男性不育症患者精子DNA损伤与精子形态学主要参数的比较研究

目的 探讨并分析男性不育患者精子DNA损伤的发生率以及精子DNA损伤与精子形态相关参数之间的关系及其临床意义.方法 选取2013年1月至2015年1月就诊于本院生殖中心门诊的男性不育患者(有正常性生活,未采取避孕措施,同居一年以上未能使配偶怀孕)104例.根据精液分析结果将患者分为四组:对照组、少精子症组、弱精子症组以及梗阻性无精子症(obstructive azoospermia,OA)组.采用精子染色质扩散实验(SCD)分析精子DNA完整性和Diff-Quik染色进行精子形态学检测.结果 经统计学分析表明弱精子症组、OA组患者DFI与对照组、少精子症组相比差异有显著统计学意义(P＜0.01);除弱精子症组正常精子形态率与OA组相比差别无统计学意义外(P＞0.05),其余任何两组间正常精子形态率比较差异均有统计学意义(P＜0.05);精子DNA损伤指数(DFI)与畸形精子率成正相关的关系(r=0.622,P＜0.01,n=104),与头部畸形精子率之间存在明显的正相关(r=0.796,P＜0.01,n=104).结论 弱精子症组、OA组患者DFI明显高于少精子症组和对照组.精液常规异常患者精子正常形态率均低于对照组.精子DNA损伤可能是导致精子形态异常,尤其是精子头部异常的主要原因之一.     

不育患者精子DNA损伤和精液常规参数关系分析

目的探讨男性不育患者的精子DNA碎片率(DFI)与精液参数间相关性及精子DFI评价男性生育力方面的应用价值。方法精液标本均取自不育患者,以WHO精液分析标准行精液检测,根据结果分为精液参数正常组、弱精子症组、少精子症组、少弱精子症组。用染色质扩散实验法(SCD)检测精子DFI。结果精液参数正常组与参数异常组(包括弱精子症组、少精子症组和少弱精子症组)间的DFI有明显的差异(P0.05),不育组间DFI也存在差异(P0.01)。DFI与精子活动率、前向运动精子率存在明显的负相关性(r=-0.575,r=-0.547,P0.01),与精子浓度之间无相关性(r=-0.049,P0.05);精子DFI评价精液参数的ROC曲线下面积(AUC)达0.693,其阈值为19.5%(特异性:89.3%,敏感性:41.8%)。结论随着男性精液质量的下降,精子DFI明显升高,提示精子DNA损伤可能是引起男性不育的重要原因之一。精子DFI19.5%时,精液质量参数有进一步降低的趋势和风险。精子DFI的检测对评估男性生育能力有重要的临床意义。     

334例男性不育症患者精子DNA完整性与精液常规参数间的相关性分析

目的探讨男性不育症患者精子DNA完整性与精液常规参数的相关性,研究精子DNA完整性在评估男性生育力方面的应用价值。方法回顾性分析2015年1月至2016年12月于西北妇女儿童医院生殖中心男性不育门诊就诊的334例患者的临床资料,按照精子DNA碎片指数(DFI)不同进行分组,Ⅰ组(192例):DFI≤15%;Ⅱ组(98例):15%DFI30%;Ⅲ组(44例):DFI≥30%。比较各组患者的精液常规参数(精子浓度、前向运动精子率、正常形态率、年龄和禁欲时间),分析DFI与精液常规参数的相关性。结果不同DFI组间比较,年龄、精子浓度及正常形态率无统计学差异(P0.05),但禁欲时间和前向运动精子率组间差异有统计学意义(P0.05)。DFI与前向运动精子率和正常形态率呈显著负相关(r分别为-0.457、-0.147,P0.05),与禁欲时间呈显著正相关(r=0.222,P0.05),与年龄及精子浓度无明显相关性(P0.05)。结论精子DNA完整性与精液常规参数(前向运动精子率、正常精子形态率、禁欲时间)具有一定的相关性,精子DNA完整性检测可作为精液常规分析的补充。     

无精子症患者精浆pH值、性激素与生精细胞检测及其意义

目的:探讨对无精子症患者进行精浆pH值、性激素和生精细胞检测及其意义.方法:对60例无精子症患者根据精液pH值分为高pH值组38例(pH值7.2～8.0),低pH值组22例(pH值≤7.0);另以20例正常男性作为正常对照组.采用电化学发光免疫法(ECLI)测定精浆性激素水平,用瑞-姬染色法进行精液细胞学检查.结果:高pH值组33例检出生精细胞,精浆中睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)与正常组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);低pH值组22例均未检出生精细胞,精浆中T、FSH与正常组相比差异均无统计学意义.结论:临床只有对无精症患者精液的pH值、性激素水平与生精细胞学进行综合分析,才能正确诊断发生无精子症的原因,以指导临床治疗.     

男性不育患者精子形态与精子浓度和活力关系的研究

目的 研究男性不育患者精子形态与精子浓度和活力的关系,探讨评估男性生育能力的最佳指标.方法 90例男性不育患者,年龄25～40岁,身体健康,无特殊病史,精子浓度均在正常范围.利用Prader睾丸计评估患者睾丸容积,根据世界卫生组织标准(第5版)进行精液常规分析.结果 90例男性不育患者按照精子形态分析结果分为3组,每组30人.组1为正常形态精子＜4％、组2为正常形态精子≥4％且＜10％、组3为正常形态精子≥10％.三组年龄分别为(31.27±5.32)岁、(32.60±5.36)岁和(32.23±4.53)岁,差异不具统计学意义,(P＞0.05);左侧睾丸容积分别为(14.27±3.65)ml,(16.90±3.57)ml和(14.57±3.57)ml,组1与组2比较P＞0.01,组1与组3比较P＞0.05和组2与组3比较P＜0.05;右侧睾丸容积分别为(14.60±3.70)ml,(16.60±3.35)ml和(14.67±3.54)ml,P=0.05;精子浓度分别为(55.80±46.34)×106/ml,(76.21±58.40)×106/ml和(101.73±46.24)×106/ml,组1与组2比较P＞0.05,组1与组3比较P＜ 0.01,组2与组3比较P＞0.05;前向运动分别为(27.51±15.23)％,(42.97±16.93)％和(40.35±18.53)％,组1与组2比较P＜0.01,组1与组3比较P＜0.01,组2与组3比较P＞0.05.结论 在精液常规分析3个主要参数(浓度,活力和形态),精子形态学分析结果对评估男性生育能力最重要,正常形态精子百分率高,其精子浓度也高、前向运动精子百分比也高,生育力可能也越强.     

精液、睾丸针吸细胞学与睾丸活检的相关性

对两组病例，第１组６１例无精子症病人，进行精液细胞学与睾丸针吸细胞学检查；第２组１５例正常生育男性及４例无精子症病人，进行睾丸活检与精液细胞学检查。结果显示：第１组５３例（占８７％，５３／６１）精液中检出生精细胞，检出病例中精液细胞学与睾丸针吸细胞学所反映的生精细胞发育水平总符合率为９１％，经Ｘ２检验二者显著相关（Ｐ＜０．００５）；８例（占１３％）精液细胞学检查未见生精细胞的病例，考虑梗阴性无精子症，其中７例经精液生化指标证实，５例睾丸针吸细胞检查见精子。第２组两种方法所反映的生精细胞发育水平完全一致。说明精液细胞学检查既能很好反映睾丸生精状况，又能反映精道梗阴情况，是一种比较理想的判断睾丸生精功能及精道梗阻的无创伤性检查方法。     

不育男性抗苗勒管激素与生殖激素及精液质量参数关系的研究

目的探讨男性不育患者精浆和血清抗苗勒管激素(AMH)与血清生殖激素及精液参数之间关系。方法选取2018年9~12月于我院生殖中心就诊的男性不育患者107例,按照《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册(第五版)》操作规范检测精液体积、精子浓度、前向运动精子(PR)百分比、精子顶体酶、精子DNA完整性、正常形态精子率,根据精液参数分为4组:少精子症组(n=15)、弱精子症组(n=26)、少弱精子组(n=31)、正常精子组(n=35),比较各组患者精浆和血清AMH及血清FSH、LH、催乳素(PRL)、T、E 2之间的差异,并对精浆和血清AMH与生殖激素及精液参数的相关性进行统计分析。结果弱精子症组血清AMH水平高于其他3组,但各组间差异无统计学意义(P>0.05);正常精子组精浆AMH水平[中位数(四分位距)]为1.28(7.71)ng/ml,显著高于少精子症组[0.11(1.26)ng/ml]和少弱精子组[0.16(2.15)ng/ml](P<0.05)。相关性分析显示,血清AMH与生殖激素及精液参数不存在相关(P>0.05);精浆AMH与血清FSH、LH呈负相关(P<0.05),与血清T呈正相关(P<0.05);精浆AMH与精子总数、精子浓度、PR%呈正相关(P<0.05),与其他精液参数不相关(P>0.05)。结论不育男性精浆AMH与血清生殖激素及精子浓度、活力具有一定的相关性,一定程度上反映睾丸生精功能,对男性不育的诊断和治疗有一定的参考作用。     

精子形态率、顶体酶活性对IVF受精失败的影响

目的 探讨精液中精子形态率及顶体酶活性与IVF受精失败的关系.方法 回顾性分析2014年在本中心行IVF新鲜周期的982个周期患者,根据精子形态分析结果,将正常精子形态百分率(x)分为5组,包括:1组:x≥4％,2组:x＜1％,3组:1％≤x＜2％,4组:2％≤x＜3％,5组:3％≤x＜4％.根据顶体酶活性分为正常组及异常组.结果 IVF受精失败组(受精率＜30％)与正常组比较,正常精子形态率及顶体酶活性差异有统计学意义(P＜0.01).精子形态率比较,2、3、4组与1组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).5组与1组比较,差异无明显统计学意义(P＞0.05).顶体酶活性正常组与异常组比较,受精失败率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 精子形态率及顶体酶活性异常可导致IVF受精失败率升高.     

精液细胞学与睾丸活检及针吸细胞学的相关性研究

为了寻找无创伤性判断睾丸生精功能及精道梗阻的检查方法，对６５例无精症患者随机分为两组：第一组６１例无精子症患者，进行精液细胞学与睾丸针吸细胞学检查；第二组１５例正常生育男性及４例无精子症患者，进行睾丸活检与精液细胞学检查。结果：第一组５３例（占８７％），精液中检出生精细胞，检出病例二者的生精细胞发育水平总符合率９１％，经χ２检验两者呈显著相关（Ｐ＜０．００５）；８例（占１３％）精液细胞学检查未见生精细胞的病例，考虑梗阻性无精子症，其中７例经精液生化指标证实，５例睾丸针吸细胞检查见精子。第二组两种方法所反映的生精细胞发育水平完全一致。说明精液细胞学检查既能很好反映睾丸生精状况，又能反映精道梗阻情况，是一种比较理想的判断睾丸生精功能及精道梗阻的无创伤性检查方法。     

男性不育症患者血清抗精子抗体与精子质量的关系

目的 观察抗精子抗体(AsAb)对男性不育症患者精子质量的影响及临床意义.方法 男性不育患者553例检测血清AsAb和精液后分为两组,一组为AsAb阳性组(140例),另一组为AsAb阴性组(413例).统计两组患者精液精子密度、活率及活力的指标,两组间进行比较,观察它们之间的差异.同时取正常生育男性60例作为对照组,男性不育AsAb阳性组与正常生育组进行比较,观察它们之间的差异.结果 男性不育症553例血清AsAb检测有3种结果:抗体阴性413例(占74.7％)、精子凝集抗体(TAT)阳性122例(占22.1％)、精子凝集抗体+精子制动抗体(TAT+SIT)阳性1 8例(占3.2％);无单独精子制动抗体SIT检出.男性不育AsAb阳性组与阴性组、正常生育组精子质量经统计学比较,精子密度、活率、活力差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 抗精子抗体检测在免疫性不育诊断和治疗中具有临床意义和参考价值.     

不育症精液生精细胞凋亡率检测

目的了解精液中生精细胞的状况和生精细胞凋亡率与不育症的关系,并作为评估睾丸功能的指标。方法293例精液标本用瑞-姬染色,油镜下进行生精细胞形态学及凋亡率检出与分析。并采用DNA缺口原位末端标记技术(TUNEL)染色进行对照,确认瑞-姬染色对生精细胞凋亡鉴别的可行性。结果在293例精液中,有生精细胞者273例占93.1%;无生精细胞者20例占6.9%。生精细胞凋亡率随精子数量减少而增加,以无精子症者最高,比生育组高5.8倍(P<0.001)。显示瑞-姬染色的可行性与优越性。结论睾丸生精障碍与生精细胞过度凋亡密切相关,可在精液中检出脱落生精细胞,根据精液生精细胞凋亡率可作为评估睾丸功能的指标之一。     

不育男性精子形态与体外受精妊娠结局的相关性研究

目的 探讨不育男性精子形态与体外受精妊娠结局的关系.方法 按照WHO《人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》要求对573例接受辅助生殖技术治疗的男性不育患者的精子形态进行分析,根据患者正常精子形态百分比分为2组(＜1 5％:≥1 5％),分别采用体外受精(IVF)或卵泡浆内单精子注射(ICSI)的受精方式,观察精子形态对IVF及ICSI的受精率、卵裂率、优质胚胎率、妊娠率和流产率等的影响.结果采用IVF(327例)受精方式下,两形态组精子的受精率、卵裂率、优质胚胎率和妊娠率差异均有统计学意义(P＜0.05),但流产率差异无统计学意义(P＞0.05);而采用ICSI(246例)受精方式下,两形态组精子的上述指标比较差异均无统计学意义(P＞ 0.05).结论不育男性精子形态异常影响IVF治疗结局,但对ICSI治疗结局无影响,对于精子形态异常的患者应采用ICSI的受精方式.     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性与男性不育的相关性及机制研究

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T基因多态性与男性不育人群精液质量指标的相关性及可能机制。方法回顾性分析我院2016年1月至2017年3月就诊的59名男性不育症患者的临床资料,根据MTHFR基因型C677T分型分为CC、CT和TT基因型3组,比较各组精子质量参数,包括各组重度少、弱精子症、严重少弱精子症和正常精子者的比例,精子存活率、DNA完整性和顶体完整性,同时分析各组精液活性氧(ROS)水平。结果 CT基因型组正常精子者比例显著低于CC基因型组(P0.05);TT基因型组重度少、弱精子症、严重少弱精子症比例显著高于CC基因型组,严重少弱精子症比例亦显著高于CT型组,正常精子比例显著低于CC型和CT型组(P均0.05)。CT基因型组精子存活率显著低于CC基因型组,TT基因型组精子存活率显著低于CC、CT基因型组(P均0.05)。TT基因型组较CC、CT基因型组精子DNA完整性相关指标均有显著升高(P0.05);TT基因型组精子顶体完整性则显著低于CC、CT基因型组(P0.05)。CT基因型组ROS水平显著高于CC基因型组(P0.05),TT基因型组ROS水平显著高于CC、CT基因型组(P0.05)。结论 MTHFR基因C677T基因多态性与男性不育人群的精子质量指标相关,可能与ROS水平增高有关。     

miR-34b在男性不育患者精浆中的表达及其临床意义

目的研究精浆游离miR-34b在体外不同条件下的稳定性及其与男性不育症患者精液参数的关系。方法选取男性不育症患者80例和同期因女方因素不孕前来检查的生育力评估正常的健康男性20例为正常对照组,将8例正常的精液标本分别在室温和-80℃下放置,以不同时间点检测精浆miR-34b的稳定性。采用实时荧光定量PCR检测精浆游离miR-34b的相对含量,精子浓度及精子活力用计算机辅助精子分析系统,精子存活率采用低盐膨胀实验检测,正常精子形态百分率采用Diff-Quick染色法。分析男性不育症组和正常对照组精液参数及miR-34b表达量的差异,对精浆游离rniR-34b在男性不育组精浆中的诊断价值进行ROC曲线分析,并采用Pearson直线相关分析miR-34b与男性不育组精液各参数的相关性。结果精浆游离miR-34b在室温和低温下不同时间点表达量无明显变化(F=0.13,P=0.97;F=0.35,P=0.84)。与正常组比较发现,男性不育组精浆游离miR-34b表达下调(P0.01)。两组的精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率(PR)和正常形态精子百分率均有差异(P0.01)。ROC曲线显示miR-34b能够较好的区分不育组与健康对照组,曲线下面积分比(AUC)为0.85(0.79-0.95,95%)。Pearson直线相关分析发现男性不育患者精浆miR-34b表达量与精子密度(r=0.28,P0.05)、精子活率(r=0.56,P0.01)、前向运动精子百分率(r=0.41,P0.01)正相关,与精子形态无相关性(r=O.15,P0.05)。结论精浆miR-34b在室温下稳定,并能在-80℃条件下长期保存,在男性不育患者精浆中表达下调,并与精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率呈正相关,与精子形态无相关性。     

精浆和血清生殖激素与精液质量的关系

目的为了评估精液质量不同的男性精浆和血清生殖激素的浓度与精子浓度及活动力的关系,探索精浆与血清生殖激素的关系。方法对301名男性进行精液检查,按照精液的质量参数将受试对象分成4组:精液正常组(n=176),弱精子症组(n=66),少精子症组(n=40)和非梗阻性无精子症组(n=19)。采用电化学发光免疫法测定各组受试对象血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、泌乳素(PRL)、孕酮(P)、睾酮(T)和雌二醇(E2)六项生殖激素和精浆PRL、T、P和E2四项生殖激素的浓度,比较组间差异并进行相关性分析。结果精液正常组和弱精子症组血清FSH和E2的浓度显著低于少精子症组和非梗阻性无精子症组(P0.05),精液正常组血清LH和P的浓度显著低于弱精子症、少精子症和非梗阻性无精子症的人群(P0.05);而精液正常、弱精子症和少精子症三组精浆PRL的浓度则高于非梗阻性无精子症组(P0.05)。除了非梗阻性无精子症组,受试者血清FSH的浓度与其精子浓度呈负相关(r分别为-0.350、-0.273和-0.448,P0.05)。精液正常组精浆PRL的浓度和精子的浓度之间呈正相关(r=0.269,P0.05);在少精子症组中,亦有相同趋势的相关性(r=0.432,P0.05)。结论精浆PRL及血清FSH的浓度能够反映精子浓度或活动力,在男性不育的病因分析中具有一定的指导价值。     

男性不育症患者中常见病原体感染对精液参数的影响

目的分析存在沙眼衣原体(CT)、解脲脲原体(UU)和细菌感染的男性不育症患者的精液参数,探讨相关病原体感染与男性不育的关系,为临床诊治提供一定依据。方法收集2013年7月至2015年6月于我院生殖健康科门诊就诊,存在相关病原体感染的男性不育症患者456例为病例组,包括CT感染者146例,UU感染者165例,细菌感染者94例,混合感染者51例;选择同期来我院体检、有正常生育史的男性176例为对照组。全部研究对象均通过手淫法采集精液,行精液常规检测和CT核酸检测、UU及细菌培养。结果合并CT、UU或细菌感染的男性不育症患者,其精液体积、精子浓度与正常生育男性精液比较,无显著性差异(P均0.05);前向运动精子百分率、非前向运动精子百分率、精子总活力、正常形态精子百分率则显著低于正常生育男性(P均0.05)。结论 CT、UU或细菌感染,会导致精子活力下降、畸形率上升,继而引起男性不育。     

解脲支原体、沙眼衣原体与精液白细胞及精子形态的关系

目的 探讨解脲支原体、沙眼衣原体、精液白细胞与精子形态的关系.方法 对1023例男性不育患者精液样本进行检测,解脲支原体采用培养法,沙眼衣原体采用生化酶法进行检测,白细胞采用联苯胺染色方法进行检测,精子形态检测采用计算机辅助系统下人工修正的方法进行分析.结果 UU阳性率为27.57%,CT阳性率为30.11%.UU阳性组、CT阳性组及UU CT阳性组正常形态精子百分率均显著低于对照组(P＜0.01),亦均显著低于阴性组(P＜0.05,P＜0.01).UU阳性组、CT阳性组及UU CT阳性组白细胞异常率均显著高于对照组(P＜0.001),亦均显著高于阴性组(P＜0.001).白细胞异常组正常形态精子百分率显著低于对照组和白细胞正常组(P＜0.001).结论 UU、CT感染、白细胞、精子形态关系密切,UU、CT感染可能直接影响精子形态,亦可能通过激发白细胞异常,通过白细胞机制影响精子形态.     

畸形精子症患者中氧化应激与精子DNA损伤的关系探讨

目的:探讨畸形精子症患者中氧化应激相关指标与精子DNA损伤变化的相关性,以期为男性不育诊治提供理论依据。方法:选取2019年1月至2019年8月在河北医科大学第四医院生殖医学科诊治的101例男性不育症患者作为研究对象,按精子形态将患者精液标本分为两组,A组为精子正常形态≥4,B组为精子正常形态<4,即畸形精子症组,按世...     

供精者捐精的最佳时间研究

目的 了解禁欲时间对供精志愿者精液参数、精了形态及冷冻精液合格率的影响,为供精志愿者捐精最佳时间提供依据.方法 6414份精液样奉均来自2006年9月-2008年6月浙江省计划生育科学技术研究所人类精子库的1135例供精志愿者,年龄22至32周岁.对所有6414份精液标奉进行精液常规分析:其中的483例供精志愿者的精液标本进行精子形态学分析;5425份精液标木进行冷冻及冻后精液常规分析.结果 按禁欲时间分为3d、4d、5d及6～7d四组,各组之间精液量、精子密度及前向运动精子百分率有显著性差异(P＜0.05),精液量、精子密度随禁欲时间的延长而增加,前向运动精子白分率随禁欲时间的延长而下降,各组之间的精液pH值无显著性差异(P＞0.05);四组之间精子正常率、头部异常率、预及中段异常率、尾部异常率、胞质小滴发生率、畸形精子指数(TZI)及精子畸形指数(SDI)均无显著性差异(P＞0.05);各组之间前向运动精子冷冻复苏率无显著性差异(P＞0.05),但禁欲3d、4d、5d三组冷冻精液合格率均高于禁欲6～7d组,有显著性差异(P＜0.05);结论禁欲3～7d,精液量、精子密度随禁欲时间的延长而增加,前向运动精子百分率随禁欲时间的延长而下降;禁欲时间对精子形态参数、前向运动精子冷冻复苏率无影响;禁欲3～5d的冷冻精液合格率明显高于禁欲6～7d,供精者捐精的最佳禁欲时间为3～5d.     

DAZL基因单核苷酸多态性与弱畸精子症的相关性研究

目的:探讨DAZL基因(deleted in azoospermia like)单核苷酸多态性(SNP)与弱精子症伴畸形精子症男性不育的关系。方法:收集弱畸精子症不育患者(病例组,n=173)和精液正常男性(对照组,n=175)精液样本,进行精液常规及精子形态学分析并提取精子基因组DNA,应用Sequenom MassARRAY SNP分型技术对DAZL基因A260G和A386G多态性位点进行基因分型,比较病例组与对照组基因型的分布差异。结果:在病例组与对照组中,DAZL基因A260G、A386G这两个位点均表现为野生基因型,无突变基因型。结论:DAZL基因A260G和A386G两个多态性位点与汉族男性精子活力低下及精子形态异常所致不育可能不存在相关,不足以视为男性不育的易感基因。