氧化苦参碱体外抗乙型肝炎病毒作用

目的:体外观察氧化苦参碱(OM)抗乙型肝炎病毒(HBV)作用,并初步探讨其作用机制.方法:用125,250,500,1000,2000 mg·L-1OM连续作用于90％汇合度的HepG2.2.15细胞9d,以MTT比色法观察药物细胞毒性;用酶联免疫法测定细胞上清液中乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg),乙型肝炎病毒s抗原(HBsAg);采用荧光定量PCR法(FQ-PCR)测定细胞上清液中HBV DNA,细胞中HBV DNA和共价闭合环状DNA(cccDNA).结果:OM对细胞内HBV DNA和cccDNA,以及细胞外HBV DNA均有抑制作用,随着浓度升高抑制作用加强,2000 mg·L-1OM对细胞内HBV DNA,cccDNA和细胞外HBV DNA的抑制率分别为64.56％,52.12％,54.25％;对HBsAg和HBeAg的分泌也有抑制作用,且浓度越高、处理时间越长,抑制作用越明显;在相同条件下对HBsAg的抑制作用强于HBeAg,OM浓度为2000 mg·L-1时对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为51.59％,17.88％.结论:OM能有效抑制HepG2.2.15细胞中HBV复制,该作用是抑制病毒核酸复制和基因表达的结果.     

Chinonin抗HSV-Ⅱ及对HSV-Ⅱ DNA影响的实验研究

目的:观察知母宁(Chinonin)对单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的作用途径及对HSV-Ⅱ DNA的影响,探讨Chinonin抗HSV-Ⅱ的作用机理。方法:通过Chinonin对HSV-Ⅱ所致细胞病变(CPE)的抑制作用及其对病毒感染的预防、治疗、直接杀伤作用,阻止病毒复制的动态观察,探讨Chinonin抗HSV-Ⅱ的作用途径;通过HSV-Ⅱ DNA荧光定量PCR观察Chinonin对HSV-Ⅱ DNA的影响,探讨Chinonin对HSV-Ⅱ的作用机理。结果:Chinonin预先用药,对CPE没有明显的抑制作用;治疗用药,在6.25 mg/ml浓度能完全抑制CPE。药物与病毒直接作用后感染细胞,与对照组没有显著的差异。对Chinonin抑制HSV的动态观察发现,Chinonin能明显抑制病毒的增殖。荧光定量PCR结果显示,Chinonin浓度大于6.25 mg/ml时HSV DNA为阴性,浓度为3.125 mg/ml、1.56 mg/ml时DNA拷贝量显著低于病毒对照组。结论:Chinonin抗HSV的作用可能主要不是通过影响HSV与病毒的吸附,而是通过影响病毒的复制,与抑制HSV DNA合成有关。     

姜黄素抗HTV作用研究进展

对中药姜黄有效成分姜黄素抗HIV的作用,包括抑制HIV LTR活性、抑制病毒复制的相关酶(逆转录酶、蛋白酶和整合酶)及对细胞因子的影响等方面进行了综述。     

盐酸千金藤碱抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

目的 探讨盐酸千金藤碱(CH)对乙型肝炎病毒的体外抑制作用.方法 MTT法检测CH对HepG2.2.15的细胞毒性;酶联免疫吸咐(ELISA)法检测不同浓度CH对细胞上清液中HBsAg和HBeAg的影响;荧光定量聚合酶链反应(FQ- PCR)法检测CH在用药后第9天对细胞内外HBV DNA拷贝数的影响.结果 CH对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)为10.24 μmol/L;对HBsAg和HBeAg分泌的半数抑制浓度(IC50)分别为7.01,6.64 μmol·L-1,治疗指数(TI)分别为1.46,1.54;对细胞上清液中HBV DNA拷贝数的IC50为3.49 μmol·L-1,对细胞内HBV DNA拷贝数的IC50为4.25 μmol·L-1,TI值分别为2.93,2.41.结论 CH在体外对HBsAg和HBeAg的分泌和对细胞内外HBV DNA的复制均有明显的抑制作用.     

阿昔洛韦治疗复发性阿弗他溃疡的疗效观察

目的　探讨阿昔洛韦治疗病毒感染引起的复发性阿弗他溃疡 (RAU)的应用价值。方法　将 79例RAU患者随机分为 2组 :治疗组 4 1例 ,采用阿昔洛韦治疗 ,同时给予局部碘氧处理 ;对照组 38例 ,只给予局部碘氧处理。抗巨细胞病毒IgM(抗 -HCMV -IgM )和抗单纯疱疹病毒IgM抗体 (抗 -HSV -IgM)滴度水平测定采用酶联免疫捕捉技术 ,肝、肾功能指标测定采用生化定量法 ,同时采用聚合酶链反应技术 (PCR)检测口腔溃疡面脱落上皮细胞或血清中病毒脱氧核糖核酸 (DNA)。结果　服用阿昔洛韦治疗后抗 -HCMV -IgM、抗 -HSV -IgM滴度明显下降 ,与治疗前比较具有显著性差异 (P均 <0 .0 5 ) ;治疗前后肝、肾功能指标无显著性差异 (P均 >0 .0 5 ) ;治疗组DNA阴转 17例 ,阴转率为 5 0 % ,对照组DNA阴转 3例 ,阴转率为 9% ,2组相比有显著性差异 ( 2 =12 .88,P <0 .0 0 5 )。结论　阿昔洛韦治疗RAU具有明显地抑制单纯疱疹病毒DNA(HSV -DNA)和巨细胞病毒DNA(HCMV -DNA)复制的作用 ,且不良反应少 ,可作为治疗病毒性RAU的理想药物 ,具有一定的临床应用价值。     

绵马鳞毛蕨中的山柰酚乙酰鼠李糖苷及其对HIV-1逆转录酶的作用

HIV逆转录酶(RT)为一多功能酶,表现出RNA依赖性DNA聚合酶(RDDP)、DNA依赖性DNA聚合酶(DDDP)和核糖核酸酶H(RNase H)的活性。在筛查50种韩国和30种中国药用植物体外抑制HIV-1 RNase H活性的过程中,发现三叉蕨科植物绵马鳞毛蕨(Dryopteris crassirhizoma)根茎对RT的RNase H活性     

巨细胞病毒对造血干细胞增殖和分化情况的影响

目的 探讨人巨细胞病毒(human cytomeglavirus,HCMV)对造血干细胞的增殖和分化情况的影响.方法 采用造血干细胞体外培养技术,研究HCMV -AD169株对脐血造血干细胞增殖和分化情况的影响,采用PCR技术检测干细胞中的HCMV DNA..结果 HCMV 在体外能明显抑制造血干细胞的增殖和分化,抑制程度随病毒浓度的升高而增大,经PCR检测病毒感染的细胞中有HCMV DNA的存在.结论 HCMV-AD169对造血干细胞增殖和分化情况的有抑制作用.     

尿葡萄糖二酸测定对药物性肝炎鉴别诊断的价值

目的　探讨检测尿葡萄糖二酸 (UGA)对药物性肝炎的诊断价值。方法　采用酶竞争抑制法测定UGA值 ,应用全自动生化分析仪测定肝功能 ,采用酶联免疫吸附法检测肝炎病毒血清学标志物。结果　药物性肝炎组与病毒性肝炎组及健康组UGA值经统计学处理有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,病毒性肝炎组与健康组UGA值经统计学处理无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　测定UGA值对药物性肝炎的诊断和鉴别诊断有一定价值。     

板蓝根活性部位抗单纯疱疹病毒1型分子机制的研究

目的探讨板蓝根活性部位体外抗单纯疱疹病毒1型的分子机制。方法利用MTT法检测药物对单纯疱疹病毒感染后Vero细胞活性程度的影响。实时定量RT-PCR的方法研究药物对单纯疱疹病毒1型胸腺嘧啶核苷激酶和DNA多聚酶的影响。结果板蓝根提取部位在病毒感染早期抑制了单纯疱疹病毒的胸腺嘧啶核苷激酶和DNA多聚酶的复制。结论板蓝根活性部位在单纯疱疹病毒感染细胞的早期阶段可以降低病毒即刻早期基因——胸腺嘧啶核苷激酶和DNA多聚酶的mRNA,发挥抗病毒作用。     

饿蚂蝗总黄酮对鸭乙型肝炎的保护作用研究

目的:研究饿蚂蝗总黄酮对鸭乙型病毒性肝炎的作用。方法:采用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)血清感染1日龄广西麻鸭。感染7d后采用PCR法筛选出DHBV DNA强阳性鸭,随机分为5组:模型组、阳性药拉米夫定组(50mg/kg)、饿蚂蝗总黄酮组(300,150,75 mg/kg),每组10只。另设正常对照组(经PCR筛选出的未造模DHBV阴性鸭)10只。各组从造模后第14d开始给药,每天灌胃给药1次,持续给药14d。每组动物分别于给药前0天(T0)、给药后7天(T7)、给药后14天(T14)、停药后3天(P3)自颈静脉采血,检测血清中鸭乙型肝炎病毒DNA(DHBV DNA)、鸭乙型肝炎表面抗原(DHBs Ag)和鸭乙型肝炎e抗原(DHBe Ag)的水平,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性,白介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)的含量变化。结果:与模型组比较,在T14时,饿蚂蝗总黄酮300、150、75 mg/kg剂量组能够降低T14时鸭血清DHBV DNA载量以及ALT和AST含量,升高IL-2和IFN-γ水平;在P3时,饿蚂蝗总黄酮300、150mg/kg剂量组对鸭血清DHBV DNA载量以及ALT和AST含量的抑制仍然明显,停药后无反跳。结论:饿蚂蝗总黄酮具有抗鸭乙型病毒性肝炎作用,其机制与抑制病毒复制、保肝降酶、调节免疫功能有关。     

虎杖靶向富集活性组分抗HIV-1活性研究

目的探讨虎杖Polygonum cuspidatum富集活性组分体外对人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的抑制作用及作用靶点。方法运用表面等离子共振HIV-1多靶点筛选系统对虎杖不同工艺提取物进行筛选,整合酶氨基耦联柱靶向富集提取物中高活性成分,在TZM-bl细胞和PBMC细胞中对富集产物进行抗HIV-1病毒活性评价;采用荧光共振能量转移分析法测定药物对HIV-1整合酶3’加工的抑制作用;运用高通量ELISA法测定虎杖60%乙醇提取物的整合酶靶向富集产物(HZ60-IN)对整合酶链转移的影响;试剂盒检测HZ60-IN对逆转录酶和蛋白酶的影响。结果 HZ60-IN对整合酶有高亲和性。细胞水平病毒感染实验表明,在TZM-bl细胞中,HZ60-IN对HIV-1 NL4.3和1084i的半数抑制浓度(IC_(50))分别为(31.94±8.96)、(38.07±11.25)μg/mL;在2株PBMC细胞中,HZ60-IN对HIV-1 NL4.3病毒均显示显著的抑制活性。HZ60-IN对整合酶的3’加工和链转移均有抑制作用,其中对3’加工的IC_(50)为(6.54±1.69)μg/mL,对链转移的IC_(50)为(2.56±0.97)μg/mL,其不作用于HIV感染的进入阶段,对逆转录酶抑制活性较弱,对蛋白酶活性没有影响。结论 HZ60-IN有抗HIV-1病毒活性,主要通过影响HIV-1的整合酶活性发挥作用。     

乙肝清热解毒合养阴活血冲剂治疗乙肝的临床及实验研究

对乙肝清热解毒冲剂合乙肝养阴活血冲剂治疗乙型慢性病毒性肝炎进行临床及实验研究。临床研究表明 ,对改善患者症状、体征和肝功能有明显的疗效 ,对病毒指标的阴转亦有疗效 ,HBeAg、HBV DNA的转阴率分别为 32 14%和 37 5 0 % (P <0 0 5 )。实验研究表明 ,能有效抑制鸭乙肝病毒 (DHBV DNA)复制 ,治疗前后比较有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,对鸭肝组织的病理改变亦有显著的改善作用     

西藏紫金标抗HSV-1的作用及其分子机制的研究

 目的探讨紫金标抗单纯疱疹Ⅰ型病毒(HSV-1)的分子机制,为进一步开发该药提供理论依据。方法采用不同剂量的紫金标作用于适量HSV-1感染的Vero细胞,以50%组织细胞感染量(TCID₅₀),细胞病变效应(CPE),蚀斑形成单位(PFU)为评价指标,采用CsCl密度梯度离心,RT-PCR,Western Blot以及扫描电镜和透射电镜为研究手段。结果紫金标无直接灭活HSV-1的作用,也不能影响病毒的释放;但可干扰HSV-1对宿主细胞的吸附,选择性地抑制HSV-1DNA及蛋白质合成,不同浓度的紫金标能明显抑制HSV-lgD基因mRNA表达。结论紫金标能抑制HSV-1对宿主细胞的吸附选择性地抑制HSV-1DNA及蛋白质合成,抑制HSV-1gD基因转录。     

茶黄素衍生物抗甲型流感病毒的作用研究

目的 研究茶黄素衍生物的混合物(含茶黄素、茶黄素-3-没食子酸酯、茶黄素-3'-没食子酸酯和茶黄素-3,3’-双没食子酸酯,简称茶黄素衍生物)抗甲型流感病毒的作用及其机制.方法 采用H5N1假病毒检测体系,观察茶黄素衍生物对A/Thailand/Kan353/2004 H5N1毒株假病毒的抑制作用;采用血凝抑制实验和神经氨酸酶抑制实验进一步分析茶黄素衍生物抗甲型流感病毒的作用机制;采用H1N1 FM 1病毒检测体系,观察茶黄素衍生物对甲型流感病毒FM1的抑制作用;采用MTT法评价茶黄素衍生物对MDCK细胞的毒性.结果 茶黄素衍生物能明显的抑制H5N1假病毒的感染力,IC50为(151.88±18.95)μg/nL;对血凝素HA1亚基无抑制作用;对神经氨酸酶具有抑制作用,IC50为(129.09±1.33)μg/mL;能明显抑制甲型流感病毒FM 1株.此外,茶黄素衍生物对MDCK细胞的毒性较小,CC50为(879.89±4.54) μg/mL.结论 茶黄素衍生物可能通过与血凝素HA2亚基结合而抑制禽流感病毒的感染,同时能够在一定程度上抑制病毒的神经氨酸酶活性,提示茶黄素衍生物是通过多靶点发挥抗H5N1亚型禽流感病毒的作用.     

抗病毒化合物——二羟丙氧甲基鸟嘌呤的研究进展

 抗病毒化合物——二羟丙氧甲基鸟嘌呤（DHPG)有比无环鸟苷（ACV)更强的抗疱疹病毒（HSV，VZV，EBV及CMV)活性，其中对巨细胞病毒的作用尤为显著，并且对耐ACV的HSV亦具有同样的作用，对人腺病毒有一定活性，而对RNA病毒则无治疗性作用。此外，DHPG亦能在体内降低地松鼠乙肝病毒DNA多聚酶（GHBV-DNAP)活性，但在体外对人乙肝病毒DNA多聚酶（HBV-DNAP)活性无抑制作用。     

植物活性成分Ⅳ:石蒜碱对3种动物病毒生长的影响

石蒜碱(Lycorine)是石蒜科中活性生物碱之一,它对多种RNA和DNA病毒具抗病毒活性,作者测定了各种浓度的石蒜碱对脊髓灰质炎病毒、疱疹病毒和柯萨奇病毒(Coxsachie)生长的影响,结果发现石蒜碱在≥2.5μg/ml浓度时能抑制这3种病毒的生长,其抑制强度与浓度有关。预先以2.5μg/ml浓度的石蒜碱处理过的VERO细胞,使感染脊髓灰质炎病毒,可见到病毒在细胞内和细胞外的生长分别出现3和3.5小时     

热毒清口服液抑制呼吸道合胞病毒的体外实验研究

目的:评价热毒清口服液体外抑制呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的效果.方法:采用MTT法及细胞病变抑制实验,以病毒唑为阳性对照,测定热毒清口服液在Hep-2细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用.结果:热毒清口服液的半数中毒浓度(TC50)为9182.4 mg/L,抑制RSV的半数有效浓度(EC50)为559.8 mg/L,治疗指数(TI)为16.4.结论:热毒清口服液在体外实验中对呼吸道合胞病毒有显著抑制作用.     

Pre-S_1与HBeAg、HBeAb对乙肝病毒复制指示作用比较

HBV DNA是乙肝病毒复制最特异也最直观的指标,但其检测技术要求较高,需在经过审批的专业实验室进行,一般基层医院较难开展,故临床上常用乙肝三系(主要是HBeAg及HBeAb)判断病毒复制情况,而Pre -S1与乙肝病程及病毒复制密切相关[1],笔者现对Pre -S1与HBeAg、HBeAb对病毒复制的指示作用作一比较。1　实验资料1·1　标本来源　选择2004年6月1日—8月31日我院住院及门诊病例共912例。1·2　试剂方法　Pre -S1:酶标法,试剂由上海阿尔法生物技术有限公司生产。HBeAg、HBeAb:酶标法,试剂由北京万泰生物药业有限公司生产。HBV DNA…     

植物活性成分Ⅳ:石蒜碱对3种动物病毒生长的影响

<正> 石蒜碱(Lycorine)是石蒜科中活性生物碱之一,它对多种RNA和DNA病毒具抗病毒活性,作者测定了各种浓度的石蒜碱对脊髓灰质炎病毒、疱疹病毒和柯萨奇病毒(Coxsachie)生长的影响,结果发现石蒜碱在≥2.5μg/ml浓度时能抑制这3种病毒的生长,其抑制强度与浓度有关。预先以2.5μg/ml浓度的石蒜碱处理过的VERO细胞,使感染脊髓灰质炎病毒,可见到病毒在细胞内和细胞外的生长分别出现3和3.5小时     

苦参素联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎疗效观察

[目的]观察苦参素联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的疗效。[方法]将慢性乙型肝炎患者分为两组,治疗组服用苦参素胶囊联合拉米夫定,对照组单独服用拉米夫定。并观察血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗原抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒(HBV)DNA及慢性HBV DNA多聚酶中酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YMDD)变异情况。[结果]通过治疗2组ALT水平均分别较治疗前显著下降(P<0.01)。治疗组和对照组在降低ALT水平及ALT复常率方面差异无显著性(P>0.05)。治疗12个月时,治疗组HBeAg和HBV DNA阴转率明显高于对照组,而HBV YMDD变异发生率低于对照组,且差异有显著性(P<0.05)。[结论]苦参素与拉米夫定联合治疗可以明显提高抗病毒疗效,并降低长期使用拉米夫定而产生的耐药。