氧化苦参碱对慢性乙型病毒性肝炎Toll样受体9信号通路的影响

目的探讨氧化苦参碱抗乙型肝炎病毒(HBV)感染的作用机制。方法分离提取慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMCs),在体外加入氧化苦参碱刺激,检测其诱导抗病毒细胞因子产生的能力,及对Toll样受体9(TLR9)信号通路表达及功能的调节作用。结果氧化苦参碱可直接刺激PBMCs分泌大量干扰素α(IFN-α)和干扰素γ(IFN-γ),上调PBMCs细胞TLR9信号通路中TLR9、髓样分化因子88及肿瘤坏死因子受体相关因子6等信号传递分子,并诱导信号通路活化释放大量抗病毒细胞因子(IFN-α、IFN-γ和肿瘤坏死因子-α)。结论氧化苦参碱通过直接诱导抗病毒细胞因子释放及上调活化TLR9信号通路发挥其抗HBV作用。     

泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体4/核因子-κB信号通路的影响

目的:观察泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体4/核因子-κB信号通路的影响并探讨其作用机制。方法:实验设正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、泄浊解毒方小剂量组、泄浊解毒方大剂量组,除正常组外采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇混合溶液灌肠复制溃疡性结肠炎大鼠模型,灌服相应药物后后观察各组大鼠结肠组织Toll样受体4及核因子-κB表达。结果:泄浊解毒方各剂量组大鼠Toll样受体4及核因子-κB表达均明显低于模型组;泄浊解毒方大剂量组Toll样受体4及核因子-κB表达明显低于柳氮磺胺吡啶组。结论:泄浊解毒方对大鼠溃疡性结肠炎有良好的治疗作用,其作用机制可能与调节Toll样受体4/核因子-κB信号通路有关。     

泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体4/核因子-κB 信号通路的影响

目的:观察泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠Toll 样受体4/核因子-κB 信号通路的影响并探讨其作用机制.方法:实验设正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、泄浊解毒方小剂量组、泄浊解毒方大剂量组,除正常组外采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇混合溶液灌肠复制溃疡性结肠炎大鼠模型,灌服相应药物后后观察各组大鼠结肠组织Toll 样受体4 及核因子-κB 表达.结果:泄浊解毒方各剂量组大鼠Toll 样受体4 及核因子-κB 表达均明显低于模型组;泄浊解毒方大剂量组Toll 样受体4 及核因子-κB 表达明显低于柳氮磺胺吡啶组.结论:泄浊解毒方对大鼠溃疡性结肠炎有良好的治疗作用,其作用机制可能与调节Toll 样受体4/核因子-κB 信号通路有关.     

Toll样受体3的信号通路及作为靶点的药物研究进展

Toll样受体3是Toll样受体中的重要成员之一,可特异性识别相应配体,通过独特的信号活化途径在抗感染、自身免疫性疾病、肿瘤等疾病的发生发展过程中发挥重要作用,是疾病防治和药物开发的重要靶点。文章对TLR3结构、信号通路及以TLR3为靶点的药物,包括激动剂、拮抗剂及中医药方面的研究进展进行了综述,通过综述发现,在我国丰富的中医药资源宝库中,可能存在着新的TLR3靶点拮抗或者激动分子,能够通过TLR3及其信号通路发挥对相关疾病的调制作用。     

泄浊解毒方对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏膜Toll样受体蛋白的影响

目的：观察泄浊解毒方对溃疡性结肠炎（uc）模型大鼠结肠黏膜ToU样受体（TLR）蛋白的影响。方法：采用2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）,乙醇混合溶液灌肠复制溃疡性结肠炎大鼠模型。实验设正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组和泄浊解毒方小、大剂量组,分别处理与给药后,观察各组大鼠结肠组织TLR2、TLR4蛋白的表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠TLR2、TLR4均显著升高;与模型组比较,泄浊解毒方各剂量组和柳氮磺胺吡啶组TLR2、TLR4明显降低：而泄浊解毒方大剂量组TLR2、TLR4蛋白表达,泄浊解毒方小剂量组TLR2蛋白表达亦明显低于柳氮磺胺吡啶组。结论：泄浊解毒方对大鼠溃疡性结肠炎有良好的治疗作用,其作用机制可能与调节rr0U样受体蛋白有关。     

桑菊饮含药血清对小鼠巨噬细胞Toll样受体表达的影响

目的: 研究桑菊饮对小鼠肺巨噬细胞株RAW264.7表达Toll样受体(TLR)的影响。 方法: 用桑菊饮含药血清作用于正常RAW264.7细胞,24 h后以荧光定量PCR方法测定TLR-1~TLR-9 mRNA的表达,探讨桑菊饮对Toll样受体表达的影响。结果:桑菊饮含药血清在一定剂量(7.7 g·kg^-1·U^-1)时,可以促进TLR-4和TLR-7的表达,而对TLR-1,TLR-2,TLR-3,TLR-5,TLR-6,TLR-8和TLR-9的表达没有明显影响。 结论: 桑菊饮的药效学作用可能与促进Toll样受体某些亚型表达有关。     

解毒祛瘀滋阴方冻干粉和含药血清对小鼠单核巨噬细胞的影响

目的探讨解毒祛瘀滋阴方冻干粉与含药血清对脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症信号通路的影响。方法体外培养RAW264.7细胞,随机分为对照组、LPS组、解毒祛瘀滋阴方含药血清组、冻干粉组、LPS加含药血清组及LPS加冻干粉组。干预24 h后,采用CCK-8法筛选含药血清和冻干粉的最佳浓度并检测二者对细胞活力的影响;采用ELISA法测定细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;采用q RT-PCR法检测核转录因子-κB(NF-κB)、TNF-αm RNA的表达;采用Western blotting法检测NF-κB蛋白表达水平;采用LC-MS检测解毒祛瘀滋阴方含药血清中的有效成分。结果与对照组比较,LPS刺激组TNF-α炎性因子水平、NF-κB、TNF-αm RNA表达水平和NF-κB蛋白表达水平显著升高(P0.05),含药血清组TNF-α炎性因子水平、NF-κB、TNF-αm RNA表达水平和NF-κB蛋白表达水平较冻干粉组降低明显(P0.05);与LPS组比较,LPS加含药血清组TNF-α炎性因子水平、NF-κB、TNF-αm RNA表达水平和NF-κB蛋白表达水平降低较LPS加冻干粉组明显(P0.05);解毒祛瘀滋阴方含药血清中检测到芍药苷和阿魏酸。结论解毒祛瘀滋阴方冻干粉和含药血清均具有抑制炎症信号通路的作用。     

Toll样受体4信号通路在糖尿病视网膜病变中的研究进展

糖尿病视网膜病变（DR）是2型糖尿病（T2DM）患者常见的微血管并发症之一，也是导致患者失明的主要原因，但其发病机制尚未完全明确。其发生和发展可能是多种因素参与的结果，例如炎症、细胞因子、多元醇途径和氧化应激。Toll样受体4(TLR4)是经典免疫炎症反应的介导因子之一，可以通过与其配体结合，激活下游信号通路，诱导炎性因子的产生。随着人们对DR发生机制的不断探索，TLR4信号通路的激活与DR之间的迷雾渐渐被揭开。本文主要从氧化应激、炎性因子释放、血管内皮生长因子（VEGF）生成、糖基化终末产物、表观遗传学、基因多态性等方面对TLR4信号通路在DR发病机制中的研究进展进行综述。     

Toll样受体信号通路与脑缺血中风

“中风”一病源于《内经》,病名有大厥、仆击、偏枯等称,如《素问·调经论》曰“血之与气并走于上,则为大厥”.中风也称脑卒中,其中缺血性脑卒中约占中风患者的80％[1].历代医家认为其病因多以风、火、痰、瘀、劳倦、气虚等为主,而现代越来越多的证据表明炎症参与其中[2].与全身细菌感染类似,脑缺血后炎症反应也与先天免疫相联系.     

参苏饮含药血清对小鼠巨噬细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响

目的：研究参苏饮含药血清对脂多糖(LPS)和聚肌胞(POLY I∶C)刺激的小鼠巨噬细胞株RAW 264.7表达Toll样受体3(TLR3),Toll样受体4(TLR4)及其下游信号转导通路髓样分化蛋白(MyD88),肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6),Toll样受体相关分子(TRAM)和Toll样受体相关的干扰素活化子(TRIF) mRNA的影响。方法：用LPS(5 μg·mL^-1),POLY I∶C(50 μg·mL^-1)分别刺激RAW 264.7细胞株,同时给予参苏饮含药血清(11.2,6.7,4.0,2.4,1.5 g·kg-1·U^-1)进行干预,ELISA法测定细胞培养上清液中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-β (IFN-β)的含量。先计算参苏饮IC₅₀,然后再以IC₅₀(11,5,2.5,4.9 g·kg^-1·U^-1)做为药物剂量进行干预,荧光定量PCR方法测定TLR3,TLR4和下游通路相关指标mRNA的表达,分析评价参苏饮含药血清清热解毒药效学作用的现代药理学基础。结果：参苏饮含药血清对POLY I∶C刺激的TLR3及其下游通路的MyD88和TRAM有抑制作用,对LPS刺激的TLR4的病理性升高无抑制作用,但对TLR4下游通路TRAM和TRIF mRNA的表达有明显的抑制作用。以上综合作用引起炎症因子TNF-α和IFN-β的降低。结论：参苏饮清热解毒的药效学作用可能与抑制TLR3,MyD88,TRAM和TRIF等细胞因子的表达有关。     

解毒祛瘀滋肾拆方对狼疮样小鼠肾TXB2／6-keto-PGF1α的影响

目的：探讨解毒祛瘀滋肾方中活血药拆方对MRL／lpr小鼠肾组织血栓素B。（TXB：）及6-酮-前列腺素F1α（6-keto—PGF1α）的影响。方法：24只MRL／lpr小鼠随机分成4组,每组6只,分别以赤芍、积雪草、积雪草与赤芍煎剂、生理盐水灌胃,另取昆明小鼠6只以生理盐水灌胃。12周后取肾脏,以放免法分别检测肾组织中TXB2及6-keto—PGF1α的含量。结果：模型组6-keto—PGF1α的合成释放显著减少,TXB2的合成释放增加,TXBz／6keto—PGF1α比值升高。用药12周,赤芍及其与积雪草合用肾脏6-keto—PGF1α含量升高,积雪草及其与赤芍合用肾脏TXB2降低。结论：积雪草、赤芍都有一定的降低TXB2／6-ketoPGF1α作用,而二药联用效果更明显,二药存在协同作用。     

解毒祛瘀滋阴方对巨噬细胞吞噬细菌的影响

目的:观察解毒祛瘀滋阴方对糖皮质激素造成的免疫抑制的RAW264.7巨噬细胞吞噬功能的影响。方法:通过构建YFP-PGEX-4T-1载体并转化,制备能够产生荧光的大肠杆菌BL21。应用不同浓度的地塞米松以及解毒祛瘀滋阴方干预后,加入大肠杆菌,观察巨噬细胞吞噬细菌的情况。结果:转化YFP-PGEX-4T-1载体后,大肠杆菌能够发出荧光。经不同浓度的地塞米松作用后,RAW264.7细胞吞噬能力减弱,加用解毒祛瘀滋阴方后,吞噬能力有一定程度的恢复。结论:解毒祛瘀滋阴方可以增强糖皮质激素造成的免疫抑制的RAW264.7巨噬细胞吞噬功能,这可能是解毒祛瘀滋阴方可以减少SLE患者继发感染的原因之一。     

桂枝汤含药血清对小鼠巨噬细胞Toll样受体3、4型及其下游信号转导通路元件的影响

目的:研究桂枝汤含药血清对LPS和Poly(I:C)刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7的Toll样受体(TLR)及其下游主要信号转导通路元件的影响,从mRNA和蛋白水平探讨桂枝汤含药血清防治感染性疾病的免疫学基础。方法:用LPS或Poly(I:C)分别刺激RAW264.7细胞,加桂枝汤含药血清干预24h后,取细胞上清液测定炎症因子TNF-α和IFN-β的含量;荧光定量PCR方法测定TLR3、TLR4和下游信号转导通路元件MyD88、TRAF-6、TRAM和TRIF mRNA的表达;Western blotting法分析TLR3、TLR4蛋白的表达;细胞免疫荧光法分析MyD88、TRAF-6蛋白表达的强弱。结果:桂枝汤含药血清可显著降低LPS刺激诱导的MyD88、TRAM和TRIF的高表达;Poly(I:C)刺激后,桂枝汤含药血清显著降低TLR3、MyD88和TRAM的高表达。结论:桂枝汤能直接作用于TLR3,抑制其高表达,阻断TLR3胞内信号转导的MyD88依赖和非依赖两条途径,抑制相关基因表达产物TNF-α、IFN-β过度分泌,具有TLR3拮抗剂样作用。桂枝汤也可直接作用于接头蛋白MyD88、TRAM和TRIF,影响TLR4信号转导的MyD88依赖和非依赖性途径,抑制TNF-α、IFN-β的过度分泌。     

黄芩苷调控活化Toll样受体4/核因子-κB信号通路对复发性流产小鼠的影响

目的:探讨黄芩苷对复发性流产小鼠的影响及作用机制。方法:参照Clark经典模型构建复发性流产小鼠,并将成功构建好的小鼠随机分为模型组和实验组,每组10只;同时建立正常妊娠小鼠模型10只作为对照组。于妊娠第2天,实验组灌胃0.4 mL/mg黄芩苷,模型组和对照组灌胃等量0.9%氯化钠注射液,1次/d,连续干预7 d。酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中激素水平及母胎界面中炎性反应递质水平;免疫组织化学检测小鼠子宫组织巨噬细胞分布情况;蛋白免疫印迹法检测各组小鼠子宫组织活化Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB、髓样分化因子88(MyD88)蛋白表达情况。结果:对照组、模型组和实验组小鼠母胎界面中TNF-α/IL-4为(2.78±0.36),(4.89±0.58)和(3.39±0.34),血清中E 2为(25.16±3.69),(17.56±4.52),(22.36±4.16)ng/L。小鼠子宫组织中分化抗原14(CD14)蛋白相对表达量分别为(9.36±2.34),(68.12±13.52),(33.46±2.85)%,子宫组织中TLR4蛋白表达量为(0.23±0.02),(1.25±0.33),(0.45±0.12),核因子-κB蛋白表达量为(0.59±0.14),(1.52±0.36),(0.78±0.25),MyD88蛋白表达量为(0.63±0.24),(2.34±0.22),(1.26±0.31),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芩苷可提高复发性流产小鼠雌激素水平,降低母胎界面中炎性状态,与抑制子宫内膜巨噬细胞浸润,调控TLR4-核因子-κB信号通路活性有关。     

扶正解毒方对小鼠前胃癌诱导肿瘤相关巨噬细胞的影响

目的探讨扶正解毒方对小鼠前胃癌所诱导肿瘤相关巨噬细胞影响性,以期为临床上治疗提供有效依据。方法用75只小鼠随机分成5组,每组15只,均为雄性,分别为空白组、模型组、中药组、化疗组、中西医结合组,空白组灌注生理盐水,其他4组先进行胃癌诱导肿瘤造模,空白组不作任何处理,造模组予生理盐水灌胃3周,中药组予扶正解毒方治疗,化疗组予5-氟尿嘧啶腹腔注射1周,中西医结合组先5-氟尿嘧啶腹腔注射1周后再中药灌胃3周,然后采用相关检测方法检测巨噬细胞相关指标含量。结果 CD68+巨噬细胞浸润程度上,模型组为3+,中药组为2+,化疗和中西医结合组为1+;M2型巨噬细胞含量中模型组和其他组比较差异均有统计学意义(P0.05),而化疗组和中西医结合组比较差异无统计学意义(P0.05);而在IL-4、IL-10、IL-13、TGF-β含量上,空白组和其他四组比较差异均有统计学意义(P0.05),模型组和中药组、化疗组、中西医结合组比较差异均有统计学意义(P0.05),而化疗组、中西医结合组比较差异无统计学意义(P0.05),中药组和化疗组、中西医结合组比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论扶正解毒方能通过降低CD68+巨噬细胞浸润程度,减轻M2型巨噬细胞含量,降低炎症指标IL-4、IL-10、IL-13、TGF-β含量等对小鼠胃癌起抑制作用。     

解毒祛瘀滋肾方对MRL/lpr狼疮小鼠肾组织GRα的调控作用研究

目的 探讨解毒祛瘀滋肾方对MRL/Ipr小鼠肾组织糖皮质激素受体信号通路的作用机制.方法 30只MRL/lpr小鼠随机分为模型组、西药组和中药组,另选10只昆明鼠作为正常对照组.HE染色分析小鼠肾组织病理改变;RT-PCR和Western blot分析糖皮质激素受体α(GRα)的表达;免疫共沉淀检测GRα与亲环素A结合力的影响.结果 两个用药组MRL/lpr小鼠肾损伤程度减轻.与模型组比较,西药组小鼠肾组织GRα mRNA及蛋白相对表达量降低,中药组两个指标增加,差异均有统计学意义(P＜0.01).解毒祛瘀滋肾方可显著提高GRα与亲环素A的结合力.结论 上调GRα的表达并增强GRα与亲环素A的相互作用是解毒祛瘀滋肾方能够改善小鼠肾组织病变作用机制之一.     

黄连解毒汤含药血清对Toll样受体34、型及其下游信号转导通路的影响

目的：研究黄连解毒汤含药血清对细菌脂多糖和双链RNA病毒核酸类似物聚肌胞刺激的小鼠巨噬细胞株RAW264.7 Toll样受体（TLR）及其下游主要信号转导通路的影响。方法：用脂多糖、聚肌胞分别刺激RAW264.7细胞,同时给予黄连解毒汤含药血清进行干预,24 h后,取细胞培养上清液,ELISA法测定炎症因子TNF-α和IFN-β的含量,荧光定量PCR方法测定TLR3、TLR4和下游信号转导通路髓样分化因子88（MyD88）,肿瘤坏死因子受体相关因子-6（TRAF-6）,TOLL样受体相关分子（TRAM）和TOLL样受体相关的干扰素活化子（TRIF）mRNA的表达,Western blotting法分析TLR3、TLR4蛋白的表达,同时用细胞免疫荧光法分析MyD88,TRAF-6蛋白表达的强弱,在mRNA水平和蛋白水平探讨黄连解毒汤对Toll样受体的作用机理。结果：黄连解毒汤含药血清显著降低LPS诱导的TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM和TRlF的高表达（与单纯LPS刺激组比较,P〈0.05或P〈0.01）;Poly（I：C）刺激后,黄连解毒汤含药血清仅对TRAM利TRIF的表达有明显的降低作用（P〈0.01）。结论：黄连解毒汤能阻断TLR4高表达,阻断TLR4胞内信号转导的MyD88依赖和非依赖两条途径（以阻断非依赖途径为主）,抑制相关基因表达产物TNF-α、IFN-β过度分泌,具有TLR4拮抗剂样作用。黄连解毒汤也可直接作用于接头蛋白TRAM和TRIF,影响TLR3信号转录的MyD88非依赖性途径,抑制IFN-β的过度分泌。     

石榴提取物联合柳氮磺胺吡啶抑制Toll样受体通路对小鼠溃疡性结肠炎的治疗效果

目的研究石榴提取物联合柳氮磺胺吡啶对溃疡性结肠炎(UC)小鼠Toll样受体信号通路的影响。方法将40只健康sp F小鼠随机分为5组,空白对照组不做处理,其余4组均先采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBs)诱导造溃疡性结肠炎小鼠模型,造模成功后的第2天起,3组治疗组分别灌胃石榴提取物0.1 mL/(次·d)、柳氮磺胺吡啶0.1 mL/(次·d)、联合药物治疗(0.1 mL石榴提取物加0.1 mL柳氮磺胺吡啶),连续14 d后处死小鼠,采样待检。观察结肠形态及进行结肠黏膜损伤指数评分,HE染色考察结肠组织病理学变化;免疫组化检测结肠黏膜通路蛋白NF-κB p65、TLR2、TLR4表达;ELIs A检测血清炎性因子含量;RT-p CR检测结肠黏膜TLR2、TLR4m RNA表达。结果不同给药组均可减轻溃疡性结肠炎小鼠结肠损伤指数及组织病理损伤,联合用药组效果最佳;联合用药组的结肠通路蛋白表达及血清炎性因子含量较模型组明显改善(p <0.05),且效果优于单一药物组。联合用药组可明显降低结肠黏膜TLR2、TLR4 mRNA表达(p <0.05)。结论石榴提取物联合柳氮磺胺吡啶可有效抑制Toll样受体信号通路,明显改善炎性指标,发挥对溃疡性结肠炎小鼠的治疗作用,且较单一用药效果更佳。     

电针通过Toll样受体信号通路调控细胞因子减轻脓毒症免疫抑制的作用及其机制

目的 研究电针通过Toll样受体信号通路调控细胞因子减轻脓毒症免疫抑制的作用及其相关机制。 方法 建立大鼠脓毒症模型,将其随机分为电针组（电针刺激足三里穴与关元穴,n=24）与假电针组（假性刺激,n=24）,以正常大鼠为空白对照组（正常饲养,不做任何处理,n=8）。连续干预3d后,采集试验大鼠外周血,淋巴细胞分离液分离外周血单核细胞（PBMC）,荧光免疫聚合酶链式反应检测PBMC表面TLR-4表达水平,流式细胞仪检测PBMC表面核因子-κΒ（NF-κΒ）表达水平。流式细胞术检测外周血T淋巴亚群。同时检测外周血炎症因子水平[肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）]。探究电针刺激足三里穴与关元穴在促进脓毒症康复中可能的作用机制。 结果 电针组及假电针组大鼠外周血TLR4表达水平及TLR4表面NK-κΒ mRNA相对表达量均显著高于空白对照组大鼠（P<0.05）,但电针组大鼠外周血TLR4水平及TLR4表面NK-κΒ mRNA相对表达量显著低于假电针组（P<0.05）。电针组及假电针组大鼠外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平均显著低于空白对照组大鼠（P<0.05）,三组CD8+水平无显著性差异（P>0.05）,但电针组大鼠外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平均显著高于假电针组（P<0.05）。电针组及假电针组大鼠外周血TNF-α、IL-6及NLR水平均显著高于空白对照组大鼠（P<0.05）,但电针组大鼠外周血TNF-α、IL-6及NLR显著低于假电针组（P<0.05）。 结论 电针刺激足三里穴与关元穴可能通过TLR4/NK-κΒ信号通路减少炎症因子的释放并减轻脓毒症大鼠机体免疫抑制状况,进而促进疾病康复。     

解毒祛瘀滋肾方对MRL/lpr狼疮小鼠CD4+T细胞CD229/CD25轴的影响

目的:从CD4+T细胞C D229/C D25轴探讨解毒祛瘀滋肾方治疗系统性红斑狼疮(SLE)的作用机制.方法:24只MRL/lpr狼疮小鼠随机分成模型组、激素组、中药组,各8只,8只C57BL/6小鼠作为空白组.中药组予2g/mL解毒祛瘀滋阴方水煎剂灌胃,激素组予0.5mg/mL醋酸泼尼松片混悬液灌胃,模型组和空白组...