皮肤科学基础

20 0 136 14　重组腺病毒载体转染 CTLA4 Ig基因在毛乳头细胞中的表达 /程波 (贵阳医学院附院皮肤科 )…∥中华皮肤科杂志 .- 2 0 0 1,34(4) .- 2 6 3～ 2 6 5通过构建的重组腺病毒载体将免疫耐受基因(CTLA4 Ig) c DNA导入培养的毛乳头细胞中 ,并将体外转染的毛乳头细胞转移到小鼠体内 ,通过组织学和免疫组化检测目的基因在体内和体外的表达。结果CTLA4 Ig蛋白在基因转染 6 h后即在细胞浆中表达 ,随转染时间的延长其表达逐渐增加 ;基因转染的毛乳头细胞移植到小鼠体内 ,目的基因在 2 4 h开始表达 ,能持续表达 2周 ;移植细胞未受到排…     

真菌病

20071738白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因差异性分析/姜红浩(广州暨南大学附一院皮肤科),张宏,乔建军…∥中华皮肤科杂志.-2007,40(4).-217~220对白色念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因进行PCR-RELP及基因测序研究,结果表明,该菌两相ERG11无论在氟康唑敏感株(CA-7,CA-8),还是剂量     

皮肤科学基础

20 0 2 0 710　改良毛乳头细胞培养法 /程波 (三军大西南医院皮肤科 )…∥中华皮肤科杂志 .- 2 0 0 1,34(5 ) .- 387～ 388采用二步酶消化法分离毛乳头 ,分离得到毛乳头细胞 ,具有明显的多层凝集性生长的特性 ,在胶原凝胶表面表现更为显著 ,似乎是毛乳头细胞一种自发组织的结果。实验结果还表明 ,毛乳头细胞的最快增殖时间(4～ 7d)较真皮鞘细胞和成纤维细胞迟 (2～ 5 d)。体外培养的毛乳头细胞表达α-平滑肌肌动蛋白也是该细胞的特征之一。体内毛乳头细胞则不表达。图 4参 5　(张孝友 )2 0 0 2 0 711　 HPV16 L 1蛋白在原核表达系统中的表达与纯化 /包广宇 (哈医大微生物学教研室 )…∥哈尔滨医科大学学报 .- 2 0 0 1,35 (4) .- 2 35HPV(人乳头瘤病毒 )是一类无包膜双链 DNA病毒 ,有 70多个基因型 ,其中 HPV16与宫颈癌有关 ,为高危型别。由于 HPV不能体外培养增殖 ,阻碍了病毒疫苗及血清学诊断的研究应用。HPV16的主要衣壳蛋白 L1(HPV16 L1蛋白 )是主要的型特异性抗原 ,可刺激机体产生中和性抗体 ,阻止...     

重组腺病毒载体转染 CTLA4Ig基因在毛乳头细胞中的表达

目的：探讨免疫耐受基因（CTLA4Ig）在毛乳头细胞中的表达,为毛乳头细胞移植后产生免疫耐受提供理论和实验依据。方法：通过构建的重组腺病毒载体将免疫耐受基因（CTLA4Ig）cDNA导入培养的毛乳头细胞中,并将体外基因转染的毛乳头细胞移植到小鼠体内,通过组织学和免疫组化检测目的基因在体内和体外的表达。结果CTLA4Ig蛋白在基因转染6h后即在细胞浆中表达,随着转染时间的延长其表达逐渐增加;基因转染的毛乳头细胞移植到小鼠体内,目的基因在24h开始表达,能持续表达2周;移植细胞未受到免疫排斥。结论：带有CTLA4Ig基因的毛乳头细胞在体外和小鼠体内能较长时间存活并表达CTLA4Ig。     

须癣毛癣菌的组织工程皮肤感染模型的构建

目的 体外构建须癣毛癣菌的组织工程皮肤感染模型。 方法 用牛Ⅰ型胶原溶液复合原代成纤维细胞培养3 d后,在其表面利用气液界面培养原代角质形成细胞和黑素细胞12 d得到组织工程皮肤,取新鲜的须癣毛癣菌悬液5 μl对其进行感染,分别在12、24、48、72 h进行HE染色和PAS染色观察。 结果 成纤维细胞复合胶原构建结构致密均匀的组织工程真皮,其上角质形成细胞和黑素细胞形成了层次清晰、结构良好的组织工程表皮。须癣毛癣菌感染该组织工程皮肤后,随时间延长,HE染色和PAS染色显示须癣毛癣菌对组织工程皮肤结构的破坏逐渐加重,至48 h,表皮破坏最明显,至72 h,组织工程皮肤的整体结构被菌丝和孢子所替代。 结论 初步建立了须癣毛癣菌的组织工程皮肤感染模型。     

真菌病

20100062红色毛癣菌病患者血清NO与iNOS表达的实验研究/佟盼琢(河北医大二院皮肤科),田珂,吉冯伟∥中国麻风皮肤病杂志.-2009,25(2).-84～86应用硝酸还原酶法和分光光度法检测30例手足癣,35例甲真菌病患者和20名正常对照者血清NO、iNOS的水平。与正常对照相比,红色毛癣菌病患者外周血NO及iNOS血清水平明显降低,手足癣组与甲真菌病组之间NO及iNOS相互比较,无统计学差异。红色毛癣菌感染的患者NO和iNOS表达水平降低,可能是患者机体的免疫防御机制不能有效发挥其抗真菌效应,导致感染易反复,病程迁延的原因之一。表1参15(杨励)20100063微量稀释法测定白念珠菌     

真菌病

20101798红色毛癣菌蛋白酶MEP和SUB的表达及临床意义/陈榕(上海杨浦区中心医院皮肤科),姜培红∥中国真菌学杂志.-2010,5(1).-17~21抽提红色毛癣菌总RNA,采用半定量RT-PCR法检测红色毛癣菌金属蛋白酶(metalloproteinases,MEP)、枯草菌素蛋白酶(subtilisins,SUB)基因表达量的变化。结果,不同病例的红色毛癣菌SUB的表达水平与临床症状的严重程度密切相关,而与患者的年龄、性别、病程等无明显相关性;MEP的表达水平在不同年龄、性别、病程和临床分型等方面存在一定差异,但无显著性。提示红色毛癣菌致病力的大小可能与SUB的不同表达有关。图2表7     

真菌病

980666 某些皮肤癣菌凝集素结合形式/林俊萍（中国 医科大一院）…//中华皮肤科杂志.-1997,30（5）.-334～335 14种皮肤癣菌均表达ConA糖基受体,绝大多数表达LCA、PSA糖基受体。提示14种皮肤癣菌细胞壁均含有甘露糖和葡萄糖基。毛癣菌属和小孢子菌属的绝大多数表达ConA、LCA、PSA、WGA及sWGA糖基受体,其余9种凝集素糖基受体表达较少。红色毛癣菌与须癣毛癣菌凝集素受体表达完全一致,仅絮状表皮癣菌表达PNA、RCA、SBA糖基受体,提示此菌细胞壁的糖基组成与毛癣菌属、小孢子菌属有明显差异。参1 （郗彦平）     

真菌病

20 0 2 1490　酵母相马尔尼菲青霉菌体外抗真菌药敏试验研究 /梁伶 (广西医大一附院皮肤科 )…∥中国皮肤性病学杂志 .- 2 0 0 1,15 (4 ) .- 2 4 3～ 2 4 5对 6株马尔尼菲青霉菌 (PM)的酵母相 ,采用M2 7- P方案中的 E- test法测定对伊曲康唑、酮康唑、氟康唑、 5 -氟胞嘧啶、二性霉素 B的 MIC值。结果显示伊曲康唑敏感性最强 ,其次是酮康唑和5 -氟胞嘧啶 ,二性霉素 B敏感性相对较弱 ,氟康唑 MIC值较其它 4种药物要大。酵母型 PM对 5种抗真菌药物敏感性存在差异。图 6表 1参 7　(王冬云 )2 0 0 2 1491　红色毛癣菌随机扩增 DNA多态性分型研究 /成晓茹 (一军大南方医院惠侨科 )…∥中华皮肤科杂志 .- 2 0 0 1,34 (6) .- 4 4 8～ 4 4 9研究发现 ,三地 4 6株红色毛癣菌可分为五个基因亚型 ,基因分型与表型分型间并无对应关系 ,同一表型可呈不同的基因型 ,不同的表型又可呈同一基因型。然而 ,红色毛癣菌的基因型与地区来源却有较密切的关系 ,表明不同的地理环境、气候特征、生活习性等因素对红色毛癣菌的遗传...     

真菌病

961527 国产特比萘芬体外抗真菌作用的观察/信许娅…//中国皮肤性病学杂志。-1996,10(1).-19～20 抑菌试验结果表明,与酮康唑和咪康唑相比,对红色毛癣菌等20株真菌的抑菌作用明显优于其他两药,三种药物对白念珠菌均无杀菌作用。表2参3 961528 国产特比萘芬体外药效学研究/吴绍熙…//中国皮肤性病学杂志。-1996,10(2).-81 研究结果提示,在体外对7属12种72株常见致     

Ras1、Rac1、Rho1基因在阿萨希毛孢子菌酵母相和菌丝相中的表达差异

目的 研究Ras1、Rac1和Rho1基因在阿萨希毛孢子菌酵母相和菌丝相中的表达差异,探讨其在菌丝生长过程中的作用.方法 分别培养阿萨希毛孢子菌酵母相和菌丝相,提取两组的总RNA,采用荧光定量PCR方法测定两组中Ras1、Rac1和Rho1 mRNA的相对表达量.结果 酵母相菌丝生成率(0.40％±0.53％)显著低于菌丝相(99.33％ ± 0.57％,t=13.93,P＜0.05).实时荧光定量PCR显示,以酵母相为对照组,将其Ras1、Rac1、Rho1基因表达量均设为1,则菌丝相的Ras1、Rac1、Rho1基因mRNA相对表达量分别为25.17±10.99、16.81±7.80、42.61±18.50,与酵母相比较,差异有统计学意义(t值分别为3.81、3.51、3.90,均P＜0.05).结论 Ras1、Rac1、Rho1基因可能参与了阿萨希毛孢子菌菌丝的生长过程.     

物理性皮肤病

20053702慢性光化性皮炎凋亡蛋白表达的检测/陈浩(昆明医学院二附院皮肤科),邓丹琪,周晓鸿…∥临床皮肤科杂志.2005,34(8).517～518对28份石蜡包埋标本,应用检测试剂盒进行免疫组化染色,组织细胞定量。结果表明,FasL的表达在角质层、颗粒层均较正常高,而Fas的表达差异无显著性;Bcl-2在本病中表达和正常对照差异无显著性,而Bcl-XL的表达,尤其在棘层上部与对照差异有显著性,推测Bcl-XL的过度表达抑制了角质形成细胞的凋亡而延长角质形成细胞的寿命,造成角质形成细胞的过度增生。提示细胞凋亡蛋白的异常表达可能与发病有关。图1表1参11(张孝友)20053703光老化的临床评价/马慧军(南京医大一附院皮肤科),朱文元∥中华医学美学美容杂志.2005,11(4).250～25120053704植物光皮炎1例/李澄(上海嘉定区中心医院皮肤科),李燕∥临床皮肤科杂志.2005,34(8).53620053705复方乳酸软膏治疗手足皲裂症临床研究/汪科(北京大学第一医院皮肤科),季素玲,漆军…∥中国麻风皮肤病杂志.2005,21(7).527～529采用多中心、随机双盲、安慰剂对照研究。共入选试验...     

皮肤肿瘤

20102011MV3恶性黑素瘤皮肤体外模型中基质金属蛋白酶-2,9的表达/吕宇(贵阳医学院附院皮肤科),陆洪光∥中华皮肤科杂志.-2010,43(4).-273~274用MV3恶性黑素瘤细胞复合DED体外构建皮肤恶性黑素瘤模型,用免疫组化及RT-PCR方法对培养的MV3恶性黑素瘤体外皮肤黑素瘤组织中基质金属蛋白酶-2,9(MNP-2,MMP-9)进行检测。结果MMP-2,MMP-9主要表达于瘤细胞胞膜及沿瘤细胞分布的DED浅层的基底膜处,也可见于被瘤细胞侵袭的DED管腔的管壁处,在瘤细胞聚集处表达明显。与内参照GAPDH条带相比,黑素瘤模型组织中有目的基因条带表达,DED无目的基因条带表达。     

真菌病

20042745　一株耐热红色毛癣菌临床分离株的基因型鉴定/章强强(复旦大学华山医院)…//中华皮肤科杂志.-2003,36(8).-443～445用常规真菌学鉴定法、PCR方法和基因测序对引起皮肤肉芽肿损害的红色毛癣菌进行研究。结果显示,与普通红色毛癣菌相比,耐热菌株在常规真菌鉴定及核糖体保守区基因序列测定结果相同,但核糖体基因非转录区(NTS)内trs-1(串联重复亚单位)区基因序列测定有明显的不同。提示耐热株为红色毛癣菌的一个有较强侵袭力的同型变种,能导致特殊的皮肤损害,该变异可能是菌株为适应外界环境的结果。图1参12　(张江安)20042746　任…     

药物反应

20121580 PBMC中CD69、CD107a表达上调在诊断迟发型药疹变态反应中的意义/牛军(三军大西南医院皮肤科),钟华,宋志强…∥第三军医大学学报.-2012,34(6).-154～1562010年5月-2011年4月采集20例药疹患者和10例健康对照者的外周血,用淋巴细胞分离液分离外周血单核细胞,按2.0×106细胞/孔种植于24孔板,予致敏药物刺激,培养72h后采用流式细胞术染色并检测外周血单核细胞中CD69和CD107a分子的表达。结     

HaCaT细胞对红色毛癣菌生长的抑制作用

目的 探讨角质形成细胞对红色毛癣菌生长的抑制作用.方法 将HaCaT细胞采用含10%小牛血清的DMEM培养液,5%CO2环境下,37 ℃孵育至80%融合时,弃去培养液,加入用无血清DMEM配制的菌丝段悬液共孵育(浓度0.1×105/mL～1.0×105/mL),并以菌丝段悬液作为阴性对照.分别于4 h、8 h、16 h和24 h制备共孵育后的菌丝段悬液,进行台盼蓝染色计数和菌落计数,对真菌生长状况进行评价并计算真菌生长抑制率.结果 在细胞和菌丝段共孵育4 h、8 h、16 h和24 h,台盼蓝染色法测得的菌生长抑制百分数分别为46.8%±8.0%、64.0%±5.5%、76.3%±7.7%和39.5%±4.9%;菌落计数法测得菌生长抑制百分数分别为39.7%±4.9%、58.0%±8.9%、68.3%±7.4%和39.9%±5.5%.结论 HaCaT细胞对体外培养的红色毛癣菌有一定的抑制作用.     

糠秕马拉色菌菌丝态和酵母态细胞差异表达片段的筛选

目的 获得糠秕马拉色菌菌丝态细胞表达而酵母态细胞不表达的基因片段.方法 体外诱导培养糠秕马拉色菌标准株菌丝态和酵母态细胞并提取二者总RNA;逆转录生成糠秕马拉色菌两相细胞cDNA,运用消减杂交技术获得菌丝态细胞差异表达的cDNA,并建立差异cDNA文库;对差异cDNA片段进行克隆测序和分析.结果 ①改良菌丝诱导培养基培养糠秕马拉色菌第1d可见芽生菌丝生长,第2d可见较多菌丝,第6d菌丝更长更粗;②获得可满足多种分子生物学技术要求的RNA;③建立了菌丝态细胞差异表达的cDNA文库,并获得糠秕马拉色菌菌丝态细胞表达而酵母态细胞不表达的基因片段. 结论 体外诱导糠秕马拉色菌菌丝生成,建立了糠秕马拉色菌菌丝态细胞的差异cDNA文库,并对部分克隆片段进行测序和分析.     

普萘洛尔对体外培养血管瘤内皮细胞的影响及其分子机制

目的 研究普萘洛尔对体外培养的血管瘤内皮细胞(HemEC)增殖及凋亡的影响,探讨其分子机制.方法 收集7例增生期血管瘤患儿的手术切除血管瘤组织用于体外培养HemEC,同时培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为对照.采用0、25、50、75、100、125、150 μmol/L普萘洛尔分别处理两种细胞24、48、72 h.MTT法检测各组细胞的存活率,流式细胞仪检测凋亡率.采用含或不含100 μmol/L普萘洛尔的培养基分别培养HemEC(分别为普萘洛尔干预组及空白对照组)18h,提取两组细胞总RNA,采用表达谱基因芯片技术检测两组HemEC中差异表达的基因,并通过实时定量PCR验证.结果 25 μmol/L普萘洛尔作用24、48 h可引起HemEC轻微增殖(P＜0.05),而≥100 μmol/L普萘洛尔作用≥24 h可引起HemEC存活率下降,作用≥48 h可引起HUVEC存活率下降.100 ～150 μmol/L普萘洛尔作用24～72 h,HemEC细胞存活率比HUVEC低(P＜0.05).100 ～ 150 μmol/L普萘洛尔作用下,HemEC凋亡率随普萘洛尔作用时间及浓度逐渐升高(均P＜0.05).普萘洛尔干预HemEC后,表达谱基因芯片技术筛选出186个表达差异倍数≥1.5的基因,其中表达明显上调的基因128个,明显下调的58个.实时定量PCR显示,普萘洛尔干预组前蛋白转化酶枯草溶菌素9 mRNA表达水平为空白对照组的(9.88士2.19)倍,脂肪酸结合蛋白3 mRNA为(21.90±8.18)倍,差异均有统计学意义(t=7.028、4.427,P＜0.05).结论 高浓度普萘洛尔对HemEC及HUVEC的增殖均有抑制作用,且对HemEC的抑制作用更强.普萘洛尔抑制HemEC的增长可能与抑制HemEC增殖及促进其凋亡有关.     

真菌病

20 0 0 3661　烟台市海洋作业人群浅部皮肤真菌病与近海环境相关因素的调查研究 /成淑闻 (烟台市烟台山医院 )…∥中国皮肤性病学杂志 .- 2 0 0 0 ,14( 3) .- 182在烟台市有关海洋作业单位普查 4 82 0人次 ,检出 5.93%患浅部皮肤真菌病 ,而非海洋作业人员中为2 .96% ,差异显著。调查皮肤科门诊患者 30 0 0 2人次 ,6.75%患皮肤癣菌病。致病菌以红色毛癣菌为主 ,石膏样毛癣菌、酵母菌、念珠菌属次之。近海环境物主要携带念珠菌属。表 2参 6　 (刘彤 )2 0 0 0 3662　伊曲康唑治疗体、股癣疗效观察 /金学洙(白求恩医大二院皮肤科 )…∥临床皮肤…     

真菌病

20 0 2 0 80 5　儿童真菌性皮肤病菌种分析 /周文明 (安徽医大一附院皮肤科 )…∥安徽医科大学学报 .- 2 0 0 1,36(5 ) .- 394～ 395儿童真菌病病原菌、临床特征与成人有很大差异。为了解儿童真菌病病原菌的菌种分布及菌群动态变化 ,分析了 1980～ 2 0 0 0年间本科儿童真菌培养结果。儿童真菌标本共 2 118份 ,共分离出 110 1株真菌 ,阳性率 5 1.98%。皮肤癣菌、酵母菌、霉菌分别占菌株数的 80 .4 7%、18.5 3%和 1.0 0 %。在浅部真菌病中 ,须癣毛癣菌占首位 ,紫色毛癣菌位于第二 ;头癣中以紫色毛癣菌占首位 (47.37% )。在这 2 0年中 ,紫色毛癣菌相对稳定 ,许兰黄癣菌和断发毛癣菌逐年减少 ,而犬孢子菌和须癣毛癣菌逐年增多。认为儿童真菌病病原菌菌种在 2 0年间有动态变化。表 1参 9　 (赵恩兵 )2 0 0 2 0 80 6　脓癣继发感染 6 6例临床及病原菌分析 /张晓呜 (宁夏医学院附院皮肤科 )…∥皮肤病与性病 .-2 0 0 1,2 3(4) .- 5～ 66 6例患者浅部真菌分离结果计有石膏样毛癣菌4 5例 ,羊毛...