AG490对喉癌细胞STAT3信号传导通路的抑制作用

目的 探讨JAK激酶抑制剂AG490对人喉鳞癌细胞株Hep-2的增殖及凋亡的影响,揭示AG490对STAT3信号传导通路的抑制作用,探讨AG490在喉癌治疗中的意义.方法 应用AG490作用于Hep-2细胞,MTT法检测细胞增殖状态,流式细胞术检测细胞周期与凋亡,固定化蛋白质印迹法(Western b1ot)检测STAT3和p-STAT3蛋白的表达.结果 AG490能有效抑制体外培养的Hep-2细胞的增殖,该抑制作用具有时间与浓度依赖性的特点.AG490诱导喉癌细胞凋亡,且随作用时间延长,凋亡率增加.AG490能抑制STAT3和p-STAT3蛋白在Hep-2细胞的表达.结论 AG490可以下调Hep-2细胞中STAT3和p-STAT3蛋白的表达,抑制喉癌细胞增殖,促进喉癌细胞凋亡.     

没药挥发油对大鼠神经胶质瘤细胞体外增殖的抑制作用

目的 探讨没药挥发油 (没药油) 对大鼠神经胶质瘤细胞 C6增殖抑制作用。方法 应用 MTT 法检测不同质量浓度没药油对 C6 细胞活性的作用;BrdU 掺入试验检测细胞增殖的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 没药油对 C6 细胞活性有明显的抑制作用,其抑制率与质量浓度有关;没药油作用 24 h 后,C6 细胞 BrdU 标记指数明显降低;而不同质量浓度没药油作用24 h 后,C6 细胞凋亡率与对照组相比无显著改变。结论 没药油对大鼠神经胶质瘤细胞株 C6 的增殖具有明显的抑制作用,但诱导细胞凋亡的作用不明显。     

反义PCNA基因片断抑制胶质瘤U251细胞增殖

目的 研究反义PCNA基因片断对胶质瘤细胞株U251的细胞增殖的抑制作用。方法 用脂质体介导寡核苷酸转染培养的U251胶质瘤细胞，以MTT法检测细胞增殖活性，RT-PCR、原位杂交和免疫组织化学方法分别检测相关基因和蛋白的表达，通过流式细胞仪检测细胞周期和TUNEL法检测细胞凋亡。结果 不同浓度的反义寡核苷酸对肿瘤细胞的增殖活性均有抑制作用，且有一定的剂量依赖性。PCNA反义寡核苷酸能够诱导胶质瘤细胞凋亡，且与反义寡核苷酸浓度和作用时间有关。结论 反义PCNA寡核苷酸片断能有效地抑制胶质瘤细胞的体外增殖，且能够诱导胶质瘤细胞的凋亡。     

JAK激酶抑制剂AG490联合顺铂对喉癌细胞STAT3信号转导通路的抑制作用

目的:探讨Stat3信号转导通路在药物治疗喉癌中的作用机制.方法:应用JAK激酶抑制剂AG490与顺铂(DDP)处理喉癌细胞系Hep-2细胞,Western Blot检测Stat3信号转导通路成员表达,MTT法检测细胞增殖状态,流式细胞技术检测细胞周期与凋亡.结果:AG490与DDP可以抑制喉癌细胞增殖,促进喉癌细胞凋亡(P=0.008),联合应用AG490与DDP可以起协同作用,喉癌细胞Stat3信号转导通路成员表达与活性明显下降.结论:JAK激酶抑制剂AG490与DDP联合应用可能为治疗喉癌提供了新的理论基础.     

AG490对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡及侵袭性的影响及机制

目的：探讨JAK2激酶（Januskinase2,JAK2）特异性抑制剂AG490（tyrphosin AG490）对人宫颈癌Hela细胞增殖,凋亡及侵袭转移能力的影响及其机制.方法：用不同浓度的JAK2激酶抑制剂AG490处理Hela细胞,MTT法检测细胞增殖状况,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,Western Blot检测信号传导与转录激活因子3（Stat3）、磷酸化Stat3（P-Stat3）、基质金属蛋白酶-2（Mmp-2）和血管内皮生长因子（Vegf）蛋白的表达.结果：AG490能明显抑制宫颈癌Hela细胞增殖,使细胞周期阻滞,促进宫颈癌Hela细胞凋亡,并可使P-Stat3,Mmp-2和Vegf的蛋白表达水平明显降低.结论：AG490通过阻断JAK2/STAT3信号通路活化,抑制Hela细胞增殖,促进其凋亡,同时下调P-Stat3,Mmp-2和Vegf表达,抑制宫颈癌Hela细胞侵袭转移能力.阻断JAKs/STATs信号转导通路可能成为治疗宫颈癌及抑制其侵袭转移的一种新的策略.     

两种酪氨酸激酶抑制剂对结肠癌细胞增殖的影响

目的:研究两种酪氨酸激酶抑制剂对体外培养的HT-29结肠癌细胞生长的影响及可能机制.方法:用MTT比色法观察不同浓度的Genistein及Tyrphostin AG1478对体外培养的结肠癌细胞生长的影响;免疫细胞化学法检测两种酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitors,TKIs)对肿瘤细胞PCNA表达的影响;Western blot技术分析Genistein及Tyrphostin AG1478对结肠癌细胞ERK-1及pERK表达的影响.结果:不同浓度的Genistein及Tyrphostin AG1478对HT-29结肠癌细胞的增殖均具有抑制作用,并具有良好的量-效关系.免疫细胞化学检测表明,Genistein及Tyrphostin AG1478明显下调HT-29细胞PCNA表达.蛋白质印迹检测发现,两种酪氨酸激酶抑制剂不抑制ERK表达,但能够抑制ERK磷酸化.结论:酪氨酸激酶抑制剂Genistein及Tyrphostin AG1478能有效抑制HT-29结肠癌细胞生长,其作用机制与抑制肿瘤细胞ERK表达及磷酸化有关.     

Src蛋白在肝癌HepG2细胞增殖凋亡中作用的初步研究

目的研究Src蛋白在人肝癌细胞株HepG2细胞增殖凋亡过程中的作用。方法应用Src蛋白酪氨酸激酶抑制剂PP2不同浓度处理HepG2细胞前后,使用免疫组化、流式细胞术、MTT法检测Src蛋白的表达以及HepG2细胞增殖和凋亡情况。结果Src蛋白在HepG2细胞中高表达,用不同浓度PP2处理HepG2细胞后,能够显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖,增加凋亡。结论Src蛋白在人肝癌细胞株HepG2细胞的增殖凋亡过程中起着重要作用。     

AG490对食管鳞癌Eca-109细胞增殖、凋亡及放疗敏感性的影响

目的研究Janus激酶抑制剂AG490对食管鳞癌Eca-109细胞增殖、凋亡及放疗敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法用不同浓度(0、25、50、100μmol/L)的AG490处理Eca-109细胞,采用MTT法检测细胞增殖,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,克隆形成实验检测细胞放疗敏感性,Western blot检测各组细胞Stat3、p-Stat3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与对照组比较,AG490各浓度组(25、50、100μmol/L)在AG490作用后第1～5天Eca-109细胞增殖减慢,呈量效-时效关系(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,AG490各浓度组(25、50、100μmol/L)在AG490作用48 h后Eca-109细胞凋亡率增加,呈量效关系(P<0.01)。与对照组比较,各剂量X射线照射后50μmol/L组细胞存活率降低,放射生物学参数SF2、D0、Dq、N值均降低(P<0.05),SERD0和SERDq值增加(P<0.05)。与对照组比较,AG49050μmol/L+4Gy组和AG490 50μmol/L组p-Stat3蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,AG490各浓度(50和100μmol/L)组Bcl-2的表达降低(P<0.05)、Bax的表达增加(P<0.05)。结论 AG490抑制Eca-109细胞增殖,增加细胞凋亡,增加放疗敏感性,其机制可能是通过阻断Stat3蛋白的活化,调控凋亡蛋白(Bcl-2和Bax)的表达。     

蒿甲醚对胃癌细胞和胰腺癌细胞的体外杀伤作用

目的 观察蒿甲醚(ART)在体外对胃癌细胞株和胰腺癌细胞株的杀伤作用以及对细胞增殖和细胞凋亡的影响.方法 选择人胃癌细胞株SGC-7901和MKN-45及胰腺癌细胞株SW-1990和BXPC-3,采用MTT法检测不同浓度ART对不同肿瘤细胞的抑制作用;应用流式细胞仪检测ART对肿瘤细胞细胞周期和细胞凋亡的影响.结果 MTT结果显示ART对各株肿瘤细胞均具有显著的杀伤作用(P<0.05),且其细胞毒作用与时间-剂量呈正相关(P<0.05);流式细胞仪检测显示,ART使各株肿瘤细胞阻滞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡.结论 ART在体外对SGC-7901、MKN-45、SW-1990、BXPC-3细胞株有明显的细胞毒作用,且具有时间-剂量效应关系;其抑制作用与阻滞细胞周期和诱导肿瘤细胞凋亡有关.     

AG490对胆囊癌细胞JAK2/STAT3信号传导通路的抑制作用研究

目的研究JAK激酶抑制剂AG490对人胆囊癌细胞株GBC-SD生长增殖的影响,探讨AG490对JAK2/STAT3信号传导通路的抑制作用及其对胆囊癌治疗的意义。方法培养GBC-SD细胞,根据研究目的设置实验组和对照组,在第一项实验中,实验组以3个浓度梯度的AG490作用于GBC-SD细胞,对照组加入等量PBS,继续培养,24 h后以MTT法测定OD值,反映各组细胞的增殖活性;在第二项实验中,实验组以100μmol/mol的AG490作用24 h,对照组平行培养,收集两组细胞进行免疫印迹法检测,观察AG490对细胞中JAK2、STAT3蛋白表达的影响。结果 AG490能有效抑制胆囊癌细胞增殖,且抑制作用呈浓度依赖性,即浓度越高,抑制作用越明显,不同浓度组细胞增殖抑制率差异有统计学意义(P0.05);AG490作用后细胞中JAK2、STAT3蛋白浓度降低,与对照组比较差异亦有统计学意义(P0.05)。结论 AG490可以抑制细胞中JAK2、STAT3蛋白的表达,通过抑制JAK2/STAT3信号传导通路发挥抑制胆囊癌细胞增殖的作用。