ELISA法测定发酵茶和植物香料真菌毒素的污染

目的探讨以ELISA法检测发酵茶、植物香料中玉米赤霉烯酮、伏马菌素、黄曲霉毒素（AFB1）、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）、T-2毒素的可行性及污染状况。方法采用竞争酶联免疫吸附法,检测发酵茶、植物香料中玉米赤霉烯酮、伏马菌素、黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素。结果玉米赤霉烯酮浓度为40.0～1 000.0μg/kg之间的变异系数为1.5%～6.5%,回收率为87.5%～111.1%,r=0.998;伏马菌素浓度为0.25～5.0mg/kg之间的变异系数为2.0%～6.5%,回收率为90.0%～107.2%,r=0.992;黄曲霉毒素浓度为1.0～20.0μg/kg之间的变异系数为2.2%～7.8%,回收率为85.0%～115.0%,r=0.997;赭曲霉毒素浓度为2.0～40.0μg/kg之间的变异系数为1.8%～7.0%,回收率为87.5%～120.0%,r=0.998;脱氧雪腐镰刀菌烯醇浓度为0.25～5.0 mg/kg之间的变异系数为1.5%～8.0%,回收率为90.0%～110.0%,r=0.996;T-2毒素含量浓度为75.0～500.0μg/kg之间的变异系数为2.8%～7.5%,回收率为86.6%～106.6%,r=0.996。结论ELISA法检测发酵茶、植物香料中玉米赤霉烯酮、伏马菌素、黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素简便快速。建议日常工作中先以ELISA法筛选,阳性样品再以液相色谱—质谱联用仪分析法、薄层法进行确证实验。     

ELISA法测定三聚氰胺效果分析

目的探讨以ELISA法检测三聚氰胺的可行性。方法采用竞争酶联免疫吸附法检测三聚氰胺及调查深圳市奶粉三聚氰胺污染状态。结果检测方法具有灵敏度高、干扰少、测定步骤简便、快速、操作安全、测定结果准确可靠,在三聚氰胺浓度为20.0～500.0(μg/kg)之间变异系数为1.0%～6.3%,回收率为96.4%～104.8%,标准曲线的R值为0.995。结论检测方法的测定结果令人满意,是目前国内外测定三聚氰胺的科学而理想的方法。建议日常工作中先用ELISA法快速筛选检测,阳性样品再用液相色谱—质谱联用仪分析法进行确证实验。     

伏马菌素测定方法应用研究及对粮食污染状况调查

目的探讨以ELISA法和液相色谱-质谱联用仪分析法检测粮食、饲料中伏马菌素的可行性以及伏马菌素污染状况调查。方法采用液相色谱-质谱联用仪分析法和竞争酶联免疫吸附法联合分析伏马菌素，并对两种方法相互确证实验。结果ELISA法和液相色谱-质谱联用仪分析法同时测定12份阴性样品和12份阳性样品，测定结果相符率达100％。对花生、玉米及其制品以及动物内脏样品共288份进行检测，发现花生、玉米及其制品均含有不同程度伏马菌素和莓菌霉素的污染，而动物内脏未能检出。结论两种方法的测定结果吻合，是目前国内外测定粮食、饲料中伏马菌素的科学而理想的方法。建议日常工作中先用ELISA法快速筛选检测，阳性样品再用液相色谱-质谱联用仪分析法确证。     

测定粮食和饲料中伏马毒素的方法应用研究

目的探讨以ELISA法检测粮食、饲料中伏马毒素的可行性。方法采用先进的竞争酶联免疫吸附法检测盒（ROMER美国）和Stat Fax303酶标读数仪（美国），联合分析伏马毒素。结果该方法与HPLC法和GC-Ms法相比，具有灵敏度高、干扰少，测定步骤简便、快速，操作安全，设备投资少，测定结果准确可靠的优点。结论该方法的测定结果令人满意，是目前国内外测定粮食、饲料中伏马毒素的科学而理想的方法。     

高效液相色谱-串联质谱法测定啤酒中4种霉菌毒素

目的探讨液相色谱-串联质谱法测定啤酒中4种霉菌毒素的可行性。方法样品采用加入乙腈提取,过Mycosep~(TM)226多功能净化柱净化后,采用HPLC/MS/MS电喷雾电离负离子(ESI~-),以多离子反应监测(MRM)模式检测,外标法定量。结果 4种霉菌毒素的线性范围为5.0μg/L~206.0μg/L,线性相关系数在0.9952~0.9998之间,检出限在0.1~0.2μg/kg之间;低中高3个水平的平均加标回收率在80.6%~91.4%之间;相对标准偏差(RSD)均6.3%。结论结果提示该方法具有操作简单、干扰少、快速、准确可靠等特点,为检测此类毒素提供了一种新的潜在的方法。研究具有潜在的应用价值。     

ELISA法测定贝毒素污染的研究

目的 探讨以ELISA检测麻痹性贝毒素(PSP)、腹泻性贝毒素(DSP)、神经性贝毒素(NSP)的可行性,并对深圳市污染状况调查.方法 采用ELISA检测PSP、DSP、NSP,对抽样的深圳市贝类样品进行检测.结果 PSP浓度为0.02～0.32μg/kg之间的标准曲线R=0.996,变异系数(CV,％)为2.4～8.3,回收率为88.7％～105.0％; DSP浓度为0.20～5.00μg/kg之间的标准曲线R=0.995,变异系数(CV,％)为1.5～8.0,回收率为89.6％～116.0％; NSP浓度为0.10～2.50μg/kg之间的标准曲线R=0.993,变异系数(CV,％)为2.2～9.5,回收率为88.7％～111.6％.结论 ELISA法检测三种贝毒均具有灵敏度高、干扰少、测定步骤简便、快速、操作安全、结果准确可靠的优点,适合作为快速筛选方法.     

酶联免疫吸附法测定粮食、饲料中赭曲霉素的应用研究

目的 探讨以ELISA法检测粮食、饲料中赭曲霉素的可行性。方法采用竞争酶联免疫吸附法和StatFax303酶标读数仪联合分析赭曲霉素。结果该方法与：HPLC法和GC-MS法相比，具有灵敏度高、干扰少，测定步骤简便、快速，操作安全，设备投资少，测定结果准确可靠的优点。结论该方法的测定结果满意，是目前国内外测定粮食、饲料中赭曲霉素的科学而理想的方法。     

哈尔滨市市售食粮中T－2毒素的ELISA检测

应用酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）检测了哈尔滨市市售面粉、玉米粉和大米中Ｔ－２毒素含量，发现面粉样品阳性率为７０％，平均含量为１１．６ｎｇ／ｇ，最高含量为３６ｎｇ／ｇ；玉米粉样品阳性率为６０％，平均含量为１１．０７ｎｇ／ｇ，最高含量为４４．８ｎｇ／ｇ；大米样品阳性率为２０％，平均含量为２．０９ｎｇ／ｇ，最高含量为１２．７０ｎｇ／ｇ。对上述结果做了扼要讨论。     

T-2毒素对软骨细胞NO合成、iNOS表达的影响

目的:探讨T-2毒素对软骨细胞一氧化氮(NO)合成、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法:取胎儿软骨细胞体外培养,培养过程于培养液中加入不同浓度的T-2毒素(1~20μg/L)连续培养5d,用Griess重氮化法测定软骨细胞培养上清液中NO含量;用Western-Blot检测软骨细胞iNOS蛋白的表达;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测软骨细胞iNOS mRNA表达。结果:T-2毒素在1~20μg/L浓度范围内,能明显增加培养上清液中NO的含量,并使iNOS蛋白表达水平明显升高(P<0.05);当T-2毒素浓度达10~20μg/L时能引起iNOS mRNA表达水平提高(P<0.05),浓度越高,刺激作用越强。结论:T-2毒素使软骨细胞iNOS表达增强并使NO合成增多;T-2毒素引起的软骨细胞损伤与合成NO增多有关。     

Effects of Sterigmatocystin,Deoxynivalenol and Aflatoxin G1on Apoptosis of Human Peripheral Blood Lymphocytes in vitro

Objective To explore the effects of Sterigmatocystin (ST), Deoxynivalenol (DON) and Aflatoxin G1 (AFG1) on apoptosis of human peripheral blood lymphocytes (HPBLs) in vitro and thus to further elucidate the putative roles of these three mycotoxins on human immunosystem. Methods The effects of ST, DON and AFG1 on apoptosis of HPBLs were studied with cell culture, flow cytometric (FCM) DNA analysis and DNA agarose gel electrophoresis. Results DNA agarose gel electrophoresis results showed the characteristic "ladder" pattern of apoptosis in HPBLs treated with ST, DON and AFG1. Flow cytometric DNA analysis revealed that typical subdiploid peaks of apoptosis in DNA histogram could be seen in all groups treated with the three mycotoxins. Significant time-effect and dose-effect relationships were found between the apoptosis rates and treatment time as well as concentrations of the three mycotoxins. Conclusion ST, DON and AFG1 can induce apoptosis of HPBLs in vitro and may have some negative effects on human immunosystem.     

T-2毒素对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用及促凋亡作用

目的：探讨T-2毒素对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用和促凋亡作用。方法：选取对数生长期的人肝癌HepG2细胞,分为对照组（未给予T-2毒素）和实验组（给予0.25、2.50、25.00、250.00和2 500.00 μg·L^-1T-2毒素）。24 h后倒置显微镜下观察细胞形态变化,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率,Hoechest 33258染色法观察HepG2细胞凋亡形态表现,检测各组HepG2细胞中caspase-3的活性。结果：T-2毒素作用HepG2细胞24 h后,倒置显微镜下观察,与对照组比较,实验组细胞数量明显减少,细胞皱缩变形。MTT法检测,与对照组比较,实验组细胞增殖抑制率升高（P<0.01）。流式细胞术检测,与对照组比较,实验组SubG₁期细胞比例明显升高,细胞凋亡率明显升高。Hoechest 33258染色法检测,实验组细胞出现染色质固缩,细胞核呈致密浓染色的凋亡形态。实验组细胞中caspase-3活性明显高于对照组（P<0.01）。结论：T-2毒素对人肝癌HepG2细胞增殖具有明显的抑制作用,并能促进细胞凋亡。     

T-2毒素对雄性小鼠精液质量的影响

目的:探讨T-2毒素对雄性小鼠精液品质的影响。方法:每天腹腔注射T-2毒素,浓度依次分别为0、5、10和15mg/kg,连续7d,然后检测精液品质的变化情况。结果:与对照组相比,不同染毒剂量组精子畸形率均显著增加,而顶体完整率均显著降低,但只有10和15mg/kg两个高染毒剂量组活精子比率显著降低。结论:T-2对雄性小鼠精液品质有明显毒性作用。     

酶联免疫吸附法和薄层色谱法联合分析黄曲霉毒素B1的研究

目的 研究酶联免疫吸附法和薄层色谱法的特点，评价联合两种方法检测黄曲霉素B1的可行性。方法 应用酶联免疫吸附法进行初步筛选试验和最终定量分析，以薄层色谱法进行确证试验。结果 黄曲霉毒素B1含量为1．0～20．00μg／kg范围内，标准曲线r值为-0．993～-0．999，CV为0．4～2．6％，回收率92．0～105．0％，当酶联免疫吸附法测定结果为10.0～45．0μg／kg范围内，应用薄层色谱法进行确证试验，符合率达100％。常见的其它霉菌毒素干扰试验表明，该方法特异性反应好，无干扰现象。结论 酶联免疫吸附法是目前国际测定黄曲霉毒素B1的先进方法，灵敏度高，干扰少，测定步骤简便、快速、操作安全。薄层色谱法中的确证试验是利用三氟醋酸和黄曲霉毒素B1的特异性反应所生产的衍生物，确证黄曲霉毒素B1。结合国际先进酶联免疫吸附法和传统方法的优点，科学地实现了快速、可靠、准确测定黄曲霉毒素B1的目的。     

高效液相色谱法测定食品中黄曲霉毒素

目的建立HPLC测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量的方法。方法采用ALLSPHERE ODSLENGTH250×4·6mm色谱柱,分析时间18min左右,流动相为乙腈/水(梯度洗脱),流速:1·2ml/min,荧光检测器:激发波长360nm,发射波长440nm。结果线性关系良好,4种黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的回收率在87·8%~102·1%之间,变异系数2·33%~3·48%,最低检出浓度B1、B2、G1、G2分别为0·20μg/kg,0·05μg/kg,0·20μg/kg,0·05μg/kg。结论应用高效液相色谱仪检测食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2,操作安全、快速、准确度高、精密度好。