细胞粘附分子在肝细胞癌发生及转移中的作用

目的 探讨细胞粘附分子在肝细胞癌发生和转移中的作用。方法 运用cDNA基因芯片和逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术检测25例肝细胞癌和8例正常肝组织标本中神经细胞粘附分子（NCAM）、细胞内粘附分子（ICAM）、血管细胞粘附分子（VCAM）的表达。结果 基因芯片检测结果提示细胞粘附分子基因在肝细胞癌中表达均显著增高（P＜0.05)，肝癌转移组与无转移组相差也较明显（P＜0.05)，RT－PCR检测结果与基因芯片结果相同。结论 基因芯片能够为肝细胞癌的相关基因分析提供特异和可靠的数据。肝细胞癌的发生和转移可能与肝脏组织中粘附分子基因表达升高有关。     

胃癌淋巴结微转移与E-钙黏附素表达的关系

目的检测E-钙黏附素(E-cadherin)在胃癌组织中的表达及探讨其与淋巴结微转移的关系.方法对30例胃癌共850枚淋巴结采用细胞角蛋白-20(Cytokerarin-20,CK-20)逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增检测微转移,采用免疫组织化学染色检测该30例胃癌组织中E-cadherin的表达情况.结果46.7%(14/30)的胃癌组织E-Cadherin表达阴性;E-Cadherin表达阴性与Lau-ren分型、淋巴结转移密切相关(P＜0.05),与分化程度及淋巴管侵犯明显相关(P＜0.001),但与性别、年龄、肿瘤位置、直径及浸润深度无关(P＞0.05).14例检测出淋巴结微转移的癌组织中10例(71.4%)E-Cadherin表达阴性,而16例未检测出淋巴结微转移的癌组织中仅有4例(25%)E-Cad-herin表达阴性,P=0.026.结论E-cadherin表达减弱或消失参与了胃癌淋巴结微转移的发生.     

腹主动脉瘤中细胞黏附分子差异表达的研究

目的研究腹主动脉瘤 (AAA)中细胞黏附分子的差异表达与AAA发病的关系。方法利用基因芯片技术筛查AAA和正常腹主动脉中差异表达的细胞黏附分子基因 ,再利用分子生物学方法在基因、蛋白质水平检测。结果AAA中有 3种细胞黏附分子存在差异表达 ,它们是VCAM 1,PECAM 1,TSP ,上调比率分别达到 5 7,3 6及 5 7 4倍。结论AAA中有细胞黏附分子的表达差异 ,差异表达基因可能在AAA的发病过程中起作用     

TFPI-2基因在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨TFPI-2基因在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:收集临床胃癌患者术后大体标本64例,采用免疫组织化学方法检测TFPI-2蛋白在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达,采用RT-PCR法检测TFPI-2 mRNA在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达。结果:TFPI-2蛋白在正常胃黏膜组织中的表达高于胃癌组织(P0.05),无淋巴结转移胃癌组织的TFPI-2蛋白表达高于有淋巴结转移的胃癌组织(P0.05)。TFPI-2 mRNA在正常胃黏膜组织中的表达明显高于胃癌组织(P0.05),无淋巴结转移胃癌组织的TFPI-2 mRNA表达高于有淋巴结转移的胃癌组织(P0.05)。结论:TPFI-2基因是胃癌发生、侵袭和转移的重要调节因子,其低表达与胃癌淋巴结转移的生物学行为密切相关。     

胃癌患者外周血中survivin、livin和XIAP基因表达及其临床意义

目的 联合检测胃癌患者外周血中肿瘤细胞凋亡抑制蛋白survivin、livin和XIAP基因的表达,探讨其在胃癌微转移中的意义.方法 采用逆转录分子信标实时荧光定量PCR方法,以survivin、livin和XIAP基因cDNA克隆重组质粒为标准品,检测50例胃癌患者外周血中survivin、livin和XIAP基因的表达,并以30例健康志愿者为阴性对照组.结果 Survivin、livin和XIAP基因mRNA分子信标实时定量方法的线性检测范围为103～1010拷贝数.胃癌患者外周血中survivin、livin和XIAP基因模板拷贝数以及阳性率与患者的性别、年龄及病理类型无关(P＞0.05),而与淋巴结转移及TNM分期有关(P＜0.05).阳性表达者复发或转移率明显高于阴性表达者,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 联合检测外周血survivin、livin和XIAP基因mRNA表达可能成为胃癌的早期诊断和评价预后的新指标.     

胃癌腹膜转移相关基因的检测

目的 筛选与胃癌腹膜转移相关的基因,为研究胃癌腹膜转移的机制提供参考.方法 建立裸鼠人胃癌细胞株SGC-7901皮下移植瘤模型,鼠间传3代后移植小瘤块到裸鼠胃壁,收集原发灶和转移灶标本.采用基因芯片技术筛选胃癌原发灶和转移灶间差异表达的基因,并用RT-PCR法检验基因芯片的结果.结果 共建立胃癌原位移植裸鼠15只,胃壁成瘤率为100％(15/15),腹膜转移发生率为40.0％(6/15).芯片杂交分析筛选出192个上调基因和139个下调基因；RT-PCR验证高表达的再生基因Ⅳ(Reg Ⅳ),结果与基因芯片检测情况相符.结论 胃癌原发灶与腹膜转移灶之间存在差异表达的基因,其中部分基因可能在胃癌的腹膜转移中起了促进作用.     

肝硬化环境下黏附分子表达对肝癌转移的影响

目的 探讨肝硬化环境对肝癌肝内、外转移的影响.方法 健康雄性BALB/c小鼠,采用CCl4诱导建立肝硬化小鼠模型并设正常对照组.分别在肝硬化组及对照组的肝脏左叶上原位种植小鼠肝癌细胞,术后1、2、3周收取标本.通过大体及病理切片观察肿瘤的生长及转移行为.检测了肝脏组织中血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、E-选择素(E-selectin)和E-钙黏附素(E-cadherin)的表达情况.结果 术后观察发现,肝硬化基础上的肝癌更容易出现肝内转移(14/19)与远处转移(4/19),与对照组相比(5/17,1/17)差异具有统计学意义(P＜0.05).同时肝硬化组黏附类分子较对照组表达明显上调(P＜0.01).钙黏附素表达则无明显差异.结论 肝硬化环境更利于肝癌发生肝内、外转移.这种转移行为可能与肝硬化组织中各种黏附因子表达增高有关.     

三氧化二砷抑制肝癌细胞RhoC基因表达对其侵袭转移行为的影响

目的 观察三氧化二砷(As2O3)抑制肝癌HepG2细胞侵袭转移的作用及对转移相关基因BhoC表达的影响.方法 分别采用AnnexinV/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡,噻唑蓝(MTT)比色法、TransweU法检测As2O3对HepG2细胞黏附、迁移、侵袭能力的影响.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot法检测AS2O3作用后HepG2细胞中RhoC基因表达的变化.结果 As2O3作用后HepG2细胞的早期凋亡细胞明显增多(P＜0.05),黏附、迁移及侵袭穿膜细胞数较对照明显减少(P＜0.01).As2O3作用4、6.8d后RhoC基因表达水平下降(P＜0.05).结论 As2O3可通过下调RhoC基因的表达及诱导细胞凋亡而抑制肝癌细胞的侵袭转移.     

Bcl-2在胃癌中的表达及其临床意义

目的 研究B细胞淋巴瘤／白血病-2基因(Bcl-2)在胃癌中的表达,以探讨其与胃癌临床生物学行为和预后的关系.方法 应用免疫组织化学SP法分别检测Bcl-2在42例胃癌患者的胃癌及切缘上皮组织中的表达.结果 Bcl-2在胃癌和胃切缘上皮组织中的阳性表达率分别为69.05％和21.43％,两者差异有统计学意义(P＜0.05);Bcl-2表达水平与胃癌患者的年龄、性别和浸润深度无关(P＞0.05),而与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 胃癌中Bcl-2表达可能是胃癌侵袭、转移、演进和预后的生物学标志之一.     

下调赖氨酸特异性去甲基酶1表达对于结肠癌LoVo细胞黏附能力的影响北大核心CSCD

目的 探讨赖氨酸特异性去甲基酶1 （Lysine specific demethylase 1,LSD1）的表达水平对结肠癌LoVo细胞黏附能力的影响及其分子机制.方法 选取人结肠癌LoVo细胞株,通过LSD1-shRNA质粒瞬时转染人结肠癌LoVo细胞株,RT-PCR和Western blot检测处理后LoVo细胞中KSD1的表达情况,黏附试验检测转染后LoVo细胞的同质性黏附和异质性黏附能力变化,RT-PCR检测处理后LoVo细胞TGF-β1、HES-1、VEGF-C、CD44v6、MMP7、β-catenin等分子的mRNA水平变化.多个样本比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验.结果 LSD1-shRNA质粒瞬时转染人结肠癌LoVo细胞株1h及2h后,细胞的同质性黏附能力均增加（F=151.52和96.47,均P＜0.05）,异质性黏附能力下降（F=87.54和81.50,均P＜0.05）;RT-PCR检测显示VEGF-C、CD44v6、MMP7和β-catenin基因表达水平下降（均P＜0.05）.结论 LSD1下调可以引起LoVo细胞黏附能力改变,过程涉及到β-catenin分子信号通路.     

cDNA微阵列和抑制消减杂交技术筛选胃癌下调功能基因组的研究

目的 筛选胃癌下调基因组，发现新的胃癌下调基因。方法 采用cDNA微阵列技术，检测5例胃癌与相对应正常胃粘膜间mRNA表达差异基因，筛选胃癌下调基因组。采用抑制消减杂交技术，建立5人份正常胃粘膜mRNA抑制消减杂交胃癌mRNA的差异表达文库，用聚合酶链反应及差异表达克隆菌转膜反向杂交判定其消减效率。随机挑选阳性克隆测序，寻找胃癌下调新基因，并经逆转录-聚合酶链反应证实。结果 筛选到60个胃癌下调基因，其中包括抑癌基因，凋亡相关基因，DNA复制、转录、翻译相关基因，细胞周期相关基因，细胞迁移相关基因等。克隆到两个胃癌下调的新基因片段。结论 得到60个胃癌下调基因，它们共同作用与胃癌的发生、发展、转移密切相关。成功建立了用于筛选胃癌下调新基因的抑制消减杂交cDNA文库，发现了两个新的胃癌下调基因片段．     

粘附分子表达在脓毒症小鼠肺损伤中的作用

目的 探讨肺微血管内皮细胞粘附分子表达在脓毒症小鼠肺损伤中的作用。方法 盲肠结扎穿孔（ＣＬＰ）制造小鼠脓毒症模型,分别在致伤后３、１２ｈ分离肺微血管内皮细胞,用逆转录－聚合酶链（ＲＴ－ＰＣＲ）方法定量检测Ｅ－选择素、细胞间粘附分子（ＩＣＡＭ）－１和血管细胞粘附分子（ＶＣＡＭ）－１的基因表达,同时测定肺组织中髓过氧化物酶（ＭＰＯ）活性的改变。结果 ＣＬＰ后３ｈ肺微血管内皮细胞Ｅ－选择素、ＩＣＡＭ－１     

VCAM－1与胃癌关系分析

目的：研究胃癌瘤体中血管细胞粘附分子（VCAM－1）的表达对胃癌的生长,转移的影响及与病理参数之间的关系。方法：对41例胃癌瘤体,瘤旁(2cm)及正常胃组织标本,8例良性胃溃疡,10例正常人标本进行了VCAM－1免疫组化染色,图像分析,分析VCAM－1的表达情况。结果：41例胃癌瘤体中有31例VCAM－1阳性表达,瘤旁组织2cm有5例阳性表达,正常组织5cm有4例阳性表达（P＜0．001）。胃良性溃疡8例标本中有2例阳性表达,正常对照10例中有2例阳性表达。胃癌组与溃疡组及正常组VCAM－1的阳性表达差异显（P＝0．0006）,溃疡组与正常组之间无显性差异（P＝0．75）。有淋巴结转移的28例中,VCAM－1阳性表达26例,淋巴结转移阴性的11例中有5例VCAM－1阳性表达（P＝0．007）。VCAM－1的表达率及表达强度与胃癌的,分级及浸润深度相关,而与肿瘤的部位,大小无关。结论：VCAM－1表达与胃癌的发生有相关性,VCAM－1可能与胃癌的转移有关。     

胃癌肝转移相关基因的克隆鉴定

目的克隆胃癌肝转移的相关基因。方法将标本分成有肝转移和无肝转移的胃癌原发灶两组,每组9例。提取组织总RNA,反转录成cDNA,将RT—PCR的扩增产物在PAGE测序胶上电泳,经EB染色分离两组差异表达的基因片段,TA克隆差异片段后进行测序,用GenBank BLAST软件进行同源性分析。将其中获得的1个与人内源性逆转录病毒基因片段做为标志物,用RT—PCR检测其在肝转移胃癌、无肝转移胃癌组织中的表达。结果有肝转移与无肝转移胃癌组织之间存在明显的基因表达差异,差异明显的10个基因片段均呈高表达。与人内源性逆转录病毒同源的基因片段在有肝转移胃癌组织中有7例表达,在无肝转移胃癌组织中有2例表达（P=0．007）。结论肝转移以胃癌癌基因突变为主,人内源性逆转录病毒基因片段在有肝转移胃癌组织中的表达高于无肝转移胃癌组织。     

An in vitro model of antibody-mediated injury to glomerular endothelial cells: Upregulation of MHC class II and adhesion molecules

Chronic active antibody-mediated rejection is a major cause of allograft failure in kidney transplantation. Microvascular inflammation and transplant glomerulopathy are defining pathologic features of chronic active antibody-mediated rejection and are associated with allograft failure. However, the mechanisms of leukocyte infiltration and glomerular endothelial cell injury remain unclear. We hypothesized MHC class II ligation on glomerular endothelial cells (GEnC) would result in upregulation of adhesion molecules and production of chemoattractants. A model of endothelial cell activation in the presence of antibodies to MHC classes I and II was used to determine the expression of adhesion molecules and chemokines. Murine GEnC were activated with IFNγ, which upregulated gene expression of β2-microglobulin (MHC class I), ICAM1, VCAM1, CCL2, CCL5, and IL-6. IFNγ stimulation of GEnC increased surface expression of MHC class I, MHC class II, ICAM1, and VCAM1. Incubation with antibodies directed at MHC class I or class II did not further enhance adhesion molecule expression. Multispectral imaging flow cytometry and confocal microscopy demonstrated MHC molecules co-localized with the adhesion molecules ICAM1 and VCAM1 on the GEnC surface. GEnC secretion of chemoattractants, CCL2 and CCL5, was increased by IFNγ stimulation. CCL2 production was further enhanced by incubation with sensitized plasma. Endothelial activation induces de novo expression of MHC class II molecules and increases surface expression of MHC class I, ICAM1 and VCAM1, which are all co-localized together. Maintaining the integrity and functionality of the glomerular endothelium is necessary to ensure survival of the allograft. IFNγ stimulation of GEnC propagates an inflammatory response with production of chemokines and co-localization of MHC and adhesion molecules on the GEnC surface, contributing to endothelial cell function as antigen presenting cells and an active player in allograft injury.     

ICAM-1和CD44s在人非小细胞肺癌的异常表达与淋巴结转移的关系

目的 研究黏附分子ICAM-1及CD44s在人非小细胞肺癌(NSCLC)及癌旁正常肺组织的mRNA和蛋白水平的表达情况，以及这种异常表达与淋巴结转移的关系。方法 运用RT-PCR和SP免疫组织化学的方法检测42例NSCLC及癌旁正常组织ICAM-1及CD44s mRNA和蛋白水平的表达。结果 NSCLC组织中ICAM-1和CD448的表达水平明显高于癌旁组织，这种高水平表达与肺癌病理分型、分化程度、临床TNM分期无关，而与淋巴结转移有关，在有淋巴结转移时，二者的表达增强更加显著。结论 肺组织在恶变过程中ICAM-1和CD448的表达均明显增强，并且与淋巴结转移有关，其在NSCLC的发生、发展、浸润、转移过程中起重要作用。     

Testikuläre Ischämie

Background

Ischemia and reperfusion (I/R) lead to cellular damage. A disturbance of testicular perfusion occurs during the therapy of cryptorchidism and in cases of testicular torsion. This results in the activation of mediator cells with an increasing synthesis of mediators of infection like TNF-α and the expression of cell adhesion molecules like ICAM (intercellular adhesion molecule) and VCAM (vascular cell adhesion molecule) at the cellular surface.

Methods

The expression of the cytokines IL-10 and TNF-α and the adhesion molecules ICAM and VCAM after defined testicular I/R injury in nine male transsexuals was evaluated with rt-PCR. Furthermore we examined lactate and the diameter of the testicular tubulus under ischemic conditions.

Results

During ischemia ICAM, IL-10, and VCAM do not show significant changes on the side of testicular ischemia and the contralateral side; the same was seen for the tubulus diameter. TNF-α and the testicular lactate values showed a significant change of the expression pattern.

Discussion

The statistical changes of TNF-α and testicular lactate are the expression of leukocyte migration, infectious reaction, and immune response. To what extent the TNF-α expression represents a severe immunological reaction remains undefined. This human study shows primary results for the immunological understanding of and cellular response to testicular ischemia.