激光辅助制动对精子核DNA的影响

目的:研究激光辅助制动精子是否引起精子核DNA损伤。方法:23例行体外受精(IVF)的男性精液标本,上游法处理后用0.45ms脉冲激光照射精子尾部制动精子。采用末端转移酶介导的dUTP末端标记法(TUNEL)和单细胞凝胶电泳法(SCGE)两种方法分别检测激光辅助制动处理前后阳性精子百分率。结果:TUNEL法检测激光辅助制动处理前后阳性精子的百分率分别为(1.32±0.61)%、(1.41±0.51)%,差异无显著性(P>0.05);SCGE法检测处理前后阳性精子百分率分别为(1.59±0.70)%、(1.83±0.68)%,差异亦无显著性(P>0.05)。结论:激光照射精子尾部辅助制动精子对精子核DNA无明显损伤。     

不育患者精子DNA链损伤类型的研究及临床意义

目的:观察精子DNA单、双链损伤(SSB、DSB)在男性不育中的特征,探讨DSB与男性不育的关系,为男性不育的诊疗提供新的观察指标与思路。方法:选择男性不育患者60例以及同期因女方因素不孕前来检查的生育力评估正常的健康男性30例作为对照组,分析两组精子DNA损伤及精液主要参数的差异。精子浓度及活力采用计算机辅助精子分析系统,精子存活率分析采用低渗膨胀试验,精子形态采用Diff-Quik染色法,精子DNA损伤采用双尾彗星实验。结果:双尾彗星实验检测精子DNA完整性共有9种彗星模型。不育患者精子DNA损伤指数(DFI)为(33.8±13.1)%,单链损伤指数(SSB-DFI)为(19.2±11.4)%、SSB占所有损伤精子的比率(SSB-DFI/DFI)为(56.8±32.4)%,双链损伤指数(DSB-DFI)为(23.9±13.4)%、DSB占所有损伤精子的比率(DSB-DFI/DFI)为(70.8±19.5)%;与对照组比较[分别为(16.3±7.9)%、(14.9±7.6)%、(91.4±27.8)%、(6.1±2.7)%、(37.4±11.3)%)],SSB-DFI无显著性差异(P0.05),DSB-DFI、DFI和DSB-DFI/DFI显著高于对照组(P均0.01),SSB-DFI/DFI显著降低于对照组(P0.01)。绘制ROC曲线,DSB-DFI/DFI、DSB-DFI及DFI诊断男性不育最佳截断值分别为39.5%、15.85%和18.65%,ROCAUC、敏感度和特异性分别为(0.969,98.3%,90.0%)、(0.912,86.7%,80.0%)、(0.861,90.0%,70.0%)。不育组精子SSB-DFI及SSB-DFI/DFI与精液常规参数均无相关关系(P均0.05),DFI与前向运动精子百分率、精子存活率及正常形态精子百分率呈负相关(P0.05或P0.01),与精子浓度无相关关系(P0.05),精子DSB-DFI及DSB-DFI/DFI与精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率及正常形态精子百分率均呈负相关(P0.05或P0.01)。结论:影响男性不育的DAN损伤因素可能是DSB,而与SSB相关性不大,精子DNA链的损伤类型对男性生殖能力的评估有较大的参考价值。     

微滴无保护剂玻璃化法冷冻附睾微量精子的研究

目的:探讨微滴无保护剂的玻璃化法冷冻经皮附睾穿刺抽吸术(PESA)所获微量精子的可行性及安全性。方法:通过比较微滴法冷冻(微滴组)和常规慢速冷冻(冷冻管组)这两种冷冻方法的复苏率、回收率及精子核DNA断裂发生率,评价两种冷冻方法的冷冻效果。结果:22例患者附睾精子标本经两种方法冷冻后,仅冷冻管组中有1例患者附睾精子标本中未见活动精子,余均有活动精子,冷冻管组与微滴组的复苏率均低,分别为(18.16±9.38)%和(21.99±10.95)%,两者差异无显著性(P>0.05)。冷冻管组与微滴组的回收率分别为(58.39±12.67)%和(70.82±14.94)%,两者差异有显著性(P<0.01)。22例患者附睾精子冷冻前都存在一定比例核DNA断裂,经单细胞凝胶电泳后出现典型的彗星精子,精子核DNA断裂发生率为(26.68±9.45)%。复苏后冷冻管组和微滴组精子核DNA断裂发生率分别为(28.68±12.54)%和(27.64±10.70)%,与冷冻前比较均未增加,差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:微滴可作为微量精子冷冻的合适载体,并且微滴法无保护剂的玻璃化冷冻附睾微量精子可能是一种简单、安全而行之有效的冷冻方法。     

不同年龄对精子凋亡率及DNA完整性影响的研究

目的:探讨不同年龄阶段精子凋亡率、精子DNA完整性及精液基本参数与年龄是否存在相关性。方法:随机选取在我科因女方因素行体外受精-胚胎移植男性精液标本104例,按男方年龄分为3组,年龄<35岁组43例、35～39岁组31例、≥40岁组30例,按WHO手册第4版手工分析精液常规参数,流式细胞术(FCM)结合FITC-Annexin V/PI荧光染色检测精子凋亡率,吖啶橙荧光染色检测精子DNA完整性。结果:①3组精液量[(2.87±0.89)ml vs(2.98±1.09)ml vs(2.65±0.95)ml]、精子浓度[(60.40±25.43)×106/ml vs(69.74±28.33)×106/ml vs(55.97±27.22)×106/ml]无显著性差异(P>0.05),≥40岁组前向运动精子百分率[(39.00±8.35)%]减少,与<35岁组[(48.72±9.89)%]和35～39岁组[(45.65±10.55)%]相比,差异有显著性(P<0.01);≥40岁组正常形态精子百分率[(11.11±8.26)%]与<35岁组[(16.43±8.75)%]相比,差异有显著性(P<0.01)。②精子凋亡在不同年龄组人群均有一定发生率,≥40岁组精子凋亡率为[(11.82±5.77)%],高于<35岁组[(7.04±3.50)%]和35～39岁组[(9.42±4.73)%],与<35岁组相比结果有统计学意义(P<0.01);≥40岁组DNA完整精子百分率降低[(75.52±10.60)%],与<35岁组[(86.55±5.60)%]和35～39岁组[(81.39±8.94)%]相比,差异有显著性(P<0.01);③男性年龄与精子凋亡百分率呈正相关(P<0.01),与前向运动精子、DNA完整精子百分率呈负相关(P<0.01)。结论:男性年龄增加可能导致前向运动精子百分率减少,正常形态精子百分率降低,精子凋亡百分率增加,DNA完整精子百分率性降低,在生育过程中,男性年龄应引起关注。     

“益精方”对小鼠精子尾部特异性钙通道CatSper1的影响

目的:观察"益精方"对环磷酰胺所致少弱精子症模型小鼠精子尾部特异性钙通道CatSper1的影响。方法:将40只雄性昆明小鼠随机分为对照组(CG)、模型组(MG)、小剂量中药治疗组(SG)和大剂量中药治疗组(LG),按60mg/kg体重给CG小鼠腹腔注射生理盐水(NS),给MG、SG、LG小鼠腹腔注射环磷酰胺,每天1次,连续5d,第6d开始按体重分别给SG和LG小鼠灌服"益精方",剂量分别为人类常规用量(以60kg为标准)的1倍和5倍,MG小鼠给予等体积的NS灌胃,每天1次,连续34d,CG常规饲养,然后对小鼠进行精液常规分析,并用RT-PCR法检测小鼠精子CatSper1的表达。结果:CG、MG、SG和LG组小鼠附睾精子密度分别为(5.20±1.34)、(1.73±0.03)、(2.08±0.01)、(3.31±0.56)×106/ml,a+b级精子百分率分别为(14.49±0.30)%、(6.64±1.88)%、(11.99±1.01)%、(19.40±3.13)%,a+b+c级精子百分率分别为(68.39±15.13)%、(39.96±4.89)%、(62.28±4.43)%、(73.61±5.05)%,MG组精子密度、a+b级精子百分率、a+b+c级精子百分率显著低于CG组(P<0.05),经治疗后LG组精子密度、a+b级精子百分率、a+b+c级精子百分率明显增加,与MG组比较有显著性差异(P<0.05),而与CG组在a+b级精子百分率和a+b+c级精子百分率上没有明显区别。CatSper1的表达量在CG、MG、SG和LG组分别为0.76±0.05、0.73±0.03、0.75±0.12、0.85±0.04,LG组显著高于MG组(P<0.05),而与CG组比较没有明显区别。结论:腹腔注射环磷酰胺可使小鼠精子密度、a+b级精子百分率、a+b+c级精子百分率降低,CatSper1表达量下降,大剂量"益精方"可以通过提高CatSper1的表达量,增加小鼠精子密度、a+b级和a+b+c级精子百分率,从而达到治疗少弱精子症的目的。     

精索静脉曲张对精子染色质结构及运动能力的影响

目的:探讨精索静脉曲张对精子染色质结构及运动能力的影响。方法:对精索静脉曲张组(无慢性疾病及生殖系统病史者,n=74)和对照组(n=89)进行精子染色质结构分析(SCSA)和精液常规分析(精液量、粘稠度、pH值、精子顶体完整率、精子存活率、畸形率、精子密度、活动率及各运动参数)。结果:精索静脉曲张组精子密度、a+b级精子百分率和精子存活率[分别为(41.4±38.7)×106/ml,(31.7±16.9)%,(62.8±22.2)%]显著低于对照组[分别为(80.9±63.1)×106/ml,(46.8±20.5)%,(77.2±17.5)%],P均<0.05;精子运动参数VCL、VSL、VAP精索静脉曲张组分别为(37.4±12.5)、(23.4±7.8)、(26.5±8.2)μm/s,对照组分别为(42.4±10.7)、(27.3±7.3)、(30.7±7.8)μm/s,精索静脉曲张组与对照组相比显著降低(P均<0.05),而MAD显著增加(P<0.01),SCSACOMPαt值精索静脉曲张组(为23.2±16.2)明显高于对照组(为14.1±11.8)(P<0.05)。结论:精索静脉曲张引起精子DNA损伤和精子运动能力的改变,可能是导致男性不育的主要原因之一。     

冷冻保护剂与精液比例对冷冻复苏后精子活动力的影响

目的:比较冷冻保护剂与精浆的不同比例对人类精子冷冻复苏后活动力的影响。方法:将57例志愿者的精液标本分别采用冷冻保护剂∶精液=1∶1和冷冻保护剂∶精液=1∶3的体积比进行冷冻,比较精子复苏后的前向活动率和总活动率。结果:冷冻前的前向运动精子百分率和总活动率分别为(58.60±5.57)%和(66.17±5.24)%。采用冷冻保护剂∶精液=1∶1比例进行冷冻复苏后的前向运动精子百分率和总活动率分别为(40.53±8.97)%和(51.23±9.30)%;采用冷冻保护剂∶精液=1∶3比例进行冷冻复苏后的前向运动精子百分率和总活动率分别为(44.70±8.67)%和(51.50±7.40)%。冷冻前后精子的前向运动百分率和总活动率差异有显著性(P<0.05)。两种不同比例的保护剂相比冷冻后前向运动精子百分率差异有显著性(P<0.05),而总活动率差异没有统计学意义。结论:冷冻对精子活动力损伤明显,冷冻保护剂∶精液=1∶3比例较冷冻保护剂∶精液=1∶1比例可提高冷冻后前向运动精子百分率。     

18～35岁男性军人精液质量调查

目的:了解部队男性官兵精液质量现况。方法:采用手工方法与计算机辅助精液分析对某部1054例基层官兵进行了精液参数10项分析,并根据年龄分为18～20岁,21～25岁,26～30岁和31～35岁4组,分析并比较各组精液参数。结果:1054例青壮年男性精液量为(2.6±1.4)ml、精子密度为(55.9±46.5)×106/ml、a+b级精子(47.1±19.0)%、精子存活率为(70.6±22.1)%、正常形态精子率为(84.7±10.2)%、顶体完整率为(86.1±7.2)%。18～20岁组精液量少、粘度大、pH值偏碱性,与其他3组相比,差异有显著性(P<0.05)。精液质量指标符合WHO标准的百分率为精液量73.5%、液化时间91.1%、pH值93.0%、a+b级精子45.5%、精子存活率86.7%、精子密度80.4%、正常形态精子率为98.2%、精子总数为78.0%,上述各项指标都符合WHO标准的对象仅占40.2%。结论:18～35岁部队基层官兵男性精液质量现况好于国内同类文献报道。在不同年龄分组研究中26～30岁年龄组人员精液质量好于其他年龄组。     

双囊三腔前列腺灌注引流对慢性前列腺炎患者精子质量的影响

目的:观察双囊三腔前列腺灌注引流导管技术治疗慢性前列腺炎患者后精子质量的改善情况。方法:采用双囊三腔前列腺灌注引流导管技术辅助毫米波理疗及抗生素静脉输液方法治疗58例慢性前列腺炎患者,通过计算机辅助精液分析系统分析患者治疗前后的精子质量参数,并进行统计学分析。结果:患者治疗前后精子质量参数比较,活动精子百分率分别为(42.66±17.12)%和(55.23±14.79)%,a级精子百分率为(12.63±12.50)%和(29.84±14.86)%、(a+b)级精子百分率为(29.14±15.04)%和(42.28±12.67)%,精子头部侧摆幅值分别为(3.04±1.55)μm和(2.69±1.67)μm。上述精子质量参数治疗前后的差异均有显著性(P<0.01),其他参数差异无显著性(P>0.05)。结论:采用前列腺灌注引流导管技术治疗慢性前列腺炎可明显改善患者的精子质量,但不能在短时间内完全恢复精子的运动功能。     

Chk1基因在人类精子中的表达及其意义

目的:探讨Chk1基因在人精子中的表达及其临床意义。方法:收集正常组、少精子组、弱精子组和少弱精子组的标本各20份,分别采用Western印迹和RT-PCR方法检测各组精子中Chk1的表达,并计算其相对表达量;采用DNA梯度法检测4组精子中DNA的损伤和梯度变化,用Annexin V/PI双染色法检测各组精子的凋亡情况。结果:Chk1基因在正常组和其他3组的精子中均有表达,Chk1在各组中表达有差异,在正常组、少精子组、弱精子组和少弱精子组的Chk1 mRNA的相对表达量分别为1.00±0.22、0.76±0.10、0.45±0.08、0.37±0.07,各组间比较差异有显著性(P<0.01)。CHK1蛋白的相对表达量与mRNA类似。DNA梯度检测显示弱精子组和少弱精子组中DNA呈现梯状条带;Annexin V/PI双染色法检测发现,与正常组相比,少精子组、弱精子组、少弱精子组和100%d级精子组中精子凋亡率明显增加[分别为(7.6±0.34)%、(8.3±0.60)%、(11.6±0.92)%、(12.5±1.43)%和(17.0±1.98)%,各组间比较P<0.05]。结论:实验证实Chk1在人类精子中有表达,且在不同患者中的表达显著不同,Chk1的表达与DNA损伤和精子凋亡之间存在相关性。即Chk1表达的减少可能导致精子DNA损伤修复功能的下降,精子凋亡增加,从而影响精液质量。     

益肾活血法对精子DNA损伤及自然妊娠结局的影响

目的:探讨益肾活血法治疗男性不育症的疗效,观察其对精子DNA损伤、自然妊娠结局的影响。方法:伴有精子DNA碎片指数(DFI)异常的50例男性不育症患者为观察对象,随机分为2组,最后42例纳入统计分析,其中益肾活血法组(试验组)22例,对照组20例。试验组予口服中药治疗,对照组予口服他莫昔芬片和维生素E胶丸,3个月为1个疗程。治疗前后检测精液常规参数、精子形态、DFI变化情况,并对自然妊娠情况随访。结果:与治疗前比较,治疗后试验组精子浓度[(36.82±29.16)×10^6/ml vs(50.00±39.16)×10^6/ml,P<0.05]、前向运动精子百分率[(20.62±9.10)%vs(36.82±13.45)%,P<0.05]、正常形态精子百分率[(1.28±1.00)%vs(3.44±1.33)%,P<0.05]显著升高,精子DFI显著降低[(29.07±11.52)%vs(15.51±11.31)%,P<0.05];对照组精子浓度[(34.56±37.03)×10^6/ml vs(40.72±47.37)×10^6/ml,P<0.05]、前向运动精子百分率[(21.25±9.11)%vs(26.18±10.60)%,P<0.05]、正常形态精子百分率[(1.48±0.91)%vs(2.57±1.32)%,P<0.05]也显著升高,精子DFI也显著降低[(24.43±8.46)%vs(18.53±10.44)%,P<0.05];两组比较,试验组在提高精子总活力、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率方面显著优于对照组(P<0.05),而在增加精子浓度和降低DFI差异无统计学意义(P>0.05)。试验组妊娠率(18.2%vs 15.0%)和活产率(18.2%vs 10.0%)均高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益肾活血法类中药有助于降低精子DNA损伤,改善自然妊娠结局。     

Sperm DNA damage in men from infertile couples

Aim： To investigate the prevalence of high levels of sperm DNA damage among men from infertile couples with both normal and abnormal standard semen parameters. Methods： A total of 350 men from infertile couples were assessed. Standard semen analysis and sperm chromatin structure assay （SCSA） were carried out. Results： Ninety-seven men （28% of the whole study group） had a DNA fragmentation index （DFI） 〉 20%, and 43 men （12%） had a DFI 〉 30%. In the group of men with abnormal semen parameters （n = 224）, 35% had a DFI 〉 20%, and 16% had a DFI 〉 30%, whereas these numbers were 15% and 5%, respectively, in the group of men with normal semen parameters （n = 126）. Men with low sperm motility and abnormal morphology had significantly higher odds ratios （ORs） for having a DFI 〉 20% （4.0 for motility and 1.9 for morphology） and DFI 〉 30% （6.2 for motility and 2.8 for morphology） compared with men with normal sperm motility and morphology. Conclusion： In almost one-third of unselected men from infertile couples, the DFI exceeded the level of 20% above which, according to previous studies, the in vivo fertility is reduced. A significant proportion of men with otherwise normal semen parameters also had high sperm DNA damage levels. Thus, the SCSA test could add to explaining causes of infertility in cases where semen analysis has not shown any deviation from the norm. We also recommend running the SCSA test to choose the appropriate assisted reproductive technique （ART）.     

短程补肾疗法对肾虚型弱精子症患者近期精液质量的影响研究

目的:评估短程补肾疗法对肾虚型弱精子症患者近期精液质量的影响。方法:2010年7月至2011年3月在我院男科门诊就诊的弱精子症患者121例,根据中医辨证分型分为3组,即肾阴亏虚型组(A组)、肾阳不足型组(B组)以及脾肾两虚型组(C组),予口服中药辨证施治,A组予左归饮合五子衍宗丸加减,B组予金匮肾气丸合五子衍宗丸加减,C组予十子汤合六君子汤加减。每日1剂,共4周。分别于治疗前及治疗4周后行计算机辅助精液分析,比较每组治疗前后精子浓度、a级精子百分率、a+b级精子百分率、精子活动率等精液参数的变化。结果:3组治疗前精子浓度分别为:(70.4±38.6)、(73.5±40.2)和(56.0±34.4)×106/ml,治疗后分别为:(74.4±32.6)、(67.0±30.8)和(58.6±24.6)×106/ml,各组治疗前后差异无显著性(P>0.05);3组治疗前a级精子百分率分别为:(9.9±6.7)%、(9.3±5.4)%和(9.0±6.8)%,治疗后分别为:(12.9±5.3)%、(13.7±7.7)%和(12.9±6.4)%,各组治疗前后差异有显著性(P<0.05);3组治疗前a+b级精子百分率分别为:(29.6±13.2)%、(27.5±10.4)%和(28.3±12.1)%,治疗后分别为:(37.4±10.2)%、(35.7±13.7)%和(35.9±12.3)%,各组治疗前后差异有显著性(P<0.05);3组治疗前精子活动率分别为:(44.3±14.0)%、(43.5±15.0)%和(42.4±14.9)%,治疗后分别为:(53.8±10.5)%、(52.6±15.2)%和(51.1±13.1)%,各组治疗前后差异有显著性(P<0.05)。A、B两组比较,B组治愈率和总有效率显著高于A组(P<0.05)。而B、C两组及A、C两组比较,治愈率和总有效率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:短程补肾疗法可以显著改善肾虚型患者近期精液质量,尤其对肾阳不足型患者疗效更佳,且无明显不良反应。     

高、低生育力捐精者复苏精液功能指标的比较性研究(附40例报告)

目的:探讨可以全面有效评估捐精者生育力的精子功能指标,运用于复苏精液标本的筛选,旨在提高辅助生殖技术成功率。方法:根据捐精者精液使用的妊娠结局,收集上海市人类精子库高、低生育力捐精者的冷冻精液标本各20例,比较两组精液标本复苏后的精子浓度、活力、正常形态率、顶体完整率、DNA完整性以及线粒体膜电位。结果:高、低生育力组精液复苏经系列评估后,正常形态率分别为(18.50±6.10)%、(14.42±6.44)%;顶体完整率分别为(86.17±4.49)%、(80.04±7.52)%;精子DNA碎片率分别为(9.21±3.22)%、(15.72±8.20)%,以上指标经统计学分析两组之间具有显著性差异(P0.05)。但线粒体膜电位高生育力组[(56.75±18.80)%]与低生育力组[(52.23±18.86)%]之间无显著性差异(P0.05)。精子线粒体膜电位与精子活力呈显著正相关(r=0.760,P0.05),其他功能指标与精子浓度、活力无显著相关。结论:精子浓度、活力与正常形态率、顶体完整率以及DNA完整性可以有效评估捐精者复苏精液生育能力。     

男性不育患者精子形态学分析与生殖激素关系的研究

目的:研究男性不育患者精子形态与生殖激素的关系,探讨畸形精子症的发病机制。方法:研究对象为90例男性不育患者,年龄25～40岁,利用Prader睾丸计评估患者睾丸容积,根据世界卫生标准进行精液常规分析,利用化学发光法测定血清生殖激素和性激素结合球蛋白(SHBG)浓度,计算得出游离睾酮和生物活性睾酮的浓度。结果:90例男性不育患者精子浓度均在正常范围,根据精子形态分析结果分为3个研究组,即组1(正常形态精子<4%)、组2(正常形态精子≥4%且<10%)和组3(正常形态精子≥10%),每组30例。3组之间年龄没有统计学差异(P>0.05);左侧睾丸容积分别为(14.27±3.65)ml,(16.90±3.57)ml和(14.57±3.57)ml,P组1,2=0.006,P组1,3=0.741和P组2,3=0.014;右侧睾丸容积分别为(14.60±3.70)ml,(16.60±3.35)ml和(14.67±3.54)ml,P=0.05;血清泌乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、总睾酮(TT)和SH-BG在3组之间均没有统计学差异(P>0.05);血清游离睾酮(FT)水平分别为(0.25±0.07)nmol/L,(0.29±0.07)nmol/L和(0.31±0.13)nmol/L,P组1,2=0.086,P组1,3=0.010和P组2,3=0.364;生物活性睾酮(Bio-T)水平分别为(5.81±1.58)nmol/L,(6.78±1.55)nmol/L和(7.29±3.02)nmol/L,P组1,2=0.086,P组1,3=0.010和P组2,3=0.364。另外,正常形态精子百分率与血清FT、Bio-T水平之间均存在正相关(P<0.05)。结论:男性不育患者血清FT和Bio-T水平越高,则正常形态精子百分率越高,提示FT和Bio-T可能参与畸形精子症发病过程。     

Novel association between sperm deformity index and oxidative stress-induced DNA damage in infertile male patients

Aim: To investigate the impact of abnormal sperm morphology using the sperm deformity index (SDI) on reactive oxygen species (ROS) production and its correlation with sperm DNA damage. Methods: Semen samples were collected from men undergoing infertility screening (n=7) and healthy donors (n=6). Mature spermatozoa were isolated and incubated with 5mmol/L β-nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) for up to 24h to induce ROS. Sperm morphology was evaluated using strict Tygerberg‘s criteria and the SDI. ROS levels and DNA damage were assessed using chemiluminescence and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated fluoresceindUTP nick end labeling (TUNEL) assays, respectively. Results: SDI values (median [interquartiles]) were higher in patients than donors (2 [1.8,2.1] vs. 1.53 [1.52, 1.58], P=0.008). Aliquots treated with NADPH showed higher ROS levels (1.22 [0.30, 1.87] vs. 0.39 [0.10, 0.57], P=0.03) and higher incidence of DNA damage than those not treated (10 [4.69, 24.85] vs. 3.85 [2.58, 5.10], P=0.008). Higher DNA damage was also seen following 24h of incubation in patients compared to donors. SDI correlated with the percentage increase in sperm DNA damage following incubation for 24h in samples treated with NADPH (r=0.7, P=0.008) and controls (r=0.58, P=0.04).Conclusion: SDI may be a useful tool in identifying potential infertile males with abnormal prevalence of oxidative stress (OS)-induced DNA damage. NADPH plays a role in ROS-mediated sperm DNA damage, which appears to be more evident in infertile patients with semen samples containing a high incidence of morphologically abnormalspermatozoa.     

上游处理前后正常形态精子百分率与体外受精-胚胎移植结局的关系

目的:探讨取卵当日上游处理前后精子形态与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的关系。方法:选取因单纯输卵管因素不孕而拟行IVF-ET治疗的夫妇94对。使用Kruger标准评价取卵当日上游处理前后的精子形态。以正常精子形态百分率10%为界,分别将上游处理前后的精子分成两组:B1组上游处理前正常形态≥10%,B2组<10%;A1组上游处理后正常形态≥10%,A2组<10%。分别比较B1和B2组以及A1和A2组的IVF-ET治疗结局。结果:上游处理前,B1组的受精率、卵裂率、优质胚胎率、妊娠率和胚胎种植率分别为(72.90±4.23)%、(95.20±2.61)%、(23.35±5.19)%、39.58%、18.35%;B2组分别为(71.33±5.10)%、(95.71±2.88)%、(20.18±6.15)%、41.86%、21.28%;各项指标两组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。上游处理后,A1组受精率、卵裂率、优质胚胎率、妊娠率、胚胎种植率分别为(72.72±3.35)%、(95.64±2.04)%、(24.39±4.57)%、50.00%、23.87%;A2组分别为(70.27±8.82)%、(94.82±4.94)%、(13.45±7.39)%、9.52%、6.25%;两组之间受精率及卵裂率差别无统计学意义(P>0.05),但A1组的优质胚胎率、妊娠率及种植率明显高于A2组(P<0.05)。结论:取卵当日经上游处理后的正常精子形态百分率对IVF-ET结局有较好的预测价值。     

精液常规参数初检合格后不同时间点再分析结果及其与精子DNA损伤的关系

目的:探讨完全液化且常规参数初检合格的精液标本,于不同时间再分析的结果差异,及精子DNA碎片化指数(DFI)与精子活动力改变的相关性。方法:选取127份符合纳入标准的精液标本,分别于取样后15、30、60 min时采用计算机辅助精液分析(CASA)系统进行分析。精子形态分析采用Shorr染色法,吖啶橙试验(AOT)检测DFI。结果:3个时间点精子浓度、a级和b级精子百分率均无统计学差异(P>0.05)。取样15 min时a+b和a+b+c级精子百分率显著高于30和60 min时的结果(P<0.05),后两者间无统计学差异(P>0.05)。不同时间精子活动力各项指标中,至少有1项由"正常组"变为"异常组"的发生率为25.2%,两组间DFI和形态学无统计学差异(P>0.05)。取样后15到60 min变化的精子活动力指标中,a、a+b、a+b+c级下降值与DFI存在正相关性(P<0.05)。结论:取样后15 min内完全液化并初查参数合格的精液标本,30～60 min内复查时,a级和b级精子百分率波动并无显著差异,而a+b级及a+b+c级精子则可能显著下降,精子活动力指标可能出现异常。故应至少进行2次精液分析,综合评估生育力。如2次结果差异较大,尤其是a级精子百分率下降幅度较大,则可能与精子DNA损伤有关,需进一步行精子DNA损伤检测。     

Relationship between seminal ascorbic acid and sperm DNA integrity in infertile men

Ascorbic acid has recently been reported to protect sperm DNA from the damage induced by exogenous oxidative stress in vitro. But, there is no report on seminal ascorbic acid and sperm DNA fragmentation in infertile men. In this study, we asked whether sperm DNA damage correlates with seminal ascorbic acid levels. Sperm DNA fragmentation index (DFI) was analysed in 75 men by flow cytometry after acridine orange staining. We also measured the levels of seminal plasma ascorbic acid and total antioxidant capacity. Abnormal sperm DNA integrity (DFI >or= 30%) was observed in 12% of the patients with normal semen parameters and in 52% of the patients with abnormal semen parameters. There were significant correlations between the level of DFI and conventional semen parameters including sperm count, motility and morphology (r = -0.29, -0.55 and -0.53 respectively; p < 0.05). Seminal ascorbic acid level was significantly lower in the patients with leucospermia than the patient with normal semen parameters. Interestingly, a significantly greater percentage of men with abnormal DFI were observed in the patients with low levels of seminal ascorbic acid compared with those with normal or high levels of ascorbic acid (59% vs. 33%, p < 0.05). Men with insufficient seminal ascorbic acid frequently have sperm DNA damage.