水溶性壳聚糖水凝胶对糖尿病小鼠感染全层皮肤缺损创面的作用及其机制

目的探讨水溶性壳聚糖水凝胶对糖尿病小鼠感染全层皮肤缺损创面的作用及其机制。方法采用实验研究方法。采用循环冻融的方法制备由聚乙烯醇和明胶组成的对照水凝胶及由前述2种材料+水溶性壳聚糖组成的水溶性壳聚糖水凝胶。大体观察第1次冻融前后试管中2种敷料流动性, 并比较12孔板中2种敷料最终形态的外观差异。取细胞株L929和HaCaT, 均分别按照随机数字表法(分组方法下同)分为对照水凝胶组和水溶性壳聚糖水凝胶组, 分别加入相应敷料培养24 h, 采用细胞计数试剂盒8检测细胞增殖活力。取兔血红细胞悬液, 分为生理盐水组、聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)组、对照水凝胶组和水溶性壳聚糖水凝胶组, 分别作相应处理后孵育1 h, 采用酶标仪检测红细胞的溶血程度。取24只11～14周龄雌性db/db小鼠, 在其背部制作全层皮肤缺损创面并在创面处滴加耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)液, 72 h后将小鼠分为空白对照组、磺胺嘧啶银水胶组、对照水凝胶组、水溶性壳聚糖水凝胶组, 分别作相应处理。伤后0(即刻)、7、14、21 d, 大体观察创面愈合情况并计算伤后14、21 d创面愈合率;伤后14 ...     

负载小鼠脂肪干细胞的甲壳素/透明质酸/胶原水凝胶的制备及其对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用

目的制备负载小鼠脂肪干细胞的甲壳素/透明质酸/胶原水凝胶并探讨其对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法该研究为实验研究。通过酸水解碱的方法提取甲壳素纳米纤维, 将提取物与透明质酸和胶原混合制备甲壳素/透明质酸/胶原水凝胶(以下简称水凝胶), 另制备负载小鼠脂肪干细胞的水凝胶。将30只雄性12周龄豚鼠按照随机数字表法分为阴性对照组、阳性对照组和水凝胶组(每组10只), 分别在豚鼠背部两侧涂抹乙醇、4-氨基苯甲酸乙酯、前述制备的不含细胞的水凝胶进行诱导接触和激发接触, 于激发接触后24、48 h观察皮肤水肿和红斑形成情况。将小鼠脂肪干细胞分为行常规培养的正常对照组和用前述制备的不含细胞的水凝胶培养的水凝胶组, 培养3 d, 采用蛋白质印迹法检测血小板衍生生长因子-D(PDGF-D)、胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、转化生长因子β1(TGF-β1)的蛋白表达(样本数均为3)。取8只雄性8周龄SD大鼠, 在其背部两侧各制备1个圆形全层皮肤缺损创面, 分别作为空白对照组(不进行任何处理)和水凝胶组(涂抹前述制备的负载脂肪干细胞的水凝胶)。伤后0(即刻)、2、4、8、10 d, 观察创面愈合情况...     

原位交联含氧化石墨烯的甲基丙烯酸酐化明胶水凝胶对小鼠全层皮肤缺损创面血管化的影响

目的制备含氧化石墨烯(GO)的甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶并探讨原位光聚合GO-GelMA复合水凝胶对小鼠全层皮肤缺损创面血管化的影响。方法采用实验研究方法。将0.2 mg/mL的GO溶液50 μL均匀涂抹于导电胶上, 烘干后于场发射扫描电子显微镜下观察GO的结构和大小。将人皮肤成纤维细胞(HSF)分为采用相应终质量浓度GO处理的0 μg/mL GO(不加GO溶液, 下同)组、0.1 μg/mL GO组、1.0 μg/mL GO组、5.0 μg/mL GO组、10.0 μg/mL GO组, 用酶标仪检测细胞培养48 h的吸光度值, 以此表示细胞增殖活性(样本数为6)。将HSF和人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)分别分为采用相应终质量浓度GO处理的0 μg/mL GO组、0.1 μg/mL GO组、1.0 μg/mL GO组、5.0 μg/mL GO组, 采用划痕试验检测划痕后24、36 h HSF的迁移率(样本数为5)及划痕后12 h HUVEC的迁移率(样本数为3), 采用酶联免疫吸附测定法检测培养4、6、8 h后HSF分泌的血管内皮生长因子(VEGF)水平(样本数为3)。...     

三维生物打印抗菌型水凝胶对大鼠全层皮肤缺损创面的作用

目的探讨三维生物打印负载纳米银的甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶对大鼠全层皮肤缺损创面的作用。方法采用实验研究方法。采用扫描电子显微镜观察不同质量浓度的纳米银溶液中的纳米银颗粒的形态、粒径、分布和含不同终质量分数GelMA的含银GelMA水凝胶的孔隙结构, 并计算孔径大小。处理1、3、7、14 d, 采用质谱仪检测含终质量分数15% GelMA和终质量浓度10 mg/L纳米银的水凝胶的纳米银释放浓度。培养24 h, 检测含终质量浓度0(无纳米银)、25、50、100 mg/L纳米银的GelMA水凝胶对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑菌圈直径。取浙江大学医学院附属第二医院泌尿外科2020年7月收治的1名健康5岁男童包皮环切术后废弃包皮和该院整形外科2020年7月收治的1名健康23岁女性抽脂手术后废弃脂肪, 采用酶解法分别提取成纤维细胞(Fb)和脂肪干细胞(ASC)。将Fb分为仅有培养基的空白对照组和另加入含相应终质量浓度纳米银溶液的2 mg/L纳米银组、5 mg/L纳米银组、10 mg/L纳米银组、25 mg/L纳米银组、50 mg/L纳米银组, 培养48 h, 采用细胞计数试剂盒8...     

载P311微球的温敏壳聚糖水凝胶对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响

目的探讨载P311微球的温敏壳聚糖水凝胶对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响。方法采用实验研究方法。通过油包水乳化法制备聚乙烯醇/海藻酸钠微球(单纯微球)、P311微球及异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白(FITC-BSA)微球, 于光学显微镜/倒置荧光显微镜下观察形貌。制备壳聚糖溶液, 将壳聚糖溶液和β-磷酸甘油二钠水合物混合制备单纯温敏水凝胶, 在单纯温敏水凝胶中加入相应物质制备载单纯微球和载P311微球的温敏水凝胶, 观察4种液体在37 ℃时倾斜状态下的形态变化, 冷冻干燥后于扫描电子显微镜下观察微观形貌。取18只3～4周龄雄性SD大鼠, 分为不进行任何处理的正常组及于背部脊柱两侧分别制作1个全层皮肤缺损创面并进行相应处理的敷贴组、壳聚糖组、单纯水凝胶组、载单纯微球水凝胶组、载P311微球水凝胶组, 每组3只。取5组全层皮肤缺损大鼠, 于伤后0(即刻)、5、10、15 d 观察创面愈合情况, 计算伤后5、10、15 d创面愈合率;取5组全层皮肤缺损大鼠伤后15 d创面和创缘组织及正常组大鼠相同部位正常皮肤组织, 行苏木精-伊红染色观察组织学变化, 行免疫组织化学染色观测CD31及血管内...     

负载银和重组人碱性成纤维细胞生长因子的甲基丙烯酸酐化明胶水凝胶对兔深Ⅱ度烧伤创面的影响

目的探讨负载银和重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)的甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶对兔深Ⅱ度烧伤创面的影响。方法采用实验研究方法。制备含不同浓度甲基丙烯酸酐(MA)的低浓度MA明胶(GelMA)材料、中浓度GelMA材料和高浓度GelMA材料, 加入光引发剂后分别制得低浓度GelMA水凝胶、中浓度GelMA水凝胶和高浓度GelMA水凝胶。采用核磁共振波谱仪检测前述3种浓度GelMA材料的氢核磁共振谱并根据波谱图计算其取代度, 采用场发射扫描电子显微镜(FESEM)检测前述3种浓度GelMA水凝胶的三维微观结构及孔径, 样本数均为9。根据前述筛选出的MA浓度合成含10种浓度银的GelMA(含银GelMA)溶液, 将每种浓度的含银GelMA溶液均分为3份, 加入光引发剂后分别暴露于紫外光下持续20、25、35 s, 制得相应的含银GelMA水凝胶。采用胶原酶降解法测定不同光交联时间含银GelMA水凝胶降解12、24、36、48 h的降解剩余率及彻底降解所需时长, 样本数为5。测定前述筛选出光交联时间下含10种浓度银GelMA水凝胶对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径反映其抑菌能...     

负载二甲双胍的甲基丙烯酰化明胶水凝胶抑制小胶质细胞炎症以促进小鼠脊髓损伤修复

目的探究负载二甲双胍(MET)的甲基丙烯酰化明胶水凝胶(GelMA)对小鼠脊髓损伤的作用。方法将二甲双胍和小鼠小胶质细胞系(BV2)通过Transwell小室共培养, 分别设置对照组, 脂多糖组(LPS组)和治疗组(MET组)。共培养24 h后, 通过定量聚合酶链反应(qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)和细胞免疫荧光技术检测不同组别的BV2细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CD68的表达。制备脊髓损伤小鼠横断模型, 将小鼠分为假手术组(Sham组), 脊髓损伤组(SCI组), 单纯水凝胶修复组(GelMA组), 负载二甲双胍水凝胶修复组(GelMA+MET组)。造模7天后取材进行免疫荧光实验检测iNOS、CD68的表达。造模8周内, 每周进行BMS评分。采用t检验和单因素方差分析进行比较。结果 MET组iNOS、TNF-α的mRNA表达(1.32±0.38、1.63±0.23)低于LPS组(2.02±0.21、4.50±0.40), 差异有统计学意义(n=3, t=2.816、10.680, P<0.05)。MET组中iNOS蛋...     

甲基丙烯酸酐化明胶水凝胶在创面修复领域中的应用研究进展

创面修复是临床中常见难题, 严重影响患者生活质量, 也给社会带来沉重负担。基于水凝胶开发的多功能敷料在治疗急性和慢性创面中显示了较强的潜力。甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶除具备良好的组织相容性、细胞黏附性和生物可降解性等优势外, 还因成本低廉、反应条件温和、理化性质可调节、临床应用广泛等而备受关注。该文介绍了GelMA水凝胶的特征及其在创面修复领域中的应用研究进展, 并对用于治疗创面的多功能GelMA水凝胶敷料的未来发展进行了展望。     

负载焦亡抑制剂的活性氧响应性自组装纳米胶束对糖尿病大鼠全层皮肤缺损的影响

目的探究负载焦亡抑制剂的活性氧响应性自组装纳米胶束对糖尿病大鼠全层皮肤缺损的影响。方法采用实验研究方法。用纳米胶束聚乙二醇-嵌段-聚丙烯硫醚(PEG-b-PPS)包封核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)1/2抑制剂(NOD-IN-1), 将所得产物称为PEPS@NOD-IN-1。利用透射电子显微镜和粒度分析仪分别观测PEG-b-PPS与PEPS@NOD-IN-1的形貌和水合粒径, 用酶标仪测量并计算PEPS@NOD-IN-1对NOD-IN-1的包封率和载药率以及PEPS@NOD-IN-1在单纯磷酸盐缓冲液(PBS)和含过氧化氢的PBS中40 h内对NOD-IN-1的累积释放率, 样本数均为3。取24只6～7周龄雄性SD大鼠, 通过注射链脲佐菌素的方法诱导1型糖尿病, 在每只大鼠背部制作6个全层皮肤缺损创面, 按随机数字表法将致伤大鼠分为进行相应处理的PBS组、NOD-IN-1组、PEG-b-PPS组、PEPS@NOD-IN-1组, 每组6只。伤后3、7、12 d观察创面愈合情况并计算创面愈合率;伤后3 d, 采用免疫荧光法检测创面组织中活性氧水平;伤后7 d, 利用苏木精-伊红染色评估创面...     

纳米β磷酸三钙/水凝胶复合材料促进骨再生的实验研究

目的 观察纳米β磷酸三钙(TCP)/水凝胶复合材料对骨再生的促进作用.方法 制作纳米β-TCP/甲基丙烯酸酰化明胶(GelMA)水凝胶复合材料.根据培养基的不同,分为空白对照组、GelMA组和纳米β-TCP/GelMA组,将大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)与上述培养基共同培养.通过电镜观察、细胞增殖实验、碱性磷酸酶(...     

单细胞RNA测序解析普通小鼠和糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面中CD34+细胞的类型与功能

目的单细胞RNA测序解析普通小鼠和糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面中CD34+细胞的类型与功能。方法该研究为实验研究。构建CD34+细胞谱系追踪小鼠, 实现CD34+细胞在荧光条件下可视化。取6只7～8周龄雄性CD34+细胞谱系追踪小鼠(设为糖尿病组), 腹腔注射链脲佐菌素构建糖尿病模型, 于小鼠13周龄时在其背部制备全层皮肤缺损创面;另取6只13周龄雄性CD34+细胞谱系追踪小鼠(设为对照组), 在其背部制备全层皮肤缺损创面。伤后4 d, 分别收集对照组3只小鼠和糖尿病组2只小鼠创面组织, 消化制备单细胞悬液, 采用荧光活化细胞分选法筛选出CD34+细胞后进行单细胞RNA测序, 采用R语言的Seurat 4.0.2程序通过降维可视化和细胞聚类分析CD34+细胞类型并筛选注释各CD34+细胞亚群的标记基因, 对2组小鼠创面组织间CD34+成纤维细胞(Fb)、平滑肌细胞、角质形成细胞(KC)、类软骨细胞的差异表达基因(DEG)进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)富集分析, 探索细胞功能。结果伤后4 d, 2组小鼠创面组织中CD34+细胞均包含7种细胞类型, 具体为内皮细...     

制备新型负压材料以构建大鼠全层皮肤缺损创面新生基质的可行性研究

目的探索制备新型负压材料以构建大鼠全层皮肤缺损创面新生基质的可行性。方法采用实验研究方法。取负压治疗中常用的聚氨酯泡沫敷料, 于扫描电子显微镜下观察其微观结构并测定其孔径(样本数为5)。分别以聚己内酯、聚丁二酸丁二醇酯(PBS)为原材料, 采用熔体纺丝技术, 以测得的聚氨酯泡沫敷料孔径为纺丝间距, 分别以15、25、35 mm/s为纺丝速率制备聚己内酯负压材料和PBS负压材料, 于扫描电子显微镜下观察制备的负压材料微观结构并测定其丝径, 采用拉力试验机与复合材料试验机分别测定制备的负压材料和聚氨酯泡沫敷料的拉伸强度与拉伸模量(样本数均为5), 以筛选后续制备负压材料的纺丝速率。将对数生长期的人皮肤成纤维细胞(Fb)分别与以筛选的纺丝速率制备的聚己内酯负压材料和PBS负压材料共培养, 于共培养1、4、7 d, 用活/死细胞检测试剂盒检测材料中细胞活性与黏附情况, 用细胞计数试剂盒8法检测材料中细胞增殖水平(样本数为5)。于18只5～6周龄雌雄不限的SD大鼠背部各制备1个全层皮肤缺损创面, 伤后即刻, 将致伤大鼠按随机数字表法分为聚己内酯+聚氨酯组、PBS+聚氨酯组、单纯聚氨酯组(每组6只...     

自体脂肪干细胞基质胶对兔耳全层皮肤缺损创面愈合及瘢痕增生的影响

目的探讨自体脂肪干细胞基质胶对兔耳全层皮肤缺损创面愈合及瘢痕增生的影响, 并分析其相关机制。方法采用实验研究方法。切取42只2～3个月龄雄性新西兰大白兔背部完整脂肪垫, 制备脂肪干细胞基质胶, 并于每只兔双耳腹侧制备全层皮肤缺损创面, 将左耳创面纳入脂肪干细胞基质胶组(以下简称基质胶组)、右耳创面纳入磷酸盐缓冲液(PBS)组, 分别注入自体脂肪干细胞基质胶和PBS。计算伤后7、14、21 d创面愈合率, 并于创面愈合后1、2、3、4个月行创面形成瘢痕组织(以下简称瘢痕组织)温哥华瘢痕量表(VSS)评分;行苏木精-伊红染色观测伤后7、14、21 d创面组织病理学改变和创面愈合后1、2、3、4个月瘢痕组织真皮厚度;行Masson染色观察伤后7、14、21 d创面组织和创面愈合后1、2、3、4个月瘢痕组织中胶原排布, 并计算胶原容积分数(CVF);采用免疫组织化学法观测伤后7、14、21 d创面组织中微血管计数(MVC)与创面愈合后1、2、3、4个月瘢痕组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达, 并行基质胶组瘢痕组织中α-SMA与TGF-β1表达相关性分...     

可注射纳米复合甲基丙烯酸化明胶水凝胶在骨修复中的应用

目的 构建可缓释血小板衍生生长因子（PDGF）的可注射复合成骨水凝胶,验证其体内外成骨再生效应。方法 通过简单共混纳米锂钙石（SN）、PDGF与甲基丙烯酸化明胶（GelMA）,构建可注射复合水凝胶（GelMA-SN-PDGF）,并进一步通过紫外光交联优化水凝胶力学性能。扫描电子显微镜、流变仪、万能力学试验机等分析GelMA-SN-PDGF的理化属性和力学性能;ELISA法测定复合水凝胶的PDGF缓释曲线,Transwell和划痕实验验证复合水凝胶的趋化性能;CCK-8法、Live/Dead染色法、DAPI-Phalloidin染色法评估GelMA-SN-PDGF的生物相容性;qRT-PCR和免疫荧光染色标记法评估GelMA-SN-PDGF的体外成骨能力,茜素红染色法分析其基质矿化能力。建立大鼠颅骨临界骨缺损模型并通过Micro-CT和Masson三色染色分析GelMA-SN-PDGF的体内成骨能力。结果 GelMA-SN-PDGF复合水凝胶制备简易,能通过注射器注射,SN和PDGF的加入并未显著影响GelMA支架结构,紫外光交联后的GelMA支架满足骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化的力学环境;PDGF在复合水凝胶中实现了理想的长期控释模式,并有效地刺激了BMSCs的归巢。GelMA-SN-PDGF复合水凝胶在体外促进了BMSCs中成骨相关标志物的表达和基质矿化,并展现了较好的体内临界骨缺损修复能力。结论 可注射的GelMA-SN-PDGF复合水凝胶具有良好的生物相容性和生物活性,能通过注射器微创修复骨缺损,体内外成骨效应较好,为临床骨缺损治疗提供了一种简单而快速的策略。     

甲基丙烯酸酐化明胶-甲壳素纳米晶须生物墨水的特性和3D打印效果

目的探讨由甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)和甲壳素纳米晶须(ChiNC)组成的混合生物墨水的物理特征、生物相容性, 以及3D打印效果。方法 2021年5月至2022年12月, 于100 mg/ml GelMA生物墨水中添加ChiNC, 制备成ChiNC浓度分别为5、10、20 mg/ml的混合生物墨水, 分别命名为GC5、GC10、GC20组, 与未添加ChiNC的GelMA生物墨水(GC0组)共同实验。采用扫描电镜观察4组生物墨水光固化后形成的水凝胶的横截面, 计算孔隙率。称量各组水凝胶溶胀前后质量, 计算平衡溶胀比。将4组生物墨水加入48孔板中, 光固化成水凝胶, 表面种植人脐静脉内皮细胞(HUVECs), 于培养基中培养至第1、3、7天分别行CCK-8实验检测吸光度A值, 比较4组水凝胶中细胞的增殖速度。4组生物墨水中添加HUVECs, 打印网格状支架, 于培养基中培养至第1、7天分别行Live-Dead染色, 观察细胞存活率。采用打印挤出成丝实验, 观察各组生物墨水挤出时的连续成丝性, 比较各组的打印效果。采用最佳配比的混合生物墨水3D打印模拟膀胱壁黏膜层、黏膜下层和肌层解剖结...     

白细胞介素4修饰的金纳米酶对糖尿病小鼠全层皮肤缺损的作用

目的探讨白细胞介素4修饰的金纳米酶颗粒(IL-4-AuNP)对糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用及其机制。方法采用实验研究方法。改进文献中的方法合成金纳米酶颗粒(AuNP)及IL-4-AuNP, 采用透射电子显微镜拍摄2种颗粒形貌并计算其粒径, 采用纳米粒度电位仪和粒度分析仪分别检测2种颗粒的表面电位和水合粒径。采用过氧化氢检测试剂盒和超氧阴离子检测试剂盒检测IL-4-AuNP的过氧化氢清除率和超氧阴离子清除率。取小鼠成纤维细胞系3T3细胞, 采用随机数字表法(下同)将其分为空白对照组、仅使用过氧化氢处理的单纯过氧化氢组、先使用IL-4-AuNP处理0.5 h再使用过氧化氢处理的过氧化氢+IL-4-AuNP组, 培养24 h后, 采用免疫荧光法检测细胞活性氧水平, 采用细胞计数试剂盒8检测细胞相对存活率。取Raw264.7小鼠巨噬细胞, 将其分为空白对照组和用IL-4-AuNP处理的IL-4-AuNP组, 培养24 h后, 采用免疫荧光法观测细胞中精氨酸酶1(Arg-1)的表达。取12只8～10周龄雄性BALB/c小鼠(小鼠周龄、性别、品系下同), 分为IL-4-AuNP组和空白对照...     

Semaphorin 4D促进小鼠皮肤创面愈合的作用和机制

目的 研究信号素蛋白Semaphorin 4D（Sema 4D）在小鼠皮肤创面愈合过程中发挥的作用和机 制。方法 采用随机分组方式将24只Sema 4D基因敲除小鼠分成实验组（Sema 4D给药组）和对照组（PBS 组）,同时将12只同窝杂合子小鼠作为正常对照组。所有小鼠制备全层皮肤缺损创面,实验组每个创面 局部皮下隔天注射250 ng（50 μl）Sema 4D蛋白/PBS溶液,对照组和正常对照组的小鼠创面以相同体积 的PBS溶液进行注射,直至创面完全愈合为止。拍照记录创面愈合情况,术后第3、7、13天取创面组织行 HE、MASSON染色及CD34、VEGF免疫组化染色。结果 实验组第5、7、9、11天创面面积小于对照组和 正常对照组（P＜0.05）;对照组第7、9、11天创面面积大于正常对照组（P＜0.05）;实验组创面完全愈合 时间短于对照组和正常对照组（P ＜0.05）;实验组第7天表皮和真皮新生评分、肉芽组织厚度均优于对照 组及正常对照组（P＜0.05）;实验组第13天胶原染色较其他两组排列紧密有序;在血管生成评价方面,实 验组第7、13天CD34表达均高于对照组及正常对照组（P ＜0.05）。结论 Sema 4D基因敲除小鼠创面愈合 速度滞后,外源性给予Sema 4D补充后,可通过促进皮肤创面血管化,发挥促创面愈合的作用。     

基于单细胞RNA测序探讨小鼠全层皮肤缺损创面中真皮成纤维细胞的生长因子调控网络

目的基于单细胞RNA测序探讨小鼠全层皮肤缺损创面中真皮成纤维细胞(dFb)的异质性与生长因子调控网络。方法采用实验研究方法。取5只8周龄雄性健康C57BL/6小鼠(鼠龄、性别、品系下同)正常皮肤组织, 另取5只背部全层皮肤缺损小鼠伤后7 d创面组织, 用胶原酶D和DNA酶Ⅰ消化组织获得细胞悬液, 用10x Genomics平台构建测序文库, 用Illumina Novaseq6000测序仪进行单细胞RNA测序。采用R4.1.1软件的Seurat 3.0程序分析获得2种组织细胞的基因表达矩阵, 采用按细胞群、细胞来源、标记皮肤中主要细胞基因分类的二维tSNE云图进行可视化展示。根据已有文献报道和CellMarker数据库检索情况, 分析2种组织细胞的基因表达矩阵中标志基因表达情况, 对各细胞群进行编号和定义。将基因表达矩阵和细胞分群信息导入R4.1.1软件的CellChat 1.1.3程序, 分析2种组织中细胞间通信以及创面组织血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)信号通路中的细胞间通信, 2种组织中FGF的各亚...     

姜黄素结合三维生物打印的甲基丙烯酸酐化明胶水凝胶可减少活性氧诱导的脂肪干细胞凋亡并提高糖尿病创面移植物的存活率

晚期糖基化终末产物(AGE)与AGE受体(AGER)相互作用, 可产生活性氧, 导致皮肤Fb和血管内皮细胞凋亡, 从而阻碍糖尿病创面愈合。浙江大学医学院附属第二医院韩春茂教授和王新刚教授团队在《Burns & Trauma》杂志发文《Curcumin?incorporated 3D bioprinting gelatin methacryloyl hydrogel reduces reactive oxygen species?induced adipose?derived stem cell apoptosis and improves implanting survival in diabetic wound》。该团队制备了一种含有姜黄素的三维生物打印甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶支架, 将其植入脂肪干细胞(ADSC)并应用于小鼠糖尿病创面。通过结构表征、蛋白质印迹法、活性氧和细胞凋亡测定来评估其抗氧化和抗细胞凋亡活性, 并通过创面愈合实验评估了姜黄素通过AGE/AGER/核因子κB p65途径对细胞凋亡的潜在调节作用。通过扫描电子显微镜观察到, 质量分数10%的G...     

促进创面愈合的负载硫化铜改性葡聚糖水凝胶微针贴片的研发与应用

目的:研发制备一种可负载硫化铜(CuS)的改性葡聚糖水凝胶微针贴片,探讨其对SD大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响。方法:合成改性葡聚糖后进行傅里叶红外光谱仪(FTIR)以确定改性葡聚糖水凝胶的改性情况,进而合成可分离式负载CuS的改性葡聚糖水凝胶微针贴片,评估其力学性能及穿刺能力。在12只雄性SD大鼠(200~250 g...