抗真菌药物的研究Ⅱ．C－端含氧代赖氨酸二肽的合成及抗白念珠菌活性

引用违法传递概念设计合成了１１个Ｃ－末端含氧代赖氨酸二肽，进行抗深部致病菌－白念珠菌活性试验，体外实验结果显示极强的抑菌活性，ＭＩＣ在１２．５～０．８μｇ／ｄｉｓｋ之间，较母体氧化赖氨酸大５０～１３５倍（克分子比）。     

5%L—赖氨酸糖浆的配制

L-赖氨酸为人体必需氨基酸之一,体内赖氨酸供给不足,会引起食欲不振、体重减轻、贫血、以及降低体内各种酶的活性,从而出现生理机能的各种疾病。由于人体内不能合成L-赖氨酸,必须从体外摄取,儿童的需要量还比成人大得多,所以儿     

贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸抗疱疹病毒复方筛选

目的 :评价贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸复方抗疱疹病毒活性 ,有效复方在整体动物的安全性。方法 :(1 )采用细胞病变效应法 (CPE) ,测定贯叶连翘提取物与盐酸赖氨酸 3种复方 (分别以质量比 1∶1、1∶ 2和 2∶ 1配比 )对Vero细胞和 2BS细胞的细胞毒性 ,以及对单纯疱疹病毒I型 (HSV 1 )和水痘 带状疱疹病毒 (VZV)的抗病毒活性。 (2 )一次灌胃(ig)给予小鼠复方 (2∶ 1 ) ,观察 1 4d ,测定LD5 0 。结果 :贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸 3种复方体外对HSV 1和VZV表现不同程度的抗病毒活性 ,最小有效浓度(MIC)和半数有效浓度 (IC5 0 )范围分别为 9.7～1 9.5mg·L- 1和 6 .8～ 9.7mg·L- 1,测得复方 (2∶1 )单次小鼠ig的LD5 0 为 1 1 .7g·kg- 1,95 %置信区间为 6 .5～ 1 7.2g·kg- 1。结论 :贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸复方体外具有较好抗HSV I和VZV作用 ,2∶ 1复方属于无毒药物范围     

高效液相色谱法测定盐酸赖氨酸葡萄糖注射液的含量

目的:建立盐酸赖氨酸葡萄糖注射液中盐酸赖氨酸与葡萄糖含量的测定方法.方法:两点校正内标测定法.结果:盐酸赖氨酸在3.6～8.4 mg/mL、葡萄糖在6.0～14.0 mg/mL范围内分别同其相对内标的响应因子呈良好线性关系,精密度良好.结论:盐酸赖氨酸葡萄糖注射液定量稀释后可用两点校正内标法测盐酸赖氨酸与葡萄糖的含量.     

赖氨酸的生物学效应

赖氨酸是人体八种必需氨基酸之一,不仅维持人体氮平衡,而且具有重要的保健和营养价值。儿童发育时期、患病后恢复期和妊娠哺乳期,机体对赖氨酸的需求更高,故此人们常把赖氨酸视为营养价值的重要指标之一。赖氨酸每天最低需要量;成年男子约8.8mg/kg,成年女子3.3mg/kg,儿童9.0mg/kg。人体缺乏赖氨酸会引起发育不良,食欲不振、体重减轻、氮平衡不足,低蛋白血症,牙齿发育不良,贫血,酶的活性下降及其它生理机能障碍。近年来研究证明:赖氨酸在降低细胞膜通透性、低温保护、肝功能保护和生殖功能等方     

阿司匹林赖氨酸盐药物前体的研制

据文献报道阿司匹林氨基酸盐类具有比纯阿司匹林强的药理活性,且为水溶性,可供注射用。其制品国内已有阿司匹林精氨酸盐粉针剂出售,而对于阿司匹林赖氨酸盐的研制国内尚未见报道。笔者探讨了阿司匹林赖氨酸盐的制法,并对其理化性质     

含L-4-氧代赖氨酸寡肽的合成及其抗白念珠菌活性

本文运用“违法传送”概念,根据白念珠菌对寡肽的传送特点,设计并合成了十个含L-4-氧代赖氨酸(以下称I-677)的寡肽,以提高I-677的抗白念珠菌活性。体外抗白念珠菌试验表明:I-677-肽(I-677-X₁,I-677-X₁-X₂和I-677-X₁-X₂-Gly,其中X₁,X₂=Met,Leu,Ile,Ala,β-Ala,Gly)较I-677单体摩尔活性提高了2.1～28倍,其摩尔最低抑菌浓度为8.7×10^-8～9.3×10^-9mol/ml,传送肽和赖氨酸分别逆转I-677-肽抗菌活性的实验结果证实了I-677的“违法传送”途径。     

HPLC—ELSD法测定盐酸赖氨酸葡萄糖注射液的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定盐酸赖氨酸葡萄糖注射液中盐酸赖氨酸及葡萄糖含量。方法:采用 Covasil-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.05 mol·L~(-1)醋酸铵-甲醇-乙腈(1:1:1)为流动相,流速为0.5 mL·min~(-1)。蒸发光散射检测器(ELSD),漂移管温度为40℃,空气流速为1.5 L·min~(-1)。结果:在选定色谱条件下,盐酸赖氨酸、葡萄糖分别在0.3～0.65 g·L~(-1)(r=0.9997),1.5～3.15 g·L~(-1)(r=0.9994)范围内呈良好的线性关系,回收率分别为98.6%～100.3%,97.8%～99.5%。结论:本法简便,专属性好,可用于盐酸赖氨酸葡萄糖注射液中盐酸赖氨酸及葡萄糖含量检测。     

赖氨酸对蟾蜍卵母细胞膜电位的影响及其作用机理

用1mM浓度赖氨酸孵育16～24h后,蟾蜍卵母细胞膜电位显著去极化。同一条件下赖氨酸也能使膜对K~+、Na~+和Cl~-的通透性降低,卵母细胞孕酮含量明显增高与印母细胞成熟。赖氨酸这种去极化作用可因去除胞外游离Ca~(++)或应用1mM浓度的二丁酰cAMP而消失。而F~-的超极化作用并不受赖氨酸影响。这些实验结果提示,赖氨酸可能通过诱导卵母细胞成熟来使膜电位去极化;其作用机理与孕酮相似,但似乎不完全通过孕酮发挥作用。     

LRP6受体胞内区赖氨酸位点突变和经典Wnt信号通路相关性分析

目的:探讨LRP6受体胞内区赖氨酸位点突变对经典Wnt信号通路影响。方法:构建胞内区3个赖氨酸位点(K8R、K48R及K82R)同时突变的突变型LRP6受体,瞬时转染HEK293细胞,运用荧光素酶报告基因技术分析其对β-catenin/TCF转录活性影响;同时运用谷胱甘肽转移酶-E-钙粘蛋白(GST-E-cadherin)结合法提取胞浆游离β-连环蛋白(β-catenin),Western blot法测定总β-连环蛋白、胞浆游离β-连环蛋白、低密度脂蛋白相关受体-6(LRP6)及磷酸化LRP6(p-LRP6)蛋白水平。结果:和转染空白质粒PcDNA3比较,转染LRP6增强TOPflash活性593倍(P<0.05),提高胞浆游离β-catenin水平126.3%;而转染赖氨酸突变的LRP6将进一步增强TOPflash活性,达2 989倍(P<0.05),胞浆游离β-catenin水平提高580.5%;和转染未突变LRP6相比,转染胞内区赖氨酸突变LRP6受体激活Wnt信号通路作用更强。结论:LRP6胞内区赖氨酸位点在LRP6参与Wnt信号通路活化过程中可能具有重要作用。     

高效液相色谱法同时测定复方赖氨酸颗粒中4种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定复方赖氨酸颗粒中4种成分(维生素B1、维生素B6、葡萄糖酸钙和盐酸赖氨酸)的含量。方法采用氨基柱,以乙腈-0.05 mol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液(68∶32)为流动相,流速为1.0 mL·min~(-1),柱温为30℃,检测波长:维生素B1和维生素B6为280 nm,葡萄糖酸钙、盐酸赖氨酸为205 nm,进样量10μL。结果维生素B1、维生素B6、葡萄糖酸钙、盐酸赖氨酸分别在0.085 61～0.1998 mg·mL~(-1)、0.054 84～0.1280 mg·m L~(-1)、1.183～2.761 mg·mL~(-1)、2.049～4.781mg·mL~(-1)与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为100.4%、99.7%、100.7%、100.7%,RSD分别为0.99%、0.83%、0.67%、0.80%(n=6)。结论该法准确、简单、方便、可行,可用于同时测定复方赖氨酸颗粒中4个有效成分的含量。     

卡维地洛对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞ADMA-DDAH系统的影响

目的 观察卡维地洛对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)二甲基精氨酸-二甲基赖氨酸水解酶(DDAH)活性及表达的影响,以探讨卡维地洛对内源性一氧化氮合酶抑制物不对称二甲精氨酸(ADMA)代谢机制的影响.方法 采用改良的Jaffe法培养原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs),取生长良好的3～6代HUVECs用于实验,分为(1)空白对照组:加DMEM培养液;(2)ox-LDL组:加入ox-LDL(100 mg/L,150 mg/L);(3)ox-LDL 卡维地洛组:同时加入150 mg/L ox-LDL及卡维地洛(10 μmol/L)共孵24h后,检测上清液中NO、NOS活性、ADMA含量、L-胍氨酸(L-cit)浓度,采用Western blotting测定细胞裂解液中二甲基精氨酸-二甲基赖氨酸水解酶(DDAH)的蛋白表达.结果 ox-LDL条件培养下,内皮细胞的代谢产物ADMA、ET的量均较空白对照组高,而NO的量及NOS的活性减少;反应DDAH酶活性的L-cit浓度显著降低,且有浓度依赖性,而DDAH的表达无明显变化.卡维地洛干预后,ADMA、ET的量较ox-LDL组降低,NOS活性及NO增加,L-cit浓度明显升高.结论 ox-LDL诱导下,内皮损伤ADMA的增加与DDAH的活性减弱有关,而与DDAH的表达无关.卡维地洛通过增加DDAH活性促进ADMA代谢,使NOS活性增高,抑制ox-LDL对内皮功能的损伤.     

HPLC法测定增智助长灵片中盐酸赖氨酸含量

目的：测定增智助长灵片中盐酸赖氨酸含量,方法：HPLC法;结果：盐酸赖氨酸浓度在20～40μg／ml范围内与峰面积线性关系良好,r=0．9996,回收率为99．3％～99．6％,RSD为0.28％-0、66％(n=3),结论：HPLC法可用于测定增智助长灵片中盐酸赖氨酸含量。     

盐酸赖氨酸（注射用）细菌内毒素检查法的研究

目的 建立盐酸赖氨酸（注射用）细菌内毒素的检测方法。方法 按2020年版《中国药典（四部）》通则1143细菌内毒素检查法,采用凝胶法对样品进行干扰试验和细菌内毒素检查,采用动态浊度法定量检测样品中细菌内毒素的含量。结果 Tris缓冲液稀释供试品,调节pH值在6.0～8.0范围内,可有效消除盐酸赖氨酸（注射用）对细菌内毒素的干扰。凝胶法和动态浊度法试验均符合规定,动态浊度法的回收率为84.75%～96.12%,在50%～200%范围内。结论 所建立的方法可行,可用于盐酸赖氨酸（注射用）细菌内毒素的检查。     

L-赖氨酸对克隆的胰岛β细胞株INS-1E细胞的急性作用

目的:探讨L-赖氨酸刺激INS-1E细胞分泌胰岛素(INS)的作用。方法:INS-1E细胞经传代培养2d后,在Krebs-Ringer缓冲液中37℃培养箱预培养30min,再用含有不同浓度葡萄糖和不同浓度L-赖氨酸的改良Krebs-Ringer缓冲液培养60min,然后留取上清液进行胰岛素测定并用细胞蛋白含量校正胰岛素。结果:在1.1～6.7mmol/L葡萄糖范围内,随着葡萄糖浓度的增加,INS分泌量逐渐增加。L-赖氨酸在0.1～20mmol/L范围促进了葡萄糖刺激的INS-1E细胞的胰岛素分泌,随剂量增大而增强。结论:INS-1E细胞分泌胰岛素随葡萄糖浓度的增加而增加。L-赖氨酸能增加葡萄糖诱导的INS-1E细胞分泌胰岛素的作用。     

霍乱毒素点突变衍生物的鼻内免疫原性及免疫佐剂作用

作者对两种减毒霍乱毒素(CT)点突变衍生物CTS106(第106位的脯氨酸被丝氨酸取代,其ADP-核糖转移酶活性减弱)和CTK63(第63位的丝氨酸被赖氨酸取代,其ADP-核糖转移酶活性丧失)及不耐热肠毒素(LT)点突变衍生物LTK63(第63位的赖氨酸被丝氨酸取代,无毒性)的免疫原性及佐剂活性进行研究。     

肌注赖氨酸乙酰水杨酸盐的止痛作用和药动学

赖氨酸乙酰水杨酸盐(LAS)是外科有效的镇痛药,临床主要进行肌注。本文用0.75％醋酸水溶液按1ml/100g体重给雌大鼠进行腹腔注射引发痉挛而产生炎症疼痛,15min后记录30min内的痉挛次数。在注酸前30min给实验大鼠肌注LAS4～50mg/kg(按乙酰水杨酸ASA计量)。结果表明,LAS的止痛活性最大,     

复方赖氨酸颗粒中盐酸赖氨酸的HPLC测定

目的： 采用反相ＨＰＬＣ 法, 分离测定复方赖氨酸颗粒中的盐酸赖氨酸。方法： 用２ , ４ － 二硝基氟苯为衍生化试剂, 将盐酸赖氨酸进行衍生化。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂, 甲醇－０－０５ ｍｏｌ·Ｌ－ １ 醋酸钠和醋酸溶液（６５∶３５） 为流动相, 检测波长为３６０ ｎｍ 。结果： 盐酸赖氨酸浓度在２－７ ～２７ μｇ·ｍ Ｌ－ １ 范围内线性关系良好, ｒ ＝ ０－９９９ ９ , 回归方程 Ｃ＝ ２－５９１ ×１０ － ５ Ａ－ ０－３１６ ６ 。平均回收率为１００－２ ％ , ＲＳＤ 为０－６６ ％ （ ｎ ＝ ６） 。结论： 本法可用于测定复方赖氨酸颗粒中盐酸赖氨酸含量。     

心钠素多拷贝基因的原核表达及其产物的纯化与测定

将含八拷贝心钠素（Ｃａｒｄｉｏｎａｔｒｉｎ，ＣＮ）ｃＤＮＡ的质粒转化大肠杆菌，在ｌａｃ启动子控制下经化学诱导表达，表达的多串蛋白之间由不存在于心钠素序列的赖氨酸相互分析，经分离纯化后，得到了８ＣＮ蛋白，电泳表现为单一条带，经赖氨酸酶Ｃ和羧肽酶Ｂ酶切及复性处理后，检测到较强的心钠素放免和生物学活性。     

赖诺普利和卡托普利治疗原发性高血压的疗效比较

赖诺普利(lisinopril)系第3代新型长效血管紧张素转换酶抑制剂。其结构是依那普利活性代谢产物(enalaprilate)的赖氨酸衍生物。与卡托普利(captopril)的结构不同,不含巯基,与巯基相关的不良反应少。口服1～2小时起效,5～6小时降压效果达高峰,血浆消除半衰期为12.6小时。降压疗效显著,且对外周动脉病变的患者有效。该药在降压的同时可逆转原发性高血压患者血管、心脏结构异常。为验证该药的疗效与不良反应,与卡托普利进行比较观察。