正交试验法优选延胡索中延胡索乙素提取工艺

摘 要 目的：优选延胡索中延胡索乙素的最佳提取工艺。方法: 选用L9（34）正交试验设计,以提取物中延胡索乙素的含量为指标,考察乙醇浓度、乙醇用量、提取温度和提取时间对提取效果的影响。结果: 最佳提取工艺为按料液比1∶10（g·ml^-1）加入浓度为60%的乙醇溶液,以80 °C为提取温度,加热回流提取3 次,每次1 h。结论: 优选得到提取工艺稳定、合理、可行、操作简单,能耗低,较大限度地提高了延胡索的综合利用率。     

延胡索醇提工艺的优选

目的优选延胡索的醇提最佳工艺。方法以延胡索乙素含量和醇溶性浸出物为评价指标,采用正交设计法优选延胡索的提取工艺。结果延胡索的最佳提取工艺为:粗粉,加75%乙醇提取2次,第1次加9倍量醇提取1.5 h,第2次加7倍量醇提取1.0 h。结论优选出的工艺简单可行,可用于延胡索的提取。     

不同炮制方法对延胡索有效成份影响研究

延胡索为多年生草本植物,含有多种生物碱,具有活血化瘀、行气止痛的功能.对于治疗胸闷痹痛、跌打损伤、血瘀痛经有奇效[1].其生物碱主要有延胡索甲素(d-corydaline)、延胡索乙素(d1-Tetrahydropalmatine)、延胡索丙素(protopine),大多以生物碱盐结合态形式存在[2].临床上多用炮制后的延胡索,<中国药典>2005版详细介绍了延胡索净制法、醋炙法和醋煮法三种方法[3],结果证实,酒制延胡索能够增强活血化瘀的活性,醋制延胡索可以提高行血止痛的疗效[4].本文以延胡索中主要有效成份延胡索乙素为研究对象,采用高效液相色谱法(HPLC),探讨不同炮制方法对延胡索乙素的影响,旨在为优化炮制方法及制定饮片的质量标准提供参考数据.     

高效液相色谱法测定延胡索药材中延胡索乙素的含量

目的：建立延胡索药材中延胡索乙素的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法,ZORBAXSB C18色谱柱,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液（pH6．8）60：40,检测波长为281nm,流速1．0ml／min,柱温为25℃。结果：延胡索乙素在0．245～0．700μg范围内线性关系良好,r=0．9997,平均加样回收率为99．84％,RSD为0．46％（n=5）。结论：该方法快速简便,准确可靠,灵敏度高,可用于延胡索的质量控制。     

HPLC法测定延胡索中延胡索乙素的含量

目的：对延胡索中的延胡索乙素进行含量测定。方法：采用ＨＰＬＣ法,以１８－ＯＤＳ为色谱柱,甲醇－０．１％磷酸（用三乙胺调ＰＨ至６．０）（６０：４０）为流动相,检测波长为２８０ｎｍ。结果：延胡索乙素的量在０．２５７－２．０５６μｇ范围内线性良好,回收率为９９．０３％,ＲＳＤ为０．５１％,结论：该方法简便、可靠,适合延胡索的质量控制。     

高效液相色谱法测定延胡索中延胡索乙素的含量

目的:建立高效液相色谱法测定中药材延胡索中延胡索乙素的含量。方法:以AgiLent zobax ExtendC18(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,甲醇-0.1％磷酸(三乙胺调pH值至6.0)(55:45)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长:280nm。结果:延胡索乙素在115-1376ng范围内线性关系良好,平均回收率为99.2％,RSD=1.5％(n=6)。结论:该方法简便,重现性好,可作为中药材延胡索的质量控制方法。     

不同炮制方法对延胡索中延胡索乙素含量的影响

目的比较醋煮、醋烘、醋炙、酒炙等炮制方法对延胡索有效成分含量的影响,为优化延胡索炮制方法提供参考。方法采用醋煮、醋烘、醋炙、酒炙等炮制方法对延胡索生品进行炮制,通过高效液相色谱法测定延胡索乙素含量。结果延胡索乙素含量在0.10~1.35μg范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率为84.05%,RSD为1.94%(n=6);醋烘、醋炙、酒炙延胡索炮制品含量有所上升,差异有统计学意义(t=3.265~6.342,P<0.05)。结论高效液相色谱法检测延胡索乙素具有线性关系良好、精密度稳定、可重复检测的优点,醋烘、醋炙、酒炙等炮制方法能增加延胡索有效成分含量。     

延胡索与川楝子配伍对有效成分延胡索乙素含量的影响

目的 测定延胡索与川楝子配伍对有效成分延胡索乙素含量的影响,探讨中药配伍的合理性.方法 采用高效液相色谱法分别对单味延胡索及其与川楝子配伍后的两种水煎液,测定其中的有效成分延胡索乙素的含量.结果单味延胡索及其与川楝子配伍中的有效成分延胡索乙素的含量分别是0.3713mg·g-1及0.4369mg·g-1,配伍后较单味延胡索的含量高0.0656mg·g-1.结论 延胡索与川楝子配伍,能够提高延胡索乙素的含量.     

胃安宁片延胡索中延胡索乙素的HPLC含量测定

目的:建立HPLC法测定胃安宁片延胡索中延胡索乙素含量测定的方法.方法:采用RP-HPLC法测定.用Agilent XDB C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸溶液(三乙胺调PH值至6.0)(60:40)为流动相,流速为1ml/min,检测波长280nm,柱温为室温,进样量为10μ1.结果延胡索乙素保留时间约为27分钟左右,与其他峰的分离度大于1.5.延胡索乙素的线性范围为0.024-0.476μg,γ=0.9999,平均加样回收率为98.81%(n=5).结论:该方法简便快速,结果准确可靠,可用于延胡索乙素中延胡索乙素的HPLC含量测定.     

不同醋制方法对延胡索中延胡索乙素和原阿片碱含量的影响

目的:探讨延胡索不同醋制方法对其延胡索乙素、原阿片碱含量的影响。方法:HPLC法:大连依利特C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.6%冰醋酸(含0.6%三乙胺)(20:80);检测被长为280nm;流速1.0ml·min~(-1);柱温:室温。结果:延胡索乙素、原阿片碱分别在0.25～1.47μg(r=0.999 9),0.20～1.21μg(r=0.999 9)范围呈良好的线性关系,平均回收率分别为104.0%,101.2%,RSD分别为1.8%,1.5%(n=6)。不同醋制方法对延胡索中延胡索乙素和原阿片碱含量影响不一。结论:方法准确,重复性好,延胡索乙素和原阿片碱含量适用于延胡索炮制品的质量控制。临床应用宜规范采用"醋延胡索"。     

延胡索HPLC指纹图谱研究

目的建立延胡索药材HPLC指纹图谱,为全面评价延胡索质量提供参考依据。方法色谱柱为Agilent ZORBAX Eclise XDB-C18(150mm×4.6mm,5μm);柱温为25℃;流动相为甲醇-0.1mL·L~(-1)磷酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0mL·min~(-1);检测波长为280nm。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》对10批延胡索药材指纹图谱进行分析。结果确定了11个共有峰,精密度、稳定性和重复性实验中各共有峰相对保留时间的RSD值均小于2.0%,相对峰面积的RSD值均小于5.0%,建立了延胡索药材HPLC指纹图谱,通过分析得到10批延胡索药材指纹图谱的相似度均大于0.85。结论该方法简单易行,重复性较好,可作为延胡索药材的质量评价方法。     

延胡索的薄层色谱鉴别研究

目的建立一种可以同时鉴别延胡索药材多种有效成分的薄层色谱方法。方法采用两次展开薄层色谱法。结果薄层板在紫外灯（365 nm）下观察,供试品中延胡索乙素,小檗碱,巴马汀3种有效成分被检识。结论操作简便,重现性好,为鉴别延胡索药材提供了更为有效薄层色谱方法。     

延胡索中延胡索乙素双相动态提取方法研究

目的探讨延胡索有效成分的最佳双相动态提取工艺。方法以延胡索乙素含量为指标,采用L9(34)正交试验设计对提取工艺进行优化,考察酸浓度、溶剂倍数、提取时间、提取温度对延胡索乙素含量的影响。结果延胡索乙素的最佳提取工艺为加酸浓度2.0%的硫酸,10倍量溶剂,100℃提取1次,提取时间3 h。结论优选得到的工艺确实可行,便于生产质量控制。     

影响天麻中天麻素提取的因素研究

目的研究影响提取天麻中天麻素的因素,确定影响提取率的重要因素。方法采用不同配制方法的不同浓度的乙醇、自来水、蒸馏水,参照药典的方法,测定天麻中天麻素的含量。结果采用自来水100mL,提取2次（第1次2h,第2次1h）,所得的天麻素的含量为最高。结论本实验发现不同溶剂可影响天麻素提取,为含天麻药材的制剂制备提供一定的参考价值。     

延胡索纤溶酶的分离纯化及部分性质

目的从延胡索(Rhizoma corydalis)中分离纯化具有溶解纤维蛋白活性的单体蛋白单一组分,并对粗酶性质做初步研究。方法利用硫酸铵分级沉淀和阴离子交换色谱从延胡索中纯化纤溶酶。结果从延胡索中纯化出两种纤溶酶,表观相对分子质量分别为33 000和59 000。粗酶用丝氨酸蛋白酶抑制剂鉴定为丝氨酸蛋白酶,ED-TA对酶活没有抑制作用。延胡索纤溶酶粗酶体外溶纤性质主要表现为激酶活性,在4~50℃活性稳定,50~75℃酶活有所下降;最适pH值为8.0,在pH 3.0左右,仍能保留大部分酶活;能抵抗胰蛋白酶水解和胃蛋白酶的作用。结论延胡索纤溶酶性质稳定,有希望研发成为一种溶栓新药。     

反相高效液相色谱法测定元胡止痛片中延胡索乙素含量

目的建立元胡止痛片中延胡索乙素的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Dikma Diamonsil柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为0.1%磷酸溶液（用三乙胺调pH至6.0）-甲醇（40：60）,检测波长280nm,流速1.0mL/min。结果延胡索乙素对照品进样量在0.20～2.02μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999（n=8）,平均回收率为99.84%,RSD=1.43%（n=6）。结论所用方法操作简便、结果准确、重复性好,可用于控制元胡止痛片的质量。     

高效液相色谱法同时测定甲磺酸双氢麦角碱注射液中3种单碱和总碱的含量

目的：建立用高效液相色谱法（HPLC）同时测定甲磺酸双氢麦角碱注射液中3种单碱和总碱的含量方法。方法：采用HPLC法，C18色谱柱（150mm×4．6mm，5μm）；流动相：乙腈-水-三乙胺（30：70：2．0）；检测波长：280nm。结果：单碱Ⅰ在0．406-4．06μg之间线性关系良好，r=0．9998，平均回收率为98．49％，RSD为1．23％；单碱Ⅱ在0．406～4．06μg之间线性关系良好，r=0．9998，平均回收率为100．55％，RSD为3．29％；单碱Ⅲ在0.406-4．06μg之间线性关系良好，r=0．9998，平均回收率为98．73％，RSD为5．21％；总碱在1．22～12．18μg·mL^-1之间线性关系良好，r=0．9998，平均回收率为98．08％，RSD为1．26％。结论：HPLC法同时测定甲磺酸双氢麦角碱注射液中3种单碱和总碱的含量专属性强，灵敏度高，准确性好，可用于甲磺酸双氢麦角碱注射液含量测定。     

高效液相色谱法测定舒通肩痛片中延胡索乙素含量

目的建立测定舒通肩痛片中延胡索乙素含量的高效液相色谱法。方法采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%三氟乙酸水溶液(60∶40),流速1 mL/min,检测波长280 nm。结果延胡索乙素质量浓度在8.32～41.60μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为100.11%,RSD为1.03%(n=6)。结论高效液相色谱法简单、快速,可用于舒通肩痛片的质量控制。     

降糖化瘀胶囊的提取工艺研究

目的研究降糖化瘀胶囊的制备,建立降糖化瘀胶囊的提取工艺,为新药的研发做些准备工作,为临床治疗提供一种安全有效的制剂,也为实现中药现代化提供一种新思路。方法采用L9(34)正交试验法优化提取条件,以丹酚酸B的含量、干浸膏得率为工艺考察指标。结果最佳提取工艺为:原药材加水浸泡2h,加8倍水,煎煮3次,每次1小时。结论用高效液相色谱法测定丹酚酸B的含量准确可靠,为降糖化瘀胶囊的进一步制剂研究和临床应用提供了试验依据。     

正交试验法优选胀果甘草多糖的提取工艺

目的对胀果甘草多糖的超声提取工艺进行研究。方法用正交试验法筛选最佳提取工艺,并用苯酚-硫酸法来测定胀果甘草多糖含量。结果λmax=490nm,平均回收收率为101.11%,RSD =1.43%。胀果甘草多糖的最佳提取工艺为:粉末粒度为40目,超声时间60min,水量20mL。结论该方法简单,快速,为从药材或制剂中提取胀果甘草多糖提供了参考。