体外树突状细胞疫苗策略抗肿瘤免疫治疗研究进展

树突状细胞(DCs)在激活天然的免疫反应和获得性免疫反应中具有独一无二的作用,应用DCs为基础的肿瘤免疫治疗已成为肿瘤治疗的研究焦点.改善DCs疫苗的效能的方法有体外DCs策略和体内DCs策略.本文就体外DCs疫苗策略在肿瘤免疫治疗中的研究进展做一综述.     

树突状细胞肿瘤疫苗的研究进展

树突状细胞(dendritic cells,DCs)是目前发现的抗原递呈功能最强的专职抗原递呈细胞(antigen presenting cell,APC),也是唯一能够激活初始免疫应答的APC,在对肿瘤产生主动免疫上起着重要的作用。DCs瘤苗的制备与应用成为了肿瘤免疫治疗的研究热点。本文主要对DCs的生物学特性、抗肿瘤机制及肿瘤疫苗的制备作一综述。     

DC联合CIK在肿瘤免疫治疗中的研究进展

伴随生物技术的突飞猛进,在恶性肿瘤的治疗中使用免疫治疗手段成为研究的热点,生物免疫治疗日益成为肿瘤治疗的一种新途径,特别是树突状细胞(dendritic cells,DCs)结合细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对恶性实体瘤展现了优异疗效。本文就DC细胞以及CIK细胞生物学特性和它们于临床抗肿瘤的作用进行综述。     

树突状细胞与肿瘤的免疫治疗

尽管化学治疗和放射治疗的进步明显提高了肿瘤治疗的缓解率 ,延长了患者的生存期 ,但许多肿瘤尚无法治愈 ,因此有必要发展其它治疗方法 ,尤其是抗肿瘤的免疫疗法。树突状细胞 (DCs)在激发 T细胞免疫方面起重要作用 ,可能成为抗肿瘤免疫疗法理想的佐剂 ,值得研究和开发。1　肿瘤抗原和抗肿瘤免疫肿瘤细胞表面存在可被 T细胞识别的抗原 ,这是抗肿瘤细胞免疫的基础 ,也是开展抗肿瘤特异性免疫治疗的前提。这些被认为具肿瘤特异性的抗原 (TSA)包括 [1 ] :(1)变异的蛋白 ,如 K- ras,p5 3,erb B2 等 ;(2 )染色体易位产生的融合基因产物 ,如在…     

子宫颈癌患者树突状细胞体内外诱导抗肿瘤免疫

目的探讨子宫颈癌患者的树突状细胞(dendritic cells,DCs)在体内外能否诱导出高效而特异的抗肿瘤免疫应答。方法应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素-4(IL-4)从子宫颈癌患者外周血诱导DCs,Hela子宫颈癌抗原致敏,MTT法检测DCs激活的细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)对肿瘤细胞的细胞毒作用。皮下接种Hela子宫颈癌建立荷瘤鼠,给予抗原致敏的DCs回输;或先给予DCs免疫,后用癌细胞攻击,观察其抑制肿瘤的效果。结果从子宫颈癌患者外周血诱导的DCs高表达CD86、CD12、HLA-DR、CD54和CD83,激活的CTLs在体外特异性杀伤子宫颈癌细胞。DCs回输小鼠具有免疫保护作用,减低成瘤率;又能引起免疫治疗作用,有效抑制肿瘤的生长。结论用GM-CSF及IL-4从子宫颈癌患者诱导的DCs能有效提呈Hela子宫颈癌抗原给T淋巴细胞,并且在体内外诱导出高效而特异的抗肿瘤免疫,有望成为有效的肿瘤特异性免疫治疗新途径。     

siRNA沉默树突状细胞恒定链以增强其抗肿瘤免疫效果

背景：利用基因修饰树突状细胞（DCs）增强抗肿瘤免疫反应已成为一种有效的策略。RNA干扰（RNAi）能够通过转录后的基因沉默机制特异地降解靶RNA。在本研究中,我们应用DCs恒定链（Ii）特异的小干扰RNA（siRNA）转染DCs后,观察其抗肿瘤效果。 方法：通过WesternBlot验证siRNA沉默效果;利用CCK-8试剂盒检测Ii siRNA转染DCs后其刺激淋巴细胞增殖的能力。此外,通过非放射性cytotox 96® 细胞杀伤检测试剂盒检测被激活细胞的体外杀伤效果。成瘤时间和肿瘤的大小被用作评价Ii siRNA转染DCs体内抗肿瘤效果的可靠指标。为了探讨Ii siRNA转染DCs抗肿瘤的机制,我们还进行了流式细胞仪的检测。 结果：DCs转染Ii siRNA后,其Ii的表达被明显抑制。体外细胞杀伤实验发现,Ii siRNA处理组的T细胞杀伤活力显著增高(P<0.05 )。此外,我们还发现,无论在小鼠接种肿瘤之前还是在接种肿瘤之后给小鼠免疫共转染Ii siRNA和内源性肿瘤抗原的DCs,均能明显抑制肿瘤的生长。通过流式细胞仪检测可能参与体内、外抗肿瘤免疫应答的免疫细胞,结果显示CD4＋和CD8＋T细胞均被明显激活(P<0.05)。 结论：通过siRNA沉默DCs的Ii链可能是一种行之有效的增强抗肿瘤免疫的方法。     

树突状细胞在肿瘤免疫治疗中的作用及临床应用研究进展

肿瘤是严重威胁人类健康的常见病及多发病。目前肿瘤生物免疫治疗已成为继手术、化疗、放疗之后另一种新的治疗模式。近年来随着细胞生物学、分子生物学和免疫学等学科的飞速发展,以及新的实验体系和新的技术方法的不断改进,人们对树突状细胞（Dendritic Cell,DC）在肿瘤免疫治疗中的作用及临床应用（尤其是抗肿瘤方面的应用）的研究取得了快速发展。本文主要对DC的免疫学活性、体外诱导扩增、功能、抗肿瘤机制和临床应用做一综述。     

树突状细胞抗肿瘤作用研究进展

树突状细胞(dendritic cell,DCs)是体内最有效的专职抗原递呈细胞(antigen presenting cell,APC),是识别病原侵入的第一道防线.机体的免疫识别首先由DCs捕获、加工和处理抗原,再将抗原递呈给T、B淋巴细胞,从而引发一系列免疫应答,在体内发挥强大的免疫监视功能[1].近年来,DCs在抗肿瘤免疫中所发挥的重要作用日益受到人们的重视.随着对DCs肿瘤抗原识别、摄取、加工处理及提呈的分子基础和作用机制的进一步阐明,以DCs为基础的肿瘤疫苗治疗得到快速发展.目前在DCs疫苗抗肿瘤实验研究和临床研究方面已取得了令人振奋的进展,显示了广泛的应用前景.     

肿瘤免疫治疗的研究进展

与以往的手术、化疗、放疗和靶向治疗不同,肿瘤免疫治疗是一种通过激活人体自身免疫系统来对抗肿瘤的治疗手段。近年来,针对免疫检查点的单抗在抗癌治疗中取得的成绩已成为癌症治疗史上里程碑式的事件,使人们认识到癌症的基因问题不是故事的全部,驱使研究者转而关注免疫治疗。肿瘤免疫治疗有多种治疗策略,包括非特异性免疫刺激剂、肿瘤疫苗、过继性免疫细胞疗法以及单抗治疗。由于肿瘤具有极大的异质性和遗传不稳定性,其发病机制复杂,单独依靠某一种治疗手段难以达到理想的抗肿瘤效果,因此在深入研究不同治疗手段之间相互作用机制的基础上,联合包括肿瘤靶向治疗、细胞毒化合物治疗、以及不同类型免疫治疗的抗肿瘤策略可能是未来的方向。     

CXCR5/CXCL13轴在肿瘤及免疫治疗相关的研究进展

近年来,以细胞为基础的免疫治疗方法在治疗肿瘤方面的研究和开发受到了广泛关注,过继性细胞免疫治疗在癌症治疗中提供强大和持久的抗肿瘤效应。与此同时对肿瘤微环境的研究也越来越多。趋化因子是肿瘤微环境的成分之一,趋化因子受体与其配体结合后可参与多种生理和病理过程,既能促进肿瘤发生发展,也参与免疫细胞发挥抗肿瘤效应。本文主要总结了CXCR5/CXCL13信号轴,在不同肿瘤中的生物学特征和免疫环境中的作用,以及其作为肿瘤免疫治疗靶点的研究进展。     

WT1为靶点的DC肿瘤疫苗研究进展

WT1基因在小儿肾癌中首次被发现,随后的研究中大量数据显示WT1基因在血液系统肿瘤和实体瘤中存在高表达,这提示WT1作为肿瘤免疫治疗新靶点的可行性。树突状细胞(DC)在诱导肿瘤抗原特异性效应和记忆性细胞过程中的作用,以及在人体内呈递抗原的能力,使其成为肿瘤免疫治疗的基础。随着目前DC研究的不断进步,以WT1为靶点的DC肿瘤疫苗也日趋成熟,有的已成功应用于临床。     

肿瘤坏死因子—α预刺激培养成熟树突状细胞

目的 利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导树突状细胞(DC)成熟的作用原理培养成熟DC的新方法。方法Ficoll密度梯度离心分离健康人外周血获得单个核细胞，用含有10％胎牛血清的RPMI640培养基培养。TNF-α预刺激4h后加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)及IL-4，48、96h再次同时加入上述3种细胞因子并继续培养，第8—10天收集细胞，记作T—DC。FCM检测FDC表型，用^3H-TdR检测同、异基因混合淋巴细胞反应(MLR)及抗原提呈功能；MTT法检测FDC诱导T细胞的杀伤活性。结果 T—DC表达CD83、CDla、CD54、CDlla、CD80、CD86、HLA—DR、CD83HLA—DR并能刺激T细胞增殖与MLR（同基因、异基因)反应；T—DC具有抗原提呈功能、可诱导特异性杀伤。结论 用TNF-α预刺激4h的方法并在含有GM—CSF、IL-4的完全培养基中培养人外周血单核细胞8d可获得成熟的DC。     

DCs和CIK细胞的研究进展

近几年,随着肿瘤的过继免疫治疗的新近发展,DCs和CIK细胞治疗恶性肿瘤逐渐成为国内外关注的焦点。自上世纪80年代发现这种细胞起,人们对于DCs、CIK细胞生物学特征的认识一直在不断的更新,目前以DCs和CIK细胞为主的治疗恶性肿瘤的技术已经在国内临床开展,并有望成为肿瘤综合治疗研究的新方向。     

环氧化酶2抑制剂对卡介苗激活的树突状细胞介导的体外抗膀胱肿瘤免疫效应的影响

目的体外实验研究环氧化酶2(Cox-2)抑制剂对卡介苗(BCG)感染的人脐血源性树突状细胞(CBDC)介导的抗膀胱肿瘤免疫效应的影响。方法从人脐带血中分离和体外诱导培养得到树突状细胞(DC)。采用BCG感染DC,并与前列腺素E2(PGE2)、塞来昔布(Celecoxib)等共培养,检测各组DC的混合淋巴细胞反应性(MLR)及DC激活的细胞毒T淋巴细胞(CTL)对人膀胱肿瘤细胞株T24的细胞毒活性。结果 MTT实验显示Celecoxib显著增强、而PGE2则明显抑制经BCG感染的DC的MLR;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验表明,Celecoxib显著增强、而PGE2则明显抑制经BCG感染的DC激活CTL的抗膀胱肿瘤细胞毒活性。结论选择性Cox-2抑制剂Cele-coxib能够增强BCG激活的DC介导的体外抗肿瘤免疫效应。     

Clinical evaluation of dendritic cells vaccination for advanced cancer patients at Fukushima Medical University

Dendritic cells (DCs) are powerful antigen-presenting cells (APCs) that have attracted attention in recent years from the viewpoint of DC vaccine therapy against cancer. However, the existence of a strongly immunosuppressed state in cancer-bearing individuals inhibits DC maturation, which is one of the problems facing anti-cancer DC vaccine therapy. Isolated DCs loaded with tumor antigen ex vivo and administered as a cellular vaccine have been found to induce protective and therapeutic anti-tumor immunity in experimental animals. In clinical trials of DC vaccination for cancer patients, induction of anti-tumor immune responses and tumor regression has been observed. In this study, eighty-one advanced cancer patients unsuccessfully treated by established treatment in individual cases were selected between January 2002 and May 2007 at Fukushima Medical University. The usefulness of DC therapy was investigated by intradermal injection of peptide pulsed DCs for an overall objective response rate of 28.0%. Furthermore, direct injection of immature DCs into tumor extracted an overall objective response rate of 35.7%, and especially 40.0% for advanced pancreatic cancer by using endoscopic ultrasound-guided fine-needle injection technique as a novel approach. These results indicate that DC-based vaccination could be a promising treatment modality for various cancers, however multiple hurdles must be cleared before the development of an affordable DC-based vaccination can be used worldwide.     

电离辐射对树突状细胞的影响

电离辐射可以导致机体免疫功能低下,对人员健康及放射病的治疗及预后有重要影响。树突状细胞(dendriticcell,DC)是机体最重要的抗原提呈细胞,是免疫反应的启动者和调控者,研究电离辐射对DC的影响不仅可以为辐射导致免疫抑制的机制提供依据,也可以通过改善照后DC的功能状态进行辐射防护研究,基于DC的癌症疫苗联合放射治疗也为肿瘤的治疗提供了新的思路。本文综述了电离辐射对DC存活率、表型、抗原提呈功能和迁移能力、分泌细胞因子的影响,以及这些辐射生物效应产生的分子机制,同时也探讨了DC疫苗结合放疗在肿瘤治疗中的一些研究进展,旨在从免疫学的角度为辐射防护提供新的思路,也为改善受照人员免疫功能状态提供文献支持。     

小鼠DC、NK细胞体外诱导、增殖及示踪方法

目的研究小鼠自然杀伤(NK)细胞、树突状细胞(DC)体外诱导增殖及其过继免疫后示踪的方法.方法建立C57BL/6小鼠皮下黑素瘤模型,体外诱导、增殖小鼠脾源性NK细胞及骨髓源性DC,进行电镜观察,并在体外以Brdu、DAPI标记,混合两种细胞回输荷瘤小鼠体内,观察肿瘤组织中两种细胞的示踪情况.结果DC、NK细胞在细胞因子诱导下体外成倍扩增,电镜下可见典型的DC、NK细胞.Brdu对细胞的标记率约65%,DAPI对细胞的标记率可达100%.在荧光显微镜下可见肿瘤组织切片中外源性DC、NK细胞的分布.结论Brdu、DAPI均可作为外源性细胞体内示踪的标记方法.     

全身热疗与肿瘤细胞凋亡的研究进展

全身热疗是恶性肿瘤综合治疗的手段之一。研究表明,当全身温度都升高到约41.8～42.0℃时,通过热作用可以选择性的杀灭肿瘤细胞,并控制肿瘤细胞的广泛转移。全身热疗不仅可以直接杀伤肿瘤细胞,而且可以激发机体免疫系统活性、增强放化疗的敏感性和抑制肿瘤的血管形成从而达到诱导肿瘤细胞凋亡的目的。就全身热疗与化疗、放疗、免疫治疗、基因治疗相结合诱导肿瘤细胞凋亡的机制的研究进展进行综述。