转化生长因子-β在结肠癌肝转移中的抑制作用

由于目前转化生长因子-β(TGF-β)在结肠癌肝转移中的作用还没有明确的结论,Are C、Si mms N、Rajupt A等拟通过在原位结肠癌小鼠模型中分析两种人类结肠癌细胞株的迁徙能力来确定TGF-β在这种转移中的作用:FET-α细胞,有完整的TGF-β应答体系;CBS细胞,因Ⅱ型受体无活性而导致TGF-β应答缺失。结果显示,接种FET-α细胞的动物未出现肝转移,     

β1整合素表达下调对结肠癌肝转移的抑制作用

目的 探讨β1整合素表达下调对人结肠癌细胞(HT-29)肝转移的抑制作用.方法 采用脂质体将β1整合素反义寡核苷酸(ASODN)转染到HT-29细胞内,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测β1整合素的表达.Transwell侵袭室方法检测HT-29体外侵袭转移能力.裸鼠开腹于脾脏被膜下注射转染的HT-29建立肝转移模型,30 d后处死裸鼠,计算肝转移癌的数量与大小,免疫组织化学(SP法)观察转移癌中β1整合素的表达.结果 与对照组比较,实验组β1整合素mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);Transwell体外侵袭实验实验组迁移的细胞数明显减少(P<0.05);体内裸鼠肝转移实验组转移癌数量(4.00±0.93)个/只、平均体积(10.10±6.50)mm3/只、平均重量(0.0440±0.0008)g/只、免疫组织化学肝转移癌中β1整合素表达阳性细胞百分率(28.60±3.79)%均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 β1整合素表达下调对结肠癌肝转移具有抑制作用.     

结肠癌肝转移治疗方式的选择

正结肠癌是常见的肿瘤,易发生转移,而肝脏是最易受累的器官,约50%~60%的结肠癌病人出现肝转移,其中20%~34%结肠癌在诊断时即合并肝转移[1]。结肠癌出现肝转移即代表处于Ⅳ期,其5年生存率仅为6%,那些转移局限于肝脏且经手术切除的患者,其5年生存率可达25%~40%[2]。因此,第七版AJCC新的结直肠癌TNM分期中,Ⅳ期根据一个或一个以上器官部位转移的不同分为Ⅳ     

阿司匹林预防小鼠结肠癌肝转移的作用及其机制

目的 探讨阿司匹林对结肠癌肝转移模型小鼠结肠癌肝转移的预防作用及其可能作用机制.方法 将20只BALB/c小鼠采用随机数字表法分成对照组和实验组,每组10只.对照组给予生理盐水灌胃0.2 mL/d,实验组给予阿司匹林灌胃30 μg/(g·d).两组小鼠灌胃60 d后使用结肠癌C26细胞采用脾脏种植且切除脾脏的方法建立小鼠结肠癌肝转移模型.模型建立成功后,实验组和对照组小鼠分别予以阿司匹林和生理盐水灌胃直到处死小鼠.建模后观察小鼠肝转移及生存情况.将结肠癌细胞系C26分为两组,对照组不作处理,实验组用10 mmoL/L阿司匹林处理24 h,分别对两组细胞进行划痕实验和Transwell实验,观察阿司匹林对C26细胞侵袭转移的影响;另外通过RT-PCR和Western blot检测两组细胞上皮间质转化(EMT)相关基因的表达.组间比较采用Student-t检验方法.Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存分析采用Log-rank检验.结果 对照组和实验组小鼠肝内转移瘤数目分别为(4.8±1.9)个和(2.6±1.6)个,肝脏荷瘤质量分别为(504±107) mg和(362±67) mg,两组比较,差异均有统计学意义(t=2.840,3.584,P＜0.05).实验组小鼠的1个月生存率为80％,与对照组的40％比较明显提高,差异有统计学意义(x2=4.418,P＜0.05).病理检查结果显示:实验组小鼠肝脏肿瘤细胞的数量和残存肿瘤细胞的异型性与对照组比较均减少.划痕实验结果显示:划痕24 h后,对照组C26细胞发生了明显的迁移,而与对照组比较,实验组未见细胞发生移动.Transwell法检测结果显示:对照组和实验组C26细胞穿膜细胞数分别为(253 ±21)个和(148±13)个,两组比较,差异有统计学意义(t=5.101,P＜0.05).RT-PCR法检测结果显示:对照组和实验组C26细胞中EMT相关基因E-cadherin mRNA相对表达量分别为0.002±0.001和0.005±0.001;波形蛋白分别为1.005±0.286和0.270±0.168,两组比较,差异均有统计学意义(t=-4.606,4.942,P＜0.05).Western blot法检测结果显示:对照组和实验组小鼠肝脏组织C26细胞中EMT相关基因E-cadherin蛋白相对表达量分别为0.473±0.179和1.585 ±0.410;波形蛋白分别为0.787±0.118和0.280 ±0.133,两组比较,差异均有统计学意义(t=-5.542,6.355,P＜0.05).结论 阿司匹林干预结肠癌肝转移模型小鼠,可抑制结肠癌细胞在肝内的种植转移,提高小鼠生存率.其可能作用机制是阿司匹林上调E-cadherin的表达水平,下调波形蛋白的表达水平,抑制了结肠癌细胞EMT的发生,从而减弱了肿瘤细胞的侵袭和转移.     

结直肠癌肝转移与肿瘤局部免疫微环境的关系

目的探讨Ⅲ、Ⅳ期结直肠癌有肝转移与无肝转移患者肠道原发肿瘤局部免疫微环境的差异。方法收集2000年1月至2005年12月中山大学附属第一医院收治的167例行首次肠道肿瘤切除的Ⅲ-Ⅳ期结直肠癌患者标本,根据患者是否出现肝转移分为肝转移组和无肝转移组。通过免疫组织化学染色分析肿瘤组织中T淋巴细胞（CD3、CD4、CD8、CD45RO、IL-17和FOXP3）、B淋巴细胞（CD20）、NK细胞（CD57）、肿瘤相关巨噬细胞（CD68）、抗原提呈细胞（S100）、中性粒细胞（CD15）、肥大细胞（tryptase）、协同刺激分子（CD80和CD86）、T淋巴细胞效应分子（GZMB、FAS和FASL）以及MHC-Ⅱ类分子（HLADR）共计18个免疫分子的表达情况．并定量分析两组患者局部免疫指标表达的差异。结果肝转移组（17例）与无肝转移组（150例）患者的临床和病理资料比较,差异无统计学意义（均P〉0．05）。在分析的18个免疫指标中,与T淋巴细胞相关的CD8、CD45RO、IL-17、FAS及肥大细胞相关的tryptase在肝转移组中表达明显减少（P〈0．05）;其余免疫指标两组比较,差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论肠道原发肿瘤局部微环境中的T淋巴细胞及肥大细胞免疫减弱可能为Ⅲ、Ⅳ期结直肠癌肝转移提供了条件。     

两种异位种植结肠癌肝转移动物模型的比较

目的建立并对比两种异位种植结肠癌肝转移小鼠模型。方法以1×106个/mL小鼠结肠癌细胞株(CT26)0.2mL对BALB/c小鼠分别行肝门静脉注射法,脾脏种植切除脾脏法构建结肠癌异位种植肝转移动物模型。术后待小鼠自然死亡,比较两种动物模型的肝转移率和成瘤效果、肺转移率以及小鼠生存期的差异。结果肝门静脉注射法与脾脏种植切除脾脏法相比,前者在肝转移率、肝脏成瘤效果和肺转移率方面高于后者,后者在小鼠生存时间和操作难易程度方面优于前者。结论本研究建立并对比了两种具有高转移率的结肠癌肝转移小鼠模型,肝门静脉法在肝转移率和肝脏成瘤效果方面更具优势,适合对肝转移率和取材要求较高的实验研究;而脾脏种植切除脾脏法则更适合验证周期较长的药物实验。     

结肠癌肝转移靶向治疗的临床观察

目的观察贝伐单抗和西妥昔单抗联合化疗治疗不可切除晚期结肠癌肝转移患者的疗效及安全性。方法收集2011年7月至2016年5月期间安徽省立医院经病理及影像学确诊的23例结肠癌肝转移患者资料,经评估均为不可切除。均经贝伐单抗或西妥昔单抗联合化疗,总结评估不同靶向治疗联合化疗的疗效,并对比不同部位结肠癌的疗效,回顾性分析各临床因素与预后关系。结果 23例中,5例进展,13例死亡。右半结肠10例,左半结肠13例。中位PFS(progression free survival,PFS)为7.0个月,(95%CI:4.28-9.72),中位OS(overall survival,OS)为22个月(95%CI:18.24-25.76)。单因素分析显示左半结肠较右半结肠相比PFS显著延长,差异具有统计学意义(P=0.045)。分层分析显示KRAS野生型患者中,左半结肠较右半结肠PFS显著延长,差异具有统计学意义(P=0.025)。结论对于晚期不可切除结肠癌肝转移患者,两种靶向治疗联合化疗疗效无明显差异,均安全有效,总体上左半结肠预后优于右半结肠。     

表皮生长因子受体和a-连接蛋白在结肠癌中的表达

目的 比较表皮生长因子受体(EGFR)和α-连接蛋白(α-cat)在正常结肠及结肠癌中的表达及其与结肠癌生物学行为的关系.方法 用SP免疫组织化学方法检测20例正常结肠和68例结肠癌组织中EGFR和α-cat的表达.结果 正常结肠EGFR表达阴性,结肠癌组织较正常结肠组织中表达增强(69.1%)(P<0.01);正常结肠中α-cat阳性表达100%,结肠癌组织表达25%,明显降低(P<0.01).EGFR在癌组织中的表达越强,结肠癌的淋巴转移及远处转移率越高(P<0.05),α-cat在癌组织中的表达降低与结肠癌的淋巴转移及远处转移显著相关(P<0.05).结论 α-cat在结肠癌组织表达降低及EGFR在结肠癌组织中表达增强与结肠癌分化、Dukes分期、淋巴转移及远处转移的关系密切,联合检测二者在结肠癌组织中的含量可以帮助评价结肠癌的恶性程度.     

结肠癌肝转移的手术和局部治疗:如何改善预后

约 2 0 %的Ⅱ期结直肠癌患者和 5 0 %的Ⅲ期患者会发生肝转移 ,手术切除是延长患者生存期甚至治愈这些患者的唯一方法。不手术的单一肝转移患者平均生存期 1 9个月 ,5年生存率为 0 ;手术切除的患者平均生存期为 36个月 ,5年生存率为 2 5 %。然而 ,虽然现今手术和麻醉方法均在不断改进 ,已使肝病灶的扩大切除成为可能 ,但也仅 1 0 %～ 2 0 %的患者适宜手术。患者的术前评估方面 :1 .决定对手术的耐受力 ;2 .排除存在肝外不可切除病灶的情况 ;3.对转移灶行解剖定位 :4 .确定术后是否能留有足够的肝实质。手术适应证 :肝转移灶少于 4个 ,小于 5…     

前药热化疗对裸鼠结肠癌肝转移的作用

目的 观察胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)系统热化疗对裸鼠结肠癌肝转移的作用.方法 45只裸鼠随机分为3组,分别给予不同的治疗方法,观察各组肝转移率、肝转移瘤数目、病理学变化、肿瘤细胞凋亡指数,检测肿瘤组织中CD基因的表达情况.结果 对照组、5-FC治疗组、5-FC热疗组平均肝脏转移瘤数和肝脏转移率分别为4.6000±1.2649、2.2000±0.9189、0.5000±0.8498;100%、40%、20%;肿瘤细胞凋亡指数平均为4.59%、9.87%和17.40%,5-FC热疗组可见较多的凋亡小体形成.结论 CD/5-FC系统热化疗对裸鼠转CD基因LoVo细胞结肠癌肝转移有明显的抑制作用.     

胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白-3在结肠癌中的表达及临床意义

目的 探讨胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白-3(IMP3)在结肠癌中的表达及其意义.方法 应用组织芯片免疫组织化学方法,观察203例结肠癌、癌旁黏膜和66例转移淋巴结的IMP3表达.结果 IMP3在结肠癌中的表达高于正常黏膜,与临床分期、T分期、淋巴和远处转移、Ki-67相关.转移淋巴结的IMP3表达高于原发癌和正常黏膜.IMP3阳性患者术后5年无瘤生存率和总体生存率明显降低,IMP3是影响无瘤生存[风险比(HR)1.92;95%可信区间(CI)1.06～3.47;P＜0.05]和总体生存(HR 2.37;95%CI 1.2～4.7;P＜0.05)的独立预后因素.结论 IMP3在结肠癌的发生发展中起重要作用,可能是预测术后转移复发的标记物.     

Survivin和p27~(Kip1)蛋白在结肠癌中的表达及临床意义

目的 探讨Survivin和p27Kip1蛋白在结肠癌中的表达及其相互关系.方法 应用免疫组织化学方法检测83例结肠癌标本和10例正常结肠黏膜组织中Survivin、p27Kip1的表达.分析Survivin、p27Kip1的表达与临床病理参数的关系.结果 Survivin在结肠癌组织中阳性表达率83.1%(69/83)明显高于在正常结肠黏膜组织中的0.0%(0/10)(P<0.01).结肠癌中Survivin的表达与临床病理参数无关(P>0.05).p27Kip1在结肠癌组织中阳性表达率41.0%(34/83)明显低于在正常结肠黏膜组织中的90%(9/10)(P<0.01).远处转移组p27Kip1阳性率(16.7%,3/18)明显低于远处无转移组(47.7%,31/65)(P<0.05).结肠癌p27Kip1表达与组织分化、肠壁浸润深度、Dukes分期有关(P<0.05).结肠癌组织中Survivin表达与p27Kip1表达未见明显相关性(P>0.05).结论 Survivin和p27Kip1蛋白在结肠癌组织中存在异常表达,提示两者在结肠癌的发生发展中起着重要的作用.结肠癌中Survivin的表达与p27Kip1蛋白的表达无相关性.     

结肠癌肝转移机制的研究

目的:研究影响结肠癌肝转移的可能机制。方法 :脾脏注射小鼠结肠癌细胞,构建大鼠结肠癌肝转移模型。实验分成正常组、门静脉分支结扎组、门静脉结扎组和CCl4诱导肝硬化动物模型组,检测各组大鼠肿瘤肝转移发生率、门静脉压力(portal pressure,PP)、血浆丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)水平、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)和表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)水平。结果 :PP的变化与肿瘤肝转移发生率不完全一致,未发现血浆ALT水平和肝脏转移肿瘤发生之间具有相关性。肝脏HGF和EGF水平与肿瘤肝转移发生率密切相关。结论:影响结肠癌肝转移发生率的因素有很多,除PP外,HGF和EGF所构成的肝脏微环境变化也起重要作用。     

腰椎间盘中转化生长因子β1的合成和基因表达

目的　观察腰椎间盘中内源性转化生长因子 β1(TFG - β1)表达分布规律及其细胞来源。 方法　采用免疫组化及原位杂交技术检测 16例胎儿期、8例生长期、12例成熟退变期和 2 7例突出椎间盘中TGF - β1蛋白合成和基因表达。结果胎儿椎间盘脊索细胞和类软骨细胞出现阳性免疫染色 ,并对TGF - β1mRNA呈强表达 ,阳性率为94 .3% (15 / 16 ) ;生长期椎间盘中软骨样细胞和成纤维细胞呈阳性表达 ,阳性率为 87.5 % (7/ 8) ,与胎儿期相比差别不显著 (P >0 .0 5 ) ,表达量低于胎儿期 (P <0 .0 5 ) ;成熟退变期阳性细胞明显减少 ;破裂型椎间盘突出组织中软骨样细胞、巨噬细胞呈阳性表达 ,阳性率为 37.4 % (10 / 2 7) ,低于胎儿期阳性率 (P <0 .0 5 )。结论　胎儿期、生长期和破裂型突出椎间盘组织可产生内源性TGF - β1,提示TGF - β1可能是腰椎间盘发育、生长和退变过程中重要调节因子。     

转化生长因子β1在胆囊癌中的表达及意义

目的：探讨转化生长因子β1（TGF－β1）与胆囊癌发生、发展的关系。方法：应用TGF－β1多克隆抗体对35例原发性胆囊癌、10例胆囊腺瘤及10例慢性胆囊炎标本进行S－P免疫组化标记。结果：胆囊癌TGF－β1的阳性率为57．1％,与胆囊腺瘤、胆囊炎（阳性率分别为20％和10％）比较差异有显著性意义（P＜0．01）,TGF－β1的阳性表达率在Nevin分期和伴淋巴结及远处转移的病人中,差异均有显著性意义（P＜0．05,P＜0．01）,TGF－β1表达率与病理组织学分级、性别及年龄无关。结论;TGF-β1与胆囊癌的发生发展密切相关,TGF－β1水平增高可增加胆囊癌转移的危险。     

结肠癌肝转移术后复发的再次肝切除4例分析

目的探讨再次肝切除在结肠癌肝转移肝切除术后肝内复发（RCLM）中的应用和价值。方法回顾性分析1997年10月至2006年8月中国医学科学院肿瘤医院收治的4例RCLM再次肝切除治疗的临床资料。结果4例RCLM首次和再次肝切除时均无手术死亡和手术并发症发生,术后中位生存期从第1次肝切除时算起为57个月,从再次肝切除算起为25.5个月。结论对RCLM再次肝切除安全可行,对经过选择的病例可明显延长存活期。     

大鼠急性脊髓损伤后白细胞介素-1β表达及其与神经细胞凋亡的关系

目的探讨脊髓损伤(SCI)后白细胞介素(IL)1β表达的变化及其与神经细胞凋亡的关系。方法采用Allen’s法建立大鼠急性SCI模型,用实时定量聚合酶链反应(PCR)和免疫组织化学染色检测SCI后IL1β表达,用原位末端标记法(TUNEL)检测SCI后神经细胞凋亡。结果对照组IL1βmRNA为4.87±0.49,SCI后早期IL1βmRNA明显升高,于伤后6h达高峰为6.95±0.95,两组间差异有统计学意义(P<0.01);免疫组织化学染色也显示伤后6hIL1β染色强度明显增加。TUNEL染色显示,对照组大鼠脊髓组织TUNEL阳性细胞极少(1.82±0.64),伤后6h有少许凋亡细胞出现,24hTUNEL阳性细胞增多最明显(32.38±4.75)。IL1β表达升高与TUNEL阳性细胞增多有明显的关系。结论SCI后IL1β表达升高,它可能参与了诱导神经细胞凋亡。     

兔关节软骨细胞转化生长因子－β1免疫组织化学的研究

目的观察成纤维细胞生长因子对培养兔关节软骨细胞转化生长因子－β１的表达。方法 培养１月龄新西兰兔的关节软骨细胞,在每次换液时加入成纤维细胞生长因子１００ｎｇ／ｍｌ,辅满后收集细胞,作关节软骨细胞转化生长因子－β１常规及电镜免疫组织化学研究。结果 光镜下实验组细胞明显呈棕色,电镜下细胞膜表面有明显的胶金颗粒粘附。结论 成纤维细胞生长因子能促进关节软骨细胞转化生长因子－β１的表达。     

转化生长因子-β1和结缔组织生长因子在慢性胰腺炎组织中的表达及其意义

我们通过建立大鼠慢性胰腺炎 (CP)模型 ,用免疫组织化学技术 ,对转化生长因子 β1(TGF β1)和结缔组织生长因子(CTGF)在CP形成过程中的表达进行动态观察 ,探讨其作用。一、材料和方法1.试剂与仪器 :三硝基苯磺酸Sigma公司产品 ,恒流静脉泵TE 3 11型 ,Teru mo公司产品 ,兔抗大鼠TGF β1单克隆抗体 ,兔抗大鼠Ⅰ型胶原多克隆抗体SantaCruz公司产品 ,兔抗大鼠CTGF单克隆抗体和EnVisionTM试剂盒购自Dako公司。2 .模型制备[1] :48只SD大鼠 (必凯公司 ) ,体重 2 5 0～ 3 0 0 g ,随机分为两组 :(1)CP组 (n =2 4)。氯胺酮 (10 0mg/kg)…     

结肠癌肝转移模型的建立及分期因素对肿瘤转移的影响

为探讨癌细胞经脾脏注射法建立裸鼠结肠癌肝转移模型的可行性及分期因素对肿瘤转移的影响,将结肠癌组织分离成细胞,采用脾脏注射法建立结肠癌肝转移模型。计算结肠癌肝脏转移率,统计分析不同临床分期对结肠癌肝转移的影响。结果显示,脾脏注射法结肠癌肝转移总体转移率为58.3%,Ⅲ/Ⅳ期结肠癌组织分离出的细胞结肠癌肝转移率(83.3%)及转移程度明显高于Ⅰ/Ⅱ期肝转移率(33.3%)及转移程度(P <0.01)。结果表明,结肠癌组织机械分离细胞脾脏注射法可以用来建立裸鼠结肠癌肝转移模型,且分期因素对转移的影响有统计学意义。