RNA干扰对大鼠血管内皮细胞血管紧张素转换酶表达的抑制作用

目的用RNA干扰技术选择性下调大鼠血管内皮细胞(ECs)上血管紧张素转换酶(ACE)的表达。方法构建携带ACE基因特异短发夹RNA(shRNA)编码序列的质粒载体pACE-shRNA,与脂质体转染剂制备成不同比例的复合物,转染原代培养的大鼠主动脉ECs,在荧光显微镜下检测转染效率,用四甲基氮唑盐比色法检测细胞存活率,选择出质粒与转染剂的最佳配比。然后以最佳配比复合物转染ECs,分别于转染前及转染后24、48、72h通过半定量RT-PCR和Western blot法检测ACE的表达。结果质粒与转染剂的最佳配比为质粒1.0μg、转染剂4μl,此时转染效率为(81.2±6.2)%,细胞生存率为(90.2±4.1)%。以最佳配比复合物转染ECs后24h,ACE的mRNA和蛋白质表达无明显变化;转染后48h,表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);72h时表达更低,只有微弱的条带显示。结论RNA干扰能选择性下调原代培养的大鼠血管ECs上ACE的表达,这可能为心血管疾病基因治疗的研究和应用提供新方法。     

RNA干扰血管紧张素转换酶对自发性高血压大鼠血压及心肌重构的影响

目的 用RNA干扰技术下调血管紧张素转换酶(ACE)表达,观察其对自发性高血压大鼠血压及心肌重构的影响.方法 自发性高血压大鼠随机分为3组,即空白对照组(尾静脉注射生理盐水),病毒对照组(尾静脉注射对照腺病毒),治疗组[尾静脉注射表达ACE基因特异性短发夹RNA(shRNA)的重组腺病毒载体],同时设WKY正常血压对照组.以上各组大鼠均于实验的第1、16天各注射1次.干预前后检测尾动脉压的变化.于首次注射后第3天,用RT-PCR及Western blot法检测心肌、主动脉组织中ACE mRNA及蛋白的表达,ELISA法检测血清中ACE的含量.实验结束时,检测左心重/体重及心肌胶原蛋白的含量,并用透射电镜观察心肌超微结构的变化.结果 治疗组于每次注射后,尾动脉压均明显下降22 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)左右,单次注射后降压作用至少可持续14 d,累积降压幅度达38 mm Hg左右,而空白对照和病毒对照组血压则持续升高.治疗组心肌、主动脉组织中ACE mRNA及蛋白表达明显低于空白对照组和病毒对照组(P＜0.05),而与WKY组比较差异无统计学意义.治疗组血清ACE含量(16.37±3.90)ng/ml也明显低于空白对照组(48.26±1.50)ng/ml和病毒对照组(46.67±2.82)ng/ml,P＜0.05,而与WKY组(14.88±3.15)ng/ml比较差异无统计学意义.治疗组左心重/体重与心肌胶原蛋白含量[2.24±0.19与(1.283±0.019)μg/mg]明显低于空白对照组[3.21±0.13与(1.686±0.013)μg/mg]和病毒对照组[3.13±0.12与(1.682±0.009)μg/mg],P均＜0.05,但还未降到WKY组水平[2.06±0.11与(1.257±0.019)μg/mg].电镜观察显示治疗组心肌超微结构得到了明显改善.结论 RNA干扰可有效下调ACE表达,降低自发性高血压大鼠血压,改善心肌重构.RNA干扰有望成为高血压病基因治疗的新方法.     

血管紧张素转换酶基因插入/缺失多态性检测方法的研究

目的 采用三条引物法进行力紧张素转换酶（ACE）基因分型检测,并与Rigat法进行比较,以探讨Rigat造成DD型分型的错判率,并用此方法检测了中国汉族人群中ACE基因I／D基因型的分布频率以及插入（I）／缺失（D）多态性与高血压病（EH）间的相关性。方法 EH患（EH组）206例,用上述两种方法进行ACE基因分型;正常血压组（NT组）156例以及核心家系25个共118例,三条引物法进行ACE基因分型。结果 EH组Rigat法得出的DD型比例较三条引物法高。与三条引物法相比较,Rigat法对DD型的错判率为13．04％。用三条引物法进行基因分型的结果如下：（1）在NT组,ACE各基因型的分布频率为Ⅱ型0．51,ID型0．41,DD型0．08。等位基因频率为：I0．71,D0．29。（2）25个EH家系所有成员的基因分型结果,完全符合孟德尔遗传规律。（3）EH与NT两组间基因型和等位基因频率无显性差异。结论 三条引物法1次完成ACE基因分型,有良好的特异性、准确性和重复性。     

原发性高血压血管紧张素转换酶基因多态性与性别的关系

目的　研究血管紧张素转换酶 (ACE)基因插入 缺失 (I D)多态性与不同性别原发性高血压 (EH)的关系。方法　应用聚合酶链反应技术分析 138例原发性高血压患者及 6 0名正常对照组的ACE基因型。结果　原发性高血压组缺失纯合子 (DD)基因型及D等位基因频率显著高于对照组 (P<0 .0 5 )。且男女两性相比 ,原发性高血压组男性DD基因型频率显著高于女性 (P <0 .0 5 ) ,收缩压水平亦显著高于女性 (P <0 .0 5 )。结论　原发性高血压与ACE基因I D多态性之间存在一种特殊的伴性关系。     

血管紧张素转换酶基因多态性与扩张型心肌病的关联研究

目的研究血管紧张紊转换酶基因插入/缺失(I/D)多态性与扩张型心肌病的关系.方法应用聚合酶链反应技术检测83例扩张型心肌病患者与正常对照组155名健康受试者血管紧张素转换酶基因第16内含子I/D多态性.结果正常对照组血管紧张素转换酶基因DD、ID、Ⅱ型频率分别为16.1%、51.6%和32.3%,D、I等位基因频率分别为0.419和0.581;扩张型心肌病组血管紧张素转换酶基因DD、ID、Ⅱ型频率分别为37.4%、30.1%和32.5%,D、I等位基因频率分别为0.524和0.476.扩张型心肌病患者血管紧张素转换酶基因DD型(X2=13.528,P＜0.001)和D等位基因(X2=4.781,P＜0.05)频率均高于正常对照组.结论血管紧张素转换酶基因DD型和D等位基因可能是扩张型心肌病遗传易感性的基因标志之一.     

白大衣高血压血管紧张素转换酶基因多态性分析

目的：研究白大衣高血压与血管紧张素转换酶（angiotensin converting enzyme，ACE）基因I／D多态性的关系。方法：应用多聚酶链式反应（PCR）方法对白大衣高血压，高血压病Ⅰ级患者和正常血压者各30例进行ACE I／D基因型检测，并分析比较。结果：白大衣高血压和高血压病Ⅰ级组Ⅱ基因型低于正常组（P〈0．01），白大衣高血压和高血压病Ⅰ级组DD基因型高于正常组（P〈0．01），白大衣高血压ID基因型显著高于高血压病Ⅰ级组和正常组（P〈0．01）。高血压病Ⅰ级组ID基因型低于正常组（P〈0．01）。结论：白大衣高血压与ACE基因多态性有关，ID基因型者易患白大衣高血压。     

法舒地尔对大鼠心肌血管紧张素转换酶2和血管紧张素(1-7)的影响

目的探讨法舒地尔对压力超负荷大鼠心肌血管紧张素转换酶2(ACE2)和血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]的影响。方法 50只SD大鼠制备压力超负荷模型,术后4周末,将存活36只大鼠随机分为假手术组8只、模型组10只、法舒地尔高剂量组(高剂量组)9只和法舒地尔低剂量组(低剂量组)组9只。术后8周末,计算各组左心室质量指数(LVMI);观察心肌组织HE和Masson胶原染色;碱水解法测定心肌羟脯氨酸(HYP)含量;免疫组织化学分析ACE和ACE2水平;RT-PCR和ELISA法分别检测ACE2mRNA表达、AngⅡ和Ang(1-7)浓度。结果与假手术组比较,模型组心肌间质大量胶原蛋白沉积,LVMI、HYP、ACE和AngⅡ明显升高,ACE2、ACE2mRNA及Ang(1-7)明显降低(P<0.01);与模型组比较,高剂量组和低剂量组LVMI、HYP明显降低,间质胶原蛋白沉积明显减轻,ACE和AngⅡ明显降低(P<0.05),ACE2、ACE2mRNA和Ang(1-7)明显升高(P<0.01)。结论法舒地尔抑制压力超负荷诱导的心肌纤维化的作用可能与局部ACE-AngⅡ及ACE2-Ang(1-7)的改善有关。     

云南纳西族人群血管紧张素转换酶基因多态性与脑血管病的相关性研究

目的 探讨血管紧张素转换酶(angiotension-convertion enzyme,ACE)基因插入/缺失(insertion/deletion,I/D)多态性与云南丽江纳西族脑血管病的相关性.方法 纳入58例纳西族脑梗死患者、32例纳西族脑出血患者以及50例性别和年龄相匹配的纳西族健康对照者,采用聚合酶链反应-...     

海南黎族血管紧张素转换酶基因多态性与高血压并动脉硬化的相关性研究

目的 探讨海南黎族人群血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与高血压并动脉硬化的相关性.方法 采用聚合酶链反应(PCR)检测260例海南黎族动脉硬化患者组及276例黎族健康人对照组的ACE基因插入或缺失(I/D)多态性,观察DD、DI、Ⅱ基因型频率及等位基因频率.用高分辨超声技术分别检测DD、DI、Ⅱ 3个亚组的平均颈动脉内-中膜厚度(MIMT). 结果 (1)动脉硬化组DD、DI、Ⅱ基因型频率为15.0%、37.3%、47.7 ;D及Ⅰ等位基因频率分别为33.7%及66.3%.对照组DD、DI、Ⅱ基因型频率17.8%、40.6%、41.7%,D及Ⅰ等位基因频率分别为38.0%及62.0%.两组间DD、DI、Ⅱ基因型频率及D、Ⅰ等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05).(2)动脉硬化组在年龄、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、载脂蛋白A(apoA)、载脂蛋白B(apoB)、收缩压、舒张压显著高于对照组(P<0.05),而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著低于对照组(P<0.05);Logistic回归分析结果 显示,TG(OR=2.14)、apoA(OR=360.39)、收缩压(OR=1.21)、舒张压(OR=1.08)、ACE DD基因型(OR=0.30)与高血压并动脉硬化相关(P<0.05).ACE DD型亚组的MIMT比DI和Ⅱ型亚组显著增高(P<0.05). 结论 ACE DD基因型增加了颈动脉硬化易感性,是海南黎族高血压并动脉硬化患者的危险因素,可作为动脉粥样硬化的一个早期预测因子.     

血管紧张素转换酶基因型与氢氯噻嗪降压疗效的相关性研究

目的　探讨高血压病患者血管紧张素转换酶 (ACE)基因不同基因型与氢氯噻嗪降压疗效的关系。方法　 5 18例高血压病患者同时服用氢氯噻嗪 12 5mg ,每日 1次 ,共 6周。资料完整的 5 0 4例患者按II、ID、DD三种基因型分组 ,比较不同基因型间的降压疗效。结果　II、ID、DD基因型患者收缩压下降值分别为 5 7mmHg(1mmHg =0 133kPa)、5 1mmHg、10 4mmHg ,DD基因型患者收缩压下降值大II、ID两型患者 ,差异具有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;三组间舒张压下降值、平均动脉压下降值差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;多元线性回归结果表明DD基因型、治疗前醛固酮水平、血钠水平是影响收缩压下降值的主要因素。结论　不同ACE基因型患者对氢氯噻嗪的反应存在差异 ,DD基因型患者收缩压下降最明显。     

急性肺栓塞患者严重程度指数与血清钠水平分析

目的分析急性肺栓塞(APE)患者肺栓塞严重程度指数(PESI)与血清钠水平的病情评估价值和关系。方法回顾性分析经CT肺动脉造影确诊的APE患者临床资料。结果 22例患者入选,PESI低危组均为低危APE,PESI中、高危组的中、高危APE发生率为66.67%,与PESI低危组比较差异显著;共6(27.27%)例APE患者出现低钠血症,其中2(33.33%)例在诊断一月内死亡,低钠血症组和非低钠血症组中、高危APE发生率比较无显著性差异;APE患者血清钠水平与PESI相关系数为-0.318(P=0.149)。结论PESI而非低钠血症对APE病情严重性具有指导价值,合并低钠血症的APE患者一月内死亡率高。     

急性肺栓塞大鼠血管内皮功能动态观察

目的探讨急性肺栓塞大鼠血浆内皮素(ET)、NO水平的动态变化,了解血管内皮功能的改变。方法雄性SD大鼠32只,随机分为对照组、栓塞24h组、栓塞1周组、栓塞2周组,每组8只。医用明胶海绵微粒制备大鼠急性肺栓塞模型,测定血浆ET、NO,HE染色。结果与对照组比较,栓塞24h组、栓塞1周组、栓塞2周组大鼠血浆ET水平呈持续升高状态,NO水平呈持续降低状态。光镜下观查,栓塞2周组大鼠肺动脉内明胶海绵多数溶解。结论急性肺栓塞大鼠血浆ET和NO水平与肺血管内皮功能损伤有关。     

肺栓塞的心电图改变及意义

目的探讨肺栓塞心电图改变及其意义。方法106位患者每人选一份心电图,根据肺血管阻塞面积小于或大于30%将106份心电图分为A、B组,其心电图改变分解为21项,进行统计分析。结果106份心电图,正常项34%,异常项68%;A组66份,正常项52%,St、QRS电轴右偏15%～26%,S1QⅢTⅢ等项0%～6%;B组40份,St、QRS电轴右偏55%～73%,顺钟向转位、STⅡ、Ⅲ、avF、V1～3下移28%～38%,S1QⅢTⅢ等项3%～23%。结论肺栓塞心电图改变与肺血管阻塞面积有关,而且是非特异性、非诊断性和有价值的,正确应用有助于肺栓塞诊断。     

Diagnosis and treatment of acute pulmonary embolism

Novelties include the introduction of sPESI, a simplified index of pulmonary embolism severity, and hs-cTnT as a new biomarker, already in use in clinical practice.Another novelty is the term unstable pulmonary embolism characterized by either the presence of cardiogenic shock or the need for ventilatory support.The main new information is the evidence of a large US study of treatment of unstable pulmonary embolism reporting a 67% reduction in overall mortality of unstable patients when treated with thrombolytic treatment when compared with the anticoagulation in the same unstable patients.The reduction was obtained across all age groups as well as in comorbid patients.Results of the above study clearly show that, in the absence of absolute contraindications, all unstable APE patients, including the elderly and comorbid patients, should be treated with thrombolysis.By contrast, the comparison of thrombolytic and anticoagulation therapy in the treatment of submassive pulmonary embolism in the PEITHO trial provided unconvincing results, perhaps because of the low mortality rates of the whole group of 1004 patients.Also reported are data from a US study of embolectomies. Caval filter insertion reduced the mortality rates in all analyzed groups. Based on the facts, it is believed another appropriate indication is that of temporary caval filter insertion in patients with severe massive APE, in whom recurrence of pulmonary embolism from pelvic veins has not been ruled out by CT venography.Hemodynamically stable patients should be treated with LMWH or unfractionated heparins, or rivaroxaban or apixaban.At the end of hospitalization a control echocardiography and calculation of residual pulmonary vascular obstruction on a perfusion scan should be performed.     

急性肺栓塞的心电图变化

目的 　 探讨心电图在诊断急性肺栓塞中的作用。　方法　回顾性分析近两年收治的 13例急性肺栓塞患者入院时、溶栓后及治疗 2～ 4周后心电图的变化。　结果　 (1)入院时心电图变化 :心动过速 8例 ,右束支阻滞 3例 ,V1 导联T波、V1 ～V2 导联T波、V1 ～V3导联T波、V1 ～V4 导联T波、V1 ～V5导联T波、V1 ～V6 导联T波倒置为 10、 6、 4、 3、 2和 1例 ,SⅠ >0 1mV、TⅢ 、QⅢ 、SⅠQⅢTⅢ 分别为 7、 7、 9和 7例 ;(2 )溶栓后心电图变化 :心动过速消失 7例 ,右束支阻滞消失 1例 ,胸前导联T波倒置加深 4例 ,SⅠ 变浅 ,QⅢ 减小或消失 ,TⅢ 倒置变浅或直立 3～ 4例 :(3)治疗 2～ 4周后心电图变化 :心动过速消失 ;胸前导联T波直立数增加 ,ST段回基线 ,QⅢ 进一步减小或消失 ,TⅢ 倒置变浅或直立。　结论　急性肺栓塞心电图变化是多变的 ,需动态观察并密切结合临床加以识别。     

超声心动图诊断急性肺动脉栓塞的价值

目的 :分析评价床旁超声心动图 (ECHO)在急性肺动脉栓塞 (APE)诊断中的实用价值。方法 :采用经胸ECHO对临床怀疑APE的 5 8例患者在 4～ 6h内行床旁ECHO检查。结果 :超声直接检出主肺动脉及左右肺动脉主干近端血栓者 4例 ,均被外科手术或肺动脉造影证实。本组具有典型右心负荷过重超声征象者 15例 (其中包括具有超声直接征象的 4例 ) ,核素肺灌注 通气扫描提示为双肺多发性大面积栓塞。仅右房、右室轻度增大或肺动脉轻度增宽者 19例 ,ECHO无改变者 2 4例 ,但核素肺灌注 通气扫描均提示为肺段或亚段栓塞。结论 :ECHO能够发现主肺动脉、左右肺动脉干内附壁血栓直接提示肺动脉栓塞 ,或根据右室负荷过重表现间接提示肺栓塞的可能 ,但对肺段或亚段栓塞者超声不能作出或排除诊断。     

Treatment options and strategies for acute severe pulmonary embolism

Pulmonary thromboembolism (PE) is the third most frequent cause of cardiovascular death after ischaemic heart disease and stroke. In fatal PE, 2/3 of patients die within first hour of presentation. There is a clinical impetus to rapidly recognize, risk-stratify and appropriately treat patients with acute severe PE. Current recommendations present conflicting classification systems, and there is often some confusion in the clinical evaluation and management of patients with acute severe PE. This review presents a series of real clinical cases, which illustrate the available treatment options, ranging from conservative therapy to thrombolysis through to percutaneous catheter fragmentation and open surgical embolectomy. We evaluate the evidence for the various strategies and propose an algorithm for clinicians with a focus on early risk stratification and timely referral. This is particularly relevant to regional and remote centres, as well as secondary and tertiary institutions.     

大鼠急性肺栓塞血清差异表达蛋白的研究

目的研究急性肺栓塞（APE）大鼠血清和正常大鼠血清的差异蛋白表达变化。方法采用血栓颈静脉注入法制备大鼠APE模型,采用双向电泳技术找出差异蛋白,用MALDI-TOF技术和生物信息学技术鉴定差异蛋白,并对部分差异表达蛋白采用Western-blot技术作进一步验证。结果大鼠血清蛋白的2-DE胶银染可分离出1 400多个点,考染可达到1 200个点以上。经图像分析得到的24个差异表达蛋白中有12个蛋白得到鉴定。对部分差异蛋白采用Western-blot方法在蛋白水平的验证结果与2-DE结果基本相符。结论采用比较蛋白质组学的方法可以发现APE大鼠血清中的差异表达蛋白,这些差异表达蛋白分子将为我们寻找新的APE血清学标志物提供重要的线索和依据。     

心电图在急性肺栓塞诊断治疗中的价值

目的 探讨心电图在急性肺栓塞诊断治疗中的价值.方法 对30例急性肺检塞患者心电图表现进行分析.结果 30例患者心电图均有改变,表现各异.结论 心电图对肺栓塞的诊断具有比较重要的价值.多次心电图检查观察动态变化并结合临床进行全面分析,综合判断,对PTE诊断和预后的判断有更大意义.