缺血后适应对大鼠肾脏急性热缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的 探讨缺血后适应对大鼠急性肾缺血再灌注损伤(isclaemic reperfusion injury,IRI)所导致的细胞凋亡的影响.方法 将40只Wistar健康雄性大鼠随机分为对照组(C组)、缺血再灌注组(IRI组)、缺血后适应组(IPo组)和腺苷组(Ado组)4组,C组仅行右肾切除,左肾蒂游离,其他3组除切除右肾外,IRI组为大鼠肾脏急性热缺血再灌注损伤模型,IPo组于再灌注之前行6个10 s无限制灌注 10 s再缺血循环,Ado组于缺血前10 min经静脉给予腺苷.分别采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)、流式细胞术及肾组织病理形态学的方法观察细胞凋亡.结果 ,与C组相比,IRI组细胞凋亡数显著增加(P＜0.05);与IRI组相比,IPo组和Ado组细胞凋亡数显著减少(P<0.05),而二者之间差异无统计学意义,结论 缺血后适应可以减少缺血再灌注引起的大鼠肾脏细胞凋亡.再灌注损伤;细胞凋亡     

MG132对移植肝缺血再灌注损伤急性期的保护作用

目的 探讨蛋白酶体抑制剂MG132对大鼠移植肝缺血再灌注损伤急性期的保护作用.方法 建立大鼠自体原位肝移植缺血再灌注损伤模型,经60 min冷缺血和恢复血流灌注90 min后,检测血清ALT、AST浓度和SOD、MDA的活性,并观察大鼠肝脏病理切片.结果 IRI+MG132组大鼠血清AIT、AST水平明显较IRI组大鼠下降(P<0.05),在MG132作用下,大鼠血清SOD活性升高,而MDA产生减少(P<0.05).这些差异也可以从IRI+MG132组相对于IPI组Suzuki评分的改善得到证实.结论 MG132能够通过清除自由基和抑制脂质过氧化,保护大鼠移植肝急性期的缺血再灌注损伤.     

热缺血损伤大鼠肾脏中中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白的表达及意义

目的 建立大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型,测定肾组织中中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白(NGAL)的表达情况,探讨其在反映肾脏热缺血损伤程度方面的应用价值.方法 建立大鼠肾脏的缺血再灌注损伤模型,根据热缺血时间将大鼠分为对照组(热缺血0 min组)、热缺血15 min、30 min、45 min和60 min组.再灌注8h后,HE染色观察肾脏病理学变化,免疫组化检测肾组织NGAL的表达,免疫印迹法检测胞质中NGAL的含量,下腔静脉抽血并测定血清肌酐(Cr)含量.结果 随着热缺血时间的延长,肾小管肿胀坏死程度加重,肾组织NGAL表达增强,血清Cr增高.对照组、热缺血15 min组和30 min组肾组织NGAL的表达有统计学差异.结论 与Cr相比,肾组织NGAL可更敏感、准确地反映热缺血30 min内大鼠肾功能情况,联合病理学检查则可更好的反映热缺血损伤对肾脏功能的影响程度.     

丹参注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤肾功能的影响

目的 探讨丹参注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤时肾功能的影响.方法 取24 只Wistar 雄性大鼠随机分成丹参注射液组、缺血再灌组和假手术组.丹参注射液组注射丹参注射液(1g/kg)、缺血再灌组与假手术组均注射等量生理盐水,建立肾缺血再灌注损伤(IRI)模型.结扎右肾动脉,用无创动脉夹夹闭左肾动脉缺血45min,于缺血30min后给药或生理盐水,再灌注后6 h采血测血清中尿素氮(BUN)和肌酐(CREA)含量.结果 缺血再灌注6 h后,与假手术组比较,缺血再灌组BUN、CREA均显著升高(P<0.01);与缺血再灌注组比较,丹参注射液组BUN、CREA均降低(P<0.05).结论 丹参注射液对肾脏缺血再灌注损伤的肾功能有保护作用.     

MSS4在缺血再灌注损伤大鼠肾脏中的表达及作用

目的 探索MSS4在缺血再灌注损伤(IRI)大鼠肾脏中的表达情况,以及在缺氧/复氧大鼠肾小管上皮细胞中的作用.方法 雄性成年SD大鼠分为假手术组和IRI组,分别予以假手术和肾脏缺血再灌注处理(双侧肾蒂夹闭45 min后再灌注),分别于术后0、12、24、48、72 h收集血液及肾组织标本.自动分析法检测各组大鼠血尿素氮...     

乌司他丁对缺血-再灌注大鼠肾脏ICAM-1表达的影响

目的 探讨大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)中,细胞间粘附分子-1(ICAM-1在不同时间点的表达以及乌司他丁(UTI)对IRI大鼠肾脏ICAM-1表达的影响.结合肌酐(Cre)水平、肾组织病理变化,从组织到分子水平初步探讨ICAM-1在肾IRI中所起的作用,以及UTI对大鼠肾脏IRI的作用及机制,为临床防治移植肾脏IRI提供新思路.方法 建立大鼠缺血再灌注模型,按照处理因素不同随机分为4组(C、I、I U、U),每组再灌注时间不同又分为3个时间点(2、6、12h),每时间点取5只大鼠实验.实验按照设定的时间点取左,肾,采血.结果 I U组与I组比较肾功能、ICAM-1、肾组织病理损伤明显减少(P<0.05),但两组与U组和C组比较上述各指标均明显升高(P<0.05).U组与C组比较,上述各指标无显著差异(P>0.05).结论 (1在大鼠IRI模型中,ICAM-1表达随再灌注时间延长而增强,病理损伤加重,肾小管损伤评分升高,肾功能也随之下降,证实了ICAM-1在肾缺血再灌注损伤的发生发展中起到了重要作用;(2UTI可显著抑制IRI后各个阶段ICAM-1表达的升高,对IRI肾有保护作用.     

大鼠肾缺血再灌注损伤后p38丝裂原活化蛋白激酶的活化及氧自由基清除剂对其的影响

目的:观察肾缺血再灌注损伤后p38活化的情况,并探讨应用氧自由基清除剂tempol后对其的影响.方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组(n-10)、缺血再灌注损伤组(IRI,n=45)和tempol预处理组(n=10).IRI组采用右侧肾摘除左肾蒂夹闭50 min后松开制备缺血再灌注模型,分别干再灌注0、5、10、15、30、45 min及1、2 h处死动物取肾组织,Western印迹法观察p38活化情况.Tempol处理组动物同样制备缺血再灌注模型,术前1 h尾静脉注射tempol(100 mg/kg),再灌注45 min取肾组织;假手术组行右侧肾摘除但不夹闭左肾蒂,术后45 rain取肾组织.Western印迹法观察3组p38活化情况,分析肾组织丙二醛(MDA)含量,ELlSA法检测肾组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1p(IL-1β)的含量.结果:大鼠肾组织磷酸化p38含量在再灌注早期(5 min)开始升高,45 min达到高峰,再灌注2 h仍较高(P＜0.05).与假手术组相比,IRI和tempol预处理组磷酸化p38含量明显升高(0.103±0.008 vs 2.025±0.136 vs 0.833±0.191,P＜0.05),且tempol预处理组低于IRI组(P＜0.05).3组间肾组织MDA、TNF-α、IL-1β的含量检测结果与磷酸化p38结果类似(P0.05).结论:氧自由基介导的p38磷酸化在缺血再灌注引起的大鼠肾脏炎症性损害中具有重要作用;应用tempol可以抑制p38磷酸化,防治缺血再灌注损伤.     

大鼠急性肾脏缺血再灌注后处理动物模型的建立

目的:建立肾脏缺血后处理动物模型. 方法:将40只SD大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组(IR组)和3个缺血后处理组(IPO1,IPO2,IPO3组),分别制作动物模型. IR组在同时夹闭双侧肾动脉45 min后恢复血供,IPO1,IPO2和IPO3组在肾缺血45 min后分别采用不同的后处理方法,其中IPO3组采用反复10次再灌注20 s-缺血20 s的后处理方法. 恢复血供24 h后留取各组大鼠静脉血标本及肾组织,检测肾功能指标,光镜下观察肾组织形态学变化并对肾小管损伤程度进行评分. 结果:IPO3组血尿素氮为(27.9±3.2) mmol/L,血肌酐为(232±49) μmol/L,肾小管损伤程度评分为382±48. 和IR组相比,IPO3组的血尿素氮、血肌酐及肾小管损伤程度评分均明显降低(P＜0.01),肾组织损伤明显减轻,其余两个缺血后处理组与IR组相比差异无统计学意义(P＞0.05). 结论:在急性肾脏缺血后,采用IPO3组的方法可以减轻急性肾脏缺血再灌注损伤,从而成功建立大鼠急性肾脏IRI的后处理动物模型.     

臭氧联合缺血后处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨臭氧后处理联合缺血后处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的影响。方法:随机将50只SD大鼠分为假手术组、IRI组、缺血后处理组、臭氧后处理和缺血后处理+臭氧后处理组,每组10只。所有大鼠均在麻醉后打开腹壁,切除右肾,然后进行如下实验:(1)假手术组:切除右肾后缝合腹壁;(2)IRI组:用无创伤血管夹夹闭左肾动、静脉45min进行缺血后打开血管夹再灌注24h;缺血后处理组:手术步骤与缺血再灌注组相同,但在缺血后、再灌注之前,对肾动静脉进行开放10s、夹闭10s的6个循环后,再灌注24h。臭氧后处理组:手术步骤与缺血再灌注组相同,但在术后10d内,每天对该组大鼠经直肠吹入氧气和臭氧的混合气体2.5-3.0ml[臭氧浓度为50mg/L,0.5mg/(kg·d)]。缺血后处理+臭氧后处理组:手术步骤与缺血再灌注组相同,但在缺血后、再灌注之前,先进行缺血后处理,然后进行臭氧后处理。比较各组大鼠血清肌酐和尿素氮水平,观察大鼠肾组织的病理改变和细胞凋亡情况,免疫组化检测各组大鼠PARP-1表达,PCR检测各组大鼠炎性因子的水平。结果:与缺血再灌注组,缺血后处理组和臭氧后处理组血清尿素氮、肌酐水平均显著降低,而缺血后处理联合臭氧后处理可以明显改善缺血再灌注损伤后的肾功能水平。缺血再灌注损伤可以诱导细胞凋亡和炎性因子水平,而与缺血后处理、臭氧后处理组相比,其联合应用可以明显抑制炎性因子表达和细胞凋亡。结论:臭氧后处理和缺血后处理均可减轻肾脏缺血再灌注损伤后的炎性反应和细胞凋亡,其联合应用对肾脏缺血再灌注损伤的保护效果更佳。     

缺血后处理对大鼠肾缺血/再灌注损伤及p38MAPK活性的影响

目的研究缺血后处理(IPO)对大鼠肾缺血/再灌注损伤(IRI)及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)活性的影响。方法将24只SD大鼠依据随机数字表法分为3组,各8只。对照(S)组:仅结扎右侧肾蒂,左肾蒂游离;缺血/再灌注(IR)组:结扎右侧肾蒂,夹闭左侧肾蒂60 min后,开放灌注24 h;IPO组:肾脏缺血60 min后,进行10 s灌注、10 s阻断,共6个循环的IPO,然后开放灌注24 h,余同IR组。检测血尿素氮(BUN)、肌酐,酶联免疫吸附试验法检测肾组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)水平,Western blot法检测肾组织磷酸化p38MAPK蛋白表达,观察肾组织的病理学变化。结果与S组比较,IR组和IPO组血BUN、肌酐,肾TNF-α、IL-1、p38MAPK蛋白表达量及组织病理评分显著增加(P<0.05);IPO组各指标较IR组显著下降(P<0.05)。结论 IPO能减轻肾IRI,其机制与抑制p38MAPK活化,进而抑制炎性因子释放有关。     

抗精子抗体和抗子宫内膜抗体与不孕及流产的关系

目的　探讨抗精子抗体（ＡｓＡｂ）与抗子宫内膜抗体（ＥＭＡｂ）在不孕、流产中的作用及二者关系,进一步 揭示不孕、流产的病因。方法　采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）同时检测３４５例不孕、流产妇女血清中的ＡｓＡｂ与 ＥＭＡｂ,按ＡｓＡｂ检测结果分阳性组和阴性组,比较两组ＥＭＡｂ阳性率的差异。结果　原发不孕及自然流产妇女中, ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率高达１６．６７％和１９．５１％,而ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率高达４３．６４％和４２．８６％,显著高于 ＡｓＡｂ（－）组（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）。继发不孕妇女中ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率为１８．１８％,ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率 为３２．２％,二者无显著性差异（０．０１＞Ｐ＞０．０５）。结论原发不孕及自然流产妇女中因个体免疫反应差异使某些 人易对体内、外物质发生免疫反应而产生抗体,从而导致不孕或流产。     

亚硝基脲类和亚硝基硫脲类的理化性质及致突变能力

本题选择N,N′-二甲基亚硝基脲(DMNU),N,N′-二乙基亚硝基脲(DENU),及其类似物N,N′-二甲基亚硝基硫脲(DMNTU)、N,N′-二乙基亚硝基硫脲(DENTU)为代表,测定了这些化合物的水解反应速度、脂溶性(HPLC的logk′值)、水解产物和致突变能力。证明了硫脲的脂溶性大于脲的脂溶性。DMNTU对TA100菌株的致突变能力最强,其它较弱。     

气血与足月妊娠分娩关系的探讨

论述足月妊娠分娩的发动和维持依靠气的推动、温煦、气化、固摄功能和血的营养、濡润功能。顺利分娩既要气血充足，还要气顺血和。临床研究结果表明调补气血，是促进产程，预防难产的重要手段。实验研究结果阐明调补气血中药加强产力、促进产程主要是从改善产妇全身情况，提高机体抗应激、抗疲劳、耐缺氧能力，即所谓使产妇气血充足调和，充分发挥气血在分娩过程中的生理作用。     

水疗联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响

目的探讨新生儿游泳联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响。方法将经阴道顺产分娩的正常新生儿100例随机分为两组，观察组（水疗联合抚触组）50例，对照组（单纯沫浴组）50例。①测定两组10日、28日的体重、身长、上臂围；②观察记录胎便转黄时间，测定皿清胆红素；③记录24h睡眠时间。结果两组新生儿10日、28日体重、身长、上臂同增长有显著差异（P〈0．05），两组新生儿5日时，胎便转黄时间及黄疸指数比较均有显著性差异（P〈0．01），两组睡眠时间比较有统计学意义（P〈0．05），两组并发症比较无统计学意义（P〉0．05）。结论新生儿水疗联合抚触可促进新生儿的生长发育，能加速胎粪的早排出，减轻生理性黄疸程度，有效地降低新生儿高胆红素血症的发病率，提高睡眠质量。