补肾安胎方调节胚泡着床障碍小鼠雌、孕激素的实验研究

目的观察补肾安胎方对着床障碍小鼠妊娠率和着床点数的影响.方法将妊娠小鼠随机分为3组,于妊娠第1天正常组和模型组灌胃自来水,中药组灌胃补肾安胎方;于妊娠第3、4天每天2次正常组皮下注射溶剂,模型组和中药组分别注射吲哚美辛（4.33 mg/kg）造成小鼠胚泡着床障碍的动物模型,妊娠第5、8天留取血清;采用放免法检测3组小鼠雌、孕激素含量;妊娠第8天观察比较3组小鼠妊娠率、妊娠小鼠着床点数;采用免疫组化技术检测子宫雌、孕激素受体表达水平.结果（1）小鼠妊娠率和胚泡着床点数：模型组（27.3%、5.3±0.7）显著低于正常组（90.9%、13.3±2.8,P＜0.01）,中药组（72.7%、10.7±2.2）较模型组显著增高（P＜0.05）.（2）血清雌激素水平：妊娠第5、8天时中药组均高于模型组（P＜0.05或P＜0.01）,第8天时高于正常组（P＜0.01）.（3）血清孕激素水平：妊娠第5、8天时模型组、中药组均低于正常组（P＜0.05或P＜0.01）,但第8天中药组显著高于模型组（P＜0.01）.（4）免疫组织化学结果：中药组雌、孕激素受体表达显著高于模型组.结论补肾安胎方能提高吲哚美辛诱导着床障碍小鼠妊娠率和着床点数,其机制可能与该方能改善甾体激素水平,促进子宫内膜雌、孕激素受体的表达有关.     

补肾安胎方及其不同组分对胚泡着床障碍小鼠雌、孕激素及其受体的影响

目的比较补肾安胎方、补肾方及活血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的影响及其机制。方法采用吲哚美辛诱导小鼠胚泡着床障碍模型,从妊娠第1天起分别予补肾安胎方、补肾方、活血方治疗。于妊娠第5、6天处死小鼠,留取血清及子宫标本。采用放射免疫法检测血清雌激素(E2)和孕激素(P)的含量;采用免疫组织化学方法检测子宫雌、孕激素受体(ER、PR)的表达。结果补肾安胎方可以提高妊娠第6天血清P及E2水平,并且促进着床位点ER及PR的表达。而补肾方和活血方虽有轻度促进ER、PR表达作用,但其治疗作用弱于补肾安胎方。结论将补肾法和活血法结合起来的补肾安胎方可以通过对E2、P、ER、PR的影响,从更大程度上改善着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进胚泡着床。     

健胎液对小鼠着床期子宫内膜孕激素受体及mRNA的影响

目的:研究健胎液对胚泡着床障碍小鼠着床期子宫孕激素受体(PR)的影响.方法:将受孕小鼠随机分为正常组、模型组和中药组,采用米非司酮诱导小鼠胚泡着床障碍,予健胎液进行干预,于妊娠第8天处死小鼠,观察子宫内膜形态学变化,采用免疫组化技术检测子宫PR的表达,Western印迹和RT-PCR技术检测子宫PR及PR mRNA表达.结果:模型组子宫内膜发育不良,中药组子宫内膜的发育与正常组相似;中药组子宫内膜腺体、间质PR表达范围和强度均较模型组显著增高(P＜0.05),与正常组无显著性差异(P＞0.05);中药组PR蛋白及基因表达均较模型组显著提高(P＜0.05),与正常组无显著性差异(P＞0.05).结论:健胎液通过调节胚泡着床障碍小鼠子宫PR及mRNA的表达,促进子宫内膜发育,改善胚泡着床.     

安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜雌孕激素受体表达的影响

目的:观察安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠雌、孕激素受体表达的影响,探讨其对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的影响及作用机制。方法:筛选有规律动情周期的雌性小鼠,随机分为正常组、模型组和中药组,每组25只。用安坤种子丸先期对中药组小鼠进行灌胃,雌、雄合笼后观察雌鼠阴栓情况,之后各组选取有阴栓者20只并计为妊娠第1天(D1),雄鼠及其余雌鼠刎除。妊娠第4天对中药组和模型组注射米非司酮进行干预,制成胚泡着床障碍模型;于妊娠第5、6天处死小鼠,留取子宫标本。检测子宫雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达;同时统计分析各组间妊娠率、平均着床胚泡数及胚泡着床率等指标的变化。结果:安坤种子丸可以提高胚泡着床障碍小鼠子宫内膜ER、PR的表达,妊娠率、平均着床胚泡数及胚泡着床率等指标虽低于正常组(P0.05),但显著高于模型组(P0.01)。结论:安坤种子丸可以提高雌鼠子宫内膜上ER、PR的水平,一定程度上改善着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进胚泡着床。     

健胎液对胚泡着床障碍小鼠雌、孕激素及其受体的影响

目的探讨健胎液促进胚泡着床障碍小鼠子宫内膜发育的机制。方法采用米非司酮诱导的小鼠胚泡着床障碍模型,予健胎液进行干预,于妊娠第8天处死小鼠,留取血清及子宫标本,采用放免法检测血清和子宫局部雌二醇(E₂),孕酮(P)含量,采用免疫组化技术检测子宫雌,孕激素受体(ER,PR)表达。结果各组血清和子宫组织E₂,P含量无显著差异(P>0.05);中药组子宫内膜腺体、间质ER,PR表达范围和强度均较模型组显著增高(P<0.05),与正常组无差异(P>0.05)。结论健胎液通过促进胚泡着床障碍小鼠子宫内膜腺体、间质的ER,PR表达,改善子宫内膜的发育,利于胚泡着床。     

补肾固黄汤改善胚泡着床障碍小鼠子宫内膜组织形态的实验研究

目的 观察中药补肾固黄汤对胚泡着床障碍小鼠子官内膜组织学形态的影响.方法 将45只雌性昆明小鼠随机分为中药组、模型组、正常组.中药组在孕前预防性行补肾固黄汤灌胃2次,孕后每天灌服补肾固黄汤;其余两组给予等体积生理盐水.妊娠第4天中药组、模型组皮下注射米非司酮溶液造成小鼠胚泡着床障碍.妊娠第5天,收集各组小鼠子宫,应用光学显微镜观察小鼠子宫内膜组织形态学变化.结果 妊娠第5天,模型组小鼠子宫内膜腺体数量少、腺腔小而直,间质细胞体积小,间质紧密;而正常组则表现为腺体数目多,腺腔扩张、弯曲,腺腔、官腔均有较多分泌物,间质疏松、水肿;中药组与正常组相似.结论 补肾固黄汤可以改善胚泡着床障碍小鼠子宫内膜组织学形态,从而提高子官内膜容受性.     

补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜腺体凋亡的影响

目的观察补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜腺体凋亡的影响。方法通过给8～12周龄昆明小鼠于妊娠第4天皮下注射米非司酮造成胚泡着床障碍模型,采用TUNEL法分析各组小鼠子宫内膜腺体的凋亡情况,采用免疫组化方法检测各组小鼠子宫内膜腺体的增殖情况以及bax和bcl-2蛋白表达情况。结果模型组妊娠率和平均着床胚泡数均显著降低(P＜0．05,P＜0．01)；治疗组的妊娠率及平均着床胚泡数均较模型组显著提高(P＜0．05,P＜0．01)。模型组子宫内膜腺体增殖指数(PI)明显高于正常组(P＜0．01)；治疗组与模型组相比,腺体PI明显降低(P＜0．01),与正常组比较差异无显著性。模型组子宫内膜腺体凋亡指数(AI)明显低于正常组(P＜0．05)；治疗组与模型组相比,腺体AI明显增高(P＜0．01),与正常组比较差异无显著性；各组子宫内膜基质细胞PI和AI差异均无显著性。模型组子宫内膜腺体中bax蛋白显著低于正常组(P＜0．01)；治疗组则显著高于模型组(P＜0．01)；治疗组与正常组比较差异无显著性。结论子宫内膜腺体细胞凋亡不足、增殖亢进可能是米非司酮诱导胚泡着床障碍的机理之一；促进子宫内膜腺体中bax的表达,使植...     

安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠血清雌、孕激素的影响简

目的:观察安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠血清雌、孕激素影响,探讨其对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的影响及其机制。方法:将有规律动情周期的雌性小鼠随机分为正常组、模型组和中药组,每组25只。先用安坤种子丸对中药组小鼠进行灌胃,雌、雄合笼后观察雌鼠阴栓情况,之后各组选取有阴栓者20只并计为妊娠第1天（D1）,雄鼠及其余雌鼠剔除。妊娠第4天对中药组和模型组小鼠颈背部皮下注射米非司酮,制成胚泡着床障碍模型;于妊娠第5、6天处死小鼠,留取血清标本。采用放射免疫法检测血清雌激素（E2）和孕激素（P）的含量;同时制备HE切片以观察各组小鼠子宫内膜形态结构的变化,分析并统计观察各组平均着床胚泡数的变化。结果:安坤种子丸可以提高胚泡着床障碍小鼠血清E2、P水平,中药组平均着床胚泡数虽低于正常组,但显著高于模型组,差异均有统计学意义（P<0.01）。结论:安坤种子丸可以通过提高雌鼠血清E2、P水平,一定程度上改善着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进胚泡着床。     

健胎液对胚泡着床障碍小鼠胚泡着床作用的研究

探讨健胎液(药物:桑寄生、丹参、当归、黄芪、川芎)对胚泡着床障碍小鼠胚泡着床及子宫内膜发育的影响.采用米非司酮诱导的小鼠胚泡着床障碍模型,予健胎液治疗,于妊娠第8天处死小鼠,观察胚泡着床率、平均着床胚泡数以及子宫内膜和卵巢的形态结构变化.结果:中药组着床率和平均着床胚泡数较模型组显著提高,与正常组无显著差异;模型组子宫内膜发育不良,中药组子宫内膜的发育与正常组相似;三组小鼠卵巢的形态结构变化无显著差异.提示健胎液能促进胚泡着床障碍小鼠胚泡着床,改善子宫内膜的发育.     

安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜HOXa-10表达的影响

目的:观察安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜HOXa-10表达的影响,探讨其对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的影响及其机制。方法:将有规律动情周期的雌性小鼠随机分为正常组、模型组和中药组,每组25只。先期用安坤种子丸对中药组小鼠进行灌胃,雌、雄合笼后观察雌鼠阴栓率,妊娠第4天对中药组和模型组小鼠颈背部皮下注射米非司酮进行干预,制成胚泡着床障碍模型;于妊娠第5、6天处死小鼠,留取子宫标本。采用Q-PCR技术和免疫组化方法检测小鼠子宫内膜HOXa-10基因及蛋白的表达;同时制备HE切片以观察各组小鼠子宫内膜形态结构的变化,统计分析各组间妊娠率、平均着床胚泡数及着床率等指标的变化。结果:安坤种子丸可以提高胚泡着床障碍小鼠子宫内膜HOXa-10基因及蛋白的表达,妊娠率、平均着床胚泡数及着床率等指标虽低于正常组,但高于模型组。结论:安坤种子丸可能通过提高雌鼠子宫内膜上HOXa-10基因及蛋白的表达,一定程度上改善着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进胚泡着床。     

针刺改善大鼠胚泡着床障碍机制初探

目的 观察针刺对胚泡着床障碍大鼠胚泡着床的影响,并初步探讨其作用机制.方法 早孕大鼠随机分为正常组、模型组及针刺组,观察各组大鼠着床率及平均着床胚泡数;放免法检测血清雌二醇（E2）、孕酮（P4）及泌乳素（PRL）的水平;免疫组化及RT—PCR法检测着床点孕激素受体（PR）及泌乳素受体（PRLR）表达的差异。结果 针刺组着床率及平均着床胚泡数较模型组显著提高（P〈0．01）,模型组血清P4、PRL水平、PR、PRLR蛋白及mRNA表达水平均低于正常组和针刺组（P〈0．05）。结论 针刺可在一定程度上促进大鼠胚泡着床,其作用机制可能与针刺调节大鼠体内性激素及其受体表达有关,     

电针结合克罗米芬对多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜胰岛素受体和胰岛素受体底物1蛋白表达及胚泡着床的影响

目的:探讨电针提高克罗米芬促排多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠胚泡着床的作用机制。方法:24日龄雌性SD大鼠皮下注射含脱氢表雄酮的麻油溶液结合高脂饮食造模;PCOS大鼠随机分为模型组、克罗米芬组、电针组、电针+克罗米芬组,每组25只。各组均于80日龄起进行干预,其中电针组及电针+克罗米芬组先电针治疗,选取"中脘""关元""天枢"穴,1周3次,连续5周;治疗结束后第1、2天,克罗米芬组、电针+克罗米芬组灌服克罗米芬(100mg·kg-1·d-1)。全部治疗结束后,各组分别取出大鼠(15只)与雄鼠交配,妊娠第8天处死,观察大鼠妊娠率及胚泡着床情况;各组其余大鼠断头处死,留取子宫内膜标本,Western blot法检测受体胰岛素受体(INSR)及胰岛素受体底物1(IRS 1)蛋白的表达。结果:模型组大鼠妊娠率和胚泡着床数显著低于正常组(P0.05);与模型组相比,克罗米芬组、电针组、电针+克罗米芬组大鼠妊娠率和胚泡着床数均显著增加(P0.05),其中电针+克罗米芬组妊娠率和胚泡着床数显著高于电针组和克罗米芬组(P0.05)。与正常组比较,模型组子宫内膜组织INSR及IRS 1蛋白表达降低(P0.05);与模型组比较,电针、电针+克罗米芬组INSR及IRS 1蛋白表达显著增加(P0.05);与克罗米芬组比较,电针、电针+克罗米芬组INSR及IRS 1蛋白表达显著增加(P0.05)。结论:电针能够提高克罗米芬促排PCOS大鼠的妊娠率和胚泡着床数,其机制可能与提高PCOS大鼠子宫内膜组织中INSR和IRS 1蛋白表达水平有关。     

二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠子宫血管生成相关因子表达的影响

目的：探讨二补助育汤对胚胎着床障碍模型小鼠子宫内膜形态及血管生成素-1（Ang-1）mRNA、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达和定位的影响。方法：24只ICR雌性小鼠随机分为空白组、模型组、戊酸雌二醇组、二补助育汤组,每组6只,用米非司酮建立胚胎着床障碍动物模型,各组给予相应药物灌胃,妊娠第5天处死小鼠后,检测各组妊娠率、平均着床位点数、子宫内膜Ang-1和VEGF mRNA表达量及其蛋白定位。结果：模型组小鼠平均胚胎着床位点数、Ang-1 mRNA、VEGF mRNA表达量明显低于空白组（均P<0.05）;与模型组比较,二补助育汤组平均胚胎着床位点数、Ang-1 mRNA、VEGF mRNA表达量显著提高（均P<0.05）。结论：二补助育汤可提高子宫内膜Ang-1和VEGF蛋白表达量,促进子宫内膜血管生成,从而提高子宫内膜容受性。