双波长测定法波长选择的探讨

近年来由于全自动生化分析仪的迅速发展使测定方法日益增多。双波长测定法由于它可以有效地消除干扰物质的影响往往被采用．作为检验人员如何选择好波长至关重要，下面就如何选择双波长谈谈自己的看法．1仪器紫外一可见分光光度计‘2在测定混合物时，如果混合物为a、b两个组分，首先用紫外一可见分光光度计分别测定a、b两种在纯品时与反应试剂成包后的吸收光谱，并分别给出它们的吸光度与波长（A－A）曲线。然后再倒出混合物忆十b）与反应试剂成色的吸收光谱，并绘出吸光度与波长（A一U曲线，见图是。3计算混合物（8＋b）在Al的Al广一A！…     

全自动生化分析仪理论K值的检查和校正

本文介绍一种在已糖激酶法测定葡萄糖的反应体系中，加入已知摩尔浓度的葡萄糖标准液，测定反应最终产物之一，ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ＋Ｈ＋在３４０ｎｍ的摩尔吸光系数来检查和校正ＴｅｃｈｎｉｃｏｎＲＡ－１０００或ＩＬＭｏｎａｒｃｈ－２０００全自动生化分析仪在３４０ｎｍ波长理论Ｋ值的方法。实验测得ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ＋Ｈ＋在ＲＡ－１０００和Ｍｏｎａｒｃｈ－２０００３４０ｎｍ波长的摩尔吸光系数分别为６．１９６６×１０３和６．２０８２×１０３。实际Ｋ值和理论Ｋ值之间的误差分别为０．３８％和０．１９％，均可忽略不计，无需校正。     

血红蛋白和胆红素干扰临床化学分析的机理初探

目的　探讨溶血和黄疸对临床化学分析方法的干扰机制。方法　用紫外 可见分光光度计和全自动生化分析仪观察血红蛋白和胆红素的光谱学行为 ;用NCCLSEP7 P方案评价血红蛋白和胆红素的干扰情况。结果　血红蛋白和胆红素自身在溶液中发生吸光特性的改变 ,双波长不能校正二者所造成的干扰。血红蛋白的光谱学干扰方向与EP7 P结果一致 ,可用血清平行空白校正 ;而胆红素的光谱学干扰方向与EP7 P结果不一致 ,并且不能用平行血清空白校正。结论　血红蛋白和胆红素对临床化学的干扰有不同机制 ,临床生化分析除了正确选择纠正方案外 ,有必要报告血清指数以指导临床医生正确诊断     

血红蛋白和胆红素干扰临床化学分析的机理初探

目的 探讨溶血和黄疸对临床化学分析方法的干扰机制。方法 用紫外-可见分光光度计和全自动生化分析仪观察血红蛋白和胆红素的光谱学行为；用NCCLS EP7-P方案评价血红蛋白和胆红素的干扰情况。结果 血红蛋白和胆红素自身在溶液中发生吸光特性的改变，双波长不能校正二者所造成的干扰。血红蛋白的光谱学干扰方向与EP7-P结果一致，可用血清平行空白校正；而胆红素的光谱学干扰方向与EPT-P结果不一致，并且不能用平行血清空白校正。结论 血红蛋白和胆红素对临床化学的干扰有不同机制，临床生化分析除了正确选择纠正方案外，有必要报告血清指数以指导临床医生正确诊断。     

影响动态零值的因素

动态零值实际上是检测试剂每分钟吸光度的改变量(试剂 A)与计算因数 ( F )的乘积。它是影响酶活性测定的因素之一。笔者对影响动态零值的各种因素予以探讨。1　影响动态零值的各种因素1 .1　试剂盒厂家不同　不同厂家的酶试剂盒 ,测得的动态零值不同。有时同一厂家、不同批号的试剂盒 ,测得的动态零值也不同。各实验室尽量使用同一厂家的酶试剂盒 ,即使更换批号也应做动态零值的测定 ,以便了解试剂盒的质量。1 .2　仪器不同　不同的仪器 ,测得的动态零值不同。这是由于生化分析仪本身比色杯光径和分析波长有偏差 ,以及加量系统和时间控制…     

OLYMPUS AU 640全自动生化分析仪理论K值的检查与校正

介绍用己糖激酶法测定葡萄糖标准溶液校正仪器的理论K值和用NADH直接校正仪器的理论K值的二种方法实验测得NAD(P)H在OLYMOPUSAU640上的摩尔吸光系数,单波长测定λ340nm为5.81×10     

两种国产试剂检测谷氨酰转肽酶结果的可比性研究

目的探讨两种不同国产谷氨酰转肽酶(GGT)试剂在同一仪器中检测相同标本,各测定结果间的可比性。方法依据EP9-A2文件要求,每天选取8例不同浓度水平的血清标本,分别用宁波美康和北京利德曼两种试剂在日立7080生化分析仪上进行GGT测定,连续测定5d,记录检测结果,将结果进行统计学分析。结果两种试剂对GGT测定结果的偏倚在允许误差范围内,两者结果具有可比性。结论在实验室用两种以上试剂检测同一项目时或者一种试剂替代另外一种试剂时,应用EP9-A2文件进行方法学比对和偏倚分析,以保证检验结果的可比性。     

开放生化检测系统校准限值的设置与应用

目的研究开放生化检测系统项目校准限值的设置,实现对开放生化检测系统检测过程的监控。方法分别测定水空白和校准品,获取各项目试剂空白及校准品校准限值初始值;回顾性分析过去12个月的校准结果,对所设校准限值进行修正和优化,同时分析相同项目校准限值在不同仪器间的差异。结果限值可用于对校准测得的吸光度批内、批间精密度,试剂空白和校准因子最大、最小值进行监控。30个项目中,校准因子最大允许相对偏差范围为2.12%~30.60%,29项小于18.00%、27项小于15.00%、10项小于5.00%。两台仪器共同测定的26个项目中,试剂空白吸光度、校准品吸光度和校准因子P值小于0.05的分别为19项(73.00%)、21项(81.00%)和22项(85.00%),证实两台仪器校准结果差异有统计学意义(P0.05)。结论通过在开放生化检测系统设置校准限值,实现对校准过程监控,减少由校准引入系统误差,进而监测整个分析检测系统。不同项目校准限值存在差异,应当根据试剂和分析仪器特点进行个性化设置、优化;同一项目校准限值在不同仪器亦存在差异,在进行设定应用时应当兼顾。     

纯水质量在AU2700生化仪上对谷丙转氨酶试剂空白的影响

目的 对纯水的导电率进行监测,通过在AU2700生化仪上测定谷丙转氨酶(ALT)试剂空白,来了解不同导电率的纯水对ALT试剂空白影响.方法 监测浙江杭州永洁达公司的超纯水机制备的纯水,分别采用不同的导电率下的纯水测定ALT试剂空白,将结果进行统计分析.结果 使用导电率0～80 US·cm-1范围的纯水,ALT试剂空白吸光度1.520 4～1.531 2,符合使用说明试剂的性能指标.结论 实验纯水的质量也是影响检验结果准确性和精密性的一个关键因素,同时也是保证仪器正常运行的一个因素,在导电率0～80 US·cm-1范围的纯水不影响ALT试剂空白吸光度.     

721分光光度计波长简易校正法

实验表明.镨钕玻璃在只改变单色光波长非空白调零(在721分光光度计上还可通过转动波长调节螺杆来实现)的条件下,529nm 处有一较尖锐的特征性吸收峰,同样可作为波长校正的依据。据此,建立了该波长校正法。1 方法1.1 用待校正的721分光光度计(下称光度计),蒸馏水调零,测试出镨钕玻璃529nm 吸收峰(下称镨峰)具     

一种快速、灵敏的蛋白浓度测定法——蛋白—染料结合法

以往的一些测定蛋白浓度的方法,存在着各种不同的缺陷,有的方法简便、快速,灵敏度却不高,有的方法灵敏度较高,却又太繁琐,而且抗干扰性都不强。一九七六年以来,人们开发了一种新的蛋白浓度测定法,即蛋白一染料结合法,也叫 Brandford 方法,是由 Marion.M.Brandford 最先介绍的,其原理是基于考马氏亮兰—G250与蛋白结合,其最大吸收波长由465nm 移至595nm,这样,通过测定反应后溶液在595nm 光吸收的增加,便可通过吸光系     

ALT速率法试剂校正半自动生化分析仪F值

半自动生化分析仪F值的校正,国内学者多利用己糖激酶试剂在反应体系中加入已知摩尔浓度葡萄糖标准液,测被检测物NADH H~ 在340nm的摩尔吸光系数来检查仪器在340nm下的理论F值。我们在ALT速率法试剂中加入已知摩尔浓度的丙酮酸,通过检测反应平衡后吸光度的变化来校正仪器的F值,结果令人满意,现报告如下。     

γ-GT试剂在四种反应温度中的试剂空白速率

我们发现γ－ＧＴ试剂的空白速率冬季高于夏季，且同一试剂在不同仪器中有明显差别，遂对γ－ＧＴ试剂在不同反应温度中的试剂空白速率作了一组试验。现报告如下。１材料和方法１．１仪器和试剂ＣＯｂａｓＦＡＲＡ离心式自动分析仪。γ－ＧＴ测定试剂盒（底物为Ｌ－γ－谷...     

血清铁自主研发生化诊断试剂的临床研究

目的进行自主研发的中生北控生物科技公司(中生)血清铁(Fe)生化诊断试剂的临床研究。方法以中生血清Fe生化诊断试剂为受试试剂(Y),进口德国Roche诊断试剂为对照试剂(X);受试试剂(Y)的自身性能评价包括空白吸光度、重复性和线性检测;并对2种试剂进行比对试验和偏倚评估。结果受试试剂(X)的空白吸光度、重复性和线性检测符合要求,且与对照试剂(Y)具有良好的相关性。结论自主研发Fe生化诊断试剂自身性能良好,安全性和有效性符合临床应用要求。     

简要快讯

淀粉与一种双功能试剂交联作为可淀性色原底物,反应产物吸收峰在近红外区(800～900nm)此处大多数有色物质都不干扰测定。     

不同进口试剂在罗氏检测系统上检测结果的可比性分析及偏倚评估

同一仪器使用不同试剂的现象在国内较为普遍，对不同试剂系统检测结果的可比性评估就显得非常重要。罗氏试剂和德赛试剂均为进口试剂，两种试剂在罗氏系统上检测结果按照美国临床和实验室标准协会（CLSI）指南文件EP9的要求进行比对及偏倚评估。     

血清总蛋白测定不同双缩脲试剂及标准化评价

在１２家医院考察了国内三种高ＮａＯＨ浓度的双缩脲试剂的应用效果。用这些双缩脲试剂测定的血清总蛋白结果偏高，精密度不如Ｄｏｕｍａｓ配方。用Ｄｏｕｍａｓ双缩脲试剂测得蛋白原始标准（ＳＲＭ９２７ａ）和二份蛋白次级标准的吸光系数均为０．２９８２±０．００１６Ｌｇ￣（－１）（５４０ｎｍ），２５Ｃ时呈色曲线在６０分钟达到平衡。用吸光系数法测定三份定值冻干质控血清的总蛋白值，均较厂方标定值略高。表明有必要统一双缩脲试剂配方和方法，吸光系数法可作为蛋白次级标准的定标方法。     

3种不同试剂对凝血酶原时间的影响

目的 了解不同试剂对凝血酶原时间(PT)测定值的影响.方法 采用ACL-100全自动血凝仪用3种不同试剂对同一样品分别检测38次,测得PT值,报告秒数和国际标准化比率.结果 不同试剂测得的PT值,其次数和标准差存在差异.结论 由于不同试剂的国际敏感指数不同,导致对同一样品测得的PT值亦不同,存在不同程度的差异.     

EP9-A2文件在评价两种碱性磷酸酶试剂中的应用

目的 应用美国临床和实验室标准研究所（CLSI）EP9-A2评价文件对两种碱性磷酸酶（ALP）试剂进行方法学比对分析,探讨两种试剂测定ALP是否具有可比性.方法 依据EP9-A2文件要求,每天随机从临床样本中抽取8份不同浓度水平的血清样本,分别用两种试剂进行ALP测定,共测定5天,记录检测结果,将结果进行相关回归分析.根据直线方程计算在某医学决定水平处的预期偏倚（BAK^C）和预期偏倚的95%可信区间,并判断偏倚是否可以接受.结果 不同试剂对ALP测定结果的偏倚在允许误差范围内,两者结果具有可比性.结论 在实验室用两种以上试剂检测同一项目时,可参照EP9-A2文件进行方法学比对和偏倚分析,判断其临床可接受性能,以保证实验室检测结果的准确性和可比性.     

克服肌酐速率法中高胆红素的干扰

以碱性苦味酸速率法对血清中肌酐测定时,血清中胆红素在碱性条件下被破坏,使原有黄色逐渐消退,造成吸光度下降。在高胆红素时,会明显影响肌酐反应吸光度上升速率,导致检测结果偏低。为此作者在BeckmanSynchronCX△5仪器上,简单地将原来的单试剂反应改成双试剂二步法。即先使血清样品先和Beckman组合试剂中的A碱性溶液混合,反应3分钟,使样品内的胆红素破坏,测定空白读数,并再加入苦味酸,使肌酐反应,检测其反应速率。此时的反应速率直接和血清中的肌酐呈良好比例关系。实验说明,改进后的速率法肌酐线性可达1768μmol/L。改进前受干扰的方法…