DNA斑点杂交检测大肠癌C—myc癌基因扩增的临床意义

应用ＤＮＡ斑点杂交技术对４４例大肠癌及相邻正常粘膜组织Ｃ－ｍｙｃ癌基因扩增进行分析，探讨Ｃ－ｍｙｃ扩增与大肠癌分化程度及Ｄｕｋｅｓ分期的关系。结果表明：大肠癌Ｃ－ｍｙｃ扩增率为６１．４％，并与分化程度密切相关，粘液腺癌和低分化腺癌的扩增率明显高于高分化腺癌。Ｃ－ｍｙｃ扩增可作为大肠癌的一项有价值的生物学标志。     

DNA斑点杂交检测大肠癌C－myc癌基因扩增的临床意义

应用ＤＮＡ斑点杂交技术对４４例大肠癌及相邻正常粘膜组织Ｃ－ｍｙｃ癌基因扩增进行分析，探讨Ｃ－ｍｙｃ扩增与大肠癌分化程度及Ｄｕｋｅｓ分期的关系．结果表明：大肠癌Ｃ－ｍｙｃ扩增率为６１．４％．并与分化程度密切相关，粘液腺癌和低分化腺癌的扩增率明显高于高分化腺癌．Ｃ－ｍｙｃ扩增可作为大肠癌的一项有价值的生物学标志．     

滚环扩增在乙型肝炎病毒cccDNA检测中的应用

目的 建立慢性乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)的滚环扩增(RCA)方法 .方法 以27例慢性乙型肝炎患者的肝组织cccDNA和血清松弛环状DNA(rcDNA)为研究对象.根据中国患者HBV基因序列特点设计4对引物,分别可与HBV cccDNA的正、负链结合.在Phi29 DNA聚合酶的作用下,获得线性多拷贝cccDNA扩增产物,以该产物为模板获得cccDNA全序列;通过对模板的系列稀释鉴定RCA方法 的灵敏度;以RCA产物为模板扩增肝组织cccDNA的反转录酶区基因,并与同时扩增的同时间采集的同一患者血清中的rcDNA序列进行比较.结果 成功建立了HBV cccDNA全序列的RCA方法 ,最低可检测到10个拷贝的cccDNA分子,并获得了所有扩增cccDNA的全基因序列.27例患者中,18例患者的肝组织CCCDNA和血清rcDNA反转录酶区的序列完全一致,9例患者中共检出 84个不同的核苷酸位点,平均每个患者9.3个,84个不同核苷酸中只有5个引起了氨基酸的改变.结论 滚环扩增方法 对肝组织HBV cccDNA的检测具有较好的灵敏度.该方法 的建立对深入了解cccDNA在HBV致病机制中的作用以及评价抗病毒疗效有重要意义.     

乙型肝炎病毒DNA分子杂交与临床的关系

应用病毒DNA分子杂交,Southern吸印等技术对乙肝患者33例肝内HBV-DNA进行了研究。并与血清HBV-DNA及乙肝标志做了比较。大部分患者肝内HBY-DNA呈游离型;HBeAg阳性患者25例中有13例肝内HBV-DNA阳性;6例抗HBe阳性有2例肝内HBV-DNA阳性;血清乙肝标志及HBV-DNA均为阴性者1例,肝内亦检出HBV-DNA。提示分子杂交法反映肝内HBV感染较血清学检测灵敏。通过比较肝内HBV-DNA与血清PHSA-R之间的关系,进一步证实PHSA-R做为判断乙肝病毒复制指标具有一定的可信性。     

DNA分子杂交法检测乙型肝炎患者血清中HBV—DNA结果分析

我们自1988年以来,采用~(32)P标记的HBV—DNA探针对634例乙型肝炎患者进行了HBV—DNA检测。现将结果报告如下。病例来源 634例乙型肝炎均为我科住院患者,经临床及实验室检查确诊的各型乙型肝炎患者。诊断标准均符合第四次全国病毒性肝炎会议制定的标准。     

医院中乙型肝炎病毒携带者

迄今,已阐明的乙型肝炎流行病学,自然病史及病毒结构的知识对控制传播已从基础理论方面提出一套完整的措施。患者传染力大小和可能传播途径是两个重要的因素。 本病自然病史和分子病毒学的发现证实HB_sAg病毒携带者的传染性差异很大。慢性乙肝病毒感染者的自然病史呈两个不同的阶段。初起,为病毒繁殖复制阶段,可在血清中检出HBcAg,HBV-     

女性乙型肝炎病毒携带者卵巢颗粒细胞中乙型肝炎病毒感染情况与临床检测结果分析

目的分析女性乙型肝炎病毒(HBV)携带者卵巢颗粒细胞中HBV感染情况与临床检测结果。方法选取自2014年1月至2016年1月于自贡市第三人民医院接受辅助生育治疗的40例女性患者作为研究对象,其中,20例患者为HBV携带者(携带组),20例患者为非HBV携带者(非携带组),分离患者卵泡液中的颗粒细胞并制成涂片。应用经地高辛标记的特异性HBV DNA探针,通过原位杂交对颗粒细泡涂片进行检测;应用碱性磷酸酶系统进行显色反应。结果携带组患者的颗粒细胞涂片显示,5例可见200个成簇的颗粒细胞,细胞核中检测出20个HBV DNA阳性细胞;6例患者可见220个片状、单层的颗粒细胞,细胞核中检测出8个HBV DNA阳性细胞;9例患者可见180个成簇的颗粒细胞,细胞核中检测出4个HBV DNA阳性细胞。非携带组患者的颗粒细胞涂片为阴性。显色10 min时,患者未出现阳性信号;显色20 min时,4例患者出现阳性信号;显色30 min时,3例患者背景着色较深,阳性信号不易辨认,忽略不计。因此,20 min为显色的最佳时间。结论女性HBV携带者卵巢颗粒细胞中具有HBV DNA,可通过生殖细胞向子代传播乙型肝炎。因此,应加强对HBV携带孕产妇的健康宣传教育,并采取有效措施进行阻断。     

聚合酶链反应检测100例鼻咽癌组织中EB病毒DNA

聚合酶链反应检测１００例鼻咽癌组织中ＥＢ病毒ＤＮＡ①２００４３３上海第二军医大学长海医院张速勤李兆基杨树青②毛裕民②关键词鼻咽肿瘤；疱疹病毒４型，人；聚合酶链反应中国图书资料分类号Ｒ７３９．６长期以来，已对ＥＢ病毒与鼻咽癌的关系进行了大量的研究，并证...     

应用酶联免疫吸附试验检测血清中抗巨细胞病毒IgM

本文应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测了单项丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高患者血清115份,病毒性肝炎患者血清56份,正常人血清170份,血清中抗-CMV-IgM阳性率分别为37.4%、19.6%和8.2%.对单项ALT升高而临床诊断不明的病人有必要进行抗-CMV-IgM检测;对于病毒性肝炎患者,CMV 感染在特定情况下可加重病情,故检测病人血清抗-CMV-IgM有一定临床意义;由于献血员中存在着CMV较高带毒率,在免疫缺陷病人、器官移植者及婴儿等特殊易感人群输血时,应加强对献血者CMV检测和筛选.     

增强子Ⅰ对乙型肝炎病毒DNA疫苗免疫应答的影响

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)自身增强子Ⅰ(enhancerⅠ,ENHⅠ)对HBVDNA疫苗免疫应答的影响。方法采用PCR法以HBVadr亚型全基因DNA序列为模板分别扩增表面抗原(HBsAg)和HBsAg-ENHⅠ基因片段,重组到载体VR1012中,构建两种HBVDNA疫苗,转染COS-7细胞及HepG2细胞并免疫BALB/c小鼠。采用蛋白印迹、ELISA、ELISPOT等方法检测其在COS-7和HepG2细胞内的表达及小鼠的体液及细胞免疫应答效果。结果转染的HepG2和COS-7细胞均表达HBsAg;连接ENHⅠ的HBVDNA疫苗转染HepG2细胞后HBsAg表达量明显升高,两种疫苗转染COS-7细胞表达HBsAg无明显差异;免疫小鼠后第2周产生HBsAb及HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL),两种疫苗免疫产生的HBsAb及HBsAg特异性CTL无明显差异。结论ENHⅠ可使HBVDNA疫苗转染HepG2细胞表达HBsAg明显增加,对转染COS-7细胞表达HBsAg及接种BALB/c小鼠引起的免疫应答无明显影响。     

增强子Ⅰ对乙型肝炎病毒DNA疫苗免疫应答的影响

目的 研究乙型肝炎病毒（HBV）自身增强子I（enhancerI，ENHI）对HBV DNA疫苗免疫应答的影响。方法 采用PCR法以HBVadr亚型全基因DNA序列为模板分别扩增表面抗原（HBsAg）和HBsA-ENHI基因片段，重组到载体VR1012中，构建两种HBV DNA疫苗，转染CADS-7细胞及HepG2细胞并免疫BALB／c小鼠。采用蛋白印迹、ELISA、ELISPOT等方法检测其在COS-7和HepG2细胞内的表达及小鼠的体液及细胞免疫应答效果。结果 转染的HepG2和COS-7细胞均表达HBsAg;连接ENHI的HBV DNA疫苗转染HepG2细胞后HBsAg表达量明显升高，两种疫苗转染COS-7细胞表达HBsAg无明显差异；免疫小鼠后第2周产生HBsAb及HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL），两种疫苗免疫产生的HBsAb及HBsAg特异性CTL无明显差异。结论ENHI可使HBV DNA疫苗转染HepG2细胞表达HBsAg明显增加，对转染COS-7细胞表达HBsAg及接种BALB／C小鼠引起的免疫应答无明显影响。     

乳胶层析法检测乙型肝炎病毒标志物的结果分析及应用

目的：讨论乳胶层析法与酶联免疫吸附法（ELISA）检测乙型肝炎病毒标志物的符合率。方法：分别用乳胶层析法和酶联免疫吸附法检测125例血清中乙型肝炎病毒标志物,将两种方法检测结果做以分析、比较。结果：125例血清标本中乙型肝炎病毒标志物的符合率为：HBsAg符合率98.4%;HBsAb符合率96%;HBeAg符合率100%;HBeAb符合率96%;HBcAb符合率97.6%,两种方法检测结果无显著差异。结论：乳胶层析法简便快速,但存在一定的假阳性或假阴性,不能完全替代酶联免疫吸附法进行乙型肝炎病毒标志物的检测,适用于标本初筛查及流行病学调查。     

血清乙型肝炎病毒DNA载量对乙型肝炎相关性肾炎临床及病理表现的影响

目的 研究血清乙型肝炎病毒(HBV DNA)载量对乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)的临床表现及肾脏病理的影响.方法 根据HBV DNA复制程度将135例患者分为4组:病毒复制阴性组(n=52)、低度复制组(n=21)、中度复制组(n=20)、高度复制组(n=42).收集患者血常规、血生化指标、免疫球蛋白、血清补体C3、C4;尿常规、24h尿蛋白定量,尿NAG酶等数据.用半定量积分法分析各组间临床指标与病理表现的差异.结果 随着血清HBV DNA载量的增加,患者中肾病综合征比例增高,而慢性肾炎综合征比例下降(P<0.01).随着血清HBVDNA载量的增加,患者尿蛋白定量升高(P<0.01),血浆白蛋白降低(P<0.05),血清C3、C4降低(P<0.05);膜性肾病患者肾小球损伤加重,IgA肾病的患者小管及间质损害加重.病毒复制阴性组乙肝标记物沉积以HbsAg为主,而中、低度复制组以HbcAg和HBsAg共同沉积为主,与阴性组比较差异有统计学意义(P<0.01).随着血清HBVDNA的增加,肾脏C4沉积增加,与血清HBVDNA有一定相关性(r=0.343,P<0.01).结论 随着血清HBVDNA载量的增加,HBV-GN患者的临床及肾脏病理表现加重,相关结果可为HBV-GN患者的抗病毒治疗提供依据.     

聚合酶链反应技术检测鼻咽部脱落细胞中EB病毒DNA

聚合酶链反应技术检测鼻咽部脱落细胞中ＥＢ病毒ＤＮＡ５１００１０广州广州军区广州总医院孙朝晖，陈勇挺，郭小谦，林龙顺关键词ＥＢ病毒；聚合酶链反应；鼻咽肿瘤中国图书资料分类号Ｒ４４６日前检测ＥＢ病毒（ＥＢＶ）主要靠血清学力法，敏感件和特异性较差。我室利用...     

免疫球蛋白检测在评估慢性乙型肝炎中应用研究

目的探讨免疫球蛋白检测在评估慢性乙型肝炎中应用。方法分析2010年11月~2013年11月入住的80例慢性乙肝患者的临床资料,包括35例慢性乙肝患者与45例慢性重型乙肝患者。另外选择同期进行健康体检的40名健康者作为对照组。比较三组免疫球蛋白（IgG、IgA及IgM）及患者病情变化与免疫球蛋白水平间的关系。结果慢性乙肝、慢性重型乙肝患者组血清中IgG、IgA及IgM水平明显高于健康对照组,慢性重型乙肝患者明显高于慢性乙肝患者;恶化患者组IgG、IgA、IgM、TBIL及PTA均显著高于病情改善患者组（P〈0.05）。结论免疫球蛋白检测在评估慢性乙型肝炎中具有十分重要的意义与临床价值,且能作为病情变化情况的判定指标。     

应用PCR技术检测痰液中结核杆菌DNA

聚合酶链反应（PCR）是一种新的基困诊断技术，我们运用此项技术对痰液中的结核杆菌DNA进行了检测，现报告如下。     

应用DNA四面体探针电化学生物传感器检测埃博拉病毒核酸

目的：建立一种基于电化学生物传感器的快速检测埃博拉病毒核酸的方法。方法利用一步热变性法自组装成带有固定探针的DNA四面体后,通过Au-S键固定至金电极表面制备成新型核酸探针。与合成的埃博拉病毒核酸序列特异性结合后引入Bio-ssDNA检测序列,通过生物素和链霉亲和素的特异性结合作用引入avidin-HRP放大信号,利用计时电流法进行检测。结果该传感器可特异性识别和定量检测人工合成的埃博拉病毒的核酸序列,通过实验条件优化,测定核酸的浓度范围在1．0×10－9～5．0×10－6 mol／L呈良好的线性关系,检测下限为5．2×10－10 mol／L。结论所构建的DNA四面体探针修饰的电化学生物传感器实现了对埃博拉病毒核酸的灵敏、特异检测。     

木瓜中齐墩果酸抗乙型肝炎病毒研究

目的　考察木瓜中提取的齐墩果酸对乙型肝炎病毒 (HBV)的抑制作用。方法　以HBVDNA转染人肝癌细胞所得的HepG2 .2 .2 .15细胞株为模型 ,考察用药后 4d培养上清中HBsAg、HBeAg;收获细胞 ,提取病毒DNA ,斑点杂交检测用药后细胞中HBVDNA的变化。结果　齐墩果酸对上述病毒抗原表现出较强的抑制作用 ,斑点杂交显示其中齐墩果酸在 2 0 μg·ml-1时对HBVDNA的抑制率为 2 9.33%。结论　齐墩果酸对于HBV复制有较强的抑制作用 ,值得进一步研究     

乙型肝炎患者唾液中HBV-DNA的检测

近年来,从乙型肝炎患者唾液中检出HBsAg的报道已引起了人们对通过唾液传播乙型肝炎的关注。我们应用斑点杂交试验(又称~(32)PHBV-DNA探针)检测了46例乙型肝炎患者唾液中乙型肝炎发病(HBV—DNA),并与血清中HBV—DNA、HBsAg、HBeAg、抗HBe进行了对比观察。以7例非乙型肝炎患者作为对照,以探讨唾液传播乙型肝炎的流行病学意义。现报告结果如下:     

公牛精液中病毒的检测

病毒传染是生殖器发病原因之一,而生殖器疾病给畜牧业带来巨大的损失。在养牛场病毒的传播途径是不同的,其中随传染性鼻气管炎、牛病毒性腹泻、副流感—3、呼吸合胞体病毒、腺病毒的稳性传染的病源体的公牛精液传播。带病毒公牛出现龟头包皮炎,射精量减少,精液品质下降(一直到精死症)。 母牛用污染病毒的精液授精,会导致其流产、不孕,出生无生活力的犊牛。 P.B.Spradbrow(1968),H.Abshgen(1971),R.D.Schwltz等(1983),V.Bitsch