应用染色体原位杂交技术进行基因定位的研究

染色体原位杂交技术是人及哺乳动物基因定位的一种重要技术,可以将克隆的基因或特异的DNA序列直接地并相当精确地定位到染色体的特定区带。我们建立这一方法后,对小鼠a干扰素基因及人21号染色体克隆的DNA序列的定位结果,证明这种技术可用于低拷贝及单拷贝基因及特异DNA序列的定位。     

染色体原位杂交技术研究进展与应用

染色体原位杂交技术是利用放射性或非放射性标记已知的核酸探针,通过放射自显影或酶促显色反应与荧光显示在染色体上检     

染色体荧光原位杂交技术

染色体荧光原位杂交技术郑文岭，吴染色体荧光原位杂交技术（ｆｌｕｏｒｅｃｅｎｔｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）是随着绘制高分辨人类基因组图谱的需求而出现的。近来，人类基因组计划的实施，更使得染色体ＦＩＳＨ技术广泛受到重视［１］。采用同...     

染色体原位杂交技术探讨

基因定位技术是确定基因数量、位置和进一步研究基因活动的重要手段。近年来,染色体原位杂交技术的应用,使基因定位取得突破性进展。这项技术具有快速、方便、直接和精确的优点,已成为目前基因定位的主要方法之一。本文根据我们工作的经验,对该方法有关的技术问题做初步探讨。     

用染色体原位杂交技术进行rRNA基因定位及其应用的研究(简报)

人的编码18S和28S的核糖体RNA(rRNA)基因位于D、G组5对近端着丝粒染色体短臂的次缢痕区。用染色体原位杂交技术进行该基因的定位,国内未见报道。本实验将rRNA基因重组质粒pA3(美国宾西法尼亚大学医学院R.D.Schmickel教授提供),用限制性内切酶EcoRI(本所制备)水解后,琼脂糖电泳分离,DE-81滤纸回收rRNA基因片断(7.3kb),经缺口翻译法用两种~3H标记的核苷酸标以同位     

分化相关基因的染色体荧光原位杂交定位

为提高标记效率基因定位的准确性，将维甲酸诱导食管癌细胞系ＥＣ８７１２通过消减杂交获得的一个能抑制食管癌细胞生长的ｃＤＮＡＲＡ５３８克隆，并将其定位于人染色体８ｑ区。方法采用改良的非同位素标记方法，使生物素标记程度提高，对染色体原位杂交信号检出率有明显的影响。结果采用两次标记的探针进行染色体原位杂交，可见明显的杂交信号，观察６０个中期分裂相，两条染色单体上均出现阳性信号的核型有１８个，检出率达３０％，而仅用单次标记的探针进行杂交时，信号检出率明显降低，观察６０个分裂相，出现杂交信号的分裂相仅有７个，且多位于染色体的一条单体上。结论使用双标记荧光原位杂交技术，增加了标记分子的掺入率，提高了检测的成功率，将分化相关基因ＲＡ５３８定位于人８号染色体的长臂２区。     

应用染色体荧光原位杂交检测染色体畸变

荧光原位杂交（ｆｌｏｕｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｅｈｙ－ｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）是利用已知碱基序列的非同位素标记的核酸探针，依据碱基互补配对原理，通过荧光亲和素免疫组化体系在组织切片、细胞、间期核及染色体标本上对待测核酸进行定性、定位及相对...     

微卫星寻找和定位8号染色体抑癌基因

微卫星 (Microsatellite)是广泛存在于原核及真核细胞基因组中的简单串联重复的DNA序列 ,约占人类基因组的10 %。大部分标记在染色体上微卫星可精确定位 ,平均间隔可达 0 .5厘摩。选择合适的微卫星标记可以发现微小的基因缺失 ,帮助寻找和定位候选的抑癌基因 ,因而成为研究恶性实体肿瘤和白血病发病机制的一个有效的分子生物学方法。本文对利用微卫星寻找和定位 8号染色体上抑癌基因的研究现状和进展综述如下。1　微卫星的主要特征微卫星具有分布广泛、丰富的多态性、较低的重组率和高度的杂合性等特点 ,其均匀分布于整个基因组 ,明确定位…     

荧光原位杂交技术检测膀胱癌染色体畸变的研究

目的 用多色荧光原位杂交（M-FISH）检测膀胱移行细胞癌中常见的染色体畸变。方法50例尿液标本采用FISH技术检测9p21区带及17、7、3号染色体的畸变情况,并对结果进行相应的统计学分析。结果50例膀胱癌病人组中,4个染色体均显示较高的畸变率。9p21以及17、7和3号染色体畸变率与病理分期、分级均有显著相关性（P〈0．01）。结论用荧光原位杂交技术是检测尿路上皮肿瘤染色体畸变的有效方法,可作为早期诊断尿路上皮肿瘤的重要途径。     

同时进行原位杂交及染色体分带的基因定位新方法

作者报道一种同时进行染色休原位杂交及染色休分带的基因定位新方法。它具有简单、快速、准确以及结果稳定、易重复等优点。细胞经常规培养制成染色体玻片后，进行染色体原位杂交。杂交信号经抗体检测放大后，染色体依次用色霉素Ａ３以及甲绿处理进行荧光反带分带（Ｒ带）。玻片在荧光显微镜下观察，只要调换滤片即可分别观察杂交点及染色体Ｒ带。两者互不干扰，结果清晰、直观，杂交点及Ｒ带持久而稳定。此方法尤其适用于做基因定位，及检测有关病毒基因在受感染细胞染色体上的插入部位。     

同时进行原位杂交及染色体分带的基因定位新方法

作者报道一种同时进行染色体原位杂交及染色体分带的基因定位新方法。它具有简单、快速、准确以及结果稳定、易重复等优点。细胞经常规培养制成染色体玻片后，进行染色体原位杂交。杂交信号经抗体检测放大后，染色体依次用色霉素Ａ３以及甲处理进行荧光反带分带。玻片在荧光显微镜下观察，只要调换滤片即可分别观察杂交点及染色体Ｒ带。两者互不干扰，结果清晰、直观，杂交点及Ｒ带持久而稳定。此方法尤其适用于做基因定位，及检测有     

用荧光原位杂交技术显示染色体易位

目的：应用荧光原位杂交技术（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ,ＦＩＳＨ）对Ｇ显带提示有染色体易位的病例进行分析,阐明易位本质。方法：以定位于待研究染色体区段的酵母人工染色体（ｙｅａｓｔ ａｒｔｉｆｉｃｉａｌｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ,ＹＡＣ）作为ＤＮＡ来源,结果：两组经Ｇ显带未能明确显示的染色体结构异常,经ＦＩＳＨ证实,一例为发生于１１号染色体与１３号染色体之间的平衡     

染色体异常的产前诊断及荧光原位杂交技术的应用

染色体异常的产前诊断及荧光原位杂交技术的应用苏光乔惠珍（第一附属医院妇产科）近年来，随着科学的发展，死于传染病及营养不良的小儿比例在不断下降，而先天畸型和一些遗传病的发病率相对升高，加上环境污染日益严重，胎儿畸型等先天性疾病已成为婴儿死亡率的主要原因...     

荧光原位杂交技术在性染色体异常诊断中的应用

用ＸＹ染色体α－卫星ＤＮＡ探针，对原Ｇ带分析性染色体异常的２０例患者外周血染色体及间期细胞进行荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）。结果：原Ｇ带核型４５，Ｘ，４５，Ｘ／４６，ＸＸ／４７，ＸＸＸ，４５，Ｘ／４６，ＸＹ，４７，ＸＸＹ，４５，Ｘ／４６，ＸＸ与ＦＩＳＨ结果一致，原Ｇ带判断不明的４５，Ｘ／４６，Ｘ，ｒ（？），４６，Ｘ，ｒ（？）经ＦＩＳＨ鉴别其真正核型是４５，Ｘ／４６，Ｘ，ｒ（ｘ），４６，Ｘ，ｒ（Ｘ），证     

荧光原位杂交在染色体异常产前诊断中的应用研究

目的对国产荧光原位杂交（FISH）试剂盒在染色体异常产前诊断中应用的可行性进行评估。方法对115例羊水样本行常规染色体核型检测外,进行间期FISH快速检测。采用国产FISH探针,特异性识别21、18、13、X、Y染色体。结果 115例样本中FISH杂交成功100例,结果获取需24～48h,其中95例为正常;3例为21三体;1例为18三体,结果与染色体核型分析一致;另有1例异常细胞数比例未达到判定阈值而结果不能判定,该样本的核型分析显示为47,XXY[7]/46,XY[43]的低比例嵌合体。未见假阴性和假阳性。结论国产FISH试剂盒具有较好的敏感性和特异性,与核型分析相比具有用材少、耗时短、操作简便及人员专业性依赖程度小的优势,但存在探针靶点有限、实验操作失败和结果不能判定的概率较高等问题。     

荧光原位杂交在染色体异常产前诊断中的应用研究

目的 对国产荧光原位杂交(FISH)试剂盒在染色体异常产前诊断中应用的可行性进行评估.方法 对115例羊水样本行常规染色体核型检测外,进行间期FISH快速检测.采用国产FISH探针,特异性识别21、18、13、X、Y染色体.结果 115例样本中FISH杂交成功100例,结果获取需24～48 h,其中95例为正常;3例为21三体;1例为18三体,结果与染色体核型分析一致;另有1例异常细胞数比例未达到判定阈值而结果不能判定,该样本的核型分析显示为 47,XXY[7]/46,XY[43]的低比例嵌合体.未见假阴性和假阳性.结论 国产FISH试剂盒具有较好的敏感性和特异性,与核型分析相比具有用材少、耗时短、操作简便及人员专业性依赖程度小的优势,但存在探针靶点有限、实验操作失败和结果不能判定的概率较高等问题.     

Raji细胞中EB病毒染色体整合的荧光原位杂交定位

目的:对Raji细胞中EBV整合位点进行染色体定位.方法:用Southern免疫印迹检测Raji细胞中EBV DNA,应用G显带和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)对Raji细胞中EBV整合位点进行染色体定位.结果:Raji细胞gDNA经BamHI酶切消化后,与同位素标记的Probe-1(EBV基因组13 232～16 189)杂交,阳性片段大小为10 kb和4 kb,与Probe-2(EBV基因组5～3271)杂交,阳性片段大小为23 kb.Raji细胞中EBV整合位点有1 P,1 q,2 q,3 P,3 q,4 q,5 q,6 q,7 P,7 q,9 q,11 P,14 q,15 q等,其中4 q,2 q,1 q,7 q为EBV DNA整合的高频位点.计数33个整合信号,分别有7,4,4,4个信号位于染色体4 q,2 q,1 q,7 q,这4个位点的信号占所有信号的构成比为64%,15号以后的染色体及2条性染色体均未见EBV整合.结论:本研究用G显带和FISH方法首次对Raji细胞中EBV整合位点进行了定位,Raji细胞中EBV整合具有一些高频位点,是一种非随机性整合.