随机扩增多态DNA分析技术及其在寄生虫学中的应用

<正> 随机扩增多态DNA(random amplified poly-morphic DNA,RAPD)分析技术,又称为任意引物PCR(arbitrarily primed PCR,AP-PCR),是90年代Williams和Welsh等几乎同时发明的将随机引物与PCR技术结合,对复杂基因组DNA分子多态性分析一种技术。1 RAPD的基本原理 RAPD技术是利用一系列单一的碱基序列随     

PCR在肿瘤病理学上的应用

聚合酶链反应(PCR)是近几年才发展起来的一项新技术,应用PCR技术研究肿瘤是目前病理学领域的热点之一。本文报告了应用PCR扩增ras基因和T细胞β受体基因重排的初步结果,并对应用该技术时的注意事项进行了讨论。     

PCR检测男性生殖道沙眼衣原体感染的临床意义

<正> 近年来,沙服衣原体(CT)引起的眼外疾病,如不育、非淋菌性尿道炎、副睾炎、前列腺炎呈逐年上升趋势。有关方面的研究也日益受到重视。本文应用聚合酶链反应(PCR)技术检测精液CT感染率,以期探讨男性生殖道感染CT的临床意义。现将结果报告并分析如下。     

PCR-STR和PCR-SSCP方法对苯丙酮尿症基因诊断的意义

①目的 探讨苯丙酮尿症的基因诊断方法。②方法 采用聚合酶链反应－短串联重复序列（PCR－STR）连锁分析技术和聚合酶链反应－单链构象多态（PCR－SSCP）分析技术,对5个苯丙酮尿症家系中17个成员的苯丙氨酸羟化酶基因突变进行分析。③结果 用PCR－STR法能准确进行基因诊断的家系3个,50％能排除诊断的家系3个;用PCR－SSCP法检出3例已知突变。④结论 联合应用PCR－STR和PCR－SSCP技术可以提高苯丙酮尿症的基因诊断率。     

聚合酶链反应检测乙肝患者血清HBV-DNA及其临床意义

聚合酶链反应(polymerase chain Reac-tion,PCR)具有敏感、特异、简便和快速等优点。我院在建立PCR检测技术的基础上,用以测定乙型肝炎患者的HBV-DNA,现报告如下。     

PCR介导的ret基因体外定点突变

目的:利用PCR技术介导ret基因cDNA上第2 753位碱基的体外定点突变.方法:利用PCR技术进行定点突变,采用Dpn Ⅰ进行原始模板消化.经Amp抗性、PCR技术初步筛选,通过序列分析进行确证.结果:Amp抗性及PCR筛选结果均为阳性;序列分析提示,2 753处碱基由T→C.结论:成功完成了ret基因的体外定点突变.     

两种方法用于HPV基因检测的比较

目的探讨PCR结合反向杂交分析技术与第二代杂交捕获技术（HC2）用于检测人乳头状瘤病毒（HPV）的一致性。方法同时使用两种方法对364例标本进行平行检测;使用PCR结合反向杂交分析技术对2561例标本进行检测、HC2技术对1327例标本进行检测。结果平行试验,PCR结合反向杂交分析技术高危型阳性率为31.6%,HC2技术阳性率29.4%,两者结果无显著性差异（P〉0.05）,总符合率为89.6%。分开试验,PCR结合反向杂交分析技术高危型阳性率为32.6%（835/2561）,HC2技术阳性率为30.7%（407/1327）,两者结果无显著性差异（P〉0.05）。结论 PCR结合反向杂交分析技术与HC2技术检测HPV结果之间具备良好的符合性,两者都适合用于临床检测与筛查。     

定量PCR分析仪的临床应用前景——AG-9900 Robo Master全自动荧光定量PCR分析仪

荧光探针杂交定量PCR技术和全自动定量PCR分析仪的出现,使PCR扩增和产物分析整个过程完全在同一个封闭系统下完成,并在分析软件支持下实现对PCR扩增产物进行实时动态监测和自动得出定量结果。彻底解决了PCR技术中扩增产物污染和不能定量的问题,为PCR技术作为常规检测技术应用于临床开辟了广阔的前景。     

PCR和核酸探针法与ELISA法检测乙肝感染的比较

PCR(聚合酶链反应的简称)是近年来发展起来的分子微生物学技术。核酸探针技术是属于生物学技术领域的一个先进检测手段。1990年10月,作者对133份已用ELISA法检测乙肝二对半的血清标本用PCR和核酸探针技术进行了HBV—DNA检测以比较此二法检测乙肝感染的灵敏度,结果报告如下。     

PCR技术及在临床检验中的应用

聚合酶链式反应(Polymerase Chain ReactionPCR)是体外酶促反应合成特定核酸序列的一种方法。1985年美国年轻科学家Mullis的这一具有划时代意义的技术发明,使人们多年来期望能在体外无限扩增DNA的梦想变为现实。之后,PCR技术迅速渗透到生命科学的各个领域,成为当今重要的分子学生物学技术之一;PCR技术本身及相关技术也以惊人的速度发展,产生了许多新型的PCR技术或由PCR衍生的新技术。现在,PCR技术已成为生命科学实验室获取某一日标DNA片段的常规技术,广泛应用于基因分离、克隆和核酸序列分析,突变体和重组体构建,基因表达与调控的研究,多态性分析,遗传病和传染病诊断,肿瘤机制的探查,法医学和考古学等领域或学科。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。     

儿童腹痛328例病因诊断及分析

目的：根据儿童急性腹痛的特点,诊断儿童腹痛应综合临床及相关检查提供的依据,做出准确诊断,给予适当治疗。方法：对临床328例腹痛患儿进行选择性辅助检查和分析。结果：小儿腹痛病因复杂,腹腔内疾病占64．63％,共17种病因;腹腔外疾病占35．37％,共6种病因。结论：仔细询问病史、认真体格检查、密切观察病情、针对性地选择辅助检查,在儿童腹痛的诊断上具有重要的意义。