陈皮多甲氧基黄酮类成分对人乳腺癌MCF-7、肝癌HepG2细胞株增殖抑制作用及其敏感性比较

目的:研究陈皮多甲氧基黄酮类成分(CM)对人乳腺癌、肝癌细胞株的增殖抑制作用并对其敏感性进行比较.方法:采用MTT法观察CM对人乳腺癌MCF-7、肝癌HepG2细胞株的增殖抑制作用.结果:不同剂量CM(10mg/L、20mg/L、40mg/L)作用于MCF-7细胞株,24h细胞抑制率分别为18.75%、19.79%、34.38%,48h细胞抑制率分别为17.39%、36.96%、40.22%,72h细胞抑制率分别为35.57%、47.08%、50.69%;作用于HepG2细胞株,24h细胞抑制率分别为5.51%、11.81%、29.92%,48h细胞抑制率分别为13.54%、38.54%、51.04%,72h细胞抑制率分别为13.21%、43.40%、55.67%.结论:CM可以抑制人乳腺癌MCF-7、肝癌HepG2细胞株的生长并对两细胞株的增殖抑制呈现时间、浓度依赖性.同等条件下,在小剂量、短时间作用时,MCF-7对于CM作用的敏感性较高;在大剂量、长时间作用时,HepG2表现出比MCF-7更高的敏感性.     

重楼复方对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡及Survivin表达的影响

目的:研究重楼复方对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖抑制作用,及其对细胞周期、细胞凋亡的影响,并探讨可能的分子机制。方法:采用MTT法观察重楼复方对SMMC-7721细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期,RT-PCR法检测凋亡相关基因生存素(Survivin)mRNA的表达。结果:重楼复方以剂量依赖方式抑制SMMC-7721的细胞增殖,其半数抑制浓度(48h)为(0.26±0.04)mg/mL。重楼复方0.2、0.4、0.8mg/mL作用于SMMC-7721细胞48h后,其早期凋亡率分别为4.8%、8.3%、21.6%,而对照组为1.8%,其诱导凋亡作用呈现剂量依赖性。重楼复方0.8mg/mL作用于SMMC-7721细胞24h后,细胞积聚在G0/G1期,同时S期细胞比例减少。重楼复方0.8mg/mL作用SMMC-7721细胞48h后,Survivin mRNA表达下调(P<0.05)。结论:重楼复方具有抑制人肝癌细胞株SMMC-7721增殖及诱导细胞凋亡作用,并能阻滞细胞于G0/G1期,下调Survivin mRNA的表达可能为其诱导细胞凋亡的主要机制之一。     

水龙骨体外抗肝癌作用研究

目的 研究水龙骨对人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721的生长增殖抑制作用.方法 制备水龙骨含药血清,用MTT法观察细胞增殖情况.结果 水龙骨含药血清在体外对人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721均有抑制作用,对HepG2的最高抑制率为87.4%,对SMMC-7721的最高抑制率为85.9%,抑制肝癌细胞的效果优于含5-氟尿嘧啶血清.结论 水龙骨对肝癌细胞的体外增殖有明显的抑制作用.     

健脾化瘀方对人肝癌细胞SMMC-7721增殖和凋亡的影响

[目的]探讨健脾化瘀方对人肝癌细胞系SMMC-7721的抑制率及药物浓度和作用时间对细胞抑制率的影响,以及IC_(50)药物浓度下对SMMC-7721凋亡的影响。[方法]采用MTT法,观察不同浓度的健脾化瘀方对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖的影响及与药物作用时间之间的关系。用AnnexinV/PI双染色法,用流式细胞仪检测健脾化瘀方对肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的影响。[结果]健脾化瘀方浓度在5mg/mL时,对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用,呈剂量依赖和时间依赖效应关系。健脾化瘀方对人肝癌细胞SMMC-7721作用24h后,肝癌细胞凋亡率升高,并有一定的浓度依赖性。[结论]健脾化瘀方有抑制SMMC-7721细胞的增殖,能诱导人肝癌细胞株SMMC-7721的凋亡。     

埃克特注射液体内外抗肝癌作用研究

目的:观察埃克特注射液对人肝癌细胞SMMC-7721细胞及小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用。方法:用MTT法、细胞生长曲线实验研究不同浓度的埃克特注射液作用48h对SMMC-7721细胞的生长抑制作用,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡,以了解该药物对肝癌细胞的体外增殖作用;同时建立小鼠H22肝癌移植性实体瘤模型研究埃克特注射液对肝癌的体内抑制作用。结果:埃克特注射液对SMMC-7721具有抑制作用,呈明显的量效关系,IC50为2.325mg/L;生长曲线提示埃克特注射液对SMMC-7721细胞的抑制作用呈明显时效和量效关系;Hoechst 33258染色后,给药组出现明显的细胞凋亡形态学变化;腹腔注射0.5、1、2mg/kg埃克特注射液对小鼠移植性肿瘤H22的抑制率分别为34.37%、42.36%、57.99%,呈剂量依赖性。结论:埃克特注射液对人肝癌细胞SMMC-7721细胞具有明显体外抗增殖作用,对小鼠移植性肿瘤H22有一定的抑制作用。     

复方斑蝥注射液对人肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制作用

目的:探讨复方斑蝥注射液(Compound Cantharis Injection,CCI)对人肝癌细胞SMMC-7721生长抑制作用.方法:分别用用MTT法和细胞生长曲线研究CCI对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用.结果:与阴性对照组比较,CCI在2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml剂量时对肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制率分别为11.63%、20.54%、38.11%、62.44% (P<0.05);平均半数抑制浓度(IC50)为11.29mg/ml.生长曲线结果显示:CCI对肝癌细胞的抑制作用且呈明显的量效和时效关系.结论:CCI能显著抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长,具有一定的剂量依赖性.     

双氢青蒿素含药血清抑制人肝癌SMMC-7721细胞活性的研究

目的:研究双氢青蒿素含药血清抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用及作用机制。方法:制备空白组、双氢青蒿素15 mg/kg、30 mg/kg、60mg/kg、120 mg/kg 5个剂量组含药血清,以贝伐单抗为对照药,作用于人肝癌SMMC-7721细胞;噻唑蓝法检测各组细胞增殖;流式细胞仪检测各组细胞凋亡;制作细胞爬片,免疫组化法检测各组细胞的血管内皮生长因子表达。结果:和空白组比较,双氢青蒿素含药血清30 mg/kg组、60 mg/kg组、120mg/kg组能明显抑制SMMC-7721细胞增殖并诱导细胞凋亡。24h的增殖抑制率分别为22.41%、29.31%和36.21%,48h的增殖抑制率分别为24.68%、36.36%和41.56%,72h的增殖抑制率分别为30.59%、38.82%和45.88%;凋亡率分别为16.13%、17.42%和19.73;免疫组化结果显示各双氢青蒿素组细胞的血管内皮生长因子表达均受到明显抑制。结论:双氢青蒿素含药血清浓度达到30 mg/kg以上时表现出明显的抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡作用,并且这种作用可能与其对血管内皮生长因子的表达抑制相关。     

MTT法检测没食子酸对两种细胞的体外毒性

目的:探讨抗肿瘤单体没食子酸(GA)对体外培养的正常人肝细胞株LO2和肝癌细胞株SMMC-7721的毒性。方法:采用MTT实验分析GA对LO2和SMMC-7721的增殖抑制作用。结果:GA作用24h、48h、72h后,用药组均出现了不同程度的增殖抑制。结论:抗肿瘤单体GA对LO2和SMMC-7721细胞均有一定的毒性,表现为增殖抑制作用,作用早期(24h)对LO2的抑制大于对SMMC-7721的抑制,连续作用后(48h、72h),对SMMC-7721细胞的损伤明显超过对LO2的抑制。     

陕重楼甾体皂苷类单体B(BM-61)对SMMC-7721细胞增殖的影响

目的:观察陕重楼甾体皂苷单体B(BM-61)对人肝癌SMMC-7721细胞的影响。方法:将不同浓度BM-61与人体肝癌SMMC-7721细胞分别在24 h、48 h、72 h处理后,采用MTT法,测定吸光度OD值,并计算细胞增殖抑制率,检测陕重楼单体B对肿瘤细胞增殖的影响。结果:本品1.6 mg·L-1、8 mg·L-1、40 mg·L-1、200 mg·L-1、1 000 mg·L-1剂量组在24 h、48 h、72 h与对照组比较吸光度A值有显著性降低(P0.01或P0.05),本品0.3 mg·L-1剂量在24 h、48 h吸光度A值也有显著性降低(P0.05),其中8 mg·L-1在24 h、48 h、72 h吸光度最小,抑制率分别为19%、23%、17%。结论:陕重楼BM-61对人肝癌SMMC-7721细胞具有一定的抑制作用,且最强抑制浓度为8 mg·L-1。     

基于HepG2、SMMC-7721肝癌细胞生长抑制的鸡血藤总黄酮纯化前后药效对比研究

目的:探讨鸡血藤总黄酮纯化前后对HepG2和SMMC-7721肝癌细胞药效对比的影响;明确鸡血藤抗肝癌作用的物质基础。方法:以肝癌细胞抑制率为评价指标,将纯化前后不同剂量的鸡血藤总黄酮分别作用于HepG2和SMMC-7721两株肝癌细胞24h、36h、48h后,采用MTT法检测其对两株肝癌细胞抑制情况。结果:鸡血藤纯化前后的总黄酮均能够显著抑制肝癌HepG2和SMMC-7721肝癌细胞的增殖。相同给药时间内,纯化后的鸡血藤总黄酮对肝癌细胞的抑制率均大于未纯化的鸡血藤黄酮抑制率。此外,无论纯化前与后,其抗肝癌作用随着时间和剂量的增加而增强,呈现显著的时-效、量-效关系(P0.05)。结论:通过体外药效学比较,显示鸡血藤总黄酮纯化后药效优于纯化前药效,表明鸡血藤总黄酮是鸡血藤抗肝癌的主要物质基础,为鸡血藤在治疗肝癌方面的发展及临床合理利用奠定基础。     

复方苦参注射液诱导人肝癌SMMC-7221细胞凋亡的研究

目的 探究复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响.方法 无菌培养人肝癌细胞SMMC-7721,采用MTT法检测复方苦参注射液对SMMC7721细胞的影响,复方苦参注射液的浓度分别为3.34、2.38、1.43和0.48 mg/ml;采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法测肝癌细胞凋亡率,复方苦参注射液的浓度分别为0.86、1.72和3.43 mg/ml.结果 复方苦参注射液浓度3.34、2.38、1.43、0.48 mg/ml作用于SMMC-7721 24 h的细胞抑制率分别为51.03％、53.67％、49.83％、0.03％;作用48 h后,上述浓度的细胞抑制率分别为67.14％、65.35％、62.25％、0.05％,作用72 h后,分别为74.16％、68.77％、66.04％、26.02％.结果 复方苦参注射液浓度0.86、1.72和3.43 mg/ml作用于SMMC-7721 24 h的细胞凋亡率分别为(2.86±0.35)％、(15.16±1.15)％、(13.17±0.40)％;作用48 h后,上述浓度的细胞凋亡率分别为(8.57±0.44)％、(28.07±0.76)％、(29.81±8.10)％,均高于空白对照组(1.05±0.09)％(P＜0.05).结论 复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖具有抑制作用,其作用机制与诱导细胞凋亡有关.     

白茅根水提物对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及细胞凋亡的影响

目的 研究白茅根水提物对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖抑制率、细胞周期及细胞凋亡的影响.方法 采用MTT法研究白茅根水提物对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制率及抑制率与时间剂量关系;并通过PI染色法和Annexin V-EGFP/PI双染法研究白茅根水提物作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞周期DNA含量变化及对细胞凋亡率的影响.结果 不同浓度的白茅根水提物处理肝癌SMMC-7721细胞24,48,72,96 h后,均呈现出显著的细胞增殖抑制作用,抑制作用具有明显的时间-剂量-效应关系,差异有统计学意义(P＜0.05);细胞周期与细胞凋亡实验结果显示不同浓度的白茅根水提物处理肝癌SMMC-7721细胞46 h后可显著增加肝癌细胞凋亡率,差异有统计学意义(P ＜0.001),作用36 h后,可增加S期比例同时降低G2/M期细胞比例,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 白茅根水提物对人肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的增殖抑制作用并可诱导其凋亡,该作用是通过抑制C2/M期细胞比例,将细胞周期阻滞在S期实现的.     

川芎嗪对人肝癌HepG2细胞的影响及与突变型p53蛋白表达的影响

目的观察川芎嗪对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及其与突变型p53蛋白表达变化的关系。方法应用不同浓度的川芎嗪作用于人肝癌HepG2细胞24h、48h和72h,MTT法检测细胞活力;Hoechst染色法检测细胞凋亡;免疫细胞化学法检测川芎嗪对突变型p53蛋白表达的影响。结果不同浓度的川芎嗪呈时间、剂量依赖性地抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并促进其凋亡（均P〈0.01）,800mg/L川芎嗪作用细胞72h后,其抑制率及凋亡率分别为49.59%和31.31%。免疫细胞化学法显示,不同浓度的川芎嗪作用人肝癌HepG2细胞48h后,突变型p53表达呈显著降低（均P〈0.01）。结论川芎嗪可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与其抑制突变型p53蛋白的表达有关。     

肝癥口服液含药血清对肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响

目的:探讨肝口服液含药血清对肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响,为临床应用肝口服液治疗肝癌提供实验室依据。方法:选取Ⅱb或Ⅲ期肝癌病人和健康志愿者各5例,分别在用药前及用药后8周采集血清,与SMMC-7721细胞共同培养24h、48h后,应用噻唑氮蓝(MTT)比色法测定肝癌细胞SMMC-7721增殖水平。结果:HCC患者含药血清对SMMC-7721细胞增殖抑制率在24h、48h分别为45.00%3、9.32%;而健康志愿者为4.58%、7.70%,HCC患者含药血清对肝癌细胞增殖抑制作用明显高于健康志愿者。结论:肝口服液含药血清对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用并促进其凋亡,表明肝口服液有抗肿瘤作用。     

半边旗提取物5F-Na盐溶液对三种肝细胞癌细胞株的增殖抑制作用

目的:评估半边旗提取物5F-Na盐溶液对肝细胞癌细胞株的增殖抑制作用。方法:采用MTT法,观察不同浓度的半边旗提取物物5F-Na盐溶液分别作24、48、72h对三种不同类型肝细胞癌细胞株(HepG2,Hep3B,BEL-7402)生长增殖的影响。结果:不同浓度的半边旗提取物5F-Na盐溶液分别对3种肝癌细胞作用24、48、72h后,所有的肝癌细胞株生长增殖均受到不同程度的抑制(P<0.05),5F-Na盐溶液对HepG2,Hep3B,BEL-7402作用72h后的IC50分别是20.67,16.74,16.09mg/L。结论:半边旗提取物5F-Na盐溶液能有效抑制肝细胞癌细胞株的体外增殖。     

乳香挥发油抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用

目的探讨乳香挥发油体外抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用。方法使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察乳香挥发油对SMMC-7721的增殖抑制作用;通过吖啶橙染色,观察SMMC-7721的形态学变化;使用琼脂糖凝胶电泳法检测乳香挥发油对细胞DNA降解的影响;利用流式细胞术分析乳香挥发油诱导SMMC-7721凋亡的凋亡率及对细胞周期的影响;应用间接免疫荧光法观察凋亡调控基因bax和bcl-2蛋白的表达变化。结果乳香挥发油浓度为0.7、0.07、0.007、0.0007、0.00007mg.mL-1作用24h时,能抑制SMMC-7721的生长,并呈浓度依赖性。在浓度为0.07mg.mL-1时,作用48h或72h,电泳结果显示了DNA梯状条带,流式细胞仪检测到凋亡峰,且细胞被阻滞于G1期。间接免疫荧光法的结果表明,促凋亡蛋白bax的表达增强,抗凋亡蛋白bcl-2的表达无明显变化。结论乳香挥发油能抑制肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,并可能通过上调线粒体内bax/bcl-2的表达比例诱导SMMC-7721细胞的凋亡,而且其诱导的凋亡具有细胞周期依赖性。     

番荔枝种子内酯提取物含药血清对人肝癌细胞株HepG2的作用

目的:研究番荔枝种子内酯提取物对人肝癌细胞株HepG2的作用。方法:以血清药理学方法考察不同剂量的番荔枝种子内酯提取物含药血清对人肝癌细胞株HepG2的抑制作用,用MTT法进行评价。结果:内酯提取物含药血清作用于HepG2细胞的抑制率呈现出时间和剂量依赖性,高剂量组作用72h时抑制率可达54.16%。结论:番荔枝种子内酯提取物对体外培养的人肝癌HepG2细胞的生长增殖具有显著的抑制作用。     

陕重楼提取物对人肝癌SMMC_(-7721)细胞bc_(l-2)和Bax基因表达的影响

目的:探讨陕重楼乙酸乙酯提取物含药血清对肝癌SMMC-7721细胞bcl-2和Bax基因的影响。方法:采用血清药理学方法,以20mg/kg、10mg/kg和5mg/kg药量提取物给SD大鼠灌胃,分离血清配制成10%含药血清培养基后,加入人肝癌细胞SMMC-7721中培养48h,制作细胞爬片,采用免疫细胞化学测定法检测bcl-2和Bax蛋白在肝癌细胞中的表达情况,观察陕重楼乙酸乙酯提取物对人肝癌SMMC-7721细胞中bcl-2和Bax基因表达的影响。结果:高、中、低浓度提取物10%含药血清制作的细胞爬片在人肝癌细胞系SMMC-7721中的bcl-2蛋白阳性细胞计数率分别为6.50%、8.47%和8.85%,Bax蛋白阳性细胞计数率分别为44.12%、43.88%和37.66%。结论:与肝癌细胞系SMMC-7721空白对照组的bcl-2、Bax蛋白阳性细胞计数率相比,给药组培育48h后肝癌细胞系中bcl-2蛋白表达水平降低,Bax蛋白的表达上调,bcl-2/Bax比值降低,陕重楼乙酸乙酯提取物应用在线粒体途径促进细胞凋亡过程中能发挥协同作用,并可能通过此途径诱导肿瘤细胞的凋亡。     

熊果酸抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长及凋亡的实验研究

目的:探讨熊果酸对人肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用.方法:将不同浓度的熊果酸分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,72 h后,采用中性红染色法测定吸光度(A),评定熊果酸对肝癌细胞株的增殖抑制作用;流式细胞术测定其对肝癌细胞凋亡及细胞周期的影响.结果:不同浓度熊果酸对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用(P＜0.05或P＜0.01),呈时间和剂量依赖关系;24,72 h的半数抑制浓度(IC50)为12.59,8.32 mg·L-1.流式细胞仪检测结果表明,熊果酸12.5 mg·L-1对肝癌SMMC-7721细胞凋亡率14.07％,凋亡率随药物浓度的增加而上升;SMMC-7721细胞阻滞S期,作用与药物剂量呈正相关.结论:熊果酸对肝癌细胞株SMMC-7721增殖有明显的抑制作用,抗肿瘤作用机制可能与诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞于S期有关.     

苦参碱和氧化苦参碱对人肝癌细胞株 SMMC-7721凋亡的影响

目的：探讨苦参碱与氧化苦参碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响。方法采用MTT法检测SMMC-7721细胞增殖,并采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法检测SMMC-7721细胞凋亡。结果苦参碱与氧化苦参碱浓度为0.50～2.00 mg/ml时,细胞增殖抑制率均逐渐上升,呈药物浓度和作用时间的依赖性;同样浓度下（1.00 mg/ml）,苦参碱增殖抑制作用强于氧化苦参碱[24 h、48 h和72 h时苦参碱组分别为（42.39±0.04）%、（51.69±0.03）%、（78.98±0.05）%,氧化苦参碱组分别为（21.36±0.02）%、（36.16±0.02）%、（61.24±0.13）%;P均＜0.05]。苦参碱与氧化苦参碱浓度为0.25、0.50、1.00 mg/ml时SMMC-7721细胞凋亡率显著增高;同样时间点（48 h）,苦参碱对细胞凋亡的诱导强于氧化苦参碱[0.25、0.50、1.00 mg/ml时,苦参碱组凋亡率分别为（4.08±0.20）%、（4.32±0.19）%、（9.93±0.18）%,氧化苦参碱组分别为（2.20±0.18）%、（3.08±0.26）%、（9.01±0.20）%;P均＜0.05]。结论苦参碱和氧化苦参碱可抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,促进其凋亡。