四神丸对腹泻型肠易激综合征模型大鼠及离体结肠的实验研究＊

目的探讨四神丸(SSW)对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠腹泻和内脏敏感性及离体分为对照组、模型组、SSW高剂量组(7.2 g·kg^-1灌胃)、SSW中剂量组(3.6 g·kg^-1灌胃),SSW低剂量组(1.8 g·kg^-1灌胃),匹维溴铵组(15 mg/kg灌胃),灌胃每天1次,共4周。用腹壁逃避反射(AWR)评估结肠高敏感性变化,用粪便粒数和腹泻指数评估大鼠腹泻状况,同时观察不同浓度SSW混悬液对大鼠离体结肠自发收缩、乙酰胆碱(Ach)和高钾引发的痉挛性收缩的作用。结果与对照组比较,模型组AWR评分、痛觉压力阈值、维溴铵组痛觉压力阈值均明显升高(P<0.01);SSW低、中、高剂量组和匹维溴铵组粪便粒数及腹泻指数均明显下降(P<0.05或0.01);SSW(0.75,1.5,3,6 g·L^-1)对Ach及高钾促发的张力性收缩均有浓度依赖的舒张作用(P<0.01)。结论四神丸能够改善IBS-D模型的排便功能和痛觉过敏,其作用机制可能是通过钙通道竞争拮抗作用抑制结肠运动亢进和肠痉挛。     

和调健脾方对腹泻型肠易激综合征模型大鼠的治疗作用及机制研究

目的:探讨和调健脾方对腹泻型肠易激综合征模型大鼠的治疗作用及对核因子-κB(NF-κB)/Notch1通路的影响。方法:建立腹泻型肠易激综合征大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、匹维溴铵组(2 mg/kg)、和调健脾方低剂量组(2.82 g/kg)、和调健脾方高剂量组(5.64 g/kg),每组12只; 另取12只健康大鼠作为对照组; 匹维溴铵组、和调健脾方低剂量组、和调健脾方高剂量组给予相应药物灌胃,对照组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃,1次/d,连续给药14 d。给药周期结束后,检测大鼠排便频率、粪便含水量,酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、二胺氧化酶(DAO)水平,观察大鼠结肠组织病理学变化,实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法测定NF-κB、Notch1 mRNA和蛋白表达水平。结果:对照组结肠黏膜组织结构正常; 模型组肠绒毛变短、增厚、脱落,肠黏膜上皮细胞脱落,可见明显炎症细胞浸润; 匹维溴铵组及和调健脾方高剂量组结肠黏膜上皮细胞脱落减轻,炎症细胞浸润减少; 和调健脾方低剂量组仍可见明显充血及炎症细胞浸润。与对照组比较,模型组大鼠排便频率、粪便含水量、血清IL-2、TNF-α、DAO水平、结肠组织NF-κB、Notch1 mRNA和蛋白表达水平明显升高(均P<0.05); 与模型组比较,匹维溴铵组、和调健脾方低剂量组、和调健脾方高剂量组大鼠排便频率、粪便含水量、血清IL-2、TNF-α、DAO水平、结肠组织NF-κB、Notch1 mRNA和蛋白表达水平降低(均P<0.05); 且和调健脾方高剂量组大鼠排便频率、粪便含水量、血清IL-2、TNF-α、DAO水平、结肠组织NF-κB、Notch1 mRNA和蛋白表达水平低于和调健脾方低剂量组(均P<0.05); 和调健脾方高剂量组各指标与匹维溴铵组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:和调健脾方可改善腹泻型肠易激综合征模型大鼠腹泻症状,减轻大鼠血清和结肠组织炎症反应,其机制可能与和调健脾方抑制NF-κB、Notch1 mRNA和蛋白表达水平进而抑制NF-κB/Notch1通路的激活有关。     

眼针疗法对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠神经激肽1表达的影响

目的探讨眼针疗法对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)的治疗作用及机制。方法将40只Wistar大鼠随机分为4组,对照组、模型组、匹维溴铵组和眼针组,每组10只。采用慢性应激结合束缚方法建立D-IBS模型,眼针组采用眼针治疗,针刺下焦区、大肠区、肝区、脾区;匹维溴铵组用匹维溴铵灌胃治疗,两组均治疗7天。HE染色观察结肠组织病理学变化;实时定量PCR测定结肠组织神经激肽1(NK1)的mRNA表达变化;免疫组化法测定结肠组织NK1的蛋白表达变化。结果各组大鼠结肠组织病理学无差异。与对照组比较,模型组结肠组织中NK1的mRNA表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,眼针组结肠组织中NK1的mRNA表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,匹维溴铵组结肠组织中NK1的mR-NA表达水平无统计学意义(P>0.05)。NK1免疫反应阳性细胞在结肠黏膜层、腺腔内、肌间神经丛、黏膜下神经丛等部位。与对照组比较,模型组结肠组织中NK1的蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,眼针组和匹维溴铵组结肠组织中NK1的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论眼针能够降低D-IBS模型大鼠结肠组织中NK1的表达,从而对D-IBS起到治疗作用。     

逍遥散对肠易激综合征模型大鼠性激素的干预作用

目的:观察逍遥散对肠易激综合征(IBS)模型大鼠性激素水平变化的影响及调节作用。方法:50只健康成年SD大鼠,雌雄各半,随机分为正常组、模型组、逍遥散高剂量组、逍遥散低剂量组和匹维溴胺组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠采用心理应激联合腹腔注射鸡卵清蛋白法建立IBS模型。造模结束后,正常组和模型组分别给予生理盐水(15 ml/kg.d-1)灌胃,逍遥散高、低剂量组每天分别给予逍遥散高、低剂量(20 g/kg体质量、5 g/kg体质量),匹维溴胺组给予匹维溴胺(15 mg/体质量.d-1),日1次,连续14 d。以放免法检测各组大鼠性激素水平,以甲苯胺蓝染色法观察结肠黏膜肥大细胞(MC)的变化。结果:IBS大鼠性激素水平紊乱,结肠黏膜组织内MC明显增多(P<0.01)。结论:逍遥散能调节IBS大鼠性激素水平紊乱,降低MC活性。     

电针对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠动力学及相关蛋白表达的影响

目的:观察电针“天枢”“上巨虚”对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠胃肠道动力障碍、心理异常及结肠组织Ras同源基因家族蛋白A(RhoA)、Rho相关激酶(ROCK)蛋白表达的影响,探讨电针治疗IBS-D的作用机制。方法:SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组、药物组,每组9只。通过二硝基苯磺酸灌胃+慢性束缚应激法建立伴有心理异常的IBS-D大鼠模型。电针组予电针双侧“天枢”“上巨虚”,每次20 min, 1次/d,持续7 d。药物组将匹维溴铵按体质量15 mg/kg研磨成粉,与1 mL 0.9%氯化钠溶液混合均匀后,灌胃给药,1次/d,持续7 d。观察各组大鼠一般状态,测定其体质量及摄食量,进行内脏敏感性检测、糖水偏嗜实验及高架十字迷宫测试,以墨汁灌胃法检测小肠推进率,Western blot法检测结肠组织中RhoA、ROCK蛋白的表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠一般状态较差,体质量、摄食量、糖水偏好指数及开臂停留时间百分比均降低(P<0.05),结肠收缩波个数明显增加(P<0.01),收缩波潜伏期明显缩短(P<0.05),小肠推进率及结肠组织中RhoA、RO...     

肠制大黄对便秘模型小鼠排便功能及结肠组织病理变化的影响

目的 观察采用猪大肠炮制大黄（简称肠制大黄）对便秘模型小鼠排便功能的影响及可能作用机制。方法 将50只昆明小鼠随机分成空白组10只和造模组40只，造模组小鼠连续4天给予洛哌丁胺混悬液8 mg/（kg·d）灌胃建立便秘小鼠模型。造模成功的24只小鼠再随机分为模型组、肠制大黄组、乳果糖组、生大黄组各6只，随机选取6只空白组小鼠作为对照。第5天开始模型组、肠制大黄组、生大黄组、乳果糖组仍予洛哌丁胺混悬液8 mg/（kg·d）灌胃4天，每日灌胃2 h后肠制大黄组再给予肠制大黄混悬液0.6 g/（kg·d）灌胃，生大黄组予生大黄混悬液0.6 g/（kg·d）灌胃，乳果糖组予乳果糖混悬液6 g/（kg·d）灌胃，空白组和模型组小鼠予0.2 ml/10 g蒸馏水灌胃，各组均连续干预4天。观察各组小鼠一般情况，最后一次灌胃后检测体质量；记录6 h内粪便粒数、粪便湿重，计算粪便含水比例；采用小肠推进运动实验计算小肠肠道推进率；进行HE染色观察结肠组织病理变化。结果 生大黄组小鼠体质量较其余各组均明显减轻（P<0.05或P<0.01）。与空白组比较，模型组小鼠粪便粒数、粪便湿重、肠道推进率均降...     

痛泻要方对肠道高敏感性肠易激综合征大鼠模型疗效和作用机理的研究

目的:探讨痛泻要方(白术、白芍、陈皮等)对肠易激综合征大鼠模型的疗效和作用机理。方法:采用结肠慢性刺激法制作肠道高敏的肠易激综合征大鼠模型。将实验动物分为空白对照组、模型对照组、西药(匹维溴铵)组、中药低剂量组、中药高剂量组。空白对照组和模型对照组以生理盐水按10 mL/kg灌胃,西药组以匹维溴铵按10 mL(15 mg)/kg灌胃;中药低剂量组、中药高剂量组分别以痛泻要方药液按10 mL(15 g)/kg和10 mL(30 g)/kg灌胃,均连续给药30 d,每天二次。观察各组大鼠肠道内扩张引起腹部抬起和背部拱起的容量阈值和大鼠肠道内不同容量下扩张期间腹壁收缩次数,检测5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)含量。结果:与对照组相比,各治疗组大鼠行为学和电生理指标均有明显改善;各治疗组模型大鼠5-HT、SP含量明显下降,CGRP含量增加,且有一定的量效关系。结论:痛泻药方对肠易激综合征大鼠模型的作用机制可能是通过降低模型大鼠血清5-HT、血浆SP含量,减弱背角神经元兴奋性,从而提高内脏痛阈,消除肠道过敏,从而达到治疗目的。     

健脾安肠丸对腹泻型肠易激综合征结肠组织SP、VIP、CGRP的影响

目的:研究健脾安肠丸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)结肠组织SP、VIP的影响。方法:采用大黄灌胃与束缚配合的方法制备IBS-D大鼠。将60只成年SD大鼠随机分为4组:正常组、模型组、健脾安肠丸大剂量组、健脾安肠丸小剂量组和匹维溴铵组。采用ELISA法检测大鼠结肠组织中P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)和降钙素基因相关肽(CGRP)的含量。结果:模型组大鼠大便形状的评分值较正常组明显增高(P0.01),而健脾安肠丸大剂量组和匹维溴铵组较模型组分值显著下降(P0.01,P0.05);大剂量、小剂量健脾安肠丸和匹维溴铵均能减少模型大鼠结肠SP、VIP含量,提高CGRP含量。结论:健脾安肠丸能有效地缓解腹泻型肠易激综合征,其疗效可能与减少SP、VIP和增加CGRP的释放有关。     

基于VIP-cAMP-PKA-AQP3信号通路探讨益气润肠方治疗气虚型便秘大鼠的作用机制

目的：基于VIP-cAMP-PKA-AQP3信号通路探讨益气润肠方对气虚便秘模型大鼠作用及其机制。方法：选取48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、乳果糖组、益气润肠方低剂量组、益气润肠方中剂量组和益气润肠方高剂量组，每组8只。空白组大鼠正常饮食，每日给予生理盐水灌胃，其余大鼠给予洛哌丁胺混悬液3 mg/（kg·d）灌胃加饥饱饮食2周制作气虚便秘模型。造模成功后，空白组及模型组每日给予生理盐水灌胃，乳果糖组给予乳果糖口服溶液1.67 g/（kg·d）灌胃，益气润肠方高、中、低剂量组分别给予益气润肠方17.5、8.75、4.375 g/（kg·d）灌胃，连续2周。14 d后称量大鼠粪便湿重、粪便干重并计算粪便含水率；留取结肠组织，采用苏木精伊红染色法观察结肠病理变化，qPCR检测大鼠结肠血管活性肠肽（VIP）、环磷酸腺苷（cAMP）、蛋白激酶A(PKA)、水通道蛋白3(AQP3)mRNA表达水平，Western blot检测大鼠VIP、AQP3蛋白表达水平。结果：与空白组比较，模型组大鼠体质量明显降低（P <0.01），粪便湿重及粒数明显减少（P <0.01）；与模型组比较，益...     

补骨脂-肉豆蔻醇提物治疗肠易激综合征大鼠的内脏高敏感

目的观察补骨脂-肉豆蔻醇提物对肠易激综合征内脏高敏感大鼠的治疗作用及其可能机制。方法将新生SD大鼠随机分为6组,正常组,模型组,补骨脂-肉豆蔻醇提高、中、低剂量组及匹维溴铵组,每组8只。除正常组外,其余各组采用母子分离结合乙酸灌肠法复制内脏高敏感大鼠模型,于造模后第6周起,治疗组大鼠给予醇提物或匹维溴铵灌胃,连续两周。观察结肠组织病理学变化及内脏高敏感性相关指标,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测P物质(SP)和降钙素基因相关肽(CGRP)含有量,通过免疫荧光法检测促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)和CRF1型受体(CRFR1)表达。结果与模型组相比,补骨脂-肉豆蔻醇提物(15、10 g/kg)能够升高大鼠腹部回缩反射阈值,降低大鼠结肠运动和结肠组织中SP、CGRP、CRF、CRFR1的表达。结论补骨脂-肉豆蔻对肠易激综合征内脏高敏感性大鼠有一定的治疗作用,其机制与调节结肠组织中SP、CGRP、CRF及其受体有关。     

肠激安胶囊对IBS-D模型大鼠脑肠轴中NPY mRNA表达及ACTH含量的影响

目的探讨肠激安胶囊对腹泻型肠易激综合征（diarrhea predominant irritable bowel syndrome,IBS-D）大鼠下丘脑和结肠组织神经肽Y（neuropeptide Y,NPY）mRNA表达和血清促肾上腺皮质激素（adreno-cortico-tropic hormone,ACTH）含量的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组,模型组,匹维溴铵组（0．018g／kg）,肠激安胶囊高（2．812g／kg）、中（1．406g／kg）、低（0．703g／kg）剂量组,每组8只,模型组以及给药组采用母乳分离＋醋酸刺激＋四肢束缚法制备IBS—D大鼠模型,正常组和模型组给予生理盐水,给药组灌胃14天,采用ELISA法检测各组大鼠血清ACTH含量,采用RT-PCR法检测各组大鼠下丘脑及结肠组织NPYmRNA表达。结果与正常组比较,模型对照组大鼠血ACTH明显升高（P〈0．01）,下丘脑、结肠组织NPYmRNA表达明显降低（P〈0．01）;与模型组比较,肠激安胶囊高、中剂量组及匹维溴胺组大鼠血ACTH明显降低（P〈0．01,P〈0．05）,匹维溴铵组和肠激安胶囊高、中、低剂量组下丘脑、结肠组织NPYmRNA表达上调（P〈0．05）。结论肠激安胶囊对IBS．D大鼠脑肠轴异常有调节作用,其作用机制可能是通过上调下丘脑和结肠组织NPYmRNA表达和下调HPA轴中ACTH含量。     

加味柴胡疏肝散对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠黏膜胆囊收缩素的影响

目的 探讨加味柴胡疏肝散对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠黏膜胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)的影响。方法 复制大鼠腹泻型肠易激综合征模型,观察加味柴胡疏肝散对模型大鼠粪便含水量、直肠内玻璃小球排出时间以及结肠黏膜中CCK含量(免疫组化法)的影响。结果 与空白对照组比较,模型组大鼠粪便含水量增加,直肠内玻璃小球排出时间缩短,结肠黏膜中CCK的含量升高,差异均有统计学意义(P < 0.05);加味柴胡疏肝散、匹维溴胺能减轻以上肠功能紊乱(P < 0.05),降低结肠黏膜中CCK的含量(P < 0.05)。HE染色观察,与空白对照组比较,模型组结肠黏膜未见病理组织学改变。免疫组化显示,与空白对照组比较,模型组CCK染色阳性颗粒明显增加;与模型组比较,加味柴胡疏肝散组及匹维溴铵组CCK染色阳性颗粒减少。结论 加味柴胡疏肝散能减轻腹泻型肠易激综合征模型大鼠的肠功能紊乱,该作用可能与其对结肠黏膜中CCK的调节有关。     

半夏泻心汤及其不同拆方对抗生素诱导的菌群紊乱幼鼠结肠黏膜屏障的影响

目的 观察半夏泻心汤及其不同拆方对抗生素诱导的菌群紊乱幼鼠结肠黏膜屏障的影响。方法 70只SPF级雄性Balb/c幼鼠随机抽取10只作为空白组,其余幼鼠予混合抗生素灌胃诱导肠道菌群紊乱,连续灌胃14 d,将造模幼鼠随机分为模型组、阳性对照组、全方组、辛开组、苦降组及甘补组,每组10只。阳性对照组予双歧杆菌四联活菌片溶液0.68 g/kg灌胃,全方组、辛开组、苦降组及甘补组分别予9.1、3.19、1.82、4.1 g/kg半夏泻心汤全方及相应拆方组药液灌胃,空白组、模型组灌胃等体积生理盐水,连续14 d。末次灌胃后收集幼鼠粪便,采用16S rDNA测序分析肠道菌群结构。腹腔注射脂多糖(10 mg/kg)诱导炎症反应,ELISA检测粪便清蛋白含量,HE染色观察结肠黏膜形态,Western blot检测结肠组织紧密连接蛋白ZO-1和Occludin表达。结果 与空白组比较,模型组幼鼠肠道菌群结构明显改变,结肠绒毛结构发育落后、隐窝不明显、腺体萎缩,粪便清蛋白含量明显增加(P<0.01),Occludin和ZO-1蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,全方组和不同拆方组肠...     

基于肠道微生态的米泔水制苍术健脾止泻药效及其机制研究

目的:研究米泔水制苍术对大黄致脾虚泄泻大鼠的治疗作用及其对肠道菌群结构的影响。方法:将42只Wistar大鼠随机分成7组，分别为正常对照组、模型对照组、盐酸小檗碱片0.09 g/kg组、米泔水制苍术1.89、7.56 g/kg组和生苍术1.89、7.56 g/kg组。除正常对照组外，其余各组均按40 g/kg给予200%大黄水煎液灌胃建立脾虚泄泻模型。造模成功后，各组分别灌胃相应药物，正常及模型对照组灌胃生理盐水，连续7 d。观察大鼠给药前后精神状态，测定粪便含水率；采用HE染色观察大鼠结肠组织病理学变化；采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清中胃动素(MTL)、D-乳酸和白细胞介素-1β(IL-1β)含量；基于16S rDNA高通量测序分析肠道菌群的结构和多样性。结果:与正常对照组比较，模型对照组粪便含水率显著升高，结肠结构损伤显著，血清MTL、D-乳酸和IL-1β含量显著升高(P<0.01);与模型对照组相比，米泔水制苍术7.56 g/kg组的粪便含水率显著降低，结肠病理结构显著改善(P<0.01),血清MTL、D-乳酸和IL-1β含量显著降低(P<0.05...     

眼针对肠易激综合征大鼠血清和结肠组织中P物质及血管活性肠肽含量的影响

目的:观察眼针疗法对肠易激综合征(IBS)大鼠血清和结肠组织中P物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)含量的影响,探讨眼针疗法对IBS治疗的作用机制。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、眼针组和匹维溴胺组,每组10只。采用慢性应激结合束缚方法建立IBS大鼠模型。眼针组取下焦区、大肠区、肝区、脾区进行针刺,治疗7 d。匹维溴胺组给予匹维溴胺灌胃7 d。HE染色检测结肠组织病理学变化;酶联免疫吸附法测定大鼠血清和结肠组织中SP和VIP含量的变化。结果:各组大鼠结肠组织病理学变化没有明显差异。模型组大鼠与正常组比较,血清和结肠组织中SP和VIP含量显著升高(P0.01);眼针治疗组和匹维溴胺组与模型组比较,血清和结肠组织中SP和VIP含量显著降低(P0.01)。结论:眼针疗法能够降低IBS模型大鼠血清和结肠组织中SP和VIP的含量,从而对IBS起到治疗作用。     

附子理中汤对腹泻型肠易激大鼠模型结肠组织中TLR4 mRNA表达水平的影响

目的:观察附子理中汤对腹泻型肠易激(D-IBS)大鼠模型结肠组织中toll样受体4(TLR4)表达水平的影响.方法:健康SPF级大鼠50只随机分为正常组、模型组、匹维溴铵组、附子理中汤高、低剂量组,用束缚应激加大黄ig方法联合复制D-IBS大鼠模型,造模成功后附子理中汤高、低剂量组(30,15 g·kg-1)、匹维溴铵(30 mg·kg-1)ig给药,1次/d,连续14 d.采用荧光定量PCR方法观察该模型大鼠结肠黏膜TLR4 mRNA的表达情况.结果:模型组大鼠肠黏膜的TLR4的表达(1.229±0.172)高于正常对照组(1.109±0.062) (P ＜0.01).而附子理中汤的干预可使大鼠肠黏膜的TLR4的表达趋于正常,与正常组无明显差异.附子理中汤高(1.068±0.056),低(1.067±0.071)剂量组之间没有显著差异,匹维溴铵组(1.205±0.290)与正常组相比TLR4的表达增多(P＜0.01).结论:附子理中汤可能通过增强整体机体耐受性,降低TLR4的表达,减少免疫应答,来维持肠道的稳态.     

“补骨脂-肉豆蔻”醇提物调控CRF-CREB信号通路对肠易激综合征内脏高敏感大鼠发挥治疗作用的研究

目的:观察"补骨脂-肉豆蔻"醇提物对母子分离结合乙酸灌肠诱导肠易激综合征内脏高敏感大鼠CRF-CREB信号通路的作用。方法:将新生SD大鼠随机分为正常组、模型组、"补骨脂-肉豆蔻"醇提物(15 g/kg、10 g/kg、5 g/kg)组和匹维溴铵(0.05g/kg)组。除正常组外,其余各组采用母子分离结合乙酸灌肠法复制内脏高敏感大鼠模型,于造模后第6周起,给药组分别灌胃给予相应的受试药物,正常组和模型组给予等量溶媒,1天1次,连续2周。采用直肠扩张法评价其腹部收缩反射(AWR)阈值,HE染色观察大鼠结肠组织病理学变化;免疫荧光检测大鼠结肠促肾上腺皮质激素释放因子(CRF),CRF 1型受体(CRFR1)蛋白的表达;RT-qP CR技术检测蛋白激酶A(PKA)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、c-fos mRNA的表达;Western blot技术检测PKA、CREB、p-CREB、c-fos蛋白的表达。结果:"补骨脂-肉豆蔻"醇提物(15 g/kg、10 g/kg)不仅能降低结肠组织中CRF、CRFR1蛋白的表达,还能降低结肠组织中PKA、CREB、p-CREB、c-fos mRNA和蛋白表达。结论:"补骨脂-肉豆蔻"对肠易激综合征内脏高敏感性大鼠有一定的治疗作用,其机制与调节结肠组织中CRF-CREB信号通路有关。     

固肠胶囊治疗腹泻型IBS模型大鼠效应及长链非编码RNA机制研究

[目的]阐释固肠胶囊治疗腹泻型肠易激综合征(IBS)模型大鼠效应及长链非编码RNA机制研究。[方法]建立腹泻型(D-IBS)大鼠模型,随机分为正常组、模型组、固肠胶囊低剂量组、固肠胶囊中剂量组、固肠胶囊高剂量组及匹维溴铵组,正常组和模型组大鼠以生理盐水灌胃,固肠胶囊低剂量、固肠胶囊中剂量组、固肠胶囊高剂量组以同浓度、不同剂量的固肠胶囊溶液,匹维溴铵组以治疗剂量的匹维溴铵灌胃;观察各组的病理结果和炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)及筛选出的特异表达lncRNA水平变化。[结果]1)各组大鼠结肠均未见明显异常病理。2)固肠胶囊中剂量组和固肠胶囊高剂量组可使结肠组织TNF-α和IL-6水平明显下降,趋于正常,与固肠胶囊低剂量组相比差异有统计学意义(P0.05)。3)筛选出2条上调特异表达lncRNAs(lncRNA ENSMUST00000153774和AK139722)、2条下调特异表达lncRNAs(lncRNA ENSMUST00000145087和NR_030708),在正常组与模型组样本中,lncRNA ENSMUST00000153774和AK139722在模型组呈相对高表达(P0.05),模型组固肠胶囊低剂量组固肠胶囊中剂量组固肠胶囊高剂量组匹维溴铵组;lncRNA ENSMUST00000145087和NR_030708在正常组呈相对高表达(P0.05),正常组固肠胶囊低剂量组固肠胶囊中剂量组固肠胶囊高剂量组匹维溴铵组,且除固肠胶囊高剂量组与匹维溴铵组比较无统计学差异,其他两组间比较均有统计学差异。[结论]炎性因子指标TNF-α、IL-6和lncRNA与D-IBS的发生发展有着密切的相关性,固肠胶囊能通过调节TNF-α、IL-6和特异表达lncRNAs的表达水平治疗DIBS,为后续研究奠定了理论和实验基础,为中药治疗本病提供了可靠的新理论和新靶点。     

石斛碱对肝郁脾虚型肠易激综合征小鼠GFAP、NGF、BDNF表达及内脏敏感性的影响

目的探讨石斛碱对肝郁脾虚型肠易激综合征(IBS)小鼠胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达及对内脏敏感性的影响。方法 C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组、石斛碱各剂量组、匹维溴铵阳性组,除正常对照组外,其余各组小鼠均采用番泻叶+束缚应激法进行IBS造模;用烘干法测小鼠粪便含水率;采用直肠气囊扩张(CRD)+腹壁撤退反射(AWR)评分法行小鼠内脏敏感性测量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清5-羟色胺(5-HT)和P物质(SP)水平,血清NGF、BDNF、GFAP表达;以蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中NGF、BDNF表达。结果与正常对照组比较,模型组小鼠粪便含水率、AWR评分、血清5-HT、SP水平、血清NGF、BDNF、GFAP表达、结肠组织NGF、BDNF表达均升高;与模型组比较,石斛碱各剂量组和匹维溴铵阳性组小鼠粪便含水率、AWR评分、血清5-HT、SP水平、血清NGF、BDNF、GFAP表达、结肠组织NGF、BDNF蛋白表达均降低;石斛碱各组呈剂量依赖性,石斛碱高剂量组与匹维溴铵阳性组各指标比较,差异无统计学意义。结论石斛碱可能通过减少5-HT、SP释放,抑制GFAP、NGF、BDNF表达,降低内脏敏感性,改善肝郁脾虚型IBS模型小鼠疼痛、腹泻等症状。     

“补骨脂-肉豆蔻”对IBS内脏高敏感大鼠CRF及其受体的调控

目的:观察"补骨脂-肉豆蔻"醇提物对母子分离结合乙酸灌肠诱导IBS内脏高敏感大鼠促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)及其受体的影响。方法:将新生SD大鼠随机分6组,每组8只,除正常组外,其余各组大鼠采用母子分离结合乙酸灌肠法复制IBS内脏高敏感大鼠模型,于造模后第6周起,分别给予"补骨脂-肉豆蔻"醇提物(15g/kg、10g/kg、5g/kg),匹维溴铵(50mg/kg)灌胃,1次/d,连续2w。治疗后评价其腹部收缩反射(AWR)阈值,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血浆中P物质(SP)和降钙素基因相关肽(CGRP)的含量;RT-qP CR和Western Blot检测大鼠结肠组织促肾上腺皮质激素释放因子(CRF),CRF1型受体(CRFR1)和CRF2型受体(CRFR2)的含量。结果:"补骨脂-肉豆蔻"醇提物(15g/kg、10g/kg)不仅能升高内脏高敏感性大鼠腹部回缩反射(AWR)阈值,还能降低血浆中SP、CGRP的含量,同时,"补骨脂-肉豆蔻"醇提物(15g/kg、10g/kg、5g/kg)能不同程度地降低结肠CRF、CRFR1表达及CRFR1/CRFR2的比值。结论 :"补骨脂-肉豆蔻"对内脏高敏感性大鼠有一定的治疗作用,其作用机制可能与调控CRF及其受体,从而提高内脏痛阈,改善肠道过敏状态有关。