ELISA法检测甲胎蛋白96例分析

近年来，应用“甲脂蛋白反向间接法血凝（简称血凝法），其费时，门诊患者不能及时得到诊断结果。最近我们采用了博赛生物试剂研究所生产的“甲胎蛋白单克隆抗体酶免诊断试剂盒”（ELISA法），具有灵敏度高，特异性强，操作简便、快速，结果易于判定等优点。标本来源及实验方法1．标本来源：本院住院肝炎及门诊患者96例，正常对照为健康人血清30人份血清分离后置一20C保存。2．方法：按甲胎蛋白单克隆机体酶免诊断试剂盒说明书进行操作。3．RPIb＼法及EIA法均按说明书操作。结果：用ELISA、RPHA、EIA、三种方法对96例患者血清（大…     

甲胎蛋白单克隆抗体酶联免疫诊断试剂盒的研制及应用

目的 为研制一种特异性强、灵敏度高、操作简便快速的甲胎蛋白（AFP）单克隆抗体酶联免疫诊断试剂盒，用于定量检测血清中的AFP。方法 将自行研制的AFP单克隆抗体（AFP-McAb）标记辣根过氧化物酶，AFP多抗（AFP-PcAb）包被微孔反应板，研制成AFP单克隆抗体酶联免疫诊断试剂盒。血清中的AFP与包被于微孔板上的AFP多抗结合，再与AFP酶标抗体结合，在TMB底物液作用下形成肉眼可见的蓝色。结果 该诊断试剂盒对305份临床病人血清进行了检测，结果与放射免疫法相比总符合率为98．6％；对215份临床病人血清进行检测，结果与化学发光法相比总符合率为99．0％；灵敏度达10ng／ml。结论 该试剂盒检测AFP特异性强、灵敏度高、操作简便、结果准确，具有临床推广应用价值。     

用酶联免疫法替代放射免疫法检测胰岛素、C—肽及其在临床上的应用

目的：用酶联免疫的方法检测胰岛素、C－肽。方法：胰岛素采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验进行检测；C－肽采用抗原竞争酶联免疫吸附实验进行检测。结果：通过对30份病人血清进行放免和酶免检测，两种方法具有良好的相关性，无显性差异；同一份标本重复试验，此两种试剂盒具有较高的精确度；通过对健康组、IGT组及2型糖尿病组病人胰岛素、C－肽结果分析，IGT组及2型糖尿病组病人均有不同程度的胰岛素抵抗。结论：酶免法检测胰岛素、C－肽具有操作简单、灵敏度高、特异性强、稳定性好、不需要特殊设备、检测快速、准确、对操作无损害，使病人及时得到诊断和治疗。     

丙肝抗体ELISA检测质控探讨

<正> 抗—HCV酶联免疫吸附试验(ELISA)法由于快速、简便、价格低、灵敏度和特异性比较好,目前在医院和血站得到广泛应用,对丙肝鉴别诊断和预防输血后丙肝病毒的传播发挥了重要作用,为了解试剂盒质量,笔者用抗—HCV临床血清盘对两组试剂盒进行重复检测,现报告如下:1、资料与方法1·1 仪器 全自动样本处理机AT和费米全自动酶免分析仪,以上由瑞士哈美顿公司制造。1·2 材料1·2·1 抗—HCV ELISA试剂盒 厦门新创实业有限公司,批号8011004;洛阳华美实业有限公司,批号971211。以下分别用A和B表示。     

单纯疱疹病毒IgM抗体(1+2型)时间分辨免疫荧光分析法的建立

目的利用时间分辨免疫荧光分析法研制单纯疱疹病毒IgM抗体(1+2型)检测试剂盒。方法基于"捕获法"原理,在96孔酶标板上包被抗人IgM单克隆抗体,铕标记特异性单纯疱疹病毒1型和2型单克隆抗体作为示踪物,建立单纯疱疹病毒IgM抗体(1+2型)检测试剂,并对自研试剂盒的各项性能进行评价,与同类试剂盒进行方法学比对试验。结果自研试剂盒的灵敏度与ELISA比较有较大的提高,分析内变异系数≤4.29%,分析间变异系数≤6.15%;血清盘检测结果与该血清盘说明书提供的Gull IFA试剂的测试结果一致;与进口酶免法试剂同时检测293份临床样本,自制试剂盒的临床敏感性达100%,临床特异性达98.88%,Kappa值为0.940(P0.001)。结论自研试剂盒灵敏度高、特异性强、精密度好,与商业化的同类产品检测结果一致性好,能满足临床应用的需要。     

ELISA一步法检测HBsAg应用评价

<正> 为对酶免(ELISA)法有一较全面的了解,本文以放免(RIA)法为参比方法,对酶免(ELISA)法的灵敏性,准确性和重复性作了评价,结果如下:1.临床资料1·1 受检标本 酶免法试剂盒阳性对照和我院门诊与住院病人待测血清。1·2 试剂 酶免试剂盒深圳月亮弯生物制品公司生产。放免试剂盒维坊3V诊断技术公司生产。1·3 实验仪器 FT—630 Gr—计数仪。511型酶标分析仪。2.实验方法     

两种HBsAg试剂检测定值血清的结果比较

室内质控(IQC)是评价实验室工作的可靠程度,保证实验室工作质量的主要措施.目前国内采供血机构都使用试剂盒对献血员进行筛选,因此在选用试剂盒时要尽可能选择灵敏度高,特异性强,重复性好的产品,这样定值血清在试剂盒的选择和检验过程中的监控就显得更加主要.为此我站从1999年5月开始选用定值血清对化验检测A1T、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV及梅毒的试剂盒进行连续室内质控以监控每批试剂的稳定性及灵敏度.     

几种酶免法试剂盒检测艾滋病抗体结果比较

酶免法是一种灵敏度较高的初筛检验方法，但试剂质量关系到检测结果的准确性和可靠性。本文用几种艾滋病抗体酶免法试剂盒检测，并进行了比较，以便选择一种较好的艾滋病抗体酶免法试剂盒。     

三种IgM酶联免疫试剂盒在麻疹病例实验室诊断中的应用比较

目的对三种抗麻疹病毒IgM酶联免疫试剂盒(海泰快速法、海泰普通法和德国试剂A)在麻疹病例早期诊断的应用进行比较。方法采用双盲法,用三种试剂盒对麻疹疑似病例急性期血清样品平行检测。结果海泰快速法、海泰普通法和德国进口试剂A等三种抗麻疹病毒IgM酶联免疫试剂对170份麻疹疑似病例急性期血清样品的阳性检出率分别为67.65%、64.71%和62.35%;灵敏度分别为100%、99.1%和94.4%;特异度分别为88.7%、95.2%和93.5%;调整一致性分别为95.7%、97.5%和93.7%;约登指数分别为0.887、0.942和0.880。结论三种试剂盒检测结果符合率较高,另外海泰快速法的灵敏度最高,海泰快速法和海泰普通法在敏感性及特异性上都有较为理想的结果,而且海泰快速法试剂操作更为简便、快速,更适合于基层疾病控制部门快速诊断麻疹病例,采取措施,控制疫情。     

免疫检测技术的临床应用

上世纪60年代建立的放射免疫技术和70年代建立的酶联免疫吸附技术，因其具有灵敏度高、特异性强、操作简单、易于组装试剂盒等优点，已广泛应用于医学、生物学的各个领域，成为进行基础医学研究及医学检验的重要技术手段。     

手工法+酶标仪酶免检测系统和FAME24/20全自动酶免检测系统的比对研究

目的:评价手工法+酶标仪酶免检测系统和FAME24/20全自动酶免检测系统使用相同试剂检测同一项目所得结果的一致性,并对手工法+酶标仪酶免检测系统进行使用前性能确认。方法:手工法+酶标仪酶免检测系统为X系统,FAME24/20全自动酶免检测系统为Y系统;使用X、Y系统及相同的HBsAg、抗-HCV、抗-HIV及TP四种试剂盒,每天检测四种试剂盒的内部质控品和同一外部质控品,并且连续20天重复实验,分别在同一块微板内进行同一批次检测20孔质控品和50例血液标本,计算批间CV值,进行X2检验和Kappa一致性检验。结果:X和Y系统检测结果批间CV值均15%,符合率为100%(K=1),X和Y系统经X2检验差异无统计学意义(P0.05)。结论:两种酶免系统的检测结果具有一致性,X系统完全可以配合Y系统同时应用于血液标本的免疫项目检测。     

酶联免疫法和胶体金法对乙肝病毒表面抗原检测的对比分析

<正>乙肝病毒表面抗原(HBsAg)检测的传统方法是酶联免疫法,特异性强,灵敏度高,重复性好,但操作较为复杂、费时,仅适用于批量检测。为此,我科购进了乙肝病毒表面抗原胶体金法检测试剂盒,此法简单快速,便于单份标本独立操作,其缺点     

未提取血浆β—内啡肽的放射免疫分析

本工作采用自制的亲和力高，滴度好，特异性强的免抗β—内啡肽血清，建立了稳定性好，灵敏度高，回收率佳，操作简便的未提取血浆β—内啡肽含量的放射免疫分析技术，适用于临床推广。     

不同免疫检验方法检测抗HIV结果的可靠性分析

目的关于对不同免疫检验方法检测抗HIV结果的可靠性进行研究,对临床加价值展开分析。方法选取我院2015年10月至2016年10月在院就诊治疗的40例艾滋病患者,这40例患者均确定其为艾滋病患者,给患者进行明胶颗粒凝集实验(PA法)以及酶联免疫吸附实验(ELISA)、以及免疫蛋白印迹法(WB),并对检验结果进行总结分析,观察对比三种检测方法的灵敏度、准确率还有特异性。结果 WB检测法的灵敏度为100%,准确率为100%,特异性为100%。酶联免疫吸附法的灵敏度为100%,准确率为65%,特异性为65%。明胶颗粒凝集实验法的准确率为100%,准确率为87.5%,特异性为87.5%。结论在临床上可以根据现实需要来选用方法,WB法远大于酶联免疫吸附试验法和明胶颗粒凝集试验法,PA法可以作为ELISA法的一个补充,可以进一步确诊,以此来提高诊断的准确率,在现实中应用有重要的价值。     

定值血清在室内质控中的应用

室内质控 (ＩＱＣ)是评价实验室工作的可靠程度 ,保证实验室工作质量的重要措施。在目前国内大多数采供血机构都使用试剂盒对献血员进行筛选 ,由于某些方面原因 ,如感染后的窗口期等问题还不能解决 ,因此在选用试剂盒时要尽可能地选择灵敏度高 ,特异性强 ,重复性好的产品 ,这样定值血清在试剂盒的选择和检验过程中的监控就显得更加重要。为此我站从1996年 12月开始选用定值血清对化验检测的ＡＬＴ、ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＣＶ、抗 ＨＩＶ及梅毒的试剂盒进行比较筛选 ,并在试剂的使用过程中进行连续室内质控以监控每批试剂的稳定性及灵敏度 ,现…     

乙肝两对半两种检测方法比较分析

目的:比较微粒子酶免分析技术(MEIA)与酶联免疫法(ELISA )检测乙型肝炎病毒(HBV)表面标志物(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc,以下简称乙肝两对半)的结果,探讨这二种方法的符合率.方法:分别用酶联免疫法和微粒子酶免分析技术检测98例成人血清标本乙肝两对半,将两种检测结果进行分析、比较.结果:两种方法检测乙肝两对半的HBsAg、表面抗体(HBsAb)和e抗原(HBeAg)无显著差异(P>0.05),e抗体(HBeAb)和核心抗体(HBcAb)有显著差异(P<0.05)结论: ELISA 法灵敏度高,易观察,适合大规模标本的测定.MEIA法定量检测乙肝两对半具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点,是一种理想的乙肝两对半定量检测方法.     

乙型肝炎病毒核心抗体IgM 时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

目的 利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立乙型肝炎病毒抗HBc-IgM的检测试剂盒.方法 采用捕获法建立抗HBc IgM TRFIA检测试剂盒.对自制试剂盒的各项性能指标进行评估.结果用自制质控品检测分析内和分析间的精密度分别为4.8～7.2%,7.5～8.6%;与抗-HBs,抗-HBc IgG和抗-HBe无交叉反应;对584份血清样本进行检测并与国产酶联免疫法试剂盒对比,结果 显示自制试剂盒的灵敏度更高;300份健康者血清样本检测结果表明,该试剂盒的cutoff值=阴性对照荧光值×3.5.结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代酶免法试剂盒.     

两种方法测定血清甲胎蛋白的结果比较

甲胎蛋白 (ＡＦＰ)为胎儿特异性血清蛋白 ,成人血清中含量极少 ,在临床作为肿瘤标志物 ,对肿瘤的普查、诊断、判断预后和转归及评价治疗效果和高危人群随访观察等方面都具有较高实用价值[1] 。ＡＦＰ的测定 ,临床大多采用酶标法及放射免疫法 ,该类方法的可测范围为 10～ 4 0 0ｎｇ/ｍｌ;敏感范围为 30～ 10 0ｎｇ/ｍｌ[2 ] 。近年来 ,我们发现磁性微粒分离的酶联免疫测定法 (ＭＡＩＡ)简称磁酶免法 ,具有特异性强、灵敏度高、无污染等特点 ,在与酶标法测定ＡＦＰ的结果比较 ,存在显著差异。现将实验结果报告如下。1　对象和方法1.1　对象　…     

单克隆与多克隆双抗体夹心法测定可溶性白细胞介素2受体试剂盒的研制

采用抗白细胞介素2受体(IL-2R)的单克隆与多克隆抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG,建立了高特异性及高灵敏度的双抗体夹心法测定可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)。结果,酶联免疫吸附试验(ELISA)测得兔抗人IL-2R多克隆抗体效价达1:10~4,免疫双向扩散法测得羊抗兔抗体效价高达1:256。本试剂盒检测sIL-2R的特异性强,灵敏度为100U/ml,在28C存放一年,稳定性不变。此方法操作简单,适用于临床和基础研究。     

血站抗HBV试剂参考品的建立

目的建立抗HBV（乙型肝炎病毒hepatitis B virus）试剂参考品以用于评价血站系统使用的抗HBV试剂盒批检的鉴定。方法收集无偿献血抗HBV阳性标本和阴性标本各100份,对其进行中和实验检测,并结合核酸检测结果。制成血浆参考盘的阴性、阳性及精密度、灵敏度参考品,其中灵敏度参考品是通过将阳性血浆倍比稀释并结合中和实验确证获得。以上样品组成本室抗HBV参考品,并对上述制备而得的参考品用四种试剂进行酶免实验验证,和国家标准参考品进行比对。结果上述参考品由20份阳性、20份阴性、4份灵敏度和1份精密度参考品组成。用四种试剂经ELISA检测后与国家参考品进行比对,符合率为100％。结论本套参考品与国家参考品酶免实验符合度高,稳定性好。灵敏度检测结果适宜本实验室应用。