脐带静脉组织结构的定量分析：评估其替代小动脉移植材料的可行性

碟子背景：长期以来，因缺乏理想的血管移植材料而制约了血管疾病的治疗效果。组织工程技术已解决了大口径人工血管替代品，但小动脉人工血管替代品一直未获得理想的材料。目的：观察不同胎龄、不同段脐带静脉的几何形态和显微结构成分，以探讨脐带静脉作为小动脉移植材料的可行性。设计：分组对照观察。单位：郧阳医学院医用生物力学实验室。对象：实验于2001—09／2004—07在郧阳医学院医用生物力学实验室完成。选择十堰市太和医院妇产科收集胎龄在24～42周自然流产或分娩的胎儿脐带50例（经产妇许可），产妇年龄在20-30岁。方法：①对脐带静脉进行机械剥离，制备成脐带静脉标本。根据胎龄分为5组：24～27周组7例；28～32周组7例；33-36周组8例；37～40周组20例；41～42周组8例。其中取胎龄在37—40周的脐带20例，依胎盘端为近端，胎儿端为远端分为近、中．远3段。常规石蜡包埋、切片。用苏木精-伊红染色法．Weigert法．苯胺蓝法及桔黄G法分别染组织结构、弹性纤维、胶原纤维和平滑肌。②脐带静脉图像定量分析：测量管径，壁厚．内膜．中膜和外膜厚度，采用德国产Leica—Q500IW彩色图像处理系统。提取中膜平滑肌细胞核，计算机自动计数测量框内细胞核的数目和面积，然后换算出单位面积内的细胞核的数目和面积，以此作为中膜平滑肌细胞核的数密度和面密度；分别测量血管壁中膜平滑肌．胶原纤维和弹性纤维各成分的绝对面积，计算不同着色面积与测试区域整体面积之比，从而求出平滑肌．胶原纤维和弹性纤维在各血管壁中的相对含量。主要观察指标：①不同胎龄脐带静脉的几何形态变化。②不同胎龄脐带静脉的显微结构成分。③不同段脐带静脉的显微结构成分。结果：①不同胎龄脐带静脉的几何形态变化：随胎龄增加，脐带静脉中膜厚度和外径在各胎龄组间均有显著的增加（24～27周，28～32周，33～36周，37～40周，41～42周中膜厚分别为0.186，0．203，0．237，0，264，0．268mm，F=133.35，P〈0.01；外径分别为1．861，1．962，2．303，2．464，2．465mm，F=37．35，P〈0．01）。②不同胎龄脐带静脉的显微结构成分：从24-40周，随胎龄增加，脐带静脉中膜弹性纤维含量逐渐增多，胶原纤维的含量及胶原纤维／弹性纤维比值逐渐减少。③不同段脐带静脉的显微结构成分：弹性纤维的含量近段比远段多（10，16，6．36Aa％，F=5.77～12．3，P〈0．05），由近段到远段胶原纤维／弹性纤维比值逐渐增大（F=7．63～13．4,P〈0.05）。结论：①脐带静脉具有与普通中等动脉相似的结构，37～40周脐带静脉管壁的胶原纤维、弹性纤维含量适中，既能承载一定的应力，又有较大的扩张能力，还富含平滑肌，具备收缩能力。②在血管移植时，以选用37-40周脐带静脉为佳，且近段顺应性优于远段，可适时选用，以利于脐带静脉移植于动脉后，能很快适应动脉的力学环境，提高移植后的远期通畅率。     

增龄变化对血管移植材料脐带静脉顺应性的影响

背景血管重建术中内径小于6 mm的人工合成血管替代人体小动脉或静脉一直未获得满意的效果,因而目前小动脉及静脉代用品成为亟待解决的问题.目的观察不同胎龄脐带静脉压力-容积关系,为血管移植材料脐带静脉的生物力学性质上提供实验数据.设计非随机对照实验.材料实验于2004-06在郧阳医学院医用生物力学实验室完成,湖北省十堰市太和医院妇产科收集胎龄在24～42周自然流产或分娩的正常胎儿脐带静脉50条(经产妇许可),产妇年龄20～30岁.其中胎龄24～27周8例,28～32周7例,33～36周8例,37周4例,38周5例,39周5例,40周5例,41周4例,42周4例.干预取胎儿脐带50条,测量一段脐带长度(2 cm)并标记两端点后,切下脐带置于生理盐水中.仔细地对脐带静脉进行机械剥离后,将试件两端标记点固定在软组织生物力学试验台上,测定其压力-容积关系,计算出顺应性.主要观察指标不同脐带静脉的压力、容积及顺应性.结果50条脐带全部进入结果分析.①37～40周脐带静脉压力-容积曲线比较接近,而28周,42周脐带静脉压力-容积曲线幅度明显下降,经二次回归分析可见38周胎龄压力-容积曲线回归系数绝对值最大.②脐带静脉顺应性随胎龄增加而增大[24～27周(2.22-±0.34)×10-4mL/(kP·cm),28～32周(3.65±0.46)×10-4 mL/(kPa·cm),33～36周(4.22±0.55)×10-4mL/(kPa·cm),37周(7.63±0.48)×10-4 mL/(kPa·cm),38周(8.32±0.76)×10-4mL/(kPa·cm)],但39周以后又降低[39周(7.61±0.46)×10-4 mL/(kPa·cm),40周(7.53±0.72)×10-4 mL/(kPa·cm),41周(4.13±0.35)×10-4 mL/(kPa·cm),42周(2.25±0.62)×10-4 mL/(kPa·cm)].37～40周脐带静脉的顺应性较相近,而42周及28周以下脐带静脉的顺应性与37～40周比较(F=65.84-86.52,P＜0.01).结论人脐带静脉是动脉移植物的良好替代材料,在移植时除了考虑脐带静脉与宿主动脉相匹配外,还应注意其顺应性与胎龄的关系,实验结果提示,胎龄在37～40周的脐带静脉作为临床应用的移植材料较为理想.     

增龄变化对血管移植材料脐带静脉顺应性的影响

背景：血管重建术中内径小于6mm的人工合成血管替代人体小动脉或静脉一直未获得满意的效果，因而目前小动脉及静脉代用品成为亟待解决的问题，目的：观察不同胎龄脐带静脉压力-容积关系，为血管移植材料脐带静脉的生物力学性质上提供实验数据：设计；非随机对照实验。材料：实验于2004—06在郧阳医学院医用生物力学实验室完成，湖北省十堰市太和医院妇产科收集胎龄在24～42周自然流产或分娩的正常胎儿脐带静脉50条（经产妇许可），产妇年龄20～30岁。其中胎龄24～27周8例，28～32周7例，33～36周8例，37周4例，38周5例，39周5例，40周5例，41周4例，42周4例。干预：取胎儿脐带50条．测量一段脐带长度（2cm）并标记两端点后，切下脐带置于生理盐水中。仔细地对脐带静脉进行机械剥离后，将试件两端标记点固定在软组织生物力学试验台上，测定其压力-容积关系，计算出顺应性：主要观察指标：不同脐带静脉的压力、容积及顺应性。结果：50条脐带全部进入结果分析，①37～40周脐带静脉压力-容积曲线比较接近，而28周，42周脐带静脉压力-容积曲线幅度明显下降，经二次回归分析可见38周胎龄压力-容积曲线回归系数绝对值最大。②脐带静脉顺应性随胎龄增加而增大[24～27周（2．22&;#177;0．34）&;#215;10^-4mL／（kPa、cm），28～32周（3．65&;#177;0．461&;#215;10^-4mL／（kPa、cm）,33～36周（4．22&;#177;0．55）&;#215;10^-4mL／（kPa&;#183;cm），37周（7．63&;#177;0．48）&;#215;10^-4mL／（kPa&;#183;cm），38周（8．32&;#177;0．76）&;#215;10^-4mL／（kPa、cm）]，但39周以后又降低[39周（7．61&;#177;0．46）&;#215;10^-4mL／（kPa&;#183;cm），40周（7．53&;#177;0．72）x10^-4ml／（kPa、cm），41周（4．13&;#177;0．35）&;#215;10^-4mL／（kPa、cm），42周（2．25&;#177;0．62）&;#215;10^-4mL／（kPa&;#183;cm）]。37～40周脐带静脉的顺应性较相近，而42周及28周以下脐带静脉的顺应性与37～40周比较（F=65．84—86．52，P〈0．01）。结论：人脐带静脉是动脉移植物的良好替代材料，在移植时除了考虑脐带静脉与宿主动脉相匹配外，还应注意其顺应性与胎龄的关系，实验结果提示，胎龄在37—40周的脐带静脉作为临床应用的移植材料较为理想．     

血管移植中不同段脐带静脉的生物力学特性研究

背景：临床施行血管重建术，内径小于6mm的人工合成血管替代人体小动脉或静脉一直未获得满意的效果，因而目前小动脉及静脉代用品的研制成为亟待解决的问题。目的：为脐带静脉作为小口径移植材料的临床应用提供理论依据。设计：非随机分组对照研究。地点和对象：实验在郧阳医学院解剖学教研室完成，对象为湖北省十堰市太和医院妇产科收集胎龄在37～40周自然分娩正常胎儿脐带静脉20例，产妇年龄在20～30岁。干预：取胎儿脐带静脉20例，依胎盘端为近端，胎儿端为远端分为近、中、远3段。在生物软组织力学试验机上测定近、中、远段脐带静脉的压力-直径关系，计算出弹性模量。横断取材，冷冻切片，苏木精-伊红法染色，用计算机图像分析系统测量其几何形态学指标。主要观察指标：脐带静脉的血管各相同性增量弹性模量(Einc)、血管压力-应变弹性模量(Ep)、血管容积弹性模量(Ev)、直径和壁厚。结果：近、中、远段脐带静脉的Einc和Ev均随压力的上升而增大，近段3种弹性模量(Einc：26．98&;#177;3．21，Ep：16．58．4&;#177;2．12，Ev8．31&;#177;2．35)均低于远段(Einc：33．20&;#177;4．21，Ep：119．452．87，Ev：9．71&;#177;1．32)(F=95．74∽126．52,P&;lt;0．05)。由近段到远段呈增大趋势。中膜厚度[(0．30&;#177;0．05)mm，(0．24&;#177;0．03)mm]及直径[(3．07&;#177;0．12)mm，(2．30&;#177;0．13)mm]值从近段到远段逐渐减小(F=12．76，P&;lt;0．01)。结论：脐带静脉作为小口径动脉移植的替代材料是可行的，在血管移植时。应注意选择不同段脐带静脉，使作为移植材料的脐带静脉与宿主血管材料间的生物力学特性尽量相近，以提高移植血管的远期通畅率。     

自体移植静脉再狭窄的反义基因治疗

自体移植静脉再狭窄的反义基因治疗边杰芳综述张柏根审校（上海第二医科大学附属仁济医院血管外科，上海２００００１）ＡｎｔｉｓｅｎｓｅＧｅｎｅＴｈｅｒａｐｙｆｏｒＲｅｓｔｅｎｏｓｉｓｉｎＡｕｔｏｖｅｎｏｕｓＧｒａｆｔＢｉａｎＪｉｅｆａｎｇ（Ｄｅｐａｒｔｍｅ...     

血管移植中不同段脐带静脉的生物力学特性研究

背景临床施行血管重建术,内径小于6mm的人工合成血管替代人体小动脉或静脉一直未获得满意的效果,因而目前小动脉及静脉代用品的研制成为亟待解决的问题.目的为脐带静脉作为小口径移植材料的临床应用提供理论依据.设计非随机分组对照研究.地点和对象实验在郧阳医学院解剖学教研室完成,对象为湖北省十堰市太和医院妇产科收集胎龄在37 40周自然分娩正常胎儿脐带静脉20例,产妇年龄在20～30岁.干预取胎儿脐带静脉20例,依胎盘端为近端,胎儿端为远端分为近、中、远3段.在生物软组织力学试验机上测定近、中、远段脐带静脉的压力-直径关系,计算出弹性模量.横断取材,冷冻切片,苏木精-伊红法染色,用计算机图像分析系统测量其几何形态学指标.主要观察指标脐带静脉的血管各相同性增量弹性模量(Einc)、血管压力-应变弹性模量(Ep)、血管容积弹性模量(Ev)、直径和壁厚.结果近、中、远段脐带静脉的Einc,Ep和Ev均随压力的上升而增大,近段3种弹性模量(Einc26.98±3.21,Ep16.58±2.12,Ev8.31±2.35)均低于远段(Einc33.20±4.21,Ep119.45±2.87,Ev9.71±1.32)(F=95.74～126.52,P＜0.05),由近段到远段呈增大趋势.中膜厚度[(0.30±0.05)mm,(0.24±0.03)mm]及直径[(3.07±0.12)mm,(2.30±0.13)mm]值从近段到远段逐渐减小(F=12.76,P＜0.01).结论脐带静脉作为小口径动脉移植的替代材料是可行的,在血管移植时,应注意选择不同段脐带静脉,使作为移植材料的脐带静脉与宿主血管材料间的生物力学特性尽量相近,以提高移植血管的远期通畅率.     

异体静脉移植血管在血液净化中的应用及护理

治疗急、慢性肾功能衰竭,需要进行血液净化治疗。血液净化首先要建立血管通道,其主要方法是建立动静脉内瘘,临床上常用自体动、静脉皮下直接吻合。但当可供选择作瘘的部位不能找到可供吻合的动脉和(或)静脉(例如:由于反复穿刺致静脉栓塞或     

脐带血干细胞制备的检测分析

目的对脐带血干细胞制备进行检测,为临床安全、有效地应用提供依据。方法测定母体和脐带血标本的人类免疫缺陷病毒(HIV)、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒(HCV)、梅毒螺旋体(TP)、巨细胞病毒(CMV)、内毒素、支原体和病原微生物。应用体外分离纯化试剂盒,分离干细胞,计数提取后单个核细胞数,经台酚兰染色检测干细胞活力。应用流式细胞仪检测CD34干细胞、淋巴细胞亚群。结果提取后有核细胞数为(5.4±1.09)×107,脐血的量和提取干细胞数成正相关。干细胞活力检测分离的活性率为(98.7±1.3)%。流式细胞仪测得脐血干细胞CD34+为(1.55±0.67)%(n=19)。淋巴细胞亚群检测结果显示,脐血CD3细胞数较少,CD4和CD8细胞数之和明显高于CD3细胞数,且选择脐血CD4/CD8小于1.3,这也是脐血移植时GVHD表现轻微的一个重要原因。结论脐血干细胞制剂的制备,符合细胞治疗的相关安全性指标。     

成人移植双份脐血植入状态的定量监测

背景:脐血因所含的有核细胞数量有限,主要应用于儿童患者,近年来,人们尝试将两份脐血混合输入,用于成人血液系统疾病的治疗。目的:定量监测双份异基因脐血用于成人白血病患者移植后两份脐血的植入状态、嵌合体类型、相对数量的动态变化及演变规律。设计:以脐血干细胞移植的供受者为观察对象,供受者移植前及受者移植后不同时间段的系列血样提取DNA作为检测标本,短串联重复序列遗传位点为观察指标。单位:深圳市血液中心输血医学研究所免疫遗传重点实验室。对象:纳入2005-06在北京大学深圳医院住院治疗的急性髓细胞白血病患者,男性,43岁,体质量75kg。首次化疗完全缓解后6个月移植两份人类白细胞抗原(HLA)各一个位点不合的非血缘脐血,脐血1有核细胞数为2.5×107kg-1;脐血2有核细胞数为1.53×107kg-1。脐血来源于广州脐血库。患者对治疗方案知情同意。方法:采用荧光标记复合扩增短串联重复位点嵌合体定量检测技术,对急性髓细胞白血病成人患者移植两份(脐血1有核细胞数为2.5×107kg-1,脐血2有核细胞数为1.53×107kg-1)HLA各一个位点不相合的异基因脐血前后的序列血样进行了9个短串联重复序列位点的检测,利用供、受者之间的差异位点定性判断脐血是否植入以及嵌合体类型;而后根据377XLDNA测序仪上荧光扫描后两供者差异基因检出峰的峰面积计算脐血植入后患者体内两份脐血的相对数量,定量分析供体细胞植入程度及演变规律。并与采用HLA差异基因对植入状态的分析结果进行对比。主要观察指标:在成人移植双份脐血后,观察患者及两供者9个位点的短串联重复序列基因在患者体内的转变过程,对植入状态进行定量及定性的描述。结果:移植后15d两份脐血植入状态为完全双份供者嵌合体,患者体内脐血1的相对细胞数量占51.3%,脐血2占48.7%;30d时脐血1上升为70.0%,脐血2下降为30.0%。52d时只检测到脐血1的基因,植入状态转为完全单份供者嵌合体,有核细胞数少的一份脐血被排斥,有核细胞数多的一份长期植入。结论:荧光标记复合扩增短串联重复序列嵌合体定量检测可精确地描述两份脐血的植入程度及变化过程,为临床脐血的应用及供者的选择提供了一个准确、可靠的实验依据,证明双份HLA各一个位点不合的脐血同时用于成人的移植是可行的。     

多份人脐血单个核细胞静脉移植治疗老年期血管性痴呆18例

选取2005-05/2007-12郑州市第二人民医院收治的血管性痴呆老年患者18例,平均年龄72.6岁,平均病程24.5个月,均经CT、MRJ确诊,符合第四届全国脑血管病学术会议修订的脑卒中诊断标准.采集足月新生儿脐带血,无菌塑料袋分离出单个核细胞,通过手背浅静脉将脐血单个核细胞输注入脑卒中患者体内,每例患者平均输注6份,细胞数≥1×108/份,每份间隔1～7 d.与移植前比较,细胞移植后6个月患者神经功能缺损程度评分明显降低(t=8.85,P<0.01);简易智能量表评分和评价日常生活能力的Barthel指数均明显升高(t=13.78,t=12.81,P<0.01).整个治疗过程中未使用免疫抑制剂,细胞移植前后无并发症及不良反应发生.     

人脐血间充质干细胞尾静脉移植治疗扩张型心肌病

背景：体外研究表明人脐血间充质干细胞可分化为自律性跳动的心肌细胞,而经静脉移植人脐血间充质干细胞治疗扩张型心肌病心力衰竭的报道较少。目的：探讨经尾静脉移植人脐血间充质干细胞对扩张型心肌病大鼠心肌结构、心功能的影响。方法：Wistar大鼠通过腹腔注射阿霉素诱导扩张型心肌病模型,扩张型心肌病实验组于造模后8周经尾静脉移植人脐血间充质干细胞,扩张型心肌病对照组注射等量DMEM培养基。健康对照组不造模,于相同时间点注射等体积的生理盐水。结果与结论：与健康对照组相比,扩张型心肌病组心功能明显受损,且扩张型心肌病实验组受损较扩张型心肌病对照组轻;移植的细胞有肌钙蛋白T的表达。结果提示人脐血间充质干细胞移植能促进扩张型心肌病大鼠心功能恢复,使心肌组织病变减轻。     

Cost of umbilical cord blood units released for transplantation

BACKGROUND: A large number of institutions have started programs banking umbilical cord blood (UCB) for allogeneic unrelated-donor and related-donor transplantation. However, limited information is available on the financial issues surrounding these activities. STUDY DESIGN AND METHODS: The aim of this study was to determine the fee per UCB unit released for transplantation that would allow cost recovery after 10 years. Three organizational models were considered suitable to provide units for five UCB transplants per 1 million population per year, a figure that would translate into an annual need for 280 units in Italy. Models A, B, and C included, respectively, seven networked banks, each with an inventory of 1,500 units; two networked banks, each with an inventory of 5,000 units; and one bank with an inventory of 10,000 units. It was estimated that it would take 3 years to develop the cryopreserved inventory and that approximately 3 percent of the inventory could be released and replaced each year during the 7-year interval between the fourth and tenth years of activity. The data on the costs of labor, reagents and diagnostics, disposables, depreciation and maintenance, laboratory tests, and overhead, as well as the operational data used in the analysis were collected at the Milano Cord Blood Bank in 1996. RESULTS: Fees of US $15,061, $12,666, and $11,602 per unit released during the fourth through the tenth years of activity allow full cost recovery (principle and interest) under Models A, B, and C, respectively. CONCLUSION: Although UCB procurement costs compare favorably with those of other hematopoietic cell sources, these results and the current fee of US $15,300 used in some institutions show that UCB is an expensive resource. Therefore, judicious planning of banking programs with high quality standards is necessary to prevent economic losses. The advantages of lower fees associated with the centralized banking approach of Model C should be balanced with the more flexible collection offered by Model A.     

脐带血干细胞移植治疗脊髓损伤中给予无缝隙护理干预的价值分析研究

目的 探讨将全程无缝隙护理干预应用于脐带血干细胞移植治疗的脊髓损伤患者的临床效果。方法 选取在2010年1月至2015年12月间本院收治的32例脊髓损伤患者作为研究对象。采用随机数字表法将患者分为对照组和观察组,每组各16例。对照组给予常规护理,观察组在对照组基础上,实施全程无缝隙护理干预。对比分析两组的神经功能,用生活质量以及并发症发生情况。结果 术后2个月时,观察组ASIA评分中运动和轻触觉评分以及SF-36评分均较对照组显著增高(P＜0.05)。两组并发症发生率对比,差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 针对行脐带血干细胞移植治疗的脊髓损伤患者,通过开展全程无缝隙护理干预,能改善其神经功能,提高生活质量,具有一定的临床应用价值。     

脑缺血再灌注损伤大鼠尾静脉移植脐带间充质干细胞的安全性

背景：尾静脉移植干细胞穿过血脑屏障到达宿主脑损伤区域内的具体机制尚不明确。目的：观察尾静脉移植人脐带间充质干细胞治疗脑缺血再灌注损伤大鼠的效果及安全性,并探讨其作用机制。方法：通过密度梯度离心法结合贴壁筛选法获取人脐带间充质干细胞并以BrdU标记。Sprague-Dawley大鼠以改良线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型,移植A组在造模后第7天、移植B组在造模后第14天通过尾静脉移植人脐带间充质干细胞,模型组不做处理。结果与结论：①移植后7,14,28,35,42,49,56d,2个移植组mNSS评分低于模型组（P〈0.05）。移植后7,14,28,35,42,49d,移植A组mNSS评分低于B组（P〈0.05）。模型组在造模后第35天、移植A组在第42天、移植B组在第49天时mNSS评分进入平台期。②2个移植组大鼠脑组织未见到CD11b、MPO单染阳性细胞,可见Brdu＋Nestin、Brdu＋MAP-2、Brdu＋GFAP、Brdu＋FⅧ,Brdu＋VEGF双染阳性细胞。结果表明人脐带间充质干细胞经尾静脉途径移植可以在宿主脑内存活,通过生成神经元样和神经胶质样细胞、促进新生血管形成并分泌神经营养因子等因素促进大鼠神经功能恢复,且未发现明显免疫排斥反应及异常分化细胞,具有较高的安全性。     

非血缘脐血移植的展望

近年,非血缘脐血移植(UCBT)的广泛开展,为恶性及非恶性血液病患者的治疗提供了更多选择.本文将从脐血的选择、预处理方案、植入前综合征(PES)、植入失败和复发的处理等方面,对UCBT的最新进展及前景进行总结.