甲基亚硝胺 (DMN)诱导的肝纤维化大鼠模型的疗效及可能的机制。方法 :制备DMN诱导的大鼠肝纤维化模型 ,同时应用氯沙坦灌胃 ,共 8周。肝组织进行常规HE及Masson三色染色。测定血清肝功能及透明质酸 (HA)。大鼠肝组织Ⅰ型胶原 (ColⅠ )、Ⅲ型胶原 (ColⅢ )及转化生长因子 βl(TGF β1)mRNA的水平用RT PCR方法检测。结果 :氯沙坦可明显改善肝纤维化的程度 ,降低血清ALT及HA的水平 (P <0 .0 1)。同时模型组ColⅠ、ColⅢ及TGF β1mRNA的水平明显高于正常对照组 ,氯沙坦治疗组明显低于模型组 (P <0 .0 0 1)。结论 :氯沙坦具有良好的抗肝纤维化作用 ,且能够抑制肝组织ColⅠ、ColⅢ及TGF β1mRNA的水平 ,从而发挥其抗肝纤维化的作用。     

氯沙坦对颈总动脉损伤大鼠血浆Ang Ⅱ与血管TGF-β1表达的影响

目的观察氯沙坦对血管损伤大鼠血浆血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平与血管转化生长因子β1（TGF—β1）表达的影响。方法采用大鼠颈总动脉挤压术制备血管再狭窄模型,设假手术组、手术组、氯沙坦组,HE染色法观察血管形态学变化,放射免疫法测定血浆AngⅡ含量,免疫组织化学法测定颈总动脉TGF—β1的表达。结果假手术组动脉各层结构正常、清晰,无明显血管平滑机细胞（VSMC）增殖,颈总动脉损伤大鼠VSMC大量增殖,内膜显著增厚,氯沙坦组VSMC增殖程度降低;与假手术组比较,颈总动脉损伤大鼠血浆Ang11含量显著升高（P〈0．01）,血管平滑肌TGF-β1。表达显著增强（P〈0．01）;与手术组比较,氯沙坦组血浆AngⅡ含量无显著差异,血管平滑肌TGF—β1表达显著下降（P〈0．01）。结论AngⅡ与TGF-β1,参与血管再狭窄的形成,氯沙坦可通过阻断AngⅡ的作用与降低TGF—β1表达实现抗血管再狭窄的作用。     

血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ受体1、2mRNA表达的影响

目的:观察血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对血管平滑肌细胞(VSMC)血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)、血管紧张素Ⅱ受体2(AT2R)mRNA表达的影响。方法:人脐带动脉平滑肌细胞体外原代培养,AngⅡ干预后RT-PCR测定VSMC的AT1R、AT2R mRNA的表达,并观察AT1R阻滞剂氯沙坦、AT2R阻滞剂PD123319对AngⅡ上述诱导作用的影响。结果:1AngⅡ作用于VSMC后,AT1R mRNA表达增强(P0.01),氯沙坦阻断AT1R后,AT1R mRNA表达显著下降(P0.01),PD123319阻断AT2R后,AT1R mRNA表达无显著性变化;2AngⅡ作用于VSMC后,AT2R mRNA表达无显著性增强,氯沙坦及PD123319作用后,AT2R mRNA表达也未见显著性变化。结论:1AngⅡ可诱导VSMC AT1R mRNA表达,AT1R在此过程中起重要介导作用,AT1R阻滞剂氯沙坦可有效抑制AngⅡ的这种诱导作用;2相对于AT1R,AngⅡ不能诱导VSMC AT2R mRNA表达增加。所以推测AngⅡ差异化诱导VSMC AT1R、AT2R mRNA表达,导致AT1R、AT2R失衡。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠心肌病变治疗的研究

目的　探讨 2型糖尿病大鼠心肌组织血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )、醛固酮 (Ald)、转化生长因子 β1 (TGF β1 )的变化及胰岛素增敏剂罗格列酮对其影响。方法　采用放免法检测血浆及心肌AngⅡ、Ald;电镜下观察心肌超微结构 ;免疫组化方法检测心肌组织TGF β1 的变化 ;用Masson三色染色观察心肌胶原含量变化。结果　糖尿病大鼠血浆及心肌组织中AngⅡ、Ald的水平明显高于正常对照大鼠 ,罗格列酮治疗组与糖尿病大鼠相比无显著性差异 ;糖尿病大鼠心肌组织TGF β1含量增加 ,罗格列酮治疗组较糖尿病组减少 (P <0 .0 1 ) ;电镜观察罗格列酮治疗组大鼠心肌的病理变化明显减轻。结论　 2型糖尿病大鼠血浆和心肌组织AngⅡ、Ald升高 ,心肌TGF β1含量增加 ,罗格列酮治疗后可延缓糖尿病心肌病变的进展。     

培哚普利对糖基化终产物培养的人内皮细胞转化生长因子-βⅡ受体表达的影响

目的:探讨培哚普利防治糖尿病血管并发症的作用机制。方法:用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Northern印迹杂交方法测定0.1,1.0,10.0μmol/L浓度的培哚普利对经体外制备的糖基化终产物(AGEs)培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)转化生长因子βⅡ受体(TβRⅡ)和Ⅰα(Ⅳ)前胶原mRNA表达的影响。结果:AGEs组TβRⅡ及Ⅰα(Ⅳ)前胶原mRNA表达较正常对照组明显增高(P<0.01);与AGEs组相比,TβRⅡ和Ⅰa(Ⅳ)前胶原mRNA的表达在培哚普利组0.1μmol/L时无明显降低,1.0μmol/L时分别降低了16%和10%,差异无统计学意义;10.0μmol/L时分别降低46%和50%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:培哚普利通过抑制高糖所致的TβRⅡ的表达,从而抑制细胞外基质的生成,防止血管重构,可能是其防治糖尿病血管并发病的机制之一。     

局灶性缺血再灌注大鼠脑血管紧张素Ⅱ1型受体基因的表达

目的　研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1 R)基因的表达及氯沙坦对其的影响。方法　 32只Wistar大鼠随机分为氯沙坦用药组、缺血再灌注组、假手术组和正常对照组 ,氯沙坦用药组给予氯沙坦(10mg·kg- 1 ·d- 1 )灌胃 ,2周后制作大鼠大脑中动脉栓塞再通模型 ,运用逆转录 聚合酶链反应法检测大脑中动脉供血区皮质AT1 RmRNA的表达 ;用放射免疫法测定血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )的水平。结果　缺血再灌注组缺血区皮质AT1 RmRNA的表达和AngⅡ的水平均高于正常对照组 ,氯沙坦用药组缺血区皮质AT1 RmRNA的表达较缺血再灌注组降低。结论　局灶性脑缺血再灌注诱导AngⅡ水平和AT1 R基因的表达增加 ,氯沙坦可降低AT1 R基因的表达。     

洛沙坦对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子-β1及其Ⅱ型受体表达的影响及机制

目的　探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂洛沙坦对糖尿病 (DM )大鼠肾脏的保护作用及其作用机制。　方法　大鼠随机分为正常对照组 (C组 )、糖尿病组 (DM组 )和DM洛沙坦治疗组 (DL组 ) ,每组 10只。观察 8周后用半定量RT PCR检测各组肾皮质转化生长因子 βⅡ型受体 (TβRⅡ)和纤维连接蛋白 (FN)mRNA的表达。用免疫组化检测各组肾皮质转化生长因子 β1(TGF β1)、TβRⅡ和FNmRNA的表达。检测血糖 (BG )、尿素氮 (BUN )、肌酐 (Cr)、血胰岛素 (Ins)、AngⅡ、尿白蛋白排泄率(UAER)。　结果　DM组 8周出现平均肾小球体积、肾重 /体重增加 ,UAER、血BUN和Cr水平上升(P <0 .0 5)。DM组肾皮质TβRⅡ和FNmRNA的表达明显增加 ,TGF β1、TβRⅡ和FNmRNA的表达也显著增加 (P <0 .0 5)。洛沙坦治疗 8周后 ,DL组平均肾小球体积、肾重 /体重减少 ,UAER、血BUN和Cr水平下降 (P <0 .0 5)。肾皮质TβRⅡ和FNmRNA的表达降低 ,TGF β1、TβRⅡ和FNmRNA的表达也降低 (P <0 .0 5)。　结论　洛沙坦对DM大鼠肾脏具有保护作用。其机制可能为洛沙坦下调TGF β系统的表达 ,后者抑制肾细胞肥大、减少细胞外基质 (ECM)成分的合成     

血管紧张素Ⅱ与基质金属蛋白酶及其抑制剂在糖尿病大鼠心肌中的表达及影响

目的研究糖尿病（DM）大鼠心肌间质重构与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、转化生长因子（TGF）-β1、基质金属蛋白酶（MMP）-1及其抑制剂（TIMP-1）的关系。方法20只sD大鼠分为正常对照组（10只），DM组（10只），用STZ法建立DM模型，10W时麻醉处死大鼠，免疫组化法检测Ⅰ和Ⅲ型胶原的表达，TGF—β1、MMP-1和TIMP-1蛋白的表达，RT—PCR法检测TIMP-1和MMP-1mRNA的表达。结果DM组心脏指数和左心室指数显著高于正常组（P〈0．05），I、Ⅲ型胶原的表达也增加，存在着心肌间质重构，同时AngⅡ，TGF—β1，TIMP-1蛋白及TIMP-1mRNA表达增高，MMP-1蛋白及mRNA表达减少（P〈0．05）。结论DM大鼠可能因肾素-血管紧张素系统（RAS）的激活，AngⅡ表达增加，直接或间接的影响TGF—β1及MMPs的表达，导致心肌间质重构。     

血管紧张素Ⅱ在缺氧诱导的人肺成纤维细胞表型转化及胶原合成中的作用

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)在缺氧诱导的人肺成纤维细胞(human lung fibroblast,HLF)表型转化及胶原合成中的作用。方法:在缺氧条件下培养HLF-1细胞株,将细胞分为AngⅡ组、AngⅡ+替米沙坦(TST)组和对照组。采用免疫荧光法检测HLF-1细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达水平;采用Western blot法检测HLF-1细胞Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,Col-Ⅰ)蛋白的表达水平。结果:AngⅡ组HLF-1细胞α-SMA和Col-Ⅰ蛋白的表达水平较对照组明显上调,AngⅡ+TST组α-SMA和Col-Ⅰ蛋白的表达水平较AngⅡ组明显下降。结论:AngⅡ/血管紧张素Ⅱ1型受体信号通路可诱导缺氧性HLF表型转化以及胶原合成。     

缬沙坦和螺内酯对高血压大鼠心肌生长因子和Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

目的　观察血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )AT1 受体拮抗剂缬沙坦和盐皮质激素受体拮抗剂螺内酯对自发性高血压大鼠 (SHR)左心室生长因子和Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。方法　将 1 8只雄性SHR随机分为三组 :SHR对照组、缬沙坦治疗组、螺内酯治疗组 ,每组 6只。其中两治疗组分别用缬沙坦 30mg·kg- 1 ·d- 1 、螺内酯 2 0mg·kg- 1 ·d- 1 溶于饮水灌胃 ,每天一次 ,连续治疗 1 3周 ;另一组给正常饮水。另选同源同系Wistar kyoto大鼠 6只作为正常对照组。用RT PCR方法检测大鼠心肌转化生长因子 β1 (TGFβ1 )、肝细胞生长因子 (HGF)、Ⅰ型胶原mRNA水平。结果　治疗1 3周后 ,缬沙坦组和螺内酯组TGFβ1 、Ⅰ型胶原mRNA水平明显低于SHR对照组 (P <0 0 1 ) ,但高于WKY组 (P <0 0 1 ) ,其中螺内酯组Ⅰ型胶原mRNA水平高于缬沙坦组 (P <0 0 1 ) ;缬沙坦组和螺内酯组的HGFmRNA水平高于SHR对照组 (P <0 0 1 ) ,但低于WKY组 (P均 <0 0 1 ) ,螺内酯组的HGFmRNA水平低于缬沙坦组 (P <0 0 1 )。结论AngⅡAT1 受体拮抗剂缬沙坦和盐皮质激素受体拮抗剂螺内酯均能抑制SHR的左室肥厚和心肌纤维化     

吡格列酮下调高糖培养的心肌成纤维细胞促纤维化因子表达

目的:探讨高糖刺激、吡格列酮(Piog)孵育对心肌成纤维细胞(CFs)胶原生成的影响及其作用机制.方法:培养1~3 d SD乳鼠CFs,分为4组:Ⅰ组对照组,Ⅱ组吡格列酮(Piog-10 μmol/L)干预组,Ⅲ组高糖培养组(Glu 25 mmol/L),Ⅳ组高糖+Piog(10 μmol/L)共刺激组.分别测定各组细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达;促纤维化因子TGFβ1和CTGFmRNA的表达;血管紧张素Ⅱ-1型受体(AT1-R)mRNA及蛋白的表达.结果:与Ⅰ组相比,Ⅲ组Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达明显上升;TGFβ1和CTGFmRNA的表达,AT1-R mRNA及蛋白表达显著上调(P<0 05).Ⅳ组Piog干预后与Ⅲ组比较,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA、TGFβ1 mRNA表达明显下降,AT1-R mRNA及蛋白表达显著下降(P<0 05);CTGF mRNA表达虽有下降,但差异无统计学意义.结论:高糖刺激CFs可导致Ⅰ、Ⅲ胶原合成增加,Piog干预可下调TGFβ1表达,以及AT1-R的表达、降低肾素-血管紧张素醛固酮系统活性,抑制心肌纤维化过程.     

血管紧张素Ⅱ及氯沙坦对糖尿病大鼠心肌成纤维细胞α1(Ⅰ)前胶原mRNA和蛋白表达的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)及其1型受体阻断剂氯沙坦对糖尿病动物模型心肌成纤维细胞α1(Ⅰ)前胶原mRNA和蛋白表达的作用。方法 用链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型，饲养12周后分离心肌成纤维细胞进行原代培养。分别将一定浓度的ATⅡ(10^-9～10^-7mmol／L)，和ATⅡ10^-7 mmol／L加上不同浓度ATⅡ受体阻滞剂氯沙坦(10^-7～10^-5mmol／L)加入细胞培养液中刺激48h，分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹方法检测大鼠心肌成纤维细胞α1(I)前胶原的mRNA及蛋白表达。结果体外成功地培养糖尿病心肌成纤维细胞，并经免疫组化染色结果证实。经ATⅡ刺激48h后，α1(Ⅰ)前胶原mRNA和蛋白表达量明显增高，增高程度与ATⅡ浓度呈正比；加入氯沙坦后，前胶原mRNA和蛋白表达量较单用ATⅡ组下降，也呈浓度依赖性。结论 ATⅡ可促进糖尿病大鼠心肌成纤维细胞的胶原合成，可能在糖尿病大鼠心肌纤维化倾向中起重要作用，该作用可能主要通过ATⅡ1型受体介导完成。     

氯沙坦对肺成纤维细胞转分化和胶原合成的抑制作用

目的观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对人胚肺成纤维细胞（HLF）的转分化作用和对其结缔组织生长因子（CTGF）表达、胶原合成的影响，并检测AngⅡ受体拮抗剂氯沙坦对AngⅡ作用的干预。方法常规培养HLF细胞并随机分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ＋氯沙坦组和氯沙坦组，用免疫荧光法和Western免疫印迹法检测各组HLF转分化肌成纤维细胞中标志蛋白α-平滑肌动蛋白（α-5MA）的表达，逆转录-多聚酶链反应和免疫组织化学法检测各组CTGFmRNA及蛋白表达的改变；分别用AngⅡ、AngⅡ＋氯沙坦孵育CTGF反义、正义、错义寡核苷酸转染HLF细胞，观察各组细胞I型胶原蛋白mRNA和α—SMA的mRNA和蛋白水平变化，比色法测定各组细胞培养液中羟脯氨酸含量。结果AngⅡ组CTGFmRNA的吸光度值（0．82±0．07）较对照组（0．29±0．05）、AngⅡ＋氯沙坦组（0.51±0.04）、氯沙坦组（0.26±0．04）明显增高；AngⅡ组CTGF蛋白的吸光度值（0.24±0．05）明显高于其他组；AngⅡ组胶原蛋白mRNA的吸光度值为1．03±0．12，羟脯氨酸含量为（0．62±0．01）ng／ml，明显高于其他3组；AngⅡ孵育CTGF反义寡核苷酸转染细胞组α-SMA的吸光度值（1．14±0．15）和胶原蛋白mRNA的吸光度值（0．30±0．04）明显低于正义组（4．25±0．21和0．55±0．08）和错义组（4．34±0．31和0．58±0．06）；AngⅡ＋氯沙坦孵育CTGF反义寡核苷酸转染细胞组α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白mRNA的吸光度值（0.85±0．09和0．20±0．02）明显低于AngⅡ单独孵育时（4．39±0．29和1．03±0．12）。结论AngⅡ可通过上调HLF细胞CTGF表达水平诱导其转分化为肌成纤维细胞并促进胶原合成，阻断CTGF表达可使AngⅡ对HLF细胞的转分化及胶原诱导合成作用减低，氯沙坦可抑制AngⅡ对HLF细胞的诱导作用。     

肾上腺髓质素对血管紧张素Ⅱ促血管外膜成纤维细胞胶原生成作用的影响

目的探讨肾上腺髓质素（ADM）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的血管外膜成纤维细胞胶原生成的影响及机制。方法体外培养大鼠主动脉外膜成纤维细胞,通过放射免疫法测定培养上清中ADM含量,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定培养上清中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量,用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）及Western印迹法检测转化生长因子β1（TGFβ1）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA及蛋白的表达。结果AngII呈剂量依赖性地刺激血管外膜成纤维细胞分泌ADM,在AngⅡ（10^-6mol／L）刺激前30min加入氯沙坦或（和）PD123319,氯沙坦（10^-5mol／L）可明显降低AngⅡ刺激的ADM分泌,其抑制率为45％（P〈0．01）,而PD123319（10mmol／L）作用后抑制率仅为3％（P〉0．05）,氯沙坦＋PD123319组与单独氯沙坦组相比差异无统计学意义（P〉0．05）;AngⅡ显著增加培养上清中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量,ADM呈剂量依赖地抑制AngⅡ上述作用,其中ADM（10“mol／L）组中I、Ⅲ型胶原合成分别抑制了30％和31％（P〈0．01）,ADM（10^-7mol／L）组则分别抑制了43％和42％（P〈0．01）。ADM受体拈抗剂ADM22-52可增强AngII上述作用,Ⅰ、Ⅲ型胶原合成分别增加了38％和43％（P〈0．01）;ADM呈剂量依赖性抑制AngⅡ刺激的TGFβ1mRNA及蛋白表达,其中ADM（10^-8mol／L）组中TGFβ1mRNA及蛋白表达分别抑制了55％和45％（P〈0．01）,ADM（10^-7mol／L）组则分别抑制了70％和59％（P〈0．01）;AngⅡ明显下调细胞内MMP-2mRNA及蛋白表达,ADM呈剂量依赖性抑制上述作用,其中10^-8mol／LADM组细胞内MMP-2mRNA及蛋白表达分别增加了1．0和0．9倍。结论AngⅡ可刺激血管外膜成纤维细胞释放ADM,而自分泌旁分泌的ADM可能通过下调细胞内TGFN表达和上调MMP-2表达,抑制AngⅡ刺激的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白生成,从而发挥有效的抗血管重构作用。     

反义转化生长因子βⅡ型受体表达质粒对实验性肝纤维化的影响

目的 观察反义转化生长因子βⅡ型受作(TGF βRⅡ)表达质粒对实验性肝纤维化的影响。方法 运用重组DNA技术中构建反义TGF βRⅡ真核细胞表达质粒,采用猪血清腹腔注射制备免疫性大鼠肝纤维化模型,实验动物分为肝纤维化模型组、反义TGF βRⅡ治疗组、pCDNA3对照组及正常对照组。反义TGF βRⅡ质粒和pCDNA3空质粒与糖化多聚赖氨酸偶联后经尾静脉分别导入大鼠体内,通过northern blot、RT-PCR、Western blot检测外源导入质粒在肝组织中的表达,检测血清转化生长因子β1(TGFβ1)、肝组织羟脯氨酸测定,Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组织化学与Van Gieson染色观察反义TGF βRⅡ质粒对大鼠肝纤维化的影响。 结果 反义TGF βRⅡ表达质粒可在肝组织中获得确切表达,其表达可使反义治疗组血清TGF β1含量下降,反义TGF βRⅡ治疗组为(23.16 ± 3.13)ng/ml,模型组为(32.96±3.79)ng/ml,F=36.73,P<0.01。肝组织羟脯氦酸含量下降,治疗组为(0.17±0.01)mg/g,模型组为(0.30±0.03)mg/g,F=15.48,P<0.01。减少了肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的沉积,治疗组Ⅰ型胶原为650.26±51.51,Ⅲ型胶原为661.5 8±55.28,模型组Ⅰ型胶原为1209.44±16.60,Ⅲ型胶原为1175.14±121.44,F值分圳为69.87、70.46,P<0.01。并促进反义治疗组肝脏病理形态一定程度的改善。     

氯沙坦或卡托普利对自发性高血压大鼠心脏纤维化的干预研究

目的　探讨在不同水平阻断肾素 -血管紧张素系统 (RAS)对高血压心肌纤维化的影响。方法　 2 9只自发性高血压大鼠 (SHR)随机分成 (1)SHR对照组 (n =15 ) ;(2 )氯沙坦组 (n =7,30mg·kg-1·d-1) ;(3)卡托普利组 (n =7,10 0mg·kg-1·d-1) ;(4)WKY(n =12 )为非高血压组。治疗组每日灌胃给药 ,对照组蒸馏水灌胃 15周后 ,获取标本。结果　 1.SHR心肌血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )和醛固酮 (Ald)浓度、羟脯氨酸和Ⅰ /Ⅲ型胶原比值较同龄WKY大鼠明显增高 (P <0 0 1) ,而心肌胶原单体 /二聚体 (α/ β)比值和基质金属蛋白酶 - 1(MMPs- 1)活力降低 (P <0 0 1) ,且随病程而进一步升高或降低。 2 .经氯沙坦或卡托普利干预后 ,心肌AngⅡ、Ald浓度、心肌羟脯氨酸和Ⅰ、Ⅲ型胶原比值有不同程度的降低 (P <0 0 1) ,而心肌胶原单体 /二聚体 (α/ β)比值和MMPs- 1活性升高 (P <0 0 1) ,逆转了心肌纤维化。3.氯沙坦在改善胶原表型、胶原可溶性及提高MMPs- 1活性优于卡托普利。结论　不同水平阻断肾素血管紧张素系统对纤维化逆转不仅减少胶原含量 ,还改善表型和交联的异常     

松弛素对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠血管外膜成纤维细胞胶原水平的影响

目的:探讨松弛素(RLX)对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的大鼠血管外膜成纤维细胞胶原水平的影响及机制。方法:体外培养大鼠主动脉外膜成纤维细胞,随机分为对照组、AngⅡ组(10-6 mmol/L),RLX组(100μg/L)及AngⅡ+RLX组。采用波形蛋白染色法鉴定血管外膜成纤维细胞,用RT-PCR检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达,用Western blot印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及转化生长因子(TGF)-β1蛋白的表达。结果:AngⅡ可显著增加培养液上清中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量及TGF-β1蛋白表达,而RLX明显抑制AngⅡ的上述作用;AngⅡ可显著下调细胞内MMP-2和MMP-9的蛋白表达,而RLX明显抑制AngⅡ的上述作用(均P<0.05)。结论:AngⅡ可刺激血管外膜成纤维细胞胶原合成增加,而RLX通过上调MMP-2、MMP-9表达和下调TGF-β1表达,抑制AngⅡ刺激的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白生成,从而发挥抗血管纤维化作用。