树舌多糖GF对荷瘤小鼠H_（22）细胞端粒酶活性的影响

目的：探讨树舌多糖GF对肝癌H22小鼠抑瘤率及端粒酶活性的影响。方法：用ELISA法检测端粒酶活性。结果：树舌多糖GF对肝癌H22小鼠抑瘤率可达42.25%,树舌多糖GF组和环磷酰胺组与阴性对照组比较,端粒酶活性降低,差异有显著性（P〈0.05）。结论：树舌多糖GF对肝癌H22小鼠具有很强的抑瘤作用,能抑制H22细胞端粒酶的活性。     

树舌多糖GF对小鼠肝癌H_(22)细胞P53及RB基因的影响

目的:为探明树舌多糖GF对肝癌H22瘤细胞RB基因及P53基因的影响。方法:用ELISA法检测RB基因及P53基因用药前后表达的差异。结果:树舌多糖GF组中P53基因、RB基因的表达量均显著高于荷瘤组(P<0.01)。树舌多糖组、环磷酰胺组无显著差异。结论:树舌多糖GF能使肝癌H22细胞P53及RB基因的表达上调。     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞MDM-2基因表达的影响研究

应用免疫组化技术对HepA瘤细胞中MDM-2基因的表达量进行分析,以探讨树舌多糖抗肿瘤的分子机制.目的:研究树舌多糖GF对HepA瘤细胞MDM-2表达的影响.方法:应用SP免疫组化染色技术和多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中MDM-2的表达.结果:树舌多糖组中MDM-2的表达量均显著低于模型组(P＜0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异.结论:初步认为树舌多糖GF可通过降低MDM-2的表达而抑制HepA瘤细胞的增殖.     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞C-myc基因表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤组织C-myc基因表达的影响。方法:应用免疫组化和原位杂交方法检测小鼠HepA瘤细胞中C-myc基因的mRNA与蛋白的表达情况。结果:与荷瘤组比较,树舌多糖组、猪苓多糖组中C-myc基因的mRNA与蛋白的表达量均明显降低(P﹤0.01),其中树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论:树舌多糖GF可通过降低C-myc mRNA量及C-myc蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。     

树舌多糖GF抑制肝癌细胞SMMC7721增殖及对CDK2基因表达的影响

目的:探明树舌多糖GF(Ganoderma appanatum polysaccharides GF,GAPSGF)对肝癌细胞SMMC7721增殖及CDK2表达的影响。方法:不同浓度树舌多糖GF处理肝癌细胞SMMC7721,采用MTT法检测树舌多糖GF对肝癌细胞SMMC7721增殖抑制作用;实时定量聚合酶链反应(Real-TimePCR)检测CDK2 mRNA表达;蛋白印迹法(Western blot)检测CDK2蛋白表达情况。结果:树舌多糖GF对肝癌细胞SMMC7721具有明显的生长抑制作用。其中树舌多糖GF2.5μg/mL组与树舌多糖GF10μg/mL组作用显著,且CDK2的mRNA和蛋白表达下降。结论:树舌多糖GF可能通过降低CDK2表达,抑制肝癌细胞SMMC7721增殖。     

免疫印迹技术分析树舌多糖GF对H22肝癌移植瘤PTEN蛋白表达的影响

目的探明树舌多糖(GAPS)GF对H22肝癌移植瘤PTEN蛋白表达的影响。方法昆明种小鼠随机分为两组:肿瘤组和树舌多糖组,接种后各组肌肉注射给药,分别给与生理盐水和树舌多糖GF。连续10 d,于末次给药24 h,处死小鼠,剥离肿瘤组织。Western blot技术检测各组样品PTEN蛋白的表达量。结果肿瘤组检测结果为阴性,树舌多糖组检测结果为阳性。结论树舌多糖GF抗肿瘤的作用靶点之一可能为抑癌基因PTEN。     

SDS-PAGE分析树舌多糖GF对H22小鼠血清蛋白质组的影响

目的：观察移植性肿瘤H22对动物血清蛋白表达的影响,并探讨树舌多糖GF注射液（GASPGF）抑制肿瘤的血清蛋白质组学机制。方法：小鼠随机分为正常组、肿瘤组、GAPSGF组。通过SDS-PAGE技术对各组血清进行分离,利用PDQuest6．1软件对各组图谱进行对比分析,观察其改变。结果：分离得到正常组样品组分20个,肿瘤组24个,GAPSGF组22个。肿瘤组与正常组相比,多出8条带,缺失4条。GAPSGF组能使在肿瘤组多表达的3条带和缺失的2条带恢复正常组水平。结论：树舌多糖GF能通过影响移植性肿瘤动物的血清蛋白质组达到抗肿瘤作用。     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras基因表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras基因表达的影响.方法:运用原位杂交法、SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细包中N-ras mRNA量及N-Ras蛋白的表达量.结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中N-ras mRNA量及Ras蛋白的表达量均显著低于荷瘤组(P＜0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异.结论:初步认为树舌多糖GF可通过降低N-rasmRNA量及Ras蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖.     

树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞凋亡影响的初探

目的 :观察树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞凋亡的影响 ,进一步研究树舌多糖GF抗肿瘤机制。方法 :将实体瘤常规制备成细胞悬液 ,用流式细胞仪进行分析。结果 :树舌多糖组与阴性对照组比较 ,Ap峰明显增高 ,细胞凋亡率、S期细胞数、G2 -M细胞数均有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :树舌多糖GF能够诱导细胞凋亡 ,并且能够使细胞阻滞于S期不进入M期。     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞Rb基因表达的影响

目的 探讨树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞Rb基因表达的影响。方法 本实验用链霉菌抗生素蛋白－过氧化酶免疫组化法来测定细胞中Rb蛋白含量，通过多媒体图像分析系统分析实验结果。结果 树舌多糖GF组、猪苓多糖组与荷瘤对照组比较，差异均非常显著（P＜0．01），即树舌多糖GF、猪苓多糖能促使HepA瘤细胞中Rb基因表达明显增强；树舌多糖组与猪苓多糖组比较，差异非常显著（P＜0．01），即树舌多糖GF更能明显增强Rb基因表达，优于猪苓多糖。结论 树舌多糖GF抗瘤作用机理之一是作用于抑癌基因Rb并使之表达增强。     

中药胃康宁对胃癌细胞周期因子Cyclin E、CDK2和p27表达的影响

目的:观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞Cyc lin E、CDK2(Cyc lin dependant k inase 2,CDK2)和p27mRNA及其蛋白表达的作用。方法:分别以高、中、低不同剂量的胃康宁制剂对W istar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组含药血清培养胃癌细胞,采用免疫组织化学SABC法检测各组胃癌细胞中Cyc linE、CDK2和p27蛋白的表达,RT-PCR法检测各组胃癌细胞中Cyc lin E、CDK2和p27 mRNA的表达。结果:免疫组化法结果显示,胃康宁高、中、低剂量组Cyc lin E和CDK2灰度值均有明显升高,与空白对照组比较,P<0.05~0.01,而p27灰度值则显著降低(P<0.05~0.01);RT-PCR结果显示,与空白对照组比较,胃康宁低、中、高剂量组均能明显降低Cyc lin E和CDK2 OPTD I值(P<0.05~0.01)。同时,还能升高p27 OPTD I值(P<0.05~0.01)。结论:中药胃康宁可抑制胃癌细胞周期因子Cyc lin E、CDK2及其mRNA的表达,促进细胞周期抑制因子p27及其mRNA的表达,这可能是胃康宁抑制胃癌细胞生长的机制之一。     

黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax 及Bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax及Bcl-2蛋白表达的影响。方法:建立H22荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤试验,将50只荷瘤小鼠随机分为空白对照组(模型组)、环磷酰胺组(CTX组)、黄芪注射液(高、中、低剂量)组,连续ip给药10 d,观察肿瘤生长情况以及小鼠一般情况,绘制肿瘤生长曲线。10 d后处死小鼠,剥取瘤组织称重,计算抑瘤率;采用流式细胞术测定药物作用后肿瘤细胞凋亡率;免疫组化方法检测肿瘤组织Bax及Bcl-2的蛋白表达。结果:小鼠移植瘤H22试验结果显示,在128,,4 g.kg-1的剂量下黄芪注射液的抑瘤率分别为52.36%,33.68%,17.28%。流式细胞术及免疫组化结果表明黄芪注射液各剂量组均可明显增加肿瘤细胞凋亡率;增强Bax蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,且Bax/Bcl-2明显增高(P<0.05)。结论:黄芪注射液通过促进Bax蛋白表达、抑制Bcl-2蛋白表达来诱导H22肿瘤细胞凋亡,进而发挥抑瘤效应。     

艾灸预刺激对AD模型大鼠细胞周期蛋白CDK2、p21／cip的影响

目的通过观察艾灸预刺激对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠细胞周期蛋白CDK2、p21／cip的影响,探讨艾灸预刺激防治AD的作用机制。方法将40只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、预艾灸组,每组各10只,以大鼠海马注入A131—42制作AD模型,预艾灸组采用艾务温和灸“百会”、“肾俞”两穴,免疫组化实验测定大鼠海马区CDK2、p21／cip蛋白的表达。结果预艾灸组经过2个月的预艾灸治疗,CDK2蛋白阳性细胞教相应减少,p21／cip蛋白阳性细胞数相应增加,与模型组比较有显著性差异（P〈0．01）。蛄论艾灸预刺激可调控细胞周期蛋白的表达,通过降低CDK2的表达,增加p21／tip的表达来抑制AD的病理改变,达到防治AD的目的。     

灵芝孢子粉对HepG2细胞生长增殖和生长周期的影响

目的:观察灵芝孢子粉对人肝癌细胞株HepG2细胞生长增殖和生长周期的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用MTT比色法研究灵芝孢子粉对HepG2细胞生长抑制作用;通过流式细胞仪检测DNA含量,分析细胞周期的分布。结果:MTT实验结果表明高剂量的灵芝孢子粉对HepG2细胞具有直接的抑制作用,并呈剂量和时间依赖性,2500μg/m l的灵芝孢子粉作用于HepG2细胞72h后,对细胞生长的抑制率最高可达51.4%;流式细胞术实验结果表明,灵芝孢子粉浓度为3mg/m l时,可使肿瘤细胞生长G2期减小,浓度为6 mg/m l时,可使HepG2细胞出现明显的凋亡峰。结论:灵芝孢子粉具有直接抑制肿瘤细胞生长的作用,并可作用于细胞周期的G2期,高剂量的灵芝孢子粉还可使肿瘤细胞发生凋亡。     

氧化苦参碱对结肠癌LoVo细胞c-myc,PSMD9,CDK4mRNA表达的影响

目的:探讨氧化苦参碱( oxymatrine,OM)抑制人结肠癌LoVo细胞增殖和诱导凋亡的分子作用机制.方法:采用流式细胞仪检测LoVo细胞凋亡率以及细胞周期分布;采用荧光定量PCR法检测0.25,0.5 g·L-1 OM对LoVo细胞增殖相关基因c -myc,蛋白酶调解因子9(PSMD9),CDK4的基因表达的影响.结果:0.5 g·L-1以下浓度的OM作用结肠癌LoVo细胞48 h,对细胞凋亡无明显影响.0.25 g·L-1 OM作用48 h时可明显抑制人结肠癌LoVo细胞c-myc基因表达(P＜0.05).0.5g·L-1 OM作用48 h时可明显抑制LoVo细胞c-myc,CDK4的基因表达(P ＜0.01,P＜0.01,).药物作用时间为96 h时,0.5g·L-1 OM可明显抑制c-myc,PSM D9,CDK4基因表达(P＜0.05,或P＜0.01).结论:较低剂量OM显著抑制人结肠癌LoVo细胞增殖的作用机制,可能与下调LoVo细胞c-myc,PSM D9,CDK4表达有关.     

扶正抑瘤颗粒对H22瘤细胞bax、bcl-2及 caspase-3蛋白表达的影响

目的观察扶正抑瘤颗粒对H 22瘤细胞bax、bcl-2及caspase-3蛋白表达的影响.方法采用免疫组织化学方法检测瘤组织切片中bax、bcl-2及caspase-3的蛋白表达.结果扶正抑瘤颗粒各治疗组bax及caspase-3的IOD值均高于模型组,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05);扶正抑瘤颗粒各治疗组bcl-2的IOD值均低于模型组,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).结论通过促进bax及caspase-3的蛋白表达、抑制bcl-2基因的蛋白表达来诱导H22瘤细胞凋亡,进而发挥抑瘤效应.