小剂量rh-TNFαD3a协同阿霉素对人肺癌细胞株抑瘤率的影响

目的研究小剂量重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a(rh-TNFαD3a)对人肺癌低转移表型(AGZY)和高转移表型(Anip973)细胞株的毒性作用及其与阿霉素(ADM)联合的协同效应.方法采用MTT比色法检测小剂量rh-TNtα D3a及与ADM联合后对AGZY和Anip973细胞株的毒性作用.结果ADM加TNF后,在两细胞株中均可明显降低ADM的半数致死浓度.在Anip973细胞株中,ADM各浓度组加TNF后,其抑制率均明显增加(P＜0.05).而在AGZY细胞株中只有ADM浓度在2.00μg/ml时其抑制率明显增加(P＜0.05),其它浓度组变化不大.结论小剂量rh-TNFαD3a可降低ADM的半数致死浓度,增加ADM对人肺癌细胞株的抑瘤率.     

肺癌动态血清TNF—α对预后意义的探讨

肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）自从被发现后,多用于肿瘤免疫治疗。有关ＴＮＦ－α判断肿瘤预后尚未见报道。为了探讨ＴＮＦ－α对肺癌预后的价值,本组对１４例肺癌患者术前、术后测定了血清ＴＮＦ－α和癌胚抗原（ＣＥＡ）水平,以比较ＴＮＦ－α和肿瘤标志物ＣＥＡ对肺...     

PI3K/AKT抑制剂对人肺癌细胞株生长的影响

目的 研究PI3K／Akt特异性抑制剂LY294002对人肺腺癌细胞株（A549）增殖的影响。方法 用免疫细胞化学S-P法检测对照组和LY294002干预组A549细胞p-Akt蛋白的表达，MTT法检测对照组和LY294002干预组（LY294002 5μmol／L，10μmol／L，20μmol／L，40μmol／L）干预24h，48h、72h后A549细胞增殖的抑制率。结果 LY294002以剂量、时间依赖性方式抑制A549细胞的生长，各个LY294002干预组与对照组相比p-Akt蛋白的表达降低，有统计学意义（P〈0．01）。结论 LY294002对人肺腺癌A549细胞有抑制生长的作用。LY294002对p-Akt表达的抑制可能是细胞增殖受抑的重要原因。     

维生素D3对人乳腺癌细胞株表皮生长因子受体mRNA表达的影响

目的 探讨维生素Ｄ３对人乳腺癌细胞株细胞增殖等生物学行为的影响。方法 选用两种人类乳腺癌细胞株ＭＣＦ－７及ＺＲ－７５－１,应用细胞培养及核酸分子杂交方法,研究使用维生素Ｄ３以及并用三苯氧胺后,上述细胞株生长及表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）ｍＲＮＡ表达的改变。结果 （１０＾－１０～１０＾－７）ｍｏｌ／Ｌ维生素Ｄ３对ＭＣＦ－７及ＺＲ－７５－１细胞呈现明显的抑制生长作用,并能抑制（１０＾－９～１０＾－７）     

脂质体阿霉素对人喉癌HEP-2细胞株的影响

[目的]研究脂质体阿霉素对人喉癌HEP-2细胞株的作用特点。[方法]以MTT法分别测定脂质体阿霉素组与游离阿霉素组分别作用于HEP-2细胞株72h后的细胞增殖抑制率并比较两组的半数抑制浓度（IC50）;通过流式细胞仪（FCM）检测两组药物分别作用于HEP-2细胞株72h后对其细胞周期的影响：采用荧光分光光度法分别测定脂质体阿霉素和游离阿霉素分别作用于HEP-2细胞株1、3、6h后实验细胞内的药物浓度。[结果]脂质体阿霉素对HEP-2细胞株的IC50是游离阿霉素的1,4倍。脂质体阿霉素组与游离阿霉素组分别采用0．016μg/ml、0．06μg／ml的浓度作用于HEP-2细胞株72h后．均使HEP-2细胞株停滞于G2/M期．且脂质体阿霉素G2/M期百分率高于游离阿霉素。荧光分光光度法结果显示：脂质体阿霉素组内药物浓度在1、3、6h后均分别大于游离阿霉素组,且6h后脂质体阿霉素作用于HEP-2细胞株内的阿霉素浓度是游离阿霉素的4倍。[结论]与游离阿霉素相比．脂质体阿霉素对人喉癌HEP-2细胞株具有较好的增殖抑制作用,并且阻滞HEP[2细胞株于G2/M．其可能机制是与脂质体阿霉素增加细胞内阿霉素浓度有关。     

TNF—α对人胃癌细胞IAP-2表达调节的体外实验研究

应用重组人肿瘤坏死因子（TNF-α）体外诱导三株胃癌细胞株SGC7901，MGC803和MKN45，同时检测诱导组和对照组细胞表面免疫抑制酸性蛋白Ⅱ型（IAP-2）表达水平。结果表明，无TNF-α对照组，三析细胞均表达一定量IAP-2；TNF-α诱导组，当TNF-α诱导浓度在1×10^2-10^4u/ml时，三株细胞IAP-2表达量显高于对照组（P<0.01)；当TNF-α≥1×10^5u/ml时，细胞IAP-2表达量显减少（P<0.01)。上述结果提示，低浓度TNF-α体外可以促进人胃癌细胞IAP-2表达；高浓度时，则可抑制IAP-2表达。     

多药耐药相关蛋白反义RNA对耐阿霉素人小细胞肺癌细胞株GLC4/ADR耐药性的调节

目的 构建表达多药耐药相关蛋白（MRP）反义RNA的真核表达载体,转染耐药细胞株,初步探讨其影响多药耐药（MDR）的作用机理。方法 以MRPcDNA为模板,应用PCR扩增MRPmRNA5′端（含起始子密码）及MRP mNRA3′端（含终止子密码）片段,通过定向克隆方法,构建表达MRP反义RNA的两个重组载体。通过Lipofectamine将其导入小细胞肺癌（SCLC）耐阿霉素（ADR）的细胞株GLC4／ADR中,经G418筛选,得到分别含pcDNA3空载（MO）、MRP mRNA5′端为靶区的反义RNA（Ma),MRPmRNA3′端为靶区的反义RNA（Mb)的3个细胞克隆。检测细胞内ADR的蓄积改变以及荷瘤裸鼠对ADR的敏感性。结果 经RT－PCR检测,外源片段可获稳定表达。Ma细胞及Mb细胞中,MRP表达分别抑制约14．0％和83．0％,且胞内ADR蓄积量均有一定程度的增加;对ADR的耐药倍数与对照细胞MO相比,分别下降9．5％和28．4％。虽然,MRP反义RNA对细胞的生长、细胞周期及ADR诱导的早期凋亡均无明显影响,但可提高荷瘤裸鼠对ADR的敏感性。结论 MRP反义RNA能抑制MRP蛋白的表达,并使转染细胞内ADR浓度增加,从而逆转MRP介导的MDR。对于配合化疗,提高MRP高表达患者的疗效,具有潜在的应用意义。     

人γTNFβ对K562细胞株的杀伤效应及其电镜观察

本文用本实验室新分离的人γ干扰素／β肿瘤坏死因子(γTNFβ)杂合蛋白，对人髓性白血病细胞株K562(该细胞株对人TFNγ，TNFα和TNFβ均有一定抗性)进行了细胞毒效应的研究。实验用甲基纤维素半固体培养系统集落形成法(培养5天）和^3H-TdR掺入法进行，并以人IFNγ、TNFβ以及丝裂霉素C等单因子或双因子为对照比较研究。     

转人TNFα基因对肾细胞癌细胞致瘤性的影响

目的:观察转人TNFα基因对肾细胞癌细胞(RCC) 致瘤性的影响,为进一步对RCC 的基因治疗打下基础。方法:将人TNFα基因构建入逆转录病毒载体,经包装、鉴定后,感染RCC 细胞株78620 , EL ISA 法测转人TNFα基因78620 细胞上清中TNFα的活性,同时,将转人TNFα基因的78620 细胞接种裸鼠,观测转TNFα前后RCC 细胞致瘤性的变化。结果: 转人TNFα78620 细胞上清TNFα的浓度平均为(5 004 ±624) pg/ ml ,接种裸鼠后无肿瘤长出。结论:转人TNFα基因使建株RCC 失去了致瘤性。     

干扰素α-2a对人鼻咽癌细胞株CNE-I放射敏感性的影响

目的探讨干扰素α2a对人鼻咽癌细胞株CNEI放射敏感性及其细胞周期的影响。方法用不同浓度的干扰素α2a处理CNEI细胞后用6MVX线照射,计算细胞存活率。流式细胞仪分析CNEI细胞周期动力学改变。结果0.5×106、1.0×106、1.5×106IU/L干扰素α2a干预CNEI细胞后细胞存活分数分别为0.62、0.43、0.20,放射增敏比为1.16、1.57、1.93;1×106IU/L干扰素α2a干预CNEI细胞24h后,与对照组比较细胞增殖周期G1和G2+M细胞数增多,S期细胞数减少(P<0.01)。结论干扰素α2a能抑制人鼻咽癌细胞株CNEI的生长,并具有放射增敏效应,放射增敏机制可能与其调节CNEI细胞增殖周期有关。     

尼妥珠单抗联合表阿霉素对人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２体外生长的影响

目的　观察尼妥珠单抗（ｈ-Ｒ３）与表阿霉素（ＥＰＩ）联合对人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２体外生长及凋亡的影响。方法　选用浓度递增的ｈ-Ｒ３和ＥＰＩ,单独和联合作用于ＨｅｐＧ２细胞,ＭＴＴ法观察不同时间点、不同药物剂量对ＨｅｐＧ２细胞生长的影响,计算两者联合的ｑ值;流式细胞仪检测两种药物对ＨｅｐＧ２细胞凋亡率及细胞周期分布情况的影响。结果　ｈ-Ｒ３和ＥＰＩ单药对ＨｅｐＧ２细胞生长均有抑制作用且呈时间和剂量依赖性,两药单独作用７２ｈ后对ＨｅｐＧ２细胞生长的最高抑制率分别为（４９.５６±８.９３）％和（９２.９７±１.１９）％,两药联合对ＨｅｐＧ２细胞生长的最高抑制率为（６.４４±１.０）％,联合用药可提高细胞增殖抑制率,呈相加作用;流式细胞仪检测发现,联合组细胞凋亡率高于单药组,随时间增加凋亡率呈升高趋势;细胞周期检测提示ｈ-Ｒ３使细胞阻滞在Ｇ０／Ｇ１期,ＥＰＩ阻滞细胞在Ｓ期,两药均能影响细胞周期分布。结论　ｈ- Ｒ３在体外与ＥＰＩ联合可以提高对ＨｅｐＧ２细胞增殖抑制及凋亡的作用,两药均可影响ＨｅｐＧ２细胞周期的分布。     

42℃温热增强顺铂对人肺癌细胞PLA-801 D毒性的实验研究

目的探讨42℃温热对化疗药顺铂(DDP)增敏的规律及其机制。方法应用四氮唑蓝(MTT)快速比色法测定42℃热疗组、单纯化疗组以及以不同序贯方式结合的热化疗组对人肺癌细胞(PLA-801D)的生长抑制率;流式细胞仪测定各组细胞周期的变化。结果42℃单独热疗和单独药物均对肺癌细胞有抑制和杀伤作用;42℃热疗与药物以不同序贯方式联合,抑制作用均强于单纯化疗组和单纯热疗组(P<0.05),尤以热化疗同时作用组效果最佳(P<0.001);细胞周期分析发现42℃热疗降低了S期细胞所占比例;单独顺铂使细胞周期阻滞于S期;与单纯化疗组相比,先化疗后热疗组、先热疗后化疗组和热化疗同时组的S期细胞所占比例减少,G2/M期细胞增多,其中热化疗同时组增减的幅度最大。结论42℃温热可以明显增强化疗药顺铂的毒性,结合方式上以热化疗同时进行最佳,其作用机制可能与干扰细胞周期有关。     

维生素D3对黑色素瘤细胞株生长及凋亡的影响

目的研究维生素D3对黑色素瘤细胞株A375生长及凋亡的影响.方法采用四唑氮蓝比色(MTT)法检测细胞增殖,光镜观察细胞形态,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率,末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位酶标记(TUNEL)法计数凋亡细胞.结果10-7mol/L的1.25(OH)2D3可以抑制A375增生,改变细胞周期时相分布,致G0/G1期阻滞,加强细胞毒性化疗药物紫杉醇的作用,促进细胞凋亡.结论维生素D3可以作为细胞凋亡诱导剂,成为新一种黑色素肿瘤治疗药物.     

全反维甲酸对人肺癌细胞株A549细胞间黏附分子-1表达及体外侵袭力的影响

细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)的表达在肿瘤的诊断、判断病程进展、转移潜能与预后方面有很大的潜在价值,受到众多学者关注.ICAM-1高表达的肿瘤细胞可能更易于脱离瘤体,随淋巴细胞游走而发生转移[1].流行病学、动物实验及临床研究均已证实全反式维甲酸(ATRA)类可用于肺癌的化学预防及治疗[2].我们研究了ATRA对肺癌细胞株A549体外增殖、侵袭力及ICAM-1、sI-CAM-1表达水平的影响,旨在阐明ATRA对肿瘤转移潜能的影响及ICAM-1分子在肿瘤侵袭中的作用,探讨ATRA对肿瘤的化学防治作用的可能机制.     

康莱特对晚期大肠癌患者NK细胞活性,sIL—2R,TNF—α影响的研究

临床上对晚期恶性肿瘤采取化疗手段,以期能阻止或减缓病情的进展,但多数抗癌药在杀伤肿瘤细胞的同时,往往对正常组织细胞产生毒性作用。康莱特（ＫＬＴ）注射乳剂是用现代科技方法从中药薏苡仁中提取的有效成分。本研究应用ＫＬＴ对２５例晚期结肠癌患者进行治疗观察,探索该治疗对晚期结肠癌患者ＮＫ细胞活性及血清ｓＩＬ２Ｒ、ＴＮＦα的影响。１　材料与方法１．１　材料１．１．１　临床资料　２５例晚期大肠癌患者（ＤｕｋｅｓＤ期,均病理证实）,男性１６例,女性９例。年龄４２～６８岁,平均５３．４岁,按中国常见恶性肿瘤…     

1α,25-二羟基维生素D3对人卵巢癌细胞株表皮生长因子受体的调节

目的:研究1α,25-二羟基维生素D3(1,25VD3)对人卵巢癌细胞株表皮生长因子受体(EGFR)表达的调节作用.方法:用1,25VD3 或其类似物EB1089处理人卵巢癌细胞株OVCAR3、2008和CAOV3,应用Western blot、Northern Blot和mRNA稳定性分析等方法检测EGFR表达的变化.结果:1,25VD3或EB1089作用后三种人卵巢癌细胞中EGFR的蛋白和mRNA表达水平均下降.用1,25VD3 和放线菌素D、RNA酶抑制剂处理OVCAR3细胞后,Northern blotting分析结果显示,1,25VD3 作用4h后没有改变EGFR mRNA的半衰期.结论:1,25VD3在mRNA转录水平下调人卵巢癌细胞株EGFR的表达.     

1α，25-二羟基维生素D3对人卵巢癌细胞株表皮生长因子受体的调节

目的：研究1α,25-二羟基维生素D3（1,25VD3）对人卵巢癌细胞株表皮生长因子受体（EGFR）表达的调节作用。方法：用1,25VD3或其类似物EB1089处理人卵巢癌细胞株OVCAK3、2008和CAOV3,应用Westernblot、NorthernBlot和mRNA稳定性分析等方法检测EGFR表达的变化。结果：1,25VD3或EB1089作用后三种人卵巢癌细胞中EGFR的蛋白和mRNA表达水平均下降。用1,25VD3和放线菌素D、RNA酶抑制剂处理OVCAR3细胞后,Northernblotting分析结果显示,1,25VD3作用4h后没有改变EGFRmRNA的半衰期。结论：1,25VD3在mRNA转录水平下调人卵巢癌细胞株EGFR的表达。     

中药木回春对QGY—7703人肝癌细胞DNA合成的影响

目的 中药木回春体外抗肝癌作用研究。方法 采用~3H—TdR掺入法检测木回春对QGY—7703人肝癌细胞DNA合成的影响。结果 实验组QGY—7703细胞DNA合成量较对照组皆有明显减少,差异显著(P<0.001)。且DNA合成量随药物浓度增加呈减少趋势,ED_(50)浓度为270.968μg/ml。结论 木回春可能成为治疗肝癌的理想药物。