基因转染法建立小鼠胸腺基质细胞系

利用基因转染方法使细胞获得不死性，快速建立小鼠胸腺基质细胞（ＭＴＳＣ）系。用含有多瘤病毒ｍＴ基因的重组质粒Ｚｉｐ－ｍＴ以脂质体介导法转染初代培养的ＭＴＳＣ，经过８００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８筛选，得到５个ＭＴＳＣ克隆。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析表明所得细胞克隆的染色体中整合有ｍＴ基因，说明ｍＴ基因的整合是导致细胞转化的原因。基因转染建系比常规建系所需时间大大缩短，仅需２个月。     

卵巢癌中myc基因家族扩增的初步分析

本研究采用聚合酶链反应（PCR）结合中性聚丙烯酰胺凝胶电泳和激光扫描技术，对38例卵巢癌、20例癌旁组织、4例卵巢良性上皮性肿瘤及2例正常卵巢组织进行myc基因家族检测，发现在卵巢癌组织中C－myc、N－myc、L－myc扩增率分别为47％、42％、42％。癌旁组织扩增率分别为40％、20％、40％。在淋巴结转移的10例卵巢癌标本中，C－myc与N－myc全部扩增，L－myc扩增只有2例，良性肿瘤及正常组织均未有扩增。结果还显示：L－myc和N－myc同时扩增占16％（6／38），N－myc和C－myc同时扩增占26％（10／38），而C－myc和L－myc同时扩增占16％（6／38），没有一例三种基因同时扩增。大多数扩增与临床分期、病理分化程度、淋巴结转移密切相关。     

脑膜瘤细胞和分子遗传学研究进展

脑膜瘤是中枢神经系统常见肿瘤，细胞遗传学研究已证实２２号染色体丢失为脑膜瘤克隆演化过程中最恒定的染色体异常，其它染色体丢失或重排的核型演化，可能与临床浸润过程有关。分子遗传学研究主要集中于２２号染色体长臂，推测２２ｑ１１－ｑ１２和ｑ１２．３－ｑｔｅｒ区域存在肿瘤抑制基因，其丢失或突变可能与脑膜瘤病因学相关。同时，癌基因ｃ－ｓｉｓ、ｃ－ｍｙｃ的过度表达可能参与诱发脑膜瘤。     

皮肤纤维肉瘤隆凸中环状22号染色体是17号和18号染色体序列的低水平扩增物

【英】／PedeutourF…／／CancerRes．－1995，55（11）．2400。2403人环状染色体最早是1956年由Levan提出的．这种环存在于肿瘤细胞中。结构性环状染色体常常取代正常律状染色体，且很容易分离。肿瘤中仅有3％的异常染色体组型含有这种环。随着使用细胞遗传学对实体瘤研究的增加已发现环状染色体具有某些规。律性。环状染色体是一组骨和“低度恶性或临界恶性”的软组织肿瘤的一种特性。应用荧光原位杂交（FISH）等相关技术分析发现在分化良好的脂肉瘤中，这种特征性环和大量标志物棒状体均含有常渠仔作序列，且与染色体组扩增相关。作…     

c-myc的结构和功能

c－myc是myc癌基因家族中最重要的一员，并编码产物c－myc蛋白属核蛋白类．其基因结构具有独特性，可作为转录因子在细胞周期、细胞增殖、分化、凋亡、肿瘤发生、转移等生理病理过程中发挥重要作用，近期研究还发现该基因与增生性心血管病的发生发展和肝糖酵解等代谢活动息息相关，并可能作为复制因子影响DNA复制过程，业已引起学者们的广泛注意。本文将就上述进行综述．     

应用荧光原位杂交研究Ⅰ～Ⅳ期乳腺癌中8号染色体拷贝数目异常

为验证8号染色体拷贝数目异常的频率随疾病严重程度（按临床分期的进展）而增加这一假说，作者采用其实验室建立的优化程序，对42例乳腺癌样本进行了荧光原位杂交（FISH）。材料为福尔马林固定，石蜡包理的档案标本，在不参阅任何临床信息或其他组织学及病理学结果的情况下，独立进行荧光原位杂交信号的计数。所获结果表明，肿瘤所处的临床分期越高（即血、IV期），8号染色体拷贝数目异常的频率越高，采用10％删除值，I期肿瘤8号染色体拷贝数目异常的全部频率为45．45％（5／if），F期肿瘤为50％（5／10），皿期肿瘤中8号染色体拷贝数目…     

应用差别PCR检测肿瘤组织中癌基因的扩增

差别PCR（differentialPCR，D-PCR）是一种半定量PCR技术，用以检测基因拷贝数改变的、快速敏感的非同位素技术，其特点是在PCR系统中检测靶基因的同时设立一个单拷贝参照基因，从而确定靶基因扩增或缺失的程度。目前多用于石蜡包埋、新鲜癌组织中癌基因扩增的检测。现以检测乳腺癌组织中c－erbB－2（HER－2／neu）扩增为例，具体说明D－PCR的检测程序．引物设计是根据靶基因HER－2／neu及参照基因γ-IFNG序列分别设立一对引物：HER－2／neu（5'-CCTCTGACGTCCATCATCTC－3'；3'－ATCTTCTGCTGCCGTCGCTT－5'）；…     

监测TCR CDR3漂移的免疫扫描谱型分析技术的建立与鉴定

外周血95％ T淋巴细胞的TCR由α（胚系基因中AV、AJ、AC重排）、β（胚系基因中的BV、BD、BJ、BC重排）两条多肽链组成，不同V（D）J重排后，由V基因末端、J基因前端和V-J（或V—D和D—J）连接时中间插入的核苷酸序列，分别组成了特异的TCRα和8的CDR3基因谱型的多样性。一种CDR3序列代表一个T细胞克隆，测定特定CDR3序列出现的频率可以反映特定T细胞克隆扩增的程度和功能状态。     

胶质母细胞瘤14号染色体杂合性丢失的初步研究

目的 寻找胶质母细胞瘤（glioblastoma,GBM)14号染色体上可能存在肿瘤抑制基因的杂合性丢失（loss of heterozygosity,LOH)aqfa,为发现和定位肿瘤抑制基因提供线索和依据。方法 应用聚合酶链反应方法,采用荧光标记引物和377型DNA序列自动分析仪,分析了20例GBM患者14号染色体上14个微卫星多态性标记的LOH。结果 在50％（10／20）GBM患者的14号染色体上观察到LOH,在38．2％（81／212）可提供信息位点存在LOH。14p和14q的LOH率分别为32％（6／19）、50％（10／20）。在位于14q31-32．3的D14S65位点、14q21-24.1的D14S63－D14S74位点间区域检测到了较高LOH率,分别为57．1％、46．7％－47．1％。在所测位点均未检测到微卫星不稳定（microsatellite instability,MI)。结论 染色体14q上等位基因的丢失可能在GBM分子水平发病机理中起着重要作用,14q31-32.3的D14S65位点、14q21-24.1的D14S63－D14S74位点间区域可能存在与GBM相关的肿瘤抑制基因。     

肺癌癌前病变中染色体17P的缺失和P53基因突变

肺癌癌前病变中染色体１７Ｐ的缺失和Ｐ５３基因突变［英］／ＳｏｚｚｉＧ…／／ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．－１９９２，５２（２１）．－６０７９￣６０８２肺癌中显性癌基因的激活及肿瘤抑制基因的失活等多个基因病变已得到描述。显性癌基因的激活包括腺癌中的Ｋ－ｒａｓ突变...     

FISH与传统细胞遗传学方法在产前诊断中应用的比较

1．FISH的原理 荧光原位杂交技术（FISH：fluorescence in situ hybridization）是原位杂交技术的一个分支，是一种高度灵敏、高特异性以及分辨率强的基因和染色体分析技术，它通过标记核酸探针（已知碱基顺序）与细胞内的末知待测的核酸按碱基互补配对原则进行特异性原位结合（即杂交），然后通过荧光显色，直接观察和确定细胞核中或染色体上的核酸序列的有无、相互位置和相对量关系。     

鼻咽癌遗传学研究进展

鼻咽癌中染色体、癌基因和肿瘤抑制基因的改变，与鼻咽癌的发生和演进关系密切、研究资料显示3p、9p是鼻咽癌特异性改变发生的区域，癌基因ras、myc、bcl－2，肿瘤抑制基因p16、pRb2和p53可能与鼻咽癌病因学有关。     

一种候补肿瘤抑制基因DPC4在头颈鳞状细胞癌中改变不频繁

最近，Hahn等通过定位克隆证实染色体18q21．1座位上存在一种候选肿瘤抑制基因DPC4．以前，细胞遗传学分析发现50％的头颈鳞状细胞癌（HNSCC）18q上发生LOH，该座位含有DCC．但并没有直接的迹象表明DCC是18q上的靶基因。为了证实DPC4是否为靶基因并且在HNSCC的肿瘤形成中是否起作用，作者检测了16例HNSCC细胞株和20例原发HNSCC的18q21座位上的LOH状况，并且测定了DPC4的序列。16例细胞株中有14例表现为标记物D18546的单体，D18S46通过放射杂交图谱定位于DCC着丝粒．RT－PCR检测发现所有细胞株表达出全长DPC4mR－NA…     

急性甲肝病人HAV－RNA原位杂交研究

急性甲肝病人ＨＡＶ－ＲＮＡ原位杂交研究［英］／ＴａｙｌｏｒＭ…／／ＪＨｅｐａｔｏｌ．－１９９４，２０（３）．－８０～３８７寡核苷酸探针原位杂交已被用于定位ＨＡＶ－ＲＮＡ基因序列。三个病人的肝活检标本经用甲醛固定和常砚处理后再用放射性３５Ｓ标记的反义探...     

荧光原位杂交及其在肿瘤生物学中的应用

荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）是一种应用荧光物质依靠核酸探针杂交原理在核中或染色体上显示ＤＮＡ序列位置的方法。ＦＩＳＨ具有快速、安全、经济、灵敏度高、特异性强等优点，在中期及间期细胞均可检测ＤＮＡ序列及其变化，广泛应用于细胞遗传学、产前诊断、肿瘤生物学、核组成、基因定位、基因扩增等领域。细胞内染色质含量的不平衡是引起肿瘤的根本原因，细胞遗传学上表现为染色体数目或结构异常，分子水平上表现为ＤＮＡ片段的扩增     

bcl—2／bax p53c—myc在肾盂和输尿管肿瘤中的表达及意义

越来越多研究表明肿瘤的发生发展与多个基因有关，细胞凋亡相关基因bcl—2／bax、p53和c—myc基因与多种肿瘤的产生和发展有关。许多研究表明在肾盂、输尿管肿瘤中检测这些基因的表达对肿瘤的诊断、分期和预后有重要意义，本文就此方面的研究现状作一综述。     

VEGF和C-myc表达在胆囊癌形成、发展和转移中的作用

应用免疫组化ABC法对30例胆囊癌的癌组织VEGF和C－myc的表达进行检测，以探讨VEGF和C－myc在胆囊癌中的表达和二者之间的相关性以及胆囊癌形成，发展和转移中的作用。结果发现VEGF和C－myc二者在胆囊癌组织和正常胆囊组织中的阳性表达率均有显著性差异（P＜0．05），VEGF与C－myc的表达呈非常显著的相关性（P＜0．01），二者的表达与胆囊癌的转移行为有关，而与肿瘤的分化程度无关，VEGF与C－myc基因协同作用在胆囊癌形成，发展和转移中起着重要作用。     

脑膜癌细胞和分子遗传学研究进展

脑膜瘤是中枢神经系统常见肿瘤，细胞遗传学研究已证实２２号染色体丢失为脑膜瘤克隆演化过程中最恒定的染色体异常，其它染色体丢失或重排的核型演化，可能与临床浸润过程有关。分子遗传学研究主要集中于２２号染色体长臂，推测２２ｑ１１－ｑ１２和ｑ１２．３－ｑｔｅｒ区域存在肿瘤抑制基因，其丢失或突变可能与脑膜瘤病因学相关。同时，癌基因ｃ－ｓｉｓ、ｃ－ｍｙｃ的过度表达可能参与诱发脑膜瘤。     

直肠癌肿瘤浸润性淋巴细胞中T细胞受体基因谱型特征

目的 分析直肠癌肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor—infiltrating lymphocytes，TIL)克隆的TCRβ基因谱型及CDR3区氨基酸序列，了解直肠癌TIL抗肿瘤细胞克隆的基因特征。方法 采用RT—PCR方法扩增直肠癌肿瘤组织、术前外周血和术后外周血T淋巴细胞TCTβ基因的24个不同V基因片段，经过特殊的测序凝胶分离和银染色后，确定它们的TCRβ基因表达谱型。通过对PCR产物直接测序的方法，分析克隆性增殖的特征和CDR3区氨基酸序列。结果 直肠癌肿瘤组织TIL的TCRβ基因谱型中具有克隆性表达，表明直肠癌TIL是呈寡克隆性增生的淋巴细胞；来自2例不同患者的肿瘤组织TIL中单克隆性表达的TCRβV11基因具有安全相同的DNA和氨基酸序列；其余四个寡克隆的CDR3区存在共同保守的氨基酸序列G／xGGN／xY（D）EQ，这些序列可能直接接触直肠癌肿瘤组织相关抗原。结论 直肠癌肿瘤组织TIL细胞中存在特异性识别肿瘤相关抗原肽的T淋巴细胞克隆。     

遗传性乳癌

美国每年发生遗传性乳癌约9000～18000例。近年来，随着乳癌易感基因（BRCA1）的发现，有关遗传性乳癌的研究再次得到重视。目前认为，大约5％～10％乳癌是由突变基因的常染色体显性遗传引起的，30岁以下的乳癌36％～85％是由遗传引起。一些原癌基因，如c－erbB2（Her－2／neu）、c－myc和int－2在乳癌原位癌和侵入性癌中的表达增加。遗传性乳癌常较散发性乳癌发病早、双侧多见并常为多灶性的。