产金属酶铜绿假单胞菌的检测及耐药现状调查

目的:研究临床中分离的耐亚胺培南铜绿假单胞菌的产金属酶的检测及耐药现状,为合理选择抗生素提供理论依据。方法:采用EDTA纸片复合法和E-test法分别筛选产金属β-内酰胺酶菌株,同时用PCR法检测blaIMP-1和blaVIM-2耐药基因,用MIC法测定产金属β-内酰胺酶菌株对8种常用抗菌药物的敏感度。结果:30株耐亚胺培南铜绿假单胞菌ED-TA纸片复合法筛选9株产金属酶菌株;E-test法筛选6株产金属酶菌株;PCR法仅检测到1株blaIMP-1和3株blaVIM-2耐药基因。产金属酶菌株呈多重耐药,尤其是PCR法产金属酶菌株耐药呈现为高水平耐药;阿米卡星抗菌活性最好,其次为环丙沙星。结论:金属酶是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的原因之一,我院临床分离铜绿假单胞菌中部分携带金属酶,该酶导致该菌对碳青霉烯类耐药。     

烟台地区产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性分析及基因型检测

目的研究烟台地区产金属伊内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性,基因型及菌株的同源性,为监控产酶菌株的流行及指导临床合理选择抗生素提供依据。方法EDTA纸片复合法和E—test法分别筛选产金属β-内酰胺酶菌株,PCR扩增耐药基因imp、vim、spm和gim,用MIC法测定产金属G内酰胺酶菌株对8种常用抗菌药物的敏感度,用肠杆菌科基因间重复一致序列为引物的聚合酶链反应（ERICPCR方法）确定菌株之间的同源性。结果42株耐亚胺培南和头胞他啶铜绿假单胞菌EDTA纸片复合法筛选出18株金属酶菌株、E—test法15株、PCR法12株;PCR法检测到imp阳性菌株4株,vim阳性菌株8株;产金属β-内酰胺酶菌株呈多重耐药,且PCR法阳性产金属酶菌株呈现为高水平耐药;ERIC—PCR结果显示,18株产金属伊内酰胺酶菌株呈现7种基因模型,其中10株为同一基因模型。结论经济简便快捷的EDTA纸片复合法可作为首选方法来对产金属酶铜绿假单胞菌进行筛选,烟台地区临床分离的铜绿假单胞菌所产金属β-内酰胺酶基因型以vim型为主,阿米卡星、环丙沙星具有较好的抗菌活性,某医院在一定时期曾出现爆发流行。     

淮北地区耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药机制

目的探讨淮北地区铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa,Pa）对亚胺培南的耐药机制。方法采用K-B法和MIC法检测25株临床分离亚胺培南耐药铜绿假单胞菌对12种临床常用抗生素的敏感性;采用PCR法检测外膜蛋白OprD2和金属β-内酰胺酶（MBLs）耐药相关基因（IMP、VIM、SPM、GIM）。结果 25株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中15株外膜通道蛋白OprD2基因缺失,缺失率60%;5株产金属酶,检出率20%（4株产VIM-2,1株产IMP-1）;未检出SPM-2、GIM基因。结论淮北地区铜绿假单胞菌亚胺培南耐药,外膜通道蛋白OprD2缺失与产金属酶均起重要作用。     

烧伤病区产金属酶铜绿假单胞菌的筛选及分析

目的比较烧伤病区和其他病区铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的情况并分析其耐药性,为临床合理选用抗生素提供依据。方法采用细菌鉴定药敏分析仪进行铜绿假单胞菌的鉴定及药敏试验。同时采用纸片协同法筛选产金属酶的菌株。结果在检测的68株铜绿假单胞菌中,产金属酶的有9株,占13．2％。烧伤病区产金属酶的有7株（7／32）,占21．9％;其他病区产金属酶的有2株（2／36）,占5．6％。产酶株对头孢他啶、头孢噻肟、亚胺培南、环丙沙星、阿米卡星、庆大霉素、哌拉西林、氨曲南的耐药率分别为100％、100％、88．9％、66．7％、88．9％、100％、100％、88．9％,远远高于不产金属酶的铜绿假单胞菌。结论烧伤病区的铜绿假单胞菌的产酶率比其他病区的高,产金属酶的铜绿假单胞菌对临床常用的多种抗生素具有较高的耐药率,临床必须依据药敏实验结果使用抗生素。     

产金属β内酰胺酶铜绿假单胞菌的筛选及基因型研究

目的 研究本院临床分离铜绿假单胞菌产金属β内酰胺酶的基因型、耐药性及同源性.方法 用2-巯基丙酸或 EDTA 协同试验筛选临床分离的亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌.协同试验阳性菌株用PCR法检测金属酶基因型,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析产金属酶菌株同源性.结果 31株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌协同试验阳性5株,PCR扩增有4株阳性,为金属酶IMP-9型,均分离自神经科重症监护病房,PFGE结果显示为同一克隆株.产酶株对阿米卡星敏感或中介,对其他临床常用抗生素均高度耐药.结论 本院神经科重症监护病房有产IMP-9型金属酶铜绿假单胞菌流行,应注意进行临床检测和监控.     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性分析及金属β-内酰胺酶的检测

目的调查盐城市第一人民医院住院患者送检标本分离的铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药水平及其产金属β-内酰胺酶(MBLs)的情况。方法临床标本分离的铜绿假单胞菌采用法国生物梅里埃细菌鉴定及药敏检测系统进行细菌鉴定与药物敏感性试验;采用纸片协同实验来检测铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的情况。结果 236株铜绿假单胞菌中有63株对亚胺培南耐药,耐药率为26.69%,耐亚胺培南铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、环丙沙星、氨曲南部分耐药,耐药率分别为45.12%、50.33%、59.74%、61.43%、62.12%和63.16%;对头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林、美罗培南耐药率较高;63株耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶的检出率为38.10%(24/63)。结论金属β-内酰胺酶的产生是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的重要机制之一,实验室应加强对产酶菌株的监测,为临床合理选用抗生素提供有效依据。     

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶基因的流行病学研究

目的明确我院临床分离的铜绿假单胞菌耐亚胺培南基因型。方法收集临床分离的铜绿假单胞菌219株,筛选亚胺培南耐药株;采用双纸片协同试验对临床分离的35株耐亚胺培南铜绿假单胞菌进行金属β-内酰胺酶(MBL)表型检测;用聚合酶链反应(PCR)检测MBL基因型别,并对PCR扩增阳性株进行测序。结果 219株铜绿假单胞菌中35株为耐亚胺培南铜绿假单胞菌,35株耐亚胺培南铜绿假单胞菌共检出14株MBL表型阳性,占40%。其中IMP-1型阳性7株、VIM-2型阳性2株。结论产金属β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的主要机制之一,临床应根据药敏结果及产酶情况综合考虑合理用药,以减少耐药菌株的产生。     

铜绿假单胞菌的耐药性与金属β-内酰胺酶检测

目的检测铜绿假单胞菌的耐药性以及β-内酰胺金属酶阳性率。方法采用K-B法检测356株铜绿假单胞菌对20种常用抗生素的耐药率,采用IPM EDTA与CAZ EDTA抑菌环直径之差判断金属酶阳必性率。结果356株铜绿假单胞菌有86株对IPM耐药。有155株对CAZ耐药,82株同时对CAZ与IPM耐药,从中共检测出16株铜绿假单胞菌产金属酶,对大多数抗生素形成耐药。结论金属酶对氨曲南和多粘菌素B稳定,可作为产金属酶铜绿假单胞菌临床感染治疗的首选药物。通过密切监视产金属酶菌株的发展趋势,合理使用抗生素,减少耐药菌株的传播。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药性及金属β-内酰胺酶的检测

目的 了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的状况及耐药性,为临床合理选用抗生素提供依据。方法 细菌鉴定、药敏实验采用WalkAway-40全自动微生物分析仪,金属β-内酰胺酶检测采用双纸片增效法。结果 铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率从1999年的13．0％升高到2005年的39．1％。亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌对阿米卡星、头孢他啶、哌拉西林／他巴坦和头孢吡肟的耐药率在60％～63％之间,对妥布霉素、氨曲南、庆大霉素、环丙沙星和哌拉西林的耐药率分别为66．5％、68．0％、70．7％、71．0％和72．2％,金属β-内酰胺酶的检出率为15,7％。结论 亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌呈逐年增加的趋势,且多重耐药现象严重;产金屑β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的重要机制,实验室应加强对金属β-内酰胺酶的检测。     

106株铜绿假单胞菌耐药性分析及金属β-内酰胺酶检测

目的分析医院铜绿假单胞菌的分布、耐药性及产金属β-内酰胺酶的现状,为临床治疗铜绿假单胞菌感染提供合理用药的实验依据。方法将VITEK-2全自动鉴定仪鉴定出的106株铜绿假单胞菌,采用琼脂纸片扩散(K-B)法进行体外耐药性监测及统计耐药率,同时用双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶的百分率。结果 106株铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的22株,占20.8%。金属β-内酰胺酶阳性与阴性的铜绿假单胞菌耐药率相比较,对头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢哌酮的耐药率差异有统计学意义(P<0.05);而对氨曲南、阿米卡星、左氧氟沙星、庆大霉素呈现的耐药率二者差异无统计学意义(P>0.05)。结论产金属β-内酰胺是铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的主要机制之一,临床应根据药敏结果及产酶情况综合考虑合理用药,以减少耐药菌株的产生。     

呼吸道铜绿假单胞菌感染的药物应用性研究

目的研究呼吸道感染标本中,铜绿假单胞菌对常用的12种抗生素的耐药性和产β内酰胺酶菌株的首选药物治疗。方法k-b纸片扩散法测定菌株的耐药性。结果引起呼吸道感染的58株铜绿假单胞菌,对12种抗生素的平均耐药率为47.6%。5重以上耐药菌占70.1%。58株菌中产β内酰胺酶的菌株占63.8%,5重以上耐药菌占83.8%。结论由铜绿假单胞菌引起的呼吸道感染的经验性治疗应选择含酶抑制剂抗生素舒普深或喹诺酮类药物配以氨基糖甙类药物治疗;对产酶菌应首选舒普深、氧氟沙星或亚胺培南/西司他丁治疗;对非产酶菌可选用第三代头孢菌素头孢哌酮或头孢他啶并配以氨基糖甙类药物治疗。     

多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性分析

[目的]探讨医院感染多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性及耐药表型.[方法]对本院2009年10月至2010年10月临床检出菌,用天地人200B系统鉴定及药敏分析,并用三维法对分离的铜绿假单胞菌进行AmpC酶检测,同时用双纸片法进行超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测.[结果]共检出铜绿假单胞菌64株,其中检出AmpC阳性菌株18株,产酶率为28.13%;产ESBLs菌株16株,产酶率为25.00%;产AmpC＋ESBLs菌株8株,产酶率为12.50%.在14种抗生素中,耐药率最低的是亚胺培南.[结论]住院病人免疫力低下的患者是铜绿假单胞菌的易感人群.亚胺培南是治疗感染多重耐药铜绿假单胞菌的有效药物.     

某医院下呼吸道标本分离铜绿假单胞菌耐药性分析

目的了解临床下呼吸道标本分离铜绿假单胞菌对13种抗菌药物的耐药性、以及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头胞菌素酶（AmpC酶）及金属β-内酰胺酶情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法选择该院2007-2012年480株下呼吸道标本中分离出的铜绿假单胞菌,菌株鉴定采用法国梅里埃API鉴定系统进行。药敏试验按K-B纸片琼脂扩散法操作并判断结果。采用三维试验法检测铜绿假单胞菌中的ESBLs和AmpC酶,双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶。结果从480株铜绿假单胞菌中检出产ESBLs、AmpC及金属β-内酰胺酶189株,总检出率39.4%。铜绿假单胞菌对妥布霉素、哌拉西林-三唑巴坦、亚胺培南、阿米卡星显示较好的敏感度,对头孢曲松、头孢替坦、头孢唑林高度耐药。结论应重视铜绿假单胞菌ESBLs、AmpC和金属β-内酰胺酶检测;对于该菌引起的呼吸道感染宜采用哌拉西林-三唑巴坦、头孢他啶联合氨基甙类或喹诺酮类抗菌药物治疗。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的药敏情况与耐药机制

目的：探讨44株耐亚胺培南铜绿假单胞菌的药敏情况和产金属β-内酰胺酶的类型。方法：采用K-B法测定抗菌药物对细菌的体外抗菌活性，双纸片协同试验进行金属β-内酰胺酶筛选，PCR法进行金属β-内酰胺酶耐药基因IMP和IMP的检测。结果：阿米卡星敏感性最高为27．3％，其次为环丙沙星（20．5％）和头孢吡肟（15．9%）；44株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中，扩增出IMP型阳性株4株，未检测到VIM型金属β-内酰胺酶基因。结论：对耐亚胺培南铜绿假单胞菌引起的感染，阿米卡星、环丙沙星和头孢吡肟可以考虑使用。北京天坛医院耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药机制中，产IMP型金属β-内酰胺酶起着重要作用。     

三维试验检测耐头孢他啶铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶

目的了解耐头孢他啶铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶的现状。方法采用K-B法进行药敏试验,筛选耐头孢他啶的铜绿假单胞菌,采用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶。结果 65株临床分离耐头孢他啶铜绿假单胞菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)30株(46.2%),AmpC酶4株(6.2%),同时产ESBLs和AmpC酶10株(15.4%),同时产金属酶和产ESBLs 15株(23.1%),同时产AmpC酶和金属酶2株(3.1%)。结论益阳市第三人民医院铜绿假单胞以产ESBLs为主,其次为AmpC酶和金属酶。     

铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药检测

目的对临床分离的铜绿假单胞菌进行常规药物敏感性试验时，同步检测细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性。方法选取临床分离对亚胺培南耐药的46株铜绿假单胞菌，用聚合酶链反应（PCR）和二维试验分别检测其对亚胺培南耐药的基因型及表型，表型检测时以铜绿假单胞菌标准菌株（ATCC 27853）、亚胺培南纸片为抗菌药物的底物。结果亚胺培南耐药的46株菌中，PCR检测膜孔蛋白基因OprD2缺失菌株7株，检出率为15．2％；金属β-内酰胺酶基因blaIMP阳性菌株9株，检出率为19．6％；blaVIM阳性0株，检出率为0％。二维试验检测产碳青霉烯酶菌株15株，阳性率为32．6％，金属p．内酰胺酶基因blaIMP阳性菌株9株，全部阳性。膜孔蛋白基因OprD2缺失7株菌中，二维试验阴性6株。结论铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药主要由产酶及膜孔蛋白缺失引起，二维试验操作简便，可与常规的纸片琼脂扩散法药物敏感性试验同步进行，结果易于判读，可在各级临床细菌室操作。     

铜绿假单胞菌产AmpC酶和ESBLs的检测和耐药性分析

目的 研究AmpC酶和ESBLs在临床分离铜绿假单胞菌中的分布及其对耐药性的影响.方法 纸片扩散法测定19种抗生素的耐药性,三维试验检测高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）.结果 92株铜绿假单胞菌中,单纯高产AmpC酶者,单纯产ESBLs者,高产AmpC酶并产ESBLs者分别为17.4%、8.7%、10.7%.产酶菌株仅对美洛培南亚胺培南敏感,对大多数抗生素耐药.非产酶菌株对头孢西丁、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻肟、头孢唑林高度耐药,对大多数抗生素敏感.结论 产ESBLs和高产AmpC酶的铜绿假单胞菌在临床分离菌株中阳性率较高,产酶菌株对大多数抗生素的耐药性明显高于非产酶菌株.     

铜绿假单胞菌的耐药性及多重耐药机制

目的了解铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性及耐药机制,指导临床合理选用抗生素。方法应用英国先德微生物分析系统检测药物敏感性,通过改良酶提取物头孢西丁和头孢曲松三维试验检测AmpC酶和ESBLs,K-B纸片扩散法检测金属β内酰胺酶。结果74株临床分离铜绿假单胞菌对亚胺培南的敏感率最高,敏感率达82.4%。对头孢吡肟、阿米卡星、派拉西林、环丙沙星、妥布霉素的敏感性较高。单产ESBLs、同时产ESBLs和AmpC酶、单产AmpC酶和单产金属β内酰胺酶的检出率分别为16.2%,9.4%,5.4%,4.0%。结论临床分离铜绿假单胞菌的耐约现象不容忽视,产生高活性β内酰胺酶是导致其耐药的机制之一,亚胺培南仍是治疗铜绿假单胞菌感染最有效的约物。     

医院耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的 了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌的产金属酶情况,分析其耐药特点.方法 使用全自动细菌鉴定药敏分析仪对临床送检各种标本进行菌种鉴定和药敏分析,采用药敏纸片法对金属β-内酰胺酶进行检测.结果 在591株铜绿假单胞菌中,耐亚胺培南214株,耐药率为36.2％,其中产金属β-内酰胺酶36株,产酶率为16.8％ (36/214);药敏结果显示,591株铜绿假单胞菌对舒普深、阿米卡星和特治星敏感率较高,对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林和头孢泊肟耐药率较高.结论 耐亚胺培南铜绿假单胞菌检出率较高,多重耐药现象严重,金属酶的产生是铜绿假单胞菌对碳青酶烯类及头孢类抗菌药物耐药的主要因素之一.临床应参考实验室的药敏结果,合理选用抗菌药物.     

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌金属β内酰胺酶的检测和同源性分析

目的了解亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的耐药性、同源性及金属β内酰胺酶类型。方法收集我院2006年1—9月临床分离的亚胺培南耐药铜绿假单胞菌29株，用琼脂稀释法测定10种抗菌药物的MIC；通过改良Hodge试验、双纸片协同试验、PCR、序列分析等方法分析金属β内酰胺酶类型，紫外分光光度法测定金属β内酰胺酶的活性；脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析菌株同源性。结果29株细菌均为多重耐药株，仅对哌拉西林一他唑巴坦和阿米卡星敏感率较高，分别为69．7％和60．6％。29株细菌PFGE图谱分为16个基因型，A型主要集中在呼吸内科病房，B、C型来自神经外科ICU，D、E型来自器官移植病房，F型来自创伤外科病房，G型来自神经内科病房，其余为散在分布。29株菌中有2株产VIM-2金属β内酰胺酶（6．9％）。结论本院亚胺培南耐药铜绿假单胞菌主要为医院感染流行株，且呈多重耐药，有2株菌产VIM-2型金属β内酰胺酶。