脑脊液中Aβ检测对老年期痴呆早期诊断的意义

目的　探讨脑脊液 (CSF)中 β -淀粉样蛋白 (Aβ)对老年性痴呆 (AD)的诊断价值。方法　采用双抗体夹心酶联免疫吸附法 (ELISA)检测 54例AD患者及 30例正常对照者 (NC)脑脊液中Aβ1 - 42 浓度。结果　CSF中Aβ1 - 42 平均浓度AD组为 (336 .0 83± 1 2 0 .1 80 )ng/L ,NC组为 (556 .967± 1 31 .341 )ng/L ;AD组CSF中Aβ1 - 42 浓度均明显低于NC组 (P <0 .0 5) ;检测CSF中Aβ1 - 42 浓度诊断AD的灵敏度为 46 .2 9% ,特异性为 92 .96 %。结论　临床上检测CSF中Aβ1 - 42 浓度可作为早期诊断老年性痴呆的辅助指标     

嗅三针对阿尔茨海默病小鼠学习能力和海马IL1-β、IL-6表达的影响

目的:观察"嗅三针"对阿尔茨海默病(AD)小鼠学习和海马IL1-β和IL-6表达的影响,以阐明其基于嗅觉通路治疗AD的作用机制。方法:采用APP/PS1转基因小鼠作为AD小鼠模型,小鼠嗅觉通路阻断模型采用嗅神经切断术建立,将40只AD小鼠随机分为模型对照组、嗅神经切断嗅三针组、嗅三针组、盐酸多奈哌齐组,每组10只,另取10只同窝的阴性小鼠作为正常对照组。通过"嗅三针"对印堂穴和双侧迎香穴行电针刺激,每次10分钟,以3mg/kg/d的剂量对盐酸多奈哌齐组AD小鼠进行灌胃,每周干预5次,间歇2天,共干预4周。小鼠学习能力采用Morris水迷宫进行监测,应用Western blot技术检测海马IL1-β和IL-6表达水平。结果:嗅三针刺激和盐酸多奈哌齐灌胃能够显著缩短AD小鼠平均逃避潜伏期,并能显著降低海马IL1-β和IL-6的表达,与AD模型组比较,差异具有显著性(P0. 05);嗅神经切断嗅三针组对AD小鼠平均逃避潜伏期以及海马IL1-β和IL-6的表达均无明显影响,与AD模型组比较,差异无显著性(P0. 05),嗅三针组与盐酸多奈哌齐组比较无显著性差异(P0. 05)。结论:"嗅三针"具有改善AD小鼠学习能力,降低海马水平IL1-β和IL-6表达的作用,嗅觉通路的完整性可能是其发挥干预效应的核心机制。     

天参益智方对老年痴呆模型学习记忆能力及Aβ_(1-40)的影响

目的研究天参益智方(TSYZ)对AD大鼠模型学习记忆障碍的保护作用,探讨其对AD大鼠脑内Aβ1-40沉积的影响。方法以慢性铝中毒法复制AD大鼠模型,用Moriss水迷宫法检测AD大鼠学习记忆能力;采用免疫组化法检测AD大鼠海马和皮质Aβ1-40水平。结果天参益智方治疗组逃出水迷宫的时间及搜索距离显著低于模型对照组(P<0.05,P<0.01),大鼠海马和皮质的平均灰度值显著升高(P<0.01),Aβ1-40水平明显低于模型组。结论天参益智方明显减少AD大鼠脑组织中Aβ1-40沉积,这可能是其改善AD大鼠学习记忆功能作用机制之一。     

天参益智方对老年痴呆模型学习记忆能力及Aβ1-40的影响

目的研究天参益智方（TSYZ）对AD大鼠模型学习记忆障碍的保护作用，探讨其对AD大鼠脑内Aβ1-40沉积的影响。方法以慢性铝中毒法复制AD大鼠模型，用Moriss水迷宫法检测AD大鼠学习记忆能力；采用免疫组化法检测AD大鼠海马和皮质Aβ1-40。水平。结果天参益智方治疗组逃出水迷宫的时间及搜索距离显著低于模型对照组（P〈0．05，P〈0．01），大鼠海马和皮质的平均灰度值显著升高（P〈0．01），Aβ1-40水平明显低于模型组。结论天参益智方明显减少AD大鼠脑组织中Aβ1-40沉积，这可能是其改善AD大鼠学习记忆功能作用机制之一。     

早期老年痴呆患者血p-tau、Aβ1-42与尿AD7c-NTP含量比较研究

目的:研究早期阿尔兹海默病(AD)和血管性痴呆(VD)患者血p-tau、Aβ1-42和尿AD7c-NTP含量的变化,为诊断早期AD、VD提供理论依据。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA),检测AD组25例,VD组25例,对照组20例血中p-tau;Aβ1-42含量及尿中AD7c-NTP含量。结果:早期AD组血p-tau、Aβ1-42蛋白含量和尿中AD7c-NTP含量明显高于VD组和对照组,具有显著性差异(P<0.05),而VD组与对照组比较没有显著性差异(P>0.05)。结论:联合检测血p-tau、Aβ1-42含量和尿AD7c-NTP含量可提高早期AD与VD的诊断与鉴别诊断。     

“通督启神”法两种电针对AD模型小鼠行为学及大脑皮层COX-2、TGF-β1表达的影响

目的:观察"通督启神"法两种电针干预对AD模型小鼠行为学及大脑皮层炎性因子表达的影响,阐释两种电针治疗AD的机理及疗效差异。方法:40只AD模型小鼠随机分为模型组(AD)、药物组(M)、脉冲电针组(EA)、音乐电针组(MEA),同背景C57BL/6小鼠为正常对照组(N),每组10只; EA组、MEA组束缚后针刺印堂、百会20 min,水沟点刺不留针,M组灌胃给药(盐酸多奈哌齐0. 92 mg/kg)后同等条件束缚,AD组和N组同等条件束缚; Morris水迷宫观察小鼠行为学变化,Western blot检测小鼠大脑皮层炎性因子表达情况。结果:EA组、MEA组的逃避潜伏期较AD组均下降(P 0. 01),目标象限游泳时间/总时间、穿越平台次数均增加(P 0. 05或P 0. 01); EA组、MEA组大脑皮层COX-2、TGF-β1的表达较AD组均下降(P 0. 01)。结论:"通督启神"法两种电针干预均能改善AD模型小鼠的空间学习、记忆能力,其机理可能与抑制MG活化、降低大脑皮层COX-2、TGF-β1的表达有关,但两者比较无统计学差异(P 0. 05)。     

复方丹参片对阿尔茨海默病转基因细胞模型Aβ表达的影响

目的研究复方丹参片对阿尔茨海默病（AD）转基因细胞模型β-淀粉样肽（Aβ）表达的影响。方法用前期试验已构建成功的转基因细胞模型做为AD转基因细胞模型,0．5、1、2,4倍复方丹参片饲养大鼠,取0．5、1、2,4倍浓度大鼠血清培养AD转基因细胞,并在24、48、72h用Westernblot方法检测转基因细胞Aβ的表达情况。结果24h,1倍剂量组量效关系最佳。结论复方丹参片能减少AD转基因细胞模型Aβ的表达。     

清心开窍方挥发油对AD大鼠皮质GFAP、Aβ及βAPP表达的影响

目的:探讨清心开窍方挥发油对Aβ25-35杏仁核注射诱导AD大鼠皮质区GFAP、Aβ、βAPP及IL-6表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组和挥发油组。采用杏仁核注射Aβ25-35诱导AD大鼠模型,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过免疫组化方法研究皮质区GFAP、Aβ、βAPP及IL-6的表达。结果:清心开窍方和挥发油能改善AD大鼠学习记忆能力,大鼠皮质区GFAP、Aβ、βAPP及IL-6表达水平降低,与对照组比较有显著性差异(P0.05)。结论:清心开窍方能明显改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能是通过降低皮质GFAP、Aβ、βAPP及IL-6的表达发生作用。     

灸法早期干预对5XFAD转基因小鼠β淀粉样蛋白_(1-40)表达的影响

目的探讨灸法早期干预对阿尔茨海默病模型(AD)小鼠脑内Ab_(1-40)的影响,对艾灸防治AD的作用机制进行探讨。方法 PCR法鉴定转基因AD传代小鼠的基因表型,选取1.5月龄雌性转基因阳性Tg6799小鼠随机分为模型组9只和治疗组8只,同龄、同背景的C57BL/6J野生型雌性小鼠9只为正常组。治疗组进行双侧心俞、肾俞麦粒灸治疗,治疗结束后,应用免疫组化法检测小鼠额叶皮层及海马区Ab_(1-40)的表达水平。结果与模型组比较,治疗组小鼠大脑额叶皮层和海马区Ab_(1-40)表达明显减少(P0.01,P0.05)。结论艾灸疗法早期干预可减少AD模型小鼠脑内Ab_(1-40)的表达,延缓AD病理过程的进展。     

清心开窍方有效成分对AD大鼠海马区IL-1β、GFAP及Aβ表达的影响

目的:探讨清心开窍方有效成分对AD大鼠海马区IL-1β、GFAP及Aβ表达的影响。方法:动物实验采用对照观察法。雄性SD大鼠112只,称体质量后按随机数字表分为7组:正常组、假手术组,模型组、安理申组,皂苷组、挥发油组、多糖组,每组16只。采用双侧海马注射Aβ1-40制造AD大鼠模型,造模后第2天开始灌胃,连续灌胃2周(每天上午10点开始),清心开窍方皂苷组、清心开窍方挥发油组、清心开窍方多糖组剂量分别是9、3.33、8.33 m L/(kg·d),安理申组给药剂量为1.67 mg/(kg·d),予对照组和模型组等体积生理盐水。2周后,采用免疫组化、实时定量荧光PCR及WB法检测AD大鼠海马区IL-1β、GFAP及Aβ表达。结果:清心开窍方各有效成分组大鼠海马区IL-1β、GFAP及Aβ表达水平降低,与对照组比较差异非常显著(P0.01,P0.05)。结论:清心开窍方有效成分可能是通过降低海马区IL-1β、GFAP及Aβ的表达发挥抗AD的作用。     

“嗅三针”对阿尔茨海默病小鼠空间记忆能力和海马APP、Aβ蛋白表达的影响

目的:观察"嗅三针"对阿尔茨海默病(AD)小鼠学习和海马APP、Aβ蛋白表达的干预效应,以阐明其基于嗅觉通路治疗AD的作用机制。方法:将40只AD小鼠随机分为AD模型组、嗅三针组、嗅三针加嗅神经切断组、盐酸多奈哌齐组,每组10只,另取10只同窝的阴性小鼠作为正常对照组。通过"嗅三针"对印堂穴和双侧迎香穴行电针刺激,以3mg/(kg·d)的剂量对盐酸多奈哌齐组AD小鼠进行灌胃,每周干预5次,间歇2d,共干预4周。小鼠空间记忆能力采用Morris水迷宫进行检测,海马APP、Aβ蛋白表达采用western blot法进行检测。结果:嗅三针刺激和盐酸多奈哌齐灌胃均能显著增加AD小鼠穿越平台次数和靶象限占总时间百分比,并能显著降低海马APP、Aβ蛋白表达(P0.05);嗅三针加嗅神经切断组对各指标表达均无明显影响(P0.05),嗅三针组与盐酸多奈哌齐组比较无显著性差异(P0.05)。结论:"嗅三针"具有改善AD小鼠空间记忆能力,降低海马APP、Aβ蛋白表达的作用,嗅觉通路的完整性是其发挥干预效应的核心机制。     

针灸百会、涌泉穴治疗阿尔茨海默病对血浆乙酰胆碱、β-淀粉样蛋白的影响

目的:探讨针灸百会、涌泉穴治疗阿尔茨海默病(AD)对血浆乙酰胆碱、β-淀粉样蛋白的影响。方法:选取2015年1月至2016年6月辽宁中医药大学附属医院收治AD患者110例,按照随机数表法随机分为对照组和观察组,每组55例,对照组给予安慰剂,观察组在对照组基础上给予针灸百会、涌泉穴治疗,观察2组治疗前及治疗6周(治疗后)简易精神状态评价量表(MMSE)及改良长谷川痴呆量表(HDS)评分变化,治疗前后血浆乙酰胆碱(Ach)、β-淀粉样蛋白(Aβ1-40、Aβ1-42)水平变化,并进行统计学分析。结果:治疗前,2组各项观察指标基本相同,差异无统计学意义(P 0. 05)。治疗后,观察组MMSE、HDS评分均显著高于对照组,差异有统计学意义(P 0. 05),观察组血浆Aβ1-40及Aβ1-42水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P 0. 05),观察组血浆Ach水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P 0. 05)。Spearman相关性分析显示,MMSE评分与血浆Ach水平呈显著正相关(P 0. 05),MMSE评分与血浆Aβ1-40及Aβ1-42水平负显著正相关(P 0. 05)。HDS评分与血浆Ach水平呈显著正相关(P 0. 05),HDS评分与血浆Aβ1-40及Aβ1-42水平负显著正相关(P 0. 05)。结论:针灸百会、涌泉穴可有效治疗AD,通过提高血浆Ach水平,降低血浆Aβ1-40及Aβ1-42水平可能是其分子生物学机制。     

补肾方对Aβ_(25-35)杏仁核注射大鼠空间学习记忆和胆碱能系统的影响

目的　观察补肾方对Aβ类老年痴呆 (AD)大鼠空间学习记忆能力和胆碱能系统的影响。方法　通过Aβ2 5-3 5杏仁核单侧注射造成AD大鼠模型 ,采用Morris水迷宫法及放射免疫法观测补肾方对AD大鼠空间学习记忆能力及胆碱能系统的作用。结果　补肾方可显著改善AD大鼠空间学习记忆障碍 ,提高大鼠胆碱乙酰化转移酶 (ChAT)活性及M受体结合容量。结论　补肾方对Aβ诱导的大鼠空间学习记忆障碍及胆碱能系统损害具有显著的改善作用。     

艾灸对AD大鼠学习记忆能力及海马Aβ、IL-1β、IL-2表达的影响

目的观察艾灸对阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)模型大鼠学习记忆能力及海马β淀粉样蛋白(amyloid β protein,Aβ)1-42、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)表达,探讨艾灸治疗AD的作用及其机制。方法将48只健康SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、西药组和艾灸组,每组12只。采用双侧侧脑室注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)制备AD大鼠模型。术后第10天起,艾灸组采用艾灸百会、命门、长强及关元穴治疗,同时西药组给予盐酸多奈哌齐灌胃治疗。治疗30 d后应用水迷宫测试检测各组大鼠的学习记忆能力的变化,采用免疫组织化学方法检测各组大鼠海马Aβ1-42的情况,并采用双抗体夹心法检测各组大鼠海马区IL-1β以及IL-2的表达。结果与模型组比较,艾灸能显著减少海马中Aβ42沉积的情况(P0.05),降低IL-1b蛋白水平(P0.05),提高IL-2蛋白水平(P0.05),并且显著改善模型大鼠的学习记忆能力(P0.05)。结论艾灸能提高机体的免疫力和学习能力,其机制可能与降低海马中IL-1β含量、升高IL-2含量以及改善Aβ42沉积有关。     

丹皮酚对Aβ诱导的AD模型大鼠脑细胞凋亡因子的影响及作用机理

目的:研究丹皮酚对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的大鼠老年痴呆症(Alzheimer disease AD)动物模型的干预作用,探讨丹皮酚对AD模型大鼠脑细胞凋亡的影响及其作用机理。方法:32只大鼠随机分为正常对照组、假手术组、Aβ诱导AD模型组和丹皮酚治疗组。动物喂养40 d后取大鼠脑组织观察其病理变化,用免疫组化染色法和原位杂交法检测大脑细胞凋亡因子P53和活化的Caspase-3以及凋亡细胞的表达水平。结果:用丹皮酚干预减轻Aβ诱导的大脑组织病理结构变化,明显抑制AD模型鼠凋亡因子P53和Caspase-3的表达,减少了凋亡细胞的产生。结论:丹皮酚能保护神经组织,具有明显的抗凋亡作用,可减缓AD的发生发展。     

清心开窍方对Aβ大鼠痴呆模型学习记忆能力和胆碱能系统的影响

目的:探讨Aβ对大鼠学习记忆能力的影响及清心开窍方的防治作用.方法:将Aβ1-40注入大鼠双侧海马建立痴呆(AD)动物模型,动物实验采用对照观察法.治疗组与预防组用清心开窍方防治,对照组用双益平治疗,疗程结束后评定疗效,用Morris水迷宫法测试大鼠学习记忆能力;用化学比色法测定乙酰胆碱酯酶含量;采用放射免疫法测定乙酰胆碱转移酶和M受体的含量.结果:预防组和治疗组大鼠的学习记忆能力改善显著高于模型组(P<0.05).脑内海马区ChaT和AchE活性,模型组ChaT活性显著降低,预防组和治疗组的ChaT活性升高,差异有显著意义(P<0.05).对大脑皮层的M受体测定表明,模型组的M受体显著低于正常对照组,治疗组与预防组则有所上升.结论:清心开窍方能改善AD大鼠的学习记忆能力,对AD病具有预防和治疗作用.     

绿茶多酚对D-半乳糖与Aβ25～35诱导的AD模型小鼠学习记忆障碍的改善作用

目的:建立D-半乳糖与Aβ25~35诱导的AD模型小鼠,观察绿茶多酚对其学习记忆障碍的改善作用。方法:皮下注射D-半乳糖(120 mg/kg,连续给药12 w),并在第7 w时于侧脑室注射Aβ25~35(4 nmol/L),建立AD模型小鼠。利用跳台法、水迷宫、避暗法和开场实验评价绿茶多酚对AD模型小鼠学习记忆障碍的改善作用。结果:绿茶多酚明显延长跳台潜伏期,减少跳台错误次数;缩短游出迷宫时间和减少进入盲端的错误次数;减少避暗活动错误次数和延长进入穿梭箱潜伏期;同时,明显增加AD小鼠的探究行为。结论:绿茶多酚对D-半乳糖与Aβ25~35诱导的AD模型小鼠学习记忆障碍具有改善作用。     

补肾填精法对肾虚阿尔茨海默小鼠海马自噬的干预作用

目的:通过研究六味地黄丸对肾虚阿尔茨海默病(AD)小鼠海马神经元自噬水平的改善作用及部分机制,探讨补肾填精法对AD的部分治疗机制。方法:健康雄性C57-B6小鼠分为正常组,AD组,肾虚AD组,六味地黄丸组(1. 08 g·kg~(-1))。正常组与AD组每日皮下注射生理盐水(15 m L·kg~(-1)),肾虚AD组和六味地黄丸组每日皮下注射氢化可的松注射液(15 m L·kg~(-1)),连续注射20 d。第21天除正常组侧脑室注射无菌生理盐水外,其余3组侧脑室注射β淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35)),6μg/只。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组小鼠血清皮质醇、睾酮水平;透射电镜观察海马神经元细胞形态变化;免疫荧光检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测选择性自噬接头蛋白(p62)的蛋白表达。结果:与正常组比较,AD组和肾虚AD组小鼠的血清皮质醇、睾酮水平显著降低(P 0. 01),小鼠海马LC3表达显著减少(P 0. 01),小鼠海马p62蛋白表达显著增加(P 0. 01);与AD组比较,肾虚AD组小鼠的血清皮质醇、睾酮水平明显降低(P 0. 05,P 0. 01),小鼠海马p62蛋白表达显著增加(P 0. 01);与AD组和肾虚AD组比较,六味地黄丸组小鼠的血清皮质醇、睾酮水平显著升高(P 0. 01),小鼠海马LC3表达显著增多(P 0. 01),p62蛋白表达显著减少(P 0. 01)。正常组和六味地黄丸组小鼠神经元细胞内可见自噬小体,AD组和肾虚AD组小鼠神经元细胞内自噬小体鲜见。结论:补肾填精法能保护海马神经元细胞,增加海马神经元中LC3表达,降低p62表达水平,提高海马神经元自噬水平,对肾虚阿尔茨海默病具有一定的治疗作用。     

补阳还五汤对Aβ1-40所致老年性痴呆大鼠海马区β淀粉样前体蛋白及相关基因表达的影响

目的探讨补阳还五汤对老年性痴呆（AD）大鼠海马区B淀粉样前体蛋白（β-APP）及相关基因：环氧合酶2（COX-2）、核转录因子抑制蛋白α（IκB-α）、神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的影响及可能的作用机制。方法采用Aβ1-40海马区注射,建立AD大鼠模型,免疫组化法观察中药补阳还五汤对AD大鼠海马区β-APP,COX-2,IKB-α及nNOS的影响。结果补阳还五汤能明显降低AD模型大鼠海马区B-APP,COX-2,IκB-α表达,使nNOS表达升高。结论补阳还五汤可能通过COX-2,NF-κB／IκB-α,增加模型大鼠海马区nNOS表达,影响B-APP生成,延缓神经元细胞的早期损伤和迟发性损伤,从而起到治疗AD的作用。     

调心方有效部位TX0201对Aβ25-35所致类"AD"大鼠氧化损伤及能量代谢的影响

目的:研究调心方有效部位TX0201对杏仁核注射Aβ25-35所致类AD模型大鼠氧化损伤及能量代谢的影响.方法:通过杏仁核双侧注射Aβ25-35片段造成类AD大鼠模型;采用分光光度法检测大脑皮层超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、活性氧(ROS)的含量以及丙二醛(MDA)含量;原位杂交法检测皮层及海马细胞色素氧化酶Ⅱ型亚基(COⅡ)mRNA的表达.结果:AD模型大鼠脑组织SOD、GSH-PX活力明显下降,MDA及ROS含量显著上升,同时COIImRNA的表达也明显降低;治疗TX0201组和治疗E2020组大鼠脑组织SOD活力相对于模型组明显提高,MDA和ROS的含量则明显降低,GSH-PX活力有升高的趋势;同时治疗TX0201组 COIImRNA的表达较模型组有显著提高,而治疗E2020组COIImRNA的表达有上升趋势.结论:调心方有效部位TX0201可以明显改善AD大鼠脑内氧化损伤以及能量代谢异常,防治AD的发生与发展.