肿节风提取物抑制鼻咽癌细胞增殖的实验研究

目的:探讨肿节风提取物药物血清对体外培养的鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2、TWO3、C666-1细胞增殖的影响, 探讨其作用机制.方法:将SD大鼠30只随机分为3组,实验组(肿节风)、阳性对照组(环磷酰胺)、阴性对照组(生理盐水),每天灌胃2次,间隔4 h,连续3 d,末次给药后1 h采血,分离血清,灭活、过滤制得含药血清.运用MTT法检测作用药物血清后细胞增殖的改变,并用流式细胞仪(FCM)测定细胞周期的改变,同时结合倒置显微镜,观察其诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用.结果:肿节风可抑制CNE1、CNE2、TWO3、C666-1细胞的增殖, 其作用具有时间和浓度依赖性;同时可诱导细胞凋亡,改变细胞周期分布,多数细胞阻滞于G1期.结论:体外实验表明,肿节风提取物具有抗鼻咽癌细胞增殖的作用,是一种具有应用前景的诱导肿瘤细胞凋亡的天然药物.     

薏苡仁提取物对鼻咽癌细胞作用的研究

目的探讨薏苡仁提取物对鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2、TW03和C666—1细胞体外培养情况下的抑制作用。方法制备薏苡仁醇提和水提混合提取液,并在此基础上制备含药血清。在倒置显微镜下观察其作用于鼻咽癌细胞后细胞形态学的改变。运用MTT法检测药物提取物及含药血清抑制细胞增殖的情况。结果薏苡仁可抑制CNE1、CNE2、TWO3和C666-1细胞的增殖,其作用具有时间和浓度依赖性。结论薏苡仁提取物在体外实验中具有抗鼻咽癌细胞增殖的作用。     

二甲双胍对人鼻咽癌C666-1细胞的增殖与凋亡作用

目的：探讨二甲双胍对人鼻咽癌C666-1细胞增殖和调亡的作用,并初步研究其作用机制.方法：体外培养人鼻咽癌C666-1细胞,以剂量5,10,20 mM的二甲双胍干预细胞24 h或48 h.采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Real-time PCR检测Bax、Bcl-2和Caspase-3表达.结果：二甲双胍抑制C666-1细胞增殖,随剂量增加和干预时间延长,细胞增殖的抑制作用增强（P＜0.05）.二甲双胍诱导C666-1细胞早期凋亡,有剂量效应关系,20 mM的二甲双胍干预细胞24 h,细胞早期凋亡率（12.40±1.01）％,高于对照组的（7.20±0.53）％,差异有统计学意义（P＜0.05）.二甲双胍诱导C666-1细胞Caspase-3表达上调,降低Bcl-2/Bax比值.结论：二甲双胍抑制人鼻咽癌C666-1细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能与调节凋亡相关基因Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达有关.     

PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235体内外对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235在体内外对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响?方法:MTT法检测NVP-BEZ235对细胞增殖的影响;Western blot检测NVP-BEZ235对PI3K/mTOR下游信号蛋白的影响;碘化丙啶染色检测细胞周期和细胞凋亡;DAPI染色从细胞形态上检测细胞凋亡;构建CNE1异种移植肿瘤模型,NVP-BEZ235口服给药,测量肿瘤体积大小和剥除的肿瘤重量计算抑制率,TUNEL法检测组织细胞凋亡?结果:① 与人鼻咽上皮细胞NP69比较,NVP-BEZ235选择性抑制鼻咽癌细胞增殖;② NVP-BEZ235在体外特异性抑制PI3K/mTOR下游信号通路;③ NVP-BEZ235通过阻滞G1期抑制细胞周期,在体外诱导细胞凋亡;④ NVP-BEZ235抑制裸鼠移植肿瘤的生长,在体内通过抑制PI3K/mTOR下游信号通路的磷酸化诱导细胞凋亡?结论:PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235在体内外选择性抑制鼻咽癌细胞增殖,抑制细胞周期进程,诱导鼻咽癌细胞凋亡?     

二烯丙基二硫诱导人鼻咽癌CNE1细胞凋亡

目的 探讨二烯丙基二硫(DADS)诱导人鼻咽癌CNEl细胞凋亡的生物学效应.方法 通过MTT法检测DADS对CNE1细胞生长的影响;用光学显微镜、流式细胞仪研究DADS诱导细胞凋亡的作用.免疫组织化学法检测细胞内Bcl-2、Bax蛋白的表达,Western blot法检测细胞内Caspase-3蛋白的表达.结果 DADS能抑制CNE1细胞的生长.DADS处理CNE1细胞后,细胞呈凋亡特征性改变.流式细胞分析显示DADS呈浓度依赖性诱导CNE1细胞凋亡.免疫组织化学结果表明DADS处理细胞后,Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达下降.随药物浓度的增加Caspase-3蛋白表达增强.结论 DADS具有诱导CNE1细胞凋亡的作用,其机制可能与Bcl-2/Bax下降,促进Caspase-3活化有关.     

参丹酮ⅡA诱导人鼻咽癌细胞凋亡及其作用机制的体外实验研究

目的：探讨丹参酮ⅡA诱导人鼻咽癌细胞（CNE－1）凋亡的作用及其机制。方法：在体外细胞培养的基础上用0．5ug/ml丹参酮ⅡA处理CNE－1细胞4天，而后应用光镜，电镜，集落形成试验，DNA凝胶电泳及流式细胞仪分析CNE－1细胞增殖及凋亡的改变。结果：经丹参酮ⅡA处理后，CNE－1细胞增殖明显被抑制，镜下可见典型典型的凋亡细胞的特征性改变，细胞DNA呈现“梯状”断裂现象，流式细胞仪分析细胞凋亡的指数为16．9％，而对照组为6．4％，细胞凋亡相关基因fas,bax,p53及细胞周期负调基因p21表达明显增加，bcl-2表达明显降低。结果：丹参酮ⅡA具有诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用。其机制可能与其诱导某些凋亡及周期调控相关基因的表达有关。     

盐酸小檗碱含药血清与血浆抗鼻咽癌CNE-1细胞作用的比较分析

目的盐酸小檗碱体外抗肿瘤等作用活性显著,目前针对其从体外过渡到体内的研究偶见报道,文中研究通过半体内研究方法,比较盐酸小檗碱含药血清、血浆对人鼻咽癌CNE-1细胞的生长抑制及诱导凋亡作用。方法新西兰白兔灌胃给药,分离血清、血浆后,56℃灭活30 min,制成含药血清、血浆,采用反向高效液相色谱法(rerersed phase high performancel iquid chromatography,RP-HPLC)分析盐酸小檗碱含量,采用MTT法比较不同作用时间和剂量对鼻咽癌CNE-1细胞增殖的抑制作用,用Annexin v-FITC流式细胞术观察诱导细胞凋亡情况。结果盐酸小檗碱含药血清、血浆均能够抑制CNE-1细胞增殖,含药血浆的抑制作用强于含药血清,且含药血浆能显著诱导CNE-1细胞凋亡。结论凡是使用血清与血浆均可的实验,应当优先选用含药血浆。     

三氧化二砷对鼻咽癌细胞系表达DNA甲基转移酶的抑制作用

目的 探讨三氧化二砷（As2O3）对鼻咽癌细胞系DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase,DNMT）（DNMT1、DNMT3A及DNMT3B）表达水平的影响。方法 应用8μmol/L As2O3与鼻咽癌细胞系C666-1、CNE1、CNE2和鼻咽上皮永生细胞系NP69细胞分别共同孵育48h,基于细胞计数试剂盒8测定鼻咽癌细胞的增殖情况。应用定量反转录聚合酶链反应和蛋白质印迹检测药物处理前后鼻咽癌细胞及NP69细胞中DNMT mRNA及蛋白表达水平的变化。结果 NP69细胞相对鼻咽癌细胞表达DNMT1和DNMT3A水平最低。经As2O3作用后,鼻咽癌细胞活力下降,形态改变明显;各种细胞表达DNMT的水平变化不完全一致,其中C666-1细胞对3种DNMT的表达水平均显著降低;而CNE1和CNE2细胞中DNMT1及DNMT3B 表达下调,CNE1细胞中DNMT3A的表达显著上调。结论 As2O3可抑制鼻咽癌细胞中DNMT的表达,表明其在一定程度上对鼻咽癌细胞具有去甲基化作用,存在治疗鼻咽癌的潜在价值。     

复方五仁醇胶囊抗氧化及抑制肝细胞凋亡的血清药理学研究

目的:研究复方五仁醇胶囊保肝作用的机理。方法:大鼠灌胃给予复方五仁醇胶囊制备含药血清,CCl4诱导原代培养大鼠肝细胞损伤模型,测定含药血清作用后细胞培养液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物岐化酶(SOD)活性,Annexin Ⅴ-FITC/PI双染色流式细胞仪定量检测细胞凋亡率。结果:与模型对照组比较,含药血清组MDA含量显著降低(P<0.01)、SOD活力显著增强(P<0.01),细胞早期凋亡率、晚期凋亡及坏死率显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论:复方五仁醇胶囊具有抗氧化和抑制肝细胞凋亡作用。     

复方苦参注射液对PC-3细胞凋亡的影响

目的：研究复方苦参注射液对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响。方法：用复方苦参注射液对体外培养的人前列腺癌PC-3细胞进行药物处理，采用MTT比色分析法测定复方苦参注射液不同剂量组对PC-3细胞生长的调控作用；采用流式细胞仪分析复方苦参注射液对PC-3细胞周期分布的影响。结果：复方苦参注射液可抑制PC-3细胞的增殖，诱导其凋亡，改变细胞周期分布，使GdG，期PC-3细胞比例增高。结论：复方苦参注射液可诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡，改变细胞周期分布，从而抑制细胞增殖。     

鼻咽癌细胞系抗失巢凋亡特性的研究

目的：探讨鼻咽癌细胞系的抗失巢凋亡特性。方法：采用鼻咽癌细胞系CNE2、C666—1、TW03以及正常鼻咽上皮细胞系NP69作为正常对照,用软琼脂实验、悬浮培养等方法诱导失巢凋亡,并用AnnexinV—PI双染色流式细胞计观察凋亡情况。结果：鼻咽癌细胞株CNE-2、C666—1、TW03均具有抵抗失巢凋亡的特性。3种鼻咽癌细胞均能在软琼脂上形成集落,并在培养24h后即可出现,1周内形成的集落速度较快。悬浮培养的鼻咽癌细胞同样出现细胞集落,而NP69细胞未见细胞集落出现。悬浮培养的鼻咽癌细胞在培养48h后凋亡率并没有升高。而NP69细胞则出现了凋亡。结论：鼻咽癌细胞系CNE-2、C666—1、TW03均具有抵抗失巢凋亡的特性。     

Mechanism of Hewei Jiangni Capsule(和胃降逆胶囊)Regulating Proliferation and Apoptosis of Human Gastric Cancer AGS Cells Through PI3K/AKT Signaling Pathway

目的:探究和胃降逆胶囊对人胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法:用不同药物剂量(3 g/kg、6 g/kg、12 g/kg)制备的和胃降逆胶囊含药血清分别干预人胃癌AGS细胞,分为和胃降逆胶囊含药血清低剂量组、中剂量组、高剂量组及空白组,分别干预AGS细胞24 h、48 h、72 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,采用流式细胞仪检测细胞周期分布情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞相关蛋白磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、促凋亡基因(Bax)、抑细胞凋亡蛋白(Bcl-2)、细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)和细胞周期蛋白依赖性抑制剂(p21)的表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Cyclin D1和p21 mRNA表达情况.结果:随着和胃降逆胶囊含药血清作用时间的延长,各药物组细胞活力逐渐降低,同剂量组24h、48 h、72 h比较差异有统计学意义(P＜0.05),48 h与72 h比较差异无统计学意义.在同一干预时间点,细胞活力随着药物血清浓度的增加而降低.各组含药血清处理AGS细胞48 h后,G0/G1期细胞比值与空白组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05);和胃降逆胶囊可以下调AGS细胞中p-PI3K、p-AKT蛋白及抑制凋亡蛋白Bcl-2和Cyclin D1的表达(P＜0.05),上调AGS细胞中促凋亡蛋白Bax和p21的表达(P＜0.05);和胃降逆胶囊可以下调AGS细胞中抑制凋亡基因Bcl-2和Cyclin D1 mRNA的表达(P＜0.05),上调AGS细胞中促凋亡基因Bax和p21 mRNA的表达(P＜0.05),且呈现出浓度相关性.结论:和胃降逆胶囊通过抑制PI3K/AKT通路的活化,调控下游周期阻滞相关基因和凋亡相关基因的表达,进而抑制人胃癌AGS细胞增殖并促进AGS细胞凋亡.     

5-氨基乙酰丙酸光动力对两株人鼻咽癌细胞杀伤效应的对比研究

目的 探讨5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)先动力学效应(photodynamic therapy,PDT)对体外培养人鼻咽癌细胞株CNE2和C666-1的生物学作用.方法 对体外培养的CNE2和C666-1分别加入不同浓度的5-ALA(0.01,0.05,0.1,0.25,0.5,1.0,2.0,4.0 mmol/L)孵育4 h,予波长为630 nm的半导体激光进行照射,照射的功率密度为20 mW/cm2,照射能量密度分别为2,5,10,20 J/cm2,继续孵育24 h,用四唑盐(MTT)比色法测定细胞存活率.结果 5-ALA-PDT能有效地杀伤体外培养的人鼻咽癌CNE2和C666-1细胞,其杀伤作用大小与5-ALA的浓度和激光剂量呈正相关(P＜0.01).激光能量为20 J/cm2,5-ALA的浓度为2.5 mmol/L或2.0 mmol/L时,其杀伤CNE2,C666-1细胞的作用最明显;5-ALA-PDT对CNE2和C666-1的半数杀伤度(IC50)分别为0.14,0.32 mmol/L,两者间差异有显著性(P＜0.05).相同5-ALA浓度、激光剂量条件下,C666-1细胞存活率显著高于CNE2(P＜0.05).结论 5-ALA-PDT对CNE2和C666-1细胞均有杀伤作用,但C666-1细胞对5-ALA-PDT的敏感性低于CNE2.     

血卟啉衍生物光动力对两株人鼻咽癌细胞杀伤实验的对比研究

目的 探讨血卟啉衍生物(HpD)光动力学效应(PDT)对体外培养人鼻咽癌细胞株CNE2和C666-1的生物作用.方法 向体外培养的CNE2和C666-1分别加入不同浓度的HpD(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0μg/m)孵育4 h,予波长为630nm的半导体激光进行照射,照射的功率密度为20mW/cm2,照射能量密度分别为2、5、10、20 J/cm2,继续孵育24h,用四唑盐比色法测定细胞存活率.结果 HpD-PDT能有效地杀伤体外培养的人鼻咽癌CNE2和C666-1细胞,其杀伤作用大小与HpD的浓度和激光剂量成正相关(P＜0.01).激光能量为20 J/cm2,HpD的浓度为2.5μg/ml或2.0μg/ml时,其杀伤CNE2、C666-1细胞的作用最明显;HpD-PDT对CNE2和C666-1的半数杀伤度分别为0.7μg/ml、1.2μg/ml,两者存在显著性差异(P＜0.05).相同HpD浓度、激光剂量条件下,C666-1细胞存活率显著高于CNE2(P＜0.05).结论 HpD-PDT对CNE2和C666-1细胞均有杀伤作用,但C666-1细胞对HpD-PDT的敏感性低于CNE2.     

丹参酮ⅡA诱导人鼻咽癌CNE1细胞凋亡

目的研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,TanⅡA)对人鼻咽癌CNE1细胞诱导凋亡及肿瘤相关基因Bcl-2和COX-2启动子表达的影响。方法不同浓度的TanⅡA体外干预CNE1细胞,用MTT比色法检测TanⅡA对CNE1细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测CNE1细胞凋亡、细胞周期及抗凋亡基因Bcl-2的表达,双荧光素酶法检测CNE1细胞COX-2启动子的活性。结果经TanⅡA干预后,CNE1细胞生长出现抑制,抑制率与TanⅡA浓度及作用时间呈依赖效应,差异有统计学意义(P<0.01);TanⅡA组细胞凋亡率较对照组升高(P<0.01),凋亡率随TanⅡA浓度的增加而上升;细胞周期被阻滞于G2/M期。Bcl-2蛋白表达在短时间(6 h)内被TanⅡA抑制,且随TanⅡA浓度的增加而上升,差异有统计学意义(P<0.05);TanⅡA处理24 h后,Bcl-2蛋白表达随着TanⅡA浓度的增加先升高后抑制,差异有统计学意义(P<0.05);COX-2启动子活性随TanⅡA浓度增加而下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 TanⅡA对CNE1细胞具有抑制生长、促进凋亡的作用,Bcl-2蛋白的表达下调和COX-2基因启动子活性下降可能是TanⅡA诱导CNE1细胞凋亡作用的机制之一。     

人鼻咽癌多药耐药细胞株CNE2/ADM的建立及生物学特性研究?

目的：建立人鼻咽癌多药耐药细胞株 CNE2/ADM,并研究其生物学特性。方法以人鼻咽癌细胞株 CNE2为亲本细胞,采用阿霉素(ADM)浓度梯度递增法诱导建立多药耐药细胞株 CNE2/ADM。通过观察细胞形态学变化,药物敏感性试验,测定生长曲线、群体倍增时间、细胞周期及 P-糖蛋白(P-gp)功能和表达情况,评价CNE2/ADM 的生物学特性。结果与 CNE2细胞相比,CNE2/ADM 耐药细胞异形明显,并对 ADM 在内的4种化疗药物产生了耐药性,增殖速度减慢,群体倍增时间延长(P <0.05),G0/G1期细胞增多,S 期、G2/M 期细胞减少(P <0.05),P-gp 的药物泵出功能增强、表达水平升高。结论成功建立了人鼻咽癌多药耐药细胞株 CNE2/ADM,其具有典型的多药耐药表型,可作为进一步研究鼻咽癌多药耐药机制及筛选逆转剂较为理想的细胞模型。     

奈达铂对不同EBV状态鼻咽癌细胞放射增敏的实验研究

目的 观察奈达铂对人鼻咽癌细胞系CNE2（EBV-）和C666（EBV＋）的抑制作用及放射增敏作用,并探讨其作用机制.方法 不同浓度奈达铂（0～100μg/ml）作用于人鼻咽癌CNE2（EBV-）和C666（EBV＋）细胞,MTS法检测奈达铂的细胞增殖抑制作用,并计算IC50值;以IC5和IC10奈达铂浓度作为增敏剂量,MTS法和克隆形成法检测细胞放射敏感性的变化,流式细胞术检测细胞凋亡百分率及细胞周期的改变.结果 MTS实验奈达铂对CNE2和C666细胞IC50值分别为34.32μg/ml和63.69μg/ml（24h）;增敏实验分为空白对照组、NDP1组（CNE2 0.34μg/ml,C666 0.69μg/ml）和NDP2组（CNE2 0.64μg/ml,C666 1.27μg/ml）,4Gy照射后三组细胞存活率,CNE2细胞为（90.0±0.3）%、（80.2±0.5）%、（53.3±0.7）%（24h）,（76.7±0.1）%、（60.0±0.6）%、（40.0±0.2）%（48h）,（66.7±0.7）%、（40.2±0.4）%、（30.0±0.6）%（72h）;C666细胞为（92.3±0.2）%、（61.5±0.7）%、（50.3±0.3）%（24h）,（77.7±0.2）%、（44.6±0.9）%、（36.2±0.4）%（48h）,（53.8±0.2）%、（34.6±0.3）%、（23.1±0.4）%（72h）;以克隆形成结果拟合存活曲线,CNE2细胞SF2为0.46、0.26、0.14,C666细胞SF2为0.43、0.31、0.20;CNE2和C666细胞SER（SF2）为1.77和1.39（NDP1）,3.29和2.15（NDP2）;照射后三组细胞凋亡率,CNE2为（4.55±0.12）%、（9.02±0.75）%和（14.55±0.45）%,C666细胞为（4.02±0.33）%、（7.11±0.32）%和（10.36±0.58）%;三组细胞G2/M期比例,CNE2为（3.49±0.25）%、（17.55±0.55）%和（32.09±0.48）%,C666为（3.65±0.18）%、（13.75±0.51）%和（30.11±0.77）%;两种细胞系组间比较差异均具统计学意义（P＜0.05）.结论 奈达铂对不同EBV状态的人鼻咽癌CNE2和C666细胞具有放射增敏作用,增敏作用CNE2细胞（EBV-）优于C666细胞（EBV＋）,其增敏机制与增加细胞凋亡、调节G2/M期比例有关.     

姜黄素衍生物FM0807体外抗鼻咽癌作用及其机制的研究

目的观察姜黄素衍生物FM0807的抗鼻咽癌细胞增殖效应,并探讨其机制。方法 MTT法、台盼蓝排染计数法、集落形成试验检测FM0807对人鼻咽癌细胞CNE1及CNE2增殖的抑制作用。吉姆萨染色、Hoechest33342/PI双染检测FM0807对鼻咽癌细胞凋亡及形态的影响。免疫共沉淀研究药物对Hsp90的分子伴侣功能的影响。Western blot检测FM0807处理后鼻咽癌细胞相关分子蛋白含量变化。结果 (1)FM0807呈剂量依赖性地抑制鼻咽癌细胞增殖、诱导其凋亡并引起细胞形态改变;(2)FM0807能够抑制AKT和ERK1/2与Hsp90的结合,影响其信号转导;(3)FM0807引起鼻咽癌细胞P-AKT、P-ERK1/2、NF-κB、Cdk4、MMP9蛋白含量下降,而Bax增多,还能对抗表皮生长因子介导的P-ERK1/2信号的激活。结论 FM0807抗鼻咽癌细胞作用的机制可能是通过抑制Hsp90与AKT和ERK1/2的结合,从而抑制PI3K/AKT与MAPK/ERK信号传导通路。     

HRP/IAA酶前药系统抗鼻咽癌的实验研究

目的 体外、原位实验观察HRP/IAA酶前药系统对鼻咽癌C666-1细胞的杀伤效应,以探讨其对鼻咽癌的治疗作用.方法 细胞转染获得稳定表达HRP蛋白的C666-1细胞.MTT法检测不同浓度的IAA对HRP表达阳性的C666-1细胞的杀伤效应.原位基因治疗:取5×106对数生长期的C666-1细胞接种裸鼠右腋下,建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,接种细胞10d后将裸鼠随机分成3组,观察HRP/IAA酶前药系统对移植瘤生长的抑制作用.结果 体外实验中,同一浓度IAA干预后C666-1/HRP(+)组细胞的相对存活率显著低于C666-1/HRP(-)组(P＜0.05),且随着IAA浓度的升高C666-1/HRP(+)组细胞的相对存活率逐渐降低,分别为(15.58±1.12)%、(10.11土1.06)%、(5.21±1.04)%;原位基因治疗实验结果表明IAA组鼻咽癌移植瘤生长受到抑制,体积明显小于空病毒组和生理盐水组(P＜0.05),且肿瘤细胞凋亡显著增多(P＜0.05).结论 HRP/IAA酶前药系统对鼻咽癌C666-1细胞具有杀伤作用,具有抗鼻咽癌的作用.     

补肾方含药血清对人肝癌SK-HEP-1细胞增殖与凋亡的影响

目的:评价补肾方含药血清对人肝癌细胞株SK-HEP-1细胞增殖和细胞凋亡的影响,探讨其作用机制。方法:用SD大鼠制备空白组、补肾组、索拉非尼组含药血清;培养并建立VEGF诱导的SK-HEP-1细胞模型,分别予药物血清干预。以MTT比色法检测各组对SK-HEP-1细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期与细胞凋亡,荧光Real-time PCR法检测细胞凋亡基因bax mRNA、bcl-2 mRNA的表达。结果:与空白血清组和VEGF组比较,补肾组含药血清可明显抑制SK-HEP-1细胞增殖(P0.01),提高SK-HEP-1细胞G1期的细胞比率(P0.05)以及细胞的早期凋亡率(P0.05)和总凋亡率(P0.05),上调bax mRNA基因表达(P0.05)和下调bcl-2 mRNA基因表达(P0.01),且补肾组和索拉非尼组组间差异无统计学意义(P0.05)。结论:补肾方对人肝癌细胞株SK-HEP-1具有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用;其作用机制可能与阻滞细胞由G1期进入S期和G2期,以及上调bax和下调bcl-2基因表达,促进SK-HEP-1细胞的凋亡有关。