2型糖尿病患者外周血单个核细胞miR-146a和miR-223的表达分析及临床意义

目的 分析2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear Cell, PBMC)中miR-146a和miR-223表达的水平,并探讨其对T2DM的临床诊断价值。方法 收集河南省人民医院2022年1月至2022年12月收治的T2DM患者及正常人外周血,分离PBMC,采用实时荧光定量PCR检测PBMC中miR-146a和miR-223的表达,Pearson法分析其与患者临床指标的相关性,对PBMC中miR-146a和miR-223的表达水平进行受试者工作曲线(receiver operating characteristic, ROC)分析,探究其对T2DM的诊断价值。结果 在T2DM患者PBMC中miR-146a、miR-223的表达量显著低于对照组。Pearson相关分显示PMBC中miR-146a和miR-223存在一定相关性(r=0.523,P<0.05),同时与其在血浆中的表达具有一定相关性(r=-0.525、0.468,P<0.05); miR-146a与病程负相关,而miR-223与病程正相关,两者与体质量指数...     

外周血miR-92a、miR-424、miR-145在食管癌中的表达及意义

目的 分析外周血微小核糖核酸(miR)-92a、miR-424、miR-145在食管癌中的表达及意义。方法 选取2018年1月—2020年12月我院68例食管癌作为食管癌组,另纳入68例体检健康者作为对照组,比较2组外周血miR-92a、miR-424、miR-145相对表达量,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血miR-92a、miR-424、miR-145相对表达量对食管癌的诊断价值;分析食管癌临床病理特征与外周血miR-92a、miR-424、miR-145的相关性。结果 食管癌组外周血miR-92a、miR-424相对表达量显著高于对照组,miR-145相对表达量低于对照组(P<0.01)。ROC曲线分析发现,外周血miR-92a、miR-424、miR-145相对表达量均对食管癌有较高的诊断价值。Spearman秩相关分析显示,食管癌TNM分期及淋巴结转移与外周血miR-92a、miR-424相对表达量呈正相关(r=0.692、0.511、0.496、0.404,P<0.05),与miR-145相对表达量呈负相关(r=-0.475、-0.382,P<0...     

血清miR-92 a、miR-20 a在结肠癌术患者中的变化及对预后的预测价值分析

目的 探讨血清miR-92a、miR-20a在结肠癌术患者中的变化及对预后的评估价值.方法 选取2018年1月—2020年11月我院血液肿瘤科诊治的86例结肠癌术患者(观察组)与86例体检健康者(对照组),比较2组血清miR-92a、miR-20a表达量;以血清miR-92a、miR-20a中位表达量为截断值将观察组分...     

miR-15a在子宫内膜癌组织中的表达变化及临床意义

目的 探讨miR-15a在子宫内膜癌组织中表达变化及临床意义,分析miR-15a在子宫内膜癌发生发展过程中的可能机制.方法 通过荧光定量PCR法测定68例子宫内膜癌组织和68例癌旁组织的miR-15a表达情况;分别将无关序列模拟物(非转染组)、miR-15a模拟物(转染组)转染入RL95-2人子宫内膜癌细胞,设立阴性对照组,比较3组的miR-15a和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达情况;并通过Transwell肿瘤细胞侵袭试验和Transwell肿瘤细胞迁移试验检测RL95-2细胞的侵袭力和迁移能力.结果 子宫内膜癌组织miR-15a相对表达量明显低于癌旁组织(P<0.05);miR-15a相对表达量与子宫内膜癌患者的FIGO分期、淋巴结转移、肌层浸润程度、分化程度相关(P<0.05);转染组miR-15a相对表达量明显高于未转染组和对照组,MMP-2相对表达量明显低于未转染组和对照组(P<0.05);转染组侵袭力与迁移力均明显低于未转染组和对照组(P<0.05).结论 在子宫内膜癌患者中miR-15a以低表达为主,且与淋巴结转移、分化程度、肌层浸润程度、FIGO分期有关,miR-15a作为抑癌基因可能是通过抑制MMP-2蛋白发挥抑制癌细胞转移及侵袭的作用.     

急性冠状动脉综合征患者PCI治疗前后血清miR-34a、miR-146a水平变化及近期预后预测价值

目的 探讨急性冠脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）患者血清微小RNA-34a(miR-34a)、微小RNA-146a(miR-146a)水平变化及近期预后预测价值。方法 选取2018年2月～2020年6月收治的拟行经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention,PCI）术的ACS患者86例,所有研究对象均采用Judkins法进行冠脉造影,并根据造影图像结果中冠脉血管狭窄程度分为单支病变组（23例）,双支病变组（36例）,三支病变组（27例）;同时对冠脉造影结果进行Gensini评分,<50分为轻度病变组（46例）,50～90分为中度病变组（30例）,> 90分为重度病变组（10例）。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）法检测ACS患者PCI术前、术后1个月的miR-34a、miR-146a的表达水平。并随访ACS患者术后1年内主要不良心血管事件（MACE）的发生情况,并根据是否发生MACE事件分为MACE组与非MACE组,比较两组血清miR-34a、miR-146a的表达水平。结果 ACS患者P...     

miR-124a对2型糖尿病小鼠胰腺组织氧化应激损伤的影响北大核心CSCD

目的探讨miR-124a对2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)小鼠的胰腺组织氧化应激损伤和β细胞功能的影响。方法将野生型C57BL/6和miR-124a低表达的C57BL/6小鼠分别随机分成2组:野生空白组(WT Con)、miR-124a^(+/-)空白组(miR-124a^(+/-)Con)、野生模型组(WT Mod)、miR-124a^(+/-)模型组(miR-124a^(+/-)Mod)。采用高脂高糖饮食联合尾静脉注射链脲佐菌素构建T2DM小鼠模型(空腹血糖≥11.1 mmol·L^(-1)),建模成功后继续高脂高糖饮食饲养8周。检测各组小鼠的体质量、FBG及INS变化。HE染色和透射电镜观察胰腺组织的病理学变化及超微结构变化。ELISA法检测小鼠血清的氧化应激因子ROS、·OH的含量及抗氧化酶Mn-SOD、CAT的活性。ELISA法检测小鼠胰腺组织的ComplexⅡ、Ⅲ、Ⅳ的活性和ATP含量。结果与WT Con对比,miR-124a^(+/-)Con小鼠血清ROS、·OH和胰腺组织的ATP含量降低(P<0.05),miR-124a^(+/-)Mod小鼠的FBG升高,INS含量降低,血清Mn-SOD和CAT活性下降,胰腺组织的ATP含量和ComplexⅡ、Ⅲ和Ⅳ活性降低(P<0.05)。与WT Mod对比,miR-124a^(+/-)Mod小鼠的FBG和血清ROS、·OH降低(P<0.05),胰岛形态好转,INS含量、Mn-SOD、CAT活性和胰腺组织的ATP含量、Complex Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性升高(P<0.05)。结论降低小鼠miR-124a表达可降低T2DM小鼠FBG,胰腺病理损伤得到缓解,其作用机理可能为提高胰腺组织的抗氧化能力,减少氧化应激对β细胞的损伤有关。     

血清miR-122和miR-199a对子宫内膜异位症的诊断价值分析

目的评价血清miR-122和miR-199 a在诊断子宫内膜异位症的的价值。方法对2016年1月至2018年1月我院80名盆腔子宫内膜异位症患者和70名因盆腔疼痛接受腹腔镜检查但未被诊断为子宫内膜异位症的妇女进行了前瞻性队列研究。采集血液和腹膜液样本,用酶联免疫吸附法测量白细胞介素-6 (IL-6),用定量实时聚合酶链反应测量miR-122和miR-199a表达量。结果子宫内膜异位症患者血清和腹膜液中的IL-6、miR-122和miR-199a水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。血清miR-122的表达与血清IL-6 (r=0.591),血清miR-199a (r=0.746),腹膜液IL-6 (r=0.611),腹膜液miR-122 (r=0.956),腹膜液miR-199a(r=0.678)呈正相关。同时,血清miR-199 a的表达与血清IL-6(r=0.612),腹膜液IL-6(r=0.645),腹膜液miR-122(r=0.741)呈正相关。血清miR-122和miR-199 a的敏感性分别为96.6%和100.0%,对诊断子宫内膜异位症的特异性分别...     

帕金森病患者脑脊液中miR-9a的表达及其临床意义

目的研究miR-9a在帕金森病(PD)患者脑脊液中的表达,为帕金森病的早期诊断提供临床检测指标。方法采用实时荧光定量PCR检测42例PD患者、24例普通头痛患者和24例健康人脑脊液中miR-9a表达水平情况。分析脑脊液中miR-9a表达水平与PD相关临床指标的关系。结果 PD组患者脑脊液中miR-9a表达水平明显高于头痛组和健康对照组(P<0.05),且PD患者脑脊液中miR-9a表达与帕金森综合评分量表(UPDRS)分级呈正相关(r=0.70,P<0.05)。ROC曲线确诊PD患者的脑脊液miR-9a临界值为0.667,其诊断敏感度为85.7%,特异度为77.9%。结论脑脊液miR-9a的检测不仅有助于PD的诊断,也可能作为判断PD病情的指标之一。     

血清miR-30a水平与先天性心脏病患儿早期心功能的相关性

目的探讨先天性心脏病(CHD)患儿心功能早期变化与血清miR-30a水平的相关性。方法选择新疆医科大学第一附属医院确诊的53例CHD患儿作为观察组,按不同心功能水平分为A组21例(无心力衰竭),B组32例(轻度心力衰竭),同期随机选取该院健康体检儿童50人为对照组。采用荧光定量PCR法测定血清miR-30a水平,组织多普勒成像(TDI)检测心功能指数,包括左室射血分数(LVEF)、右室射血分数(RVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、TDI-Z指数、TDI-Tei指数。结果三组间RVEF、miR-30R两两比较差异均有统计学意义;观察组除左心Tei指数外,其他指标组间比较差异均有统计学意义;血清miR-30a与左、右心TDI-Z指数呈负相关,血清miR-30a与左、右心TDI-Tei指数呈正相关。结论血清miR-30a参与了CHD心功能变化的过程,其水平随心功能程度波动,或可作为判断CHD心功能的监测指标。     

原发性肝癌患者血清miR-146a、miR-202、miR-148b的表达及意义

目的 探讨原发性肝癌患者血清miR-146a、miR-202、miR-148b的表达及临床意义.方法 选择2018年2月至2019年2月收治并进行根治性切除手术的78例原发性肝癌患者为观察组,同时选择正常体检者58例为对照组.采用RT-qPCR的方法检测各组血清miR-146a、miR-202和miR-148b的表达水...     

miR-497和miR-34a在铂敏感和铂耐药卵巢上皮癌患者中的表达差异及机制研究

目的:探讨微小核糖核酸miR-497和miR-34a在铂敏感和铂耐药卵巢上皮癌(EOC)患者中表达的差异及机制。方法:选取2008年1月-2012年1月于我院妇产科行卵巢癌分期手术或肿瘤细胞减灭术的EOC患者72例,术后均行以铂类药物为基础的规范化疗,并进行随访(时间为2008年7月-2016年7月)。根据患者对铂类药物的敏感性将其分为铂敏感组(42例)和铂耐药组(30例)。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测两组患者肿瘤组织中miR-497和miR-34a的表达水平,并考察其与患者总生存时间的相关性;采用巢式降落式甲基化特异性聚合酶链反应法检测患者miR-497和miR-34a启动子区DNA甲基化水平,采用蛋白印迹法考察组蛋白H3第9位赖氨酸残基二甲基化(H3K9me2)水平,采用染色质免疫共沉淀法检测miR-497和miR-34a启动子区H3K9me2水平。结果:铂敏感组患者miR-497和miR-34a的表达水平均显著高于铂耐药组,差异均有统计学意义(P<0.05);72例患者的总生存期为(45.7±17.5)个月,与其miR-497和miR-34a表达水平呈正相关(r2分别为0.2714、0.3782,P<0.01)。铂耐药组患者miR-497和miR34a启动子区DNA甲基化水平均显著高于铂敏感组,且其启动子区H3K9me2水平也显著高于铂敏感组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);而铂耐药组患者H3K9me2水平虽略高于铂敏感组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:EOC患者肿瘤组织中miR-497和miR-34a的表达水平与铂化疗的敏感性及患者的生存时间有关,启动子区DNA甲基化和组蛋白甲基化可能是其表达变化的机制之一。     

miR-18a和miR-18b在结肠癌中的表达及其临床意义

目的 探讨miR-18a和miR-18b在结肠癌中的表达及其临床意义.方法 选取手术切除的原发性结肠癌标本20例,采用实时荧光定量PCR分析miR-18a和miR-18b的表达.结果 相对于癌旁组织,20例结肠癌组织中miR-18a表达下调(P＜0.05);其表达与TNM分期及浸润深度有关(P＜0.05).而miR-18b在癌组织中的表达则上调(P＜0.05),其表达与TNM分期、浸润深度和远处转移无明显关联.结论 miR-18a可能参与了结肠癌的发展.     

miR-10a在胰腺癌侵袭转移中的作用

目的 探讨microRNA-10a(miR-10a)在胰腺癌侵袭转移中的作用. 方法 选取2014年1月至2016年12月在赣南医学院第一附属医院切除的胰腺癌组织标本68例,同时选取癌旁组织作为对照,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织标本miR-10a表达;同时选取胰腺癌细胞株Capan-1细胞,以脂质体转染法将miR-10a重组正、反义真核表达质粒载体转染Capan-1细胞,采用RT-PCR检测转染细胞miR-10a表达,Transwell和Matrigel试验观察转染细胞的迁移和侵袭能力,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力. 结果 胰腺癌组织miR-10a相对表达量为(0.213±0.024),明显高于癌旁组织(P<0.01);中低分化胰腺癌miR-10a相对表达量为(0.212±0.011),明显高于高分化胰腺癌(P<0.01);有淋巴结转移胰腺癌miR-10a相对表达量为(0.217±0.017),明显高于无淋巴结转移胰腺癌(P<0.05);TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期胰腺癌miR-10a相对表达量为(0.230±0.015),明显高于Ⅰ~Ⅱ期胰腺癌(P<0.01).转染48 h后,正义组miR-10a相对表达量为(0.021±0.010),明显高于反义组、空载组和空白对照组(P<0.05);反义组miR-10a相对表达量为(0.003±0.001),明显低于空载组和空白对照组(P<0.05).正义组24 h和48 h 光密度(OD)值分别为(0.602±0.018)和(0.753±0.041),明显高于反义组、空载组和空白对照组(P<0.05);反义组24 h和48 h OD值分别为(0.451±0.023)和(0.591±0.038),明显低于空载组和空白对照组(P<0.05).正义组迁移和侵袭细胞数分别为(85.22±12.10)个和(140.24±30.54)个,明显高于反义组、空载组和空白对照组(P<0.05);反义组迁移和侵袭细胞数分别为(12.52±3.22)个和(20.41±8.66)个,明显低于空载组和空白对照组(P<0.05). 结论 miR-10a过表达可对胰腺癌有生长促进、增强侵袭和迁移的作用,值得进一步研究.     

早期缺氧对小鼠心肌细胞miR-34a表达及凋亡的影响

目的 探讨早期缺氧对小鼠心肌细胞miR-34a表达及凋亡的影响。方法 原代培养小鼠乳鼠心肌细胞并培养,缺氧6 h造模,使用anti-miR-34a纳米颗粒干预。将其随机分为三组:对照组(C组)、缺氧组(Ⅰ组)和缺氧+anti-miR-34a纳米颗粒组(Ⅰ+NP组)。采用qRT-PCR检测miR-34a的表达,Western blot检测乙醛脱氢酶2(ALDH2)、caspase 3的表达。结果 Ⅰ组的miR-34a表达、caspase 3表达均高于C组,差异均有统计学意义(P<0.05);Ⅰ组的ALDH2表达低于C组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅰ+NP组的miR-34a表达、caspase 3表达均低于Ⅰ组,差异均有统计学意义(P<0.05);Ⅰ+NP组的ALDH2水平高于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 早期缺氧上调小鼠心肌细胞miR-34a表达,下调下游ALDH2蛋白的表达;Anti-miR-34a纳米颗粒可以进入心肌细胞缓解早期缺氧引起的凋亡。     

急性心肌梗死患者血清miR-208a检测及其临床意义

目的探讨检测miR-208a在急性心肌梗死(AMI)患者早期血清中的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量RT-PCR(Real-timeRT-PCR)检测我院收治的35例AMI患者发病后不同时间与30例正常对照组人员血清miR-208a表达水平,并与血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白I(CTnI)水平进行对比分析。结果正常人血清miR-208a维持在相对较低的水平。AMI发作后1h患者血清miR-208a的表达水平可明显升高(P<0.05),AMI发作后3h血清miR-208a即可达到峰值。皮尔森相关分析结果显示血清miR-208a的表达与CK-MB和CTnI呈正相关(P<0.01)。结论 AMI患者早期血清miR-208a表达显著升高,可能是潜在的AMI早期血清标志物。     

非小细胞肺癌38例血清miR-21、miR-146a表达的临床意义

目的 研究非小细胞肺癌患者血清中miR-21和miR-146a的表达水平,探讨其在肿瘤发生、发展中的作用.方法 采用RT-qPCR技术检测观察组非小细胞肺癌38例及正常对照组38例血清中miR-21、miR-146a的表达.结果 非小细胞肺癌患者血清中miR-21的表达较正常人血清上调,miR-146a的表达较正常人血清下调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-21和miR-146a参与非小细胞肺癌的发生、发展,miR-21和miR-146a可能成为早期诊断非小细胞肺癌的重要生物学指标.     

miR-27a对两种结肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨microRNA-27a(miR-27a)对2种结肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法应用miR-27a反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASO)在体外转染结肠癌细胞系SW620和HCT116,设置转染无义序列组作为对照组。RT-PCR检测细胞miR-27a表达;MTT法检测细胞增殖;Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力;Western blot检测转染细胞FOXO1蛋白表达。结果与对照组相比,转染miR-27a ASO后结肠癌细胞系SW620和HCT116的miR-27a表达水平均明显降低(P<0.001),增殖能力和侵袭能力均受到明显抑制(P<0.01),FOXO1蛋白表达均明显增高(P<0.05)。结论抑制miR-27a表达可显著降低结肠癌细胞系SW620和HCT116的增殖能力和侵袭能力,而调控下游FOXO1蛋白表达可能是miR-27a参与结肠癌细胞增殖和侵袭的主要机制。     

微小 RNA-92a靶向 Kru.ppel样因子 2基因促进卵巢癌细胞侵袭的作用

目的研究微小 RNA-92a(miR-92a)靶向 Kruppel.样因子 2(KLF2)基因促进卵巢癌细胞侵袭的作用及机制。方法 2019年 1月至 2020年 3月进行本研究。培养卵巢癌细胞系 A2780、SKOV3、OVCAR-3及卵巢上皮细胞系 HOSEpiC,检测 miR-92a的表达水平; SKOV3细胞分为阴性对照( NC)组、 miR-92a抑制物组、 miR-92a组、 pcDNA组、 pcDNA+miR-92a组、 pcDNA-KLF2+miR-92a组,分别转染 NC序列、 miR-92a、miR-92a抑制物、空白 pcDNA质粒、过表达 KLF2的 pcDNA重组质粒,检测细胞侵袭数目、 KLF2表达水平,双荧光素酶报告基因验证 miR-92a靶向 KLF2基因。结果 A2780、SKOV3、OVCAR-3细胞中 miR-92a的表达水平分别为( 0.92±0.15)、(1.62±0.19)、(1.21±0.13),均高于 HOSEpiC的( 0.62±0.09)(P<0.05);与 NC组( 75.38±     

miR-26a通过Notch信号通路对NSCLC细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨miR-26a通过Notch信号通路对NSCLC细胞增殖、凋亡的影响。方法将NSCLC细胞分为Fz组(未处理)、Fm组(转染miR-26a模拟物)、Fi组(转染miR-26a抑制物)。RT-PCR检测Notch、miR-26a水平,Western blotting检测Notch蛋白表达,Transwell实验检测细胞侵袭,TUNEL检测细胞调亡,免疫组化检测Notch阳性表达。结果RT-PCR结果显示,三组细胞中,Notch mRNA水平为Fi组>Fz组>Fm组,miR-26a水平为Fi组Fz组>Fm组(P<0.05)。Transwell侵袭实验发现显微镜下三组细胞计数为Fi组>Fz组>Fm组,细胞侵袭能力Fi组>Fz组>Fm组(P<0.05)。TUNEL检测发现细胞凋亡水平为Fi组Fz组>Fm组。结论miR-26a抑制剂可通过调控Notch蛋白表达诱导NSCLC细胞凋亡。     

miR-509-3p与Rab11a在喉鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨miR-509-3p和预测靶基因Rab11a在喉癌发病中的作用.方法:通过实时荧光定量逆转录PCR检测15例喉癌组织及癌旁正常组织中miR-509-3p和预测靶基因Rab11a的表达情况.用miR-509-3p mimics转染喉癌Hep-2细胞株后,检测预测靶基因Rab11a的表达情况,并分析其相关性.结果:①实时荧光定量逆转录PCR检测结果显示,在喉癌组织中miR-509-3p表达低于癌旁正常组织;而Rab11a的表达明显高于癌旁正常组织(P＜0.05).②经转染miR-509-3p mimics喉癌Hep-2细胞株实验组中Rab11a的表达较阴性对照组下调,差异有统计学意义(P＜0.05).miR-509-3p作为抑癌因子在喉癌组织表达水平低于正常组;预测靶基因Rab11a在喉癌组织表达水平高于正常组;经转染miR-509-3p的喉癌Hep-2细胞株Rab11a表达明显高于对照组.结论:miR-509-3p可能靶基因之一为Rab11a,通过下调预测靶基因Rab11a表达的负向调控机制,发挥抑癌作用.揭示miR-509-3p在喉癌中可能通过减少致癌基因Rab11a表达发挥抑癌作用.