提高人类精液中圆形细胞数量测定的精确度

本研究的目的是提高用过氧化物酶试验检测精液中的白细胞时所得的圆形细胞数量的精确度。精液样本的圆形细胞浓度在（0．6～6）×10^6／mL之间,降低精液的稀释度,增加被测悬浮液的体积。1＋5（1：6）的稀释度适合于测量过氧化物酶活性,并能为细胞检测提供足够清晰的背景。在该稀释度下,测定Neubauer-改良精子计数板两边所有18个网格中的细胞数量,额定细胞浓度为（1．9～3．3）×10^6／mL的10个样本中只有3个样本的圆形细胞数／〉400个。由于更低浓度的精子稀释液不适合测定圆形细胞或其过氧化物酶反应产物,所以无法精确测量（抽样误差5％）参考下限值（1×10^6／mL）。结果表明,正是由于测定精液中的10个样本中圆形细胞很难精确到1×10^6／mL,所以白细胞精液症临界值的确定一直存在诸多分歧。因此需要建立一些统计学上合理的参考限。     

男性不育调查研究中精液流动细胞的DNA测定

精细胞为单倍体细胞,经过形态学上的变化,最终成长为精子。此种成熟或转化过程称为精子发生。在形态学上可划分为三个主要时期:圆形细胞核、细胞核拉长或已经拉长。与此同时,在精细胞成熟过程中,核染色质发生凝缩并重新排列。人睾丸细针抽吸物的流动细胞的DNA测定,显示为伴有少于预期的单倍体(IC)荧光强度的一个小的尖峰,此外,在预期的荧光水平上还有一个较大的单倍体尖峰和2C、4C尖峰。此两种单倍体     

人类精液中止血因子的研究进展

人类精液在射出后具有自发凝固并在短时间内液化的特点.发生这种现象的确切机制尚未完全明了.目前精液凝固与液化的机制研究主要集中在蛋白水解酶系、高分子量的精囊腺蛋白系统、纤溶酶原激活因子系统、微量元素锌等缺乏及pH值改变等方面.精液的凝固与液化类似于血液凝固与纤溶途径,目前精液中止血因子作用机制尚不完全清楚.迄今发现精液中的凝血因子主要包括:组织因子(TF)、组织因子信号通路抑制剂(TFPI)、因子Ⅶ(FⅦ)及因子Ⅷ(FⅧ)等.纤溶酶原激活因子主要包括:纤溶酶原抑制因子-1(PAI-1)、组织纤溶酶原激活剂(tPA)及尿激酶纤溶酶原激活剂(u-PA)等.     

人类精液中止血因子的研究进展

人类精液在射出后具有自发凝固并在短时间内液化的特点。发生这种现象的确切机制尚未完全明了。目前精液凝固与液化的机制研究主要集中在蛋白水解酶系、高分子量的精囊腺蛋白系统、纤溶酶原激活因子系统、微量元素锌等缺乏及pH值改变等方面。精液的凝固与液化类似于血液凝固与纤溶途径,目前精液中止血因子作用机制尚不完全清楚。迄今发现精液中的凝血因子主要包括:组织因子(TF)、组织因子信号通路抑制剂(TFPI)、因子Ⅶ(FⅦ)及因子Ⅷ(FⅧ)等。纤溶酶原激活因子主要包括:纤溶酶原抑制因子-1(PAI-1)、组织纤溶酶原激活剂(tPA)及尿激酶纤溶酶原激活剂(u-PA)等。     

慈溪市犬伤病例的圆形分布季节特征

<正>慈溪市自从1981年以来,狂犬病时有病例发生,2004年有一个明显的发病高峰[1]。狂犬病通常以病犬咬、抓伤方式感染人,近年来慈溪市犬伤病例数较多,为了解犬伤发生的时间特征,本文应用圆形分布法分析2006—2010年犬伤病例的季节性分布规律,为制订防制对策提供科学依据。     

人类健康危机的细胞病因

人体中的60万亿-100万亿个细胞构成了各种组织和器官的生命体。人体每天都会有新细胞产生和衰老细胞的死亡,在自我更新中取得动态平衡。在人的生命过程中,由于人体结构和功能的老化或细胞受内外环境有害因素的影响,使新生细胞数量减少和各脏器萎缩,导致人体多种生理功能衰退或障碍,人体“自愈能力”下降,从而出现“亚健康”或多种“代谢病”,甚至危及生命。     

小鼠原代神经元细胞狂犬病病毒滴度测定

目的探索利用小鼠原代神经元细胞测定狂犬病病毒(rabies virus,RV)滴度的可行性。方法分离培养小鼠大脑皮质原代神经元细胞,接种100小鼠脑内接种半数致死量(MICLD50)的标准攻击强毒(CVS)毒株,通过免疫荧光和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其感染性,并在此基础上在原代神经元细胞上进行了该毒株的细胞半数感染量(CCID50)测定。结果成功制备了小鼠大脑皮质原代神经元细胞;原代神经细胞培养物接种CVS 96h后,用抗微管相关蛋白质(MAP2)抗体和抗RV阳性血清作为一抗并经荧光抗体染色后,在胞体和突起上均有神经元特异性和RV特异性着染;在共聚焦显微镜下,当相同的细胞部位上出现红色和绿色交迭时呈现粉色斑点,免疫荧光证实原代神经细胞可被CVS感染,同时RT-PCR得到1 770 bp左右的目的条带,说明其被CVS感染;该原代细胞上所测定的CVS病毒滴度为104.5CCID50/0.1 mL,而该病毒的原始滴度为104.5MICLD50/0.03 mL。结论小鼠脑原代神经元细胞上测定的CVS株的病毒滴度与通过脑内接种法测定的滴度相同。     

非小细胞肺癌组织中Survivin和环氧合酶2的表达及其临床意义

目的 探讨Survivin和环氧合酶2(COX-2)在非小细胞肺癌组织中的表达及与组织分化程度、淋巴结转移和临床分期的关系.方法 应用免疫组化SP染色法检测Survivin、COX-2在非小细胞肺癌组织(肺癌组,43例)和癌旁正常肺组织(对照组,20例)中的表达情况.结果 Survivin和COX-2在肺癌组中的阳性表达率分别为67.4%(29/43)和55.8%(24/43);在对照组中均无表达;Survivin和COX-2在两组中的表达差异有统计学意义(P<0.01). Survivin和COX-2在有淋巴结转移、临床分期为Ⅱ～Ⅲ期及低分化的非小细胞肺癌组织中阳性表达率显著高于无淋巴结转移、临床分期为Ⅰ期及高、中分化的非小细胞肺癌组织(P<0.05). 结论 Survivin和COX-2在非小细胞肺癌组织中均有高表达,且与组织分化程度、淋巴结转移和临床分期密切相关.     

高脂饲料对豚鼠心肌线粒体脂质构成和细胞色素氧化酶活性的影响

用含10％猪油(重量比)的饲料喂养豚鼠50天,观察对心肌线粒体脂质构成和细胞色素氧化酶活性的影响。结果表明,实验组动物心肌线粒体细胞色素氧化酶活性出现降低趋势,总胆固醇含量增加,总磷脂含量下降,总胆固醇与总磷脂的分子比显著增加(P<0.05)。测定的四种主要磷脂组分磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆硷、心磷脂和神经磷脂的含量均减少。其中磷脂酰乙醇胺含量下降显著(P<0.05)。文中对心肌线粒体脂质构成改变的机制和意义及其与细胞色素氧化酶活性之间的关系进行了初步探讨。     

TRPV离子通道家族在人精液生殖细胞中的表达及定位

目的探讨TRPV离子通道家族在人精液生精细胞及精子中的表达情况及细胞定位。方法采用非连续Percoll密度梯度离心法分离人精液中生精细胞及精子,TRIzol法提取细胞总RNA,RT-PCR合成并扩增目的基因,琼脂糖凝胶电泳检测目的基因的存在。蛋白印迹技术检测TRPV离子通道蛋白在人精液生精细胞及精子中的表达,免疫荧光染色技术检测TRPV离子通道蛋白在人精液生精细胞及精子中的表达定位。结果在人精液生精细胞及精子中检测到TRPV1、TRPV2及TRPV5mRNA的表达,未能检测到TRPV3、TRPV4及TRPV6mRNA的表达。蛋白印迹检测显示人精液生殖细胞中存在TRPV1、TRPV2及TRPV5离子通道蛋白的表达。免疫荧光染色显示,TRPV1离子通道主要表达于中晚期生精细胞胞浆及精子头部。结论人精液生精细胞及精子中存在多种TRPV家族离子通道的表达,其中TRPV1及TRPV2mRNA在人精液生精细胞及精子中呈相对较高表达,其主要定位于中晚期生精细胞胞浆及精子头部。本研究结果将为研究人类生精细胞及精子中TRP通道的功能及TRP通道各亚型之间的相互关系提供参考依据。     

某院三级查房考核质量分析

目的了解三级查房中各级医师存在问题,提出改进策略。方法由7名具有高级职称的临床专家,按照统一评分标准进行观摩并打分,利用词云图分析存在问题。结果一级医师存在辅助检查解读不全面、疑难点报告不清晰、病历陈述缺项、查体手法不规范及查体前后未执行手卫生等问题;二级医师存在解答疑难问题不全面、临床思维讲解不透彻及查体纠正不到位等问题;三级医师存在对国内外最新知识进展讲解不全面及对查房内容点评不到位等问题。结论各级医师查房中都存在一定问题。医院管理者应针对不同级别医师提供个性化培训,促其努力提升医疗服务能力。同时,树立优秀科室榜样,充分发挥榜样带动作用。此外,还应充分利用人工智能技术辅助。     

吸烟对精液DNA指标影响的研究

目的探讨吸烟对精液DNA指标的影响,以促进男性生殖健康。方法选择322例合格的研究对象,其中195例为吸烟者,127例为不吸烟者,通过问卷调查方法收集对象的背景信息、吸烟暴露情况以及可能的混杂因素,同时收集所有研究对象的精液标本,分析吸烟对精液DNA指标的影响。结果吸烟使精液中单倍体精子的比例降低,同时使二倍体细胞以及多倍体细胞的比例升高。结论吸烟对精液质量可能有不良影响,且精液DNA指标可能对烟的作用更为敏感。对大量或长期吸烟者,其影响更为深远,应当广泛提倡戒烟。     

诱导人胚胎干细胞向子宫内膜样细胞分化的初步研究

目的:探讨无饲养层培养的人胚胎干细胞诱导分化为子宫内膜样细胞的方法。方法:将无饲养层培养的人胚胎干细胞分别通过共培养诱导法和细胞因子诱导法向子宫内膜样细胞诱导,流式细胞术检测分化的细胞中子宫内膜上皮细胞标志物细胞角蛋白18和间质细胞标志物波形蛋白的表达情况。结果:共培养诱导法和细胞因子诱导法在分化第7天均出现长梭状细胞样改变。分化第8天通过流式细胞术检测发现细胞波形蛋白表达均为阴性,部分细胞角蛋白18表达阳性,共培养诱导法分化率高于细胞因子诱导法[(55.63±10.29)%vs.(13.90±0.26)%,P<0.05]。结论:共培养诱导法和细胞因子诱导法均可使人胚胎干细胞分化为子宫内膜上皮样细胞,但前者的分化效率更高。     

Compare the chemical profiling of Ziziphi Spinosae Semen and Ziziphi Mauritianae Semen using untargeted metabolomics

Ziziphi Spinosae Semen (ZSS) as a traditional edible herb has been used for treatment of insomnia in China for centuries and developed as an additive for supplementary health food nowadays. Due to the scarcity of wild resources of ZSS, Ziziphi Mauritianae Semen (ZMS) as a folk medicine is widely used as products by substituting ZSS on the market. The current study aims to propose and verify a strategy being able to find the reliable chemical markers between ZSS and ZMS by the serial performances of ¹H NMR, GC-MS and UHPLC-Q-Orbitrap-MS-based untargeted metabolomics. A total of 30 primary metabolites, 28 fatty acid and 83 secondary metabolites were detected and tentatively annotated in ZSS and ZMS. Significant species differences occurred amongst their chemome patterns. The most relevant classes of compounds from two seeds were genkwanin-C-glycoside, triterpene saponin, cyclopeptide alkaloid, statured fatty acids and polyunsaturated fatty acids, as well as amino acid and sugar. Finally, the distribution of 19 secondary metabolites and saccharose were able to highlight the species differences through receiver operating characteristics (ROC) curve assessment. The findings enable not only to present valuable chemical evidences for their discriminative quality criteria, but more importantly, to offer a robust tool being able to afford reliable markers through comparative metabolomics.     

75例供精者精液细菌学分析

目的:建立精液标本采集、菌落计数、分类培养、鉴定和杂菌污染判断等相对较为完整的精液细菌培养方法,了解供精者精液中细菌菌落数及其分布情况。方法:对61例精液进行细菌菌落计数,75例精液进行需氧菌及厌氧菌的分类培养。结果:7例精液被杂菌污染,占11.2%;在未被杂菌污染的精液中,90.7%的精液有细菌生长,其中7.4%的精液菌落数>104CFU/ml。细菌分类培养发现精液中以棒状杆菌、草绿色链球菌、表皮葡萄球菌、肠球菌、溶血葡萄球菌、微球菌为主,分别为68.0%、29.3%、20.0%、10.7%、9.3%、8.0%;另外,还培养出缓症链球菌、大肠埃希氏菌、消化链球菌、肺炎克伯雷氏菌、松鼠葡萄球菌、铜绿假单胞菌等精液中稀有细菌或致病菌。结论:精液中细菌常规培养的阳性率高,细菌种类多。     

精液质量分析与正常生育力的概念

世界卫生组织(WHO)为对精液质量参数提供参考范围,对《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》(简称手册)进行了大幅修订。这引发如何定义正常(不包括用此概念表示高斯分布)的问题。其可作为一个纯粹的统计学概念,使用生物学上主观设定的切点值表示异常水平,通常为末端5%的人群。正常的另一定义也可根据生物学上常态和非常态的概念,表示生物学功能受损的临界点。这两者都可以用于描述性流行病学,例如研究变化趋势。但在考虑生育时,精液质量和生育力(使配偶妊娠的时间)两者都是连续变量,缺乏确定的阈值。手册使用了生物学意义上的正常,因为提供的是在12个月或更短时间内使配偶妊娠男性的精液参数分布状态。但真正需要的却是反向的相同信息:获得一个特定的精液检测结果,预期生育能力如何,确定需要大概多长时间使配偶妊娠。从流行病学研究角度考虑,研究重点主要在于内部比较,而不是参考范围。如果更关注绝对值及其功能意义,换言之,如果精液分析数据从生物学角度上得到更好的校准,这将大有裨益。     

慢性肾炎对精液质量的影响及作用机制探讨

目的:探讨慢性肾炎患者精液质量及其影响机制。方法:对35例不同阶段的慢性肾炎及20例健康志愿者精液常规检验结果进行统计分析。结果:慢性肾炎患者的精液主要参数(精子活动力、存活率)明显下降,形态镜检异常,与对照组相比较差异有显著性统计意义(P<0·05),慢性肾炎患者的血清尿素氮、肌酐含量与精液常规参数值呈负相关(r=-0·05,P<0·01)。结论:慢性肾炎患者代谢毒素物质可能使精子细胞受损、存活率、活动力下降,并且导致精子畸形率增加。     

前列腺素E1对乳酸盐腹膜透析液体外致人腹膜间皮细胞损伤的保护作用

目的传统乳酸盐腹膜透析液(L-PDS)对人腹膜间皮细胞(HPMC)具有细胞毒作用。本研究旨在观察前列腺素E1(PGE1)对L-PDS在体外致人HPMC活力和增殖抑制的影响。方法采用胰蛋白酶消化法培养HPMC;设立培养基对照组、L-PDS组及PGE1组。用乳酸脱氢酶(LDH)的释放和四唑盐比色法(MTT法)评估细胞活力及检测细胞增殖。结果L-PDS可使HPMC的LDH释放显著增多(P<0.01)。随暴露于L-PDS时间延长,存活率进行性下降。PGE1可减少LDH释放而提高细胞存活率(P<0.05)。L-PDS作用30min能抑制HPMC增殖(P<0.05),而PGE1能促进其增殖(P<0.05)。结论PGE1对L-PDS体外所致HPMC活力和细胞增殖的抑制有一定的保护作用。