粘附分子表达在脓毒症小鼠肺损伤中的作用

目的 探讨肺微血管内皮细胞粘附分子表达在脓毒症小鼠肺损伤中的作用。方法 盲肠结扎穿孔（ＣＬＰ）制造小鼠脓毒症模型,分别在致伤后３、１２ｈ分离肺微血管内皮细胞,用逆转录－聚合酶链（ＲＴ－ＰＣＲ）方法定量检测Ｅ－选择素、细胞间粘附分子（ＩＣＡＭ）－１和血管细胞粘附分子（ＶＣＡＭ）－１的基因表达,同时测定肺组织中髓过氧化物酶（ＭＰＯ）活性的改变。结果 ＣＬＰ后３ｈ肺微血管内皮细胞Ｅ－选择素、ＩＣＡＭ－１     

脓毒症小鼠肝损伤时的粘附分子基因表达

目的 探讨脓毒症小鼠肝损伤时肝窦内皮细胞粘附分子基因表达变化。方法 用盲肠结扎穿孔（ＰＬＰ）法制造小鼠脓毒症模型,假手术组（ｓｈａｍ）接受同样的手术操作但不行ＣＬＰ。分别在致伤后３、１２ｈ分离肝窦内皮细胞,用ＲＴ－ＰＣＲ的方法定量检测Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ、ＩＣＡＭ－１的基因表达,同时还测定了肝组织中ＭＰＯ活性及微血管通透性的改变。结果 ＣＬＰ后３ｈ肝窦内皮细胞Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ基因的表达明显增高     

抗生素和血清制剂治疗小鼠脓毒症时对血浆内毒素和细胞因子的影响

目的通过观察脓毒症小鼠的治疗过程,研究抗生素和血清制剂对血中内毒素脂多糖（ＬＰＳ）和细胞因子的影响。方法脓毒症模型采用ＮＨ１小鼠,腹腔大肠杆菌。治疗分３组,先锋霉素５（ＣＥＦ）,新生小牛血清（ＮＢＳ）,生理盐水（ＮＳ）。结果ＮＢＳ组的７２小时生存率明显高于ＮＳ组（Ｐ＜０．０５）。ＣＥＦ组３小时白细胞计数低于ＮＳ组（Ｐ＜０．０５）。ＮＢＳ组的１、３小时ＬＰＳ水平低于ＮＳ对照组（Ｐ＜０．０５）,血ＩＬ１和ＴＮＦ低于ＮＳ组（Ｐ＜０．０５）。结论抗生素对抑制白细胞升高起主导作用,对ＬＰＳ和细胞因子活性无明显抑制作用。血清制剂可能同时具有抗休克和抗炎症的双重作用,对提高早期生存率起重要作用。     

促炎症和抗炎症细胞因子基因表达与脓毒症小鼠肝损伤的关系

目的 探索促炎症及抗炎症细胞因子在脓毒症小鼠肝损伤中的作用。方法 盲肠结扎穿孔（ＣＬＰ）造成小鼠脓毒症模型,假手术（sham）组接受同样手术操作且不行ＣＬＰ。用ＲＴ－ＰＣＲ的方法检测了脓毒症小鼠肝组织中多种细胞因子（促炎症细胞因子ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６,抗炎症细胞因子ＩＬ－４）mＲＮＡ的表达,同时还测定了肝组织含水量及微血管通透性的改变。结果 与sham组相比,ＣＬＰ小鼠在３h后ＴＮＦα、ＩＬ－１β基因表达即明显增高（Ｐ＜０.０１）,至１２h仍然高于sham组（Ｐ＜０.０１）,但较３h有所降低;ＩＬ－６基因在ＣＬＰ后３h也明显增高（Ｐ＜０.０１）,并且在ＣＬＰ后１２h仍继续增高（Ｐ＜０.０１）;与之不同的是ＩＬ－４基因,在ＣＬＰ后３h ＩＬ－４基因表达与sham组差异无显著意义,至ＣＬＰ后１２h才明显高于sham组（Ｐ＜０.０１）。ＣＬＰ后３h肝组织含水量与肝微血管通透性即开始有所升高但与sham组比较差异无显著意义,至ＣＬＰ后１２h进一步增高与sham组比较差异均有显著意义（含水量Ｐ＜０.０５,微血管通透性Ｐ＜０.０１）。结论 促炎症细胞因子与抗炎症细胞因子之间力量对比的失衡可能是脓毒症并发肝损伤的重要原因。     

抗内毒素单克隆抗体在脓毒症治疗中的评价

制做并判定抗内毒素单克隆抗体对脓毒症治疗是否有效。方法 以Ｅｃｏｌｉ Ｊ５，Ｓ，ｍｉｎｎｅｓｏｔａ Ｒａ，Ｒｅ之ＬＰＳ制备单抗Ｍ２Ｂ，ＣＬＰ大鼠或大肠杆菌一次不射小鼠伤前给于Ｍ２Ｂ。结果 Ｍ２Ｂ未能改善基细菌攻击小鼠的存活。Ｍ２Ｂ有效提高ＣＬＰ大鼠存活并减低血内毒素水平，炎性细胞因子水平，保持较高组织ＡＴＰ与ＧＳＨ。     

诱发性一氧化氮合酶抑制药对感染性休克鼠肝,肺组织学改变？…

目的 研究诱导性一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）抑制药氨基胍（ＡＧ）和非选择性ＮＯＳ抑制药Ｌ－Ｎ硝基精氨甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）对感染性休克鼠肝肺组织学改变的影响。方法 小鼠腹腔内注射（ｉ．ｐ．）内毒素（ＬＰＳ,２０ｍｇ·ｋｇ＾－１）后４小时随机分为ＬＰＳ组（ｎ＝６０）,ＬＰＳ＋Ｌ－ＮＡＭＥ组（３０ｍｇ·ｋｇ＾－１ｉ．ｐ．,ｎ＝６０）。和ＬＰＳ＋ＡＧ组（２０ｍｇ·ｋｇ＾－１ｉ．ｐ．ｎ＝６０）。５小时后取受试鼠     

抗内毒素单抗下调脓毒症小鼠肠上皮细胞白细胞介素-1转换酶基因表达及逆转肠上皮细胞凋亡的作用

目的观察抗内毒素单抗对脓毒症小鼠肠上皮细胞内诱导细胞凋亡的白细胞介素-1-转换酶(ICE)基因及细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、细胞介素(IL)-1β、IL-6基因表达的影响,判断其对防治脓毒症小鼠肠上皮细胞异常凋亡的功效。方法用盲肠结扎穿孔(CLP)造成小鼠脓毒症,动物分3组:实验组、对照组(假手术组)和治疗组。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法定量检测ICE基因及细胞因子基因表达,琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测肠上皮细胞凋亡。结果抗内毒素单抗明显下调细胞因子TNF-αa、IL-1β、IL-6基因的表达并抑制了ICE基因表达,减少了肠上皮细胞凋亡数量,改善了动物的存活率。数据为ICE基因(0.37±0.08)、TNF-α(0.34±0.05)、IL-1β(0.49±0.17)、IL-6(0.43±0.14),与实验组相比差异有显著性(P<0.05)。结论抗内毒素单抗对脓毒症小鼠肠上皮细胞凋亡相关基因(ICE)及细胞因子基因表达具有明确的抑制作用,对脓毒症小鼠肠上皮完整性(机械屏障)有保护作用。     

内皮细胞凋亡在脓毒症小鼠肺微血管通透性改变中的作用

目的 探讨肺微血管内皮细胞凋亡在脓毒症小鼠肺微血管通透性改变中的作用。方法 ２４只雄性昆明小鼠随机分为２组,盲肠结扎穿孔组（ＣＬＰ组）和假手术组（ＳＯ组）;每组再分３ｈ和１２ｈ２个时间点。以流式细胞仪和原位凋亡检测试剂盒检测肺微血管内皮细胞的凋亡。用ＲＴ－ ＰＣＲ的方法检测肺微血管内皮细胞中ｂｃｌ－２基因的表达善况。同时还用尾静脉注射伊文蓝的方法检测了肺微血管通透性的改变。结果 在ＣＬＰ组１２ｈ点     

不饱和脂肪酸对枯否氏细胞分泌功能的调节作用

通过研究不饱和脂肪酸（鱼油）对脓毒症大鼠枯否氏细胞（ＫＣ０分泌功能折影响。结果发现：脓毒组ＫＣ培养液中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ），白细胞介素－１（ＩＬ－１），白细胞介素－６（ＩＬ－６）活力明显高于正常组（Ｐ〈０．０１），两周鱼油治疗组，致伤后４小时ＴＮＦ未见明显变化，致伤后１２小时，ＴＮＦ活力明显低于脓毒症组（Ｐ〈０．０５）；４周鱼油治疗组，无论致伤后４ 小时，还是１２小时，ＴＮＦ、ＩＬ－１、ＩＬ－６     

诱导性一氧化氮合酶抑制药对感染性休克治疗作用的观察

目的：评价诱导性一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）抑制药氨基胍（ＡＧ）的抗感染性休克作用。方法：杂种犬（８￣１２ｋｇ）２小时内静滴内毒素（ＬＰＳ，１ｍｇ／ｋｇ）后随机分为对照（ｎ＝６）和治疗疗组。治疗组在ＭＡＰ下降后２小时分别静注Ｌ－Ｎ位硝基精氨甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ，ｎ＝６．３０ｍｇ／ｋｇ）和ＡＧ（ｎ＝Y６。２０ｍｇ／ｋｇl）。结果：静注后的ＬＰＳ后１小时在ＮＯ升高同时ＭＡＰ明显下降。ＳＶＲ和尿量明显减少。给予     

烧伤血清刺激下中性粒细胞与内皮细胞粘附力的变化及CD11…

为探讨烧伤血清作用下ＰＭＮ－ＥＣ粘附力的改变和ＣＤ１１／ＣＤ１８单抗对ＰＭＮ 皮细胞（ＥＣ）粘附力的影响，将烧伤血清与人ＰＭＮ或人脐静脉内细胞（ＨＵＶＥＣ）－同孵育，在孵育１，３，６，１２，２４小时分别应用细胞微管吸吮技术系统测定ＰＭＮ－ＨＵＶＥＣ粘附力，并用健康人血清刺激作对照。同时，将与烧伤血清孵育１，６，２４小时的ＰＭＮ，应用ＣＤ１１ａ／ＣＤ１１８ｍＡｂ和ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８ｍＡｂ处理后，     

烧伤血清刺激下中性粒细胞与内皮细胞粘附力的变化及CD11/CD18单抗的阻断作用

为探讨烧伤血清作用下ＰＭＮ－ＥＣ粘附力的改变和ＣＤ１１／ＣＤ１８单抗（ｍＡｂ）对ＰＭＮ与内皮细胞（ＥＣ）粘附力的影响，将烧伤血清与人ＰＭＮ或人脐静脉内细胞（ＨＵＶＥＣ）一同孵育，在孵育１，３，６，１２，２４小时分别应用细胞微管吸吮技术系统测定ＰＭＮ－ＨＵＶＥＣ粘附力，并用健康人血清刺激作对照。同时，将与烧伤血清孵育１，６，２４小时的ＰＭＮ，应用ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８ｍＡｂ和ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８ｍＡｂ处理后，再测其与ＨＵＶＥＣ粘附力。结果表明：ＰＭＮ在烧伤血清刺激后与正常ＨＵＶＥＣ粘附力迅速升高，１小时达到最高峰，并在２４小时内维持此水平。烧伤血清激活的ＰＭＮ与ＨＵＶＥＣ粘附力可被ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８单抗和ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８单抗降低７０％～８０％。ＨＵＶＥＣ在烧伤血清刺激后与ＰＭＮ粘附力呈持续升高趋势，１２小时后达最大值，并在以后１２小时内无明显变化。提示：烧伤血清具有促进ＰＭＮ－ＥＣ粘附，并在烧伤后ＰＭＮ－ＥＣ粘附中起重要作用，而且刺激ＰＭＮ后所引起的ＰＭＮ－ＥＣ粘附力变化与刺激ＥＣ后所引起的变化不同。ＣＤ１１／ＣＤ１８可部分降低ＰＭＮ－ＥＣ粘附力，从而可能减轻ＰＭＮ对ＥＣ的损害。     

H_2O_2诱导人类肝细胞、内皮细胞细胞凋亡时Ca~(2 )流变化的对比研究

探讨过氧化物诱导人类肝细胞（ＬＯ２细胞）、内皮细胞（ＥＶＣ３０４细胞）凋亡时Ｃａ２＋流变化不同特点和意义及丹参提取物Ｒｘａ通过Ｃａ２＋信号系统介导的细胞保护效应。方法用膜联蛋白荧光素（Ａｎｎｅｘｉｎ－Ｖ－Ｆｌｕｏｓ）与碘化丙啶（ＰＩ）双标记流式细胞术（ＦＣＭ）分析Ｈ２Ｏ２作用不同时限Ｒｘａ处理组与未处理组凋亡细胞指数分布;用全细胞膜片钳放大系统显微荧光检测术同步分析同期Ｃａ２＋流变化。结果Ｈ２Ｏ２诱导细胞凋亡时ＬＯ２细胞［Ｃａ２＋］ｉ、Ｃａ２＋跃升,Ａｎｎｅｘｉｎ－Ｖ＋细胞指数均较ＥＶＣ３０４细胞为高;［Ｃａ２＋」ｉ＞４００ｎｍｏｌ／Ｌ后１～２小时可观察到细胞凋亡早期膜翻转现象。Ｒｘａ组［Ｃａ２＋］ｉ、Ａｎｎｅｘｉｎ．Ｖ＋和ＰＩ＋细胞指数均较未处理组为低。结论Ｈ２Ｏ２可诱导ＬＯ２、ＥＶＣ３０４细胞Ｃａ２＋依赖性细胞凋亡;［Ｃａ２＋］ｉ＞４００ｎｍｏｌ／Ｌ可能为细胞凋亡启动的早期信号;ＬＯ２细胞较ＥＶＣ３０４细胞抗凋亡能力为差;Ｒｘａ能有效降低［Ｃａ２＋］ｉ,减轻细胞损伤程度。     

以FITC—LPS为示踪物对小鼠肠道内毒素移位的观察

以Ｐｂ－Ａｃｅｔ和５－ＨＴ静注同时ＬＰＳ灌胃方法形成肠源性内毒素血症动物模型。利用荧光素异硫氰酸盐—内毒素（ＦＩＴＣ－ＬＰＳ）的荧光特性，将其按１／１０的比例混入于口灌的ＬＰＳ中。结果证实，造模３小时后，肝、肺、肾、脑均有较强的荧光发射，说明已有肠道ＦＩＴＣ－ＬＰＳ移位现象发生。本方法具有简单性、可行性、先进性等特点，不失为一种较佳的定性观察ＬＰＳ移位的实验方法。     

间皮细胞粘附分子表达对腹腔巨噬细胞功能的影响

目的通过研究细菌毒素和炎症细胞因子诱导的间皮细胞（ＭＣｓ）粘附分子表达及其对腹腔巨噬细胞功能的影响，探讨间皮细胞在腹膜抗菌防御中的作用。方法将体外培养的人腹膜间皮细胞以细菌脂多糖（ＬＰＳ）、ＴＮＦ－α或ＩＬ－１β刺激，采用间接免疫荧光染色技术，于激光扫描共聚焦显微镜下观察间皮细胞表面粘附分子（ＩＣＡＭ－１）的表达；采用细胞瑞氏染色方法，在普通光镜下计数腹腔巨噬细胞的粘附率。结果人腹膜间皮细胞表达ＩＣＡＭ－１，用ＬＰＳ、ＴＮＦ－α或ＩＬ－１β刺激间皮细胞后培养６小时，ＩＣＡＭ－１的表达高于对照组，有显著性差异（Ｐ＜０．０５）；各刺激组腹腔巨噬细胞的粘附率也明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。间皮细胞粘附分子的表达与腹腔巨噬细胞的粘附率呈正相关（ｒ＝０．９１８）。结论炎症介质和促炎症细胞因子通过刺激腹膜间皮细胞粘附分子表达增加，增强腹腔巨噬细胞的粘附和吞噬，在腹膜抗菌防御中起重要作用     

胰腺良恶性疾患细胞凋亡及相关基因ICE表达的比较研究

目的　阐示胰腺良恶性疾患细胞凋亡的存在形式及凋亡介导基因ＩＣＥ在胰腺良恶性疾患中的表达水平。方法　由凋亡原位分析、免疫组化及Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹杂交，对３８ 例胰腺癌石蜡标本、２１ 例胰腺癌冰冻标本、２０ 例慢性胰腺炎冰冻标本进行凋亡及ＩＣＥ表达的半定量统计学分析。结果　肿瘤细胞凋亡原位分析结果为１－５５±０－８９，同组织非肿瘤细胞为２－３４±０－７１，二者差异有极显著意义（Ｐ＜０－０１） ；免疫组化示ＩＣＥ在胰腺癌组织中的表达为１－３３±０－７９，慢性胰腺炎组织为２－６０ ±０－８１，二者差异有极显著意义（Ｐ＜０－０１）；Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹示ＩＣＥ前体Ｐ４５ 及中间聚合体Ｐ３０ 在胰腺癌组织中的阳性率为９／２１（４２－９％ ），慢性胰腺炎组织为１６／２０（８０ ％） ，二者差异有极显著意义（Ｐ＜０－０１）。结论　肿瘤细胞凋亡状态的减弱及ＩＣＥ在胰腺良恶性疾患间的表达差异提示正常状态凋亡机制的被抑制是细胞癌变的可能途径。     

梗阻性黄疸兔血浆内毒素和内皮素1含量与血流动力学改变的关系

研究梗阻性黄疸内毒素血症对血管内皮细胞产生内皮素１（ＥＴ－１）的作用及ＥＴ－１与梗阻性黄应时血流动力学改变的关系。方法用肝总管结扎法建立梗阻性黄疸（ＯＪ）兔模型,偶氮显色法定量测定血内毒素含量,特异性放射免疫分析法测定血浆ＥＴ－１,生理记录仪和电磁血流计测定心率（ＨＲ）、平均动脉压（ＭＡＰ）、心输出量（ＣＯ）、肝动脉血流量（ＨＡＢＦ）、门静脉血流量（ＰＶＢＦ）、门静脉压力（ＰＶＰ）及内脏血管阻力（ＳＡＲ）。结果ＯＪ组血浆内毒素含量明显高于正常对照（ＮＣ）组;血浆ＥＴ－１低于ＮＣ组。ＯＪ组血浆内毒素与血浆ＥＴ－１含量呈负相关;ＯＪ组血浆ＥＴ－１含量与ＭＡＰ、ＨＡＢＦ、ＰＶＢＦ及ＳＡＲ呈正相关。结论梗阻性黄疽时血浆ＥＴ－１水平降低,内毒素血症不能刺激血管内皮细胞产生ＥＴ－１,血浆ＥＴ－１水平下降在系统血流动力学改变中起一定的作用。     

结直肠癌术前区域动脉灌注化疗对肿瘤细胞凋亡及白细胞介素-1β-转化酶表达的影响

目的　探讨术前区域动脉灌注化疗对结直肠癌细胞凋亡及白细胞介素１β转化酶（ＩＣＥ） 表达的影响。方法　对３０ 例术前区域动脉灌注化疗及２０ 例术前未行任何化疗的结直肠癌患者的病理标本,用ＤＮＡ 原位末端标记检测肿瘤细胞凋亡并应用ＬＡＳＢ法进行ＩＣＥ检测。结果　术前动脉化疗组与未化疗组肿瘤细胞凋亡数分别为（６１－２２ ±３－９９） 和（４０－１１ ±３－９６） 个／ 高倍视野,两者间有显著性差异（ Ｐ＜ ０－００１） 。术前动脉化疗组ＩＣＥ阳性表达亦明显高于非化疗组（ Ｐ ＜０－０５）。术前化疗组内肿瘤细胞凋亡与ＩＣＥ 表达相关分析表明两者间存在正相关（ｒ＝０－５９１, Ｐ＜ ０－０５） 。结论　术前区域动脉灌注化疗对结直肠癌细胞有明显促凋亡作用。     

枯否细胞对内毒素吞噬能力的实验研究

我们研究枯否细胞（ＫＣ）对内毒素（ＬＰＳ）的清除能力及其本身的生物特性变化，以证实ＫＣ细胞在防治肠源性内毒素血症中的作用。１．材料与方法：Ｗｉｓｔａｒ大鼠，雌雄不限，体重２３０±３０ｇ，随机分为（１）烧伤组：３０％烫伤。（２）正常对照组：不烫伤。用胶...     

ICE在肾癌中的表达及与细胞凋亡率的关系

目的探讨白细胞介素１β转换酶（ＩＣＥ）在肾癌中的表达及与细胞凋亡的关系。方法用免疫组化及流式细胞技术，测定５２例肾癌和１４例癌旁正常肾组织ＩＣＥ的表达及细胞凋亡率。结果ＩＣＥ在肾癌细胞中的表达主要位于胞浆，阳性率为８９％，高于正常肾组织的３５％，Ｐ＜００１；阳性细胞含量为（７９４±１５５）％，高于正常肾组织的（３２７±９７）％，Ｐ＜００１，相对蛋白含量（ＦＩ值）为１５９±０１６，高于正常肾组织的０５６±００８，Ｐ＜００１，肾癌细胞凋亡率为（４２±１９）％，正常肾细胞凋亡率为（９２±１６）％；ＩＣＥ表达的ＦＩ值与肾癌细胞凋亡率呈正相关（ｒ＝０４６７，Ｐ＜００５）。结论ＩＣＥ的超表达使肾癌细胞具有更易于凋亡的趋势，是肾癌发生、发展的负调控因子，但未引起肾癌细胞凋亡率的明显改变，推测在肾癌中可能有ＩＣＥ的抑制因子存在或ＩＣＥ结构和功能的变异。