IL-17和RANKL在胶原诱导性关节炎大鼠关节滑膜的表达及^99Tc-TDP的干预作用

目的：探讨白细胞介素17（IL-17）和细胞核因子-κB受体活化因子配基（RANKL）在胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠关节滑膜病变发生发展中的作用及^99锝-亚甲基二膦酸盐（^99Tc—TDP）的干预作用。方法：通过完全弗氏佐剂乳化的鸡Ⅱ型胶原构建CIA大鼠模型。模型大鼠随机分为模型对照组和^99Tc—TDP组,^99Tc-TDP组予0．05μg·（kg·d）^-1^99Tc尾静脉注射,正常对照组与模型对照组予等量生理盐水尾静脉注射。关节炎指数（AI）评分评价关节炎程度,各组大鼠用ELISA法检测血清及关节液IL-17和RANKL浓度,显微镜观察滑膜病理变化,免疫组化法半定量检测滑膜IL-17和RANKL蛋白表达。结果：与正常对照组相比,模型对照组和^99Tc-TDP组血清及关节液IL—17浓度、关节液RANKL浓度、滑膜病理积分、滑膜IL-17和RANKL蛋白表达均增加（P〈0．05）,^99Tc—TDP组上述指标较模型对照组均降低（P〈0．05）,各组血清RANKL浓度无显著性差异（P〉0．05）。结论：IL-17和RANKL参与了CIA大鼠关节滑膜病变的发生发展,^99Tc—TDP可能通过抑制滑膜IL—17和RANKL的表达延缓关节滑膜病变的进展。     

Effects of Sinomenine on OPG/RANKL and IL-17 in Serum of Collagen-induced Arthritis Rats

目的 探讨青藤碱(SIN)对胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠血清骨破坏因子血清骨保护素(OPG)、核周因子κB受体活化因子的配体(RANKL)、白细胞介素17(IL-17)的作用,了解其治疗的骨保护作用.方法 建立CIA大鼠模型,以炎症指标、X线片证实造模成功;分为对照组、模型组、SIN组、MTX组,用ELISA法分析CIA大鼠血清OPG、RANKL、炎性细胞因子IL-17的水平.结果 与正常组比较,模型组大鼠外周血RANKL、IL-17水平明显升高(P＜0.05),OPG水平明显降低(P＜0.05),OPG/RANKL比值下降.与模型组比较,SIN组外周血OPG水平及OPG/RANKL比值明显升高(P＜0.05);与MTX组比较,SIN组OPG、OPG/RANKL比值无明显差异(P＞0.05).结论 在成功建立的CIA大鼠模型中,青藤碱能够提高外周血OPG/RANKL比值,提示青藤碱对类风湿性关节炎有骨保护作用.     

桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎大鼠RANKL／0PG水平的影响

目的：研究桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原蛋白诱导类风湿关节炎大鼠踝关节骨组织细胞RANKL表达的影响,以证明桂枝芍药知母汤可通过抑制破骨细胞的分化与活化,达到缓解或阻止关节的损伤,已达到对类风湿关节炎骨破坏的抑制作用。方法：采用Ⅱ型胶原蛋白诱导类风湿关节炎大鼠模型,灌胃给药30d后用原位杂交技术检测踝关节局部的OPG／RANKL水平。结果：桂枝芍药知母汤能降低CIA踝关节组织RANKL、OPG表达水平。结论：桂枝芍药知母汤可以抑制CIA模型鼠关节RANKLInRNA的表达水平,提高OPGmRNA的表达水平,降低RANKL／OPG的比值,可能通过抑制了破骨细胞的分化与活化,从而可能缓解或阻止关节的损伤破坏。     

补肾祛寒治尪汤对胶原诱导性关节炎大鼠血清IL-17、OPG及RANKL水平的影响

目的:观察补肾祛寒治尪汤对胶原诱导性关节炎大鼠血清白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)、骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)以及核因子kB受体活化因子配基(receptor activator of nuclear factor kB ligand,RANKL)水平的影响。方法:选取健康清洁级SD大鼠55只,随机选出15只作为空白对照组,其余40只全部制备胶原诱导型关节炎模型,而后随机分为模型对照组和补肾祛寒治尪汤组,每组各20只。补肾祛寒治尪汤组连续灌胃给药28 d;空白对照组正常条件饲养,自由饮水;模型对照组灌服蒸馏水。比较3组大鼠治疗后的关节炎症指数和足趾容积变化,采用酶联免疫吸附剂测定法对大鼠血清中的IL-17、OPG及RANKL水平进行测定并比较。结果:与空白对照组比较,给药1 d、5 d模型对照组和补肾祛寒治尪汤组大鼠的关节炎症指数升高,免疫后14 d足趾容积更大,且给药28 d后两组大鼠的IL-17、RANKL及OPG水平升高,差异均有统计学意义(P0.05);与模型对照组比较,给药28 d后补肾祛寒治尪汤组关节炎症指数较低,足趾容积更小,差异具有统计学意义(P0.05);与模型对照组比较,给药28 d后补肾祛寒治尪汤组大鼠IL-17、RANKL水平明显更低,OPG水平明显更高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:补肾祛寒治尪汤可以降低胶原诱导型关节炎大鼠关节炎指数和足趾容积,其机理可能为该药降低了大鼠血清IL-17和RANKL的水平,增加OPG的血清水平。     

补肾活血汤对慢性心力衰竭大鼠血清sFas、MMP-2的影响

目的观察补肾活血汤对慢性心力衰竭大鼠血清可溶性凋亡调节因子（sFas）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的影响。方法将32周龄自发性高血压大鼠（SHR）60只随机分为五个治疗组,每组12只;另12只正常Wistar大鼠作为空白对照组。治疗组分别给予补肾活血汤高、中、低剂量和卡托普利灌胃,模型对照组与空白对照组给予同剂量的蒸馏水灌胃。给药8周后,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测每组大鼠血清sFas、MMP-2的水平。结果与模型对照组比较,补肾活血汤高、中、低剂量组和卡托普利组大鼠血清sFas和MMP-2水平下降,差异有统计学意义（P〈0.05）;与卡托普利组比较,补肾活血汤高剂量组大鼠血清sFas和MMP-2水平显著下降,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论补肾活血汤可降低慢性心衰大鼠血清sFas和MMP-2水平,从而减少心肌细胞凋亡和抑制左室重构,防治心力衰竭。     

RANKL/OPG系统与大鼠Ⅱ型胶原诱导性关节炎发病的关系及99锝-亚甲基二膦酸盐的干预作用

探讨核因子κB受体活化因子配体/骨保护素（RANKL/OPG）系统与大鼠Ⅱ型胶原诱导性关节炎（CIA）发病的关系及⁹⁹锝-亚甲基二膦酸盐（⁹⁹Tc-MDP,商品名：云克）的干预作用。除正常对照组（n=8）外,其余大鼠建立CIA模型,随机分为模型组、甲氨蝶呤（MTX）组和云克组。采用关节炎指数（AI）评分评价关节炎程度;ELISA法检测关节液RANKL、OPG水平;观察膝关节病理变化;免疫组化法检测膝关节滑膜RANKL、OPG表达。结果表明,与正常对照组相比,模型组及干预组AI评分、关节液RANKL和OPG浓度、膝关节滑膜RANKL和OPG表达均显著增加（P<0.01）,干预组上述指标均明显低于模型组（P<0.01）,云克组明显低于MTX组（P<0.01）。结果表明,RANKL/OPG系统参与了大鼠CIA关节破坏的发生发展;云克可能通过抑制CIA大鼠的RANKL、OPG表达、降低RANKL/OPG比值起延缓关节破坏的作用,其起效时间明显早于甲氨蝶呤。     

UC-MSC移植对CIA大鼠炎症因子表达水平的调控作用

目的观察脐带间充质干细胞（umbilical cord mesenchymalstemcells,UC—MSC）移植对胶原诱导型关节炎（CIA）大鼠血清白介素-1（IL-1）、IL-10、IL-17、IL-18表达水平的影响,以探讨UC—MSC移植对CIA大鼠炎症因子的调控作用。方法90只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、UC—MSC治疗组,每组各30只：采用鸡Ⅱ型胶原加完全弗氏佐剂建立CIA大鼠模型;治疗前后采州关节炎指数（AI）评分对大鼠关节炎症进行评估;以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠治疗前后血清IL-1、IL—10、IL-17、IL—18水平变化。结果模型组血清IL-1、IL-17、IL—18水平均明显高于同期空向对照组,而IL—10水平则低于同期空白对照组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）：UC—MSC治疗组治疗后第1、3周时IL-1、IL-17、IL—18水平低于同期模型组,IL—10水平高于同期模型组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）;至第5周上述指标与空白对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论CIA大鼠存在免疫功能紊乱,其促炎症因子水平显著增高,抑炎症网子降低;UC—MSC能下调CIA大鼠促炎症因子水平,而上渊炎症抑制因子,减轻机体免疫性炎症反应,促进疾病缓解．     

佐剂性关节炎大鼠骨密度及血清骨保护素和核因子-κB受体激活因子配体的变化

目的：观察佐剂性关节炎大鼠的骨密度、血清骨保护素（ OPG）及核因子-κB受体激活因子配体（ RANKL）的表达。方法：将30只SD大鼠随机均分为正常对照组、模型1组、模型2组,除正常对照组外,其余大鼠均制成佐剂性关节炎模型。造模后第21天处死模型1组,第28天处死正常对照组和模型2组。以双能X线吸收测定法测量整体右侧胫骨和距胫骨远端约1 cm兴趣区检测骨密度;ELISA方法检测血清OPG、RANKL的表达。结果：模型1组大鼠兴趣区的骨密度明显低于正常对照组（P〈0.01）;模型2组大鼠兴趣区的骨密度均较模型1组和正常对照组显著降低（P〈0.01）;3组大鼠整体右侧胫骨骨密度值差异无统计学意义（P〉0.05）。模型1组、模型2组血清OPG、RANKL表达及OPG/RANKL比值与正常对照组差异均有统计学意义（P〈0.01）。同时模型1组与模型2组血清 OPG、RANKL 表达及 OPG/RANKL 比值差异亦均有统计学意义（P 〈0.01）。结论：佐剂性关节炎大鼠胫骨远端骨丢失的发生在整体胫骨之前。造模后第21天和第28天的 OPG 表达降低, RANKL表达升高,OPG/RANKL比值降低。     

重组人骨保护素对牙周炎大鼠牙槽骨RANKL 、OPG蛋白表达的影响

目的：探讨重组人骨保护素（rhOPG）对牙周炎大鼠牙槽骨RANKL、OPG蛋白表达的影响,为rhOPG应用于牙周炎的治疗提供实验依据。方法选择22只Wistar大鼠,采用随机数字表法选择2只健康大鼠作为健康组;其余20只作为实验组,建立牙周炎大鼠模型,再将其分为实验对照组（n＝10）和rhOPG组（n＝10）,rhOPG组大鼠于上颌第2磨牙牙周袋间隙局部注入10 mg／kg rhOPG治疗。实验对照组大鼠于相同部位注射等体积灭菌注射用水。采用链霉素抗生物素蛋白‐过氧化物酶（SP）检测牙槽骨RANKL、OPG蛋白的表达。结果与健康组比较,实验组大鼠牙槽骨OPG表达水平较低,差异有统计学意义（P＜0．05）,而RANKL表达水平两组差异无统计学意义（P＞0．05）。与实验对照组比较,rhOPG组大鼠牙槽骨组织OPG蛋白的表达水平明显上调,而RANKL蛋白的表达明显下调（P＜0．05）。治疗后rhOPG组大鼠牙槽骨中OPG表达水平明显高于治疗前,而RANKL表达水平明显低于治疗前,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 rhOPG能调节牙周炎大鼠牙槽骨RANKL、OPG的表达。     

重组血管活性肠肽基因质粒治疗大鼠胶原性关节炎的研究

目的：观察重组血管活性肠肽（pcDNA3．1＋／VIP）质粒治疗胶原诱导的大鼠关节炎（CIA）对血清TNF—α、IL～2、IL-4表达的影响和病理变化，探讨VIP基因治疗类风湿性关节炎的效果及可能机制。方法：以Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎作为CIA模型，重组血管活性肠肽质粒关节腔内注射治疗CIA，以双抗体夹心酶联免疫吸附法（ABC—ELISA）检测血清TNF—α、IL-2和IL-4的表达，观察病理变化和整体疗效。结果：①病理切片显示CIA模型组炎性细胞浸润明显，并存在骨和软骨破坏，VIP治疗组可显著减轻关节炎性病理改变；②细胞因子测定显示：与正常组相比，各对照组血清TNF—α、IL-2水平显著升高（P〈0．05），IL-4水平减低（P〈0．05）；与各对照组相比，各重组VIP质粒治疗组血清TNF—α和IL-2表达水平均明显降低（P〈0．05），IL-4表达则升高（P〈0．05）。结论：血管活性肠肽基因质粒关节腔内注射治疗大鼠CIA具有显著的疗效，有望成为RA的有效治疗手段。     

阳和汤对裸鼠移植性乳腺癌骨转移模型作用机制的探讨

目的探讨阳和汤对裸鼠移植性人乳腺癌骨转移模型的作用及其相关调节因子的影响。方法股骨接种人乳腺癌细胞建立裸鼠乳腺癌骨转移模型。随机分为阳和汤高、低剂量组、唑来磷酸组、模型组、假手术组,动态观察各组裸鼠骨转移癌的生长情况,测量骨转移癌体积,绘制生长曲线;给药20 d后处死动物,测取瘤质量,计算抑瘤率;ELISA法检测裸鼠血清中相关调节因子PTHrP、RANKL、OPG含量的变化。结果 1.阳和汤高、低剂量组、唑来磷酸组的骨转移癌灶体积均小于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);2.阳和汤高、低剂量组、唑来磷酸组PTHrP和RANKL含量明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),而OPG含量水平增加,RANKL/OPG的比率下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 1.阳和汤有抗移植性人乳腺癌骨转移作用;2.阳和汤下调PTHrP、RANKL的含量、增加OPG的含量,抑制RANKL/OPG比率可能是其抑制乳腺癌骨转移的作用机制之一。     

自拟活血降脂汤治疗高脂血症的临床观察

目的：观察自拟活血降脂汤治疗高脂血症的临床疗效。方法：将100例高脂血症患者随机分为对照组与治疗组，治疗组60例应用活血降脂汤，对照组40例以血脂康胶囊治疗。两组患者治疗12W后观察临床疗效、血脂[总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）]、载脂蛋白（ApoA-I、ApoB）及安全性指标。结果：两组患者治疗后，治疗组总有效率为90．0％，对照组为85．0％；两组总有效率比较，无显著性差异（P〉0．05）。在降低TG、ApoB和升高ApoA—I方面治疗组优于对照纽，两组比较有显著性差异（P〈0．05，P〈0．01）。两组中医证候疗效及治疗前后症状积分比较，有显著性差异（P〈0．01）。结论：活血降脂汤能明显改善血脂代谢，是一种疗效确切、应用安全的降血脂汤剂。     

慢性间歇低氧对小鼠骨密度和骨代谢的影响

目的：探讨慢性间歇低氧（CIH）对骨密度（BMD）和骨代谢的影响。方法将16只12周龄C57BL/6雄性小鼠按随机数字表法分为慢性间歇低氧组（CIH组）和正常对照组（CON组）,每组8只。CON组小鼠在正常环境下饲养,CIH组小鼠在间歇低氧环境下饲养,低氧暴露时间为每日9：00-17：00,6d/周,共8周。于8周末取血,用ELISA法测定血清抗酒石酸酸性磷酸5b （TRACP-5b）、骨钙素（OC）、白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;取右侧股骨检测其BMD;取左侧股骨观察骨组织形态学改变,并分别采用免疫组化和real- time qPCR法检测骨保护蛋白（OPG）和核因子-κβ受体活化因子配体（RANKL）和其mRNA表达。结果与CON组相比,CIH组小鼠BMD、血清OC水平及OPG/RANKL mRNA比值均明显下降（P＜0.05或0.01）,而血清TRACP-5b、IL-6和TNF-α水平、骨组织内RANKL和mRNA表达均明显升高（P＜0.05或0.01）;但骨组织内OPG和mR-NA表达差异均无统计学意义（均P＞0.05）;小鼠股骨干骺端骨小梁分布稀疏,变细及断裂。血清IL-6水平与BMD呈负相关（P＜0.05）,与骨组织RANKL mRNA呈正相关（P＜0.01）;血清TNF-α水平与BMD呈负相关（P＜0.01）,与骨组织RANKL mRNA呈正相关（P＜0.05）。结论 CIH能导致骨吸收增加、骨形成下降和BMD下降,与低氧以及CIH引起的IL-6、TNF-α水平升高导致RANKL升高有关。     

补肾活血、调理冲任法治疗子宫内膜异位症不孕的临床研究

目的:观察中医补肾活血、调理冲任法治疗子宫内膜异位症引起不孕的临床疗效及其作用机制。方法:60例子宫内膜异位症患者分为中药治疗组、西药对照组各30例,中药治疗组采用补肾活血、调理冲任法进行治疗,西药对照组采用米非司酮治疗,2个疗程后观察2组患者的临床疗效,检测血清CA125、EMAB水平等。结果:中药治疗组总有效率为96.67%,妊娠率为47%,西药对照组总有效率为76.67%,妊娠率为27%,2组比较差异有统计学意义(P0.05)。与西药对照组比较,中药治疗组治疗后EMAB阳性率、血清CA125水平明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:采用中医补肾活血、调理冲任法治疗子宫内膜异位症引起的不孕能显著改善临床症状,提高受孕率。     

健脾活血利水法治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变的临床研究

目的：观察健脾活血利水法治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变（简称中浆）的临床疗效。方法：将40例中浆患者随机分成2组,治疗组和西药组各20例,治疗组给予参苓白术散合生蒲黄汤加减,水煎服,每日1剂,西药组给予西医常规治疗,疗程14d,随访1年。结果：治疗组痊愈率总有效率95％,西药组总有效率80％。经统计学分析,两组疗效差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：健脾活血利水疗法治疗中浆病优于单纯西医治疗。     

补肾活血法联合中药保留灌肠治疗盆腔炎性疾病后遗症临床研究

目的观察补肾活血法联合中药保留灌肠治疗盆腔炎性疾病后遗症的临床疗效。方法将64例盆腔炎性疾病后遗症患者随机分为治疗组和对照组。治疗组采用口服补肾活血中药汤剂联合中药保留灌肠治疗。对照组口服康妇炎胶囊。治疗3个疗程后观察综合疗效。结果治疗组总有效率为94.1%,对照组为66.7%,两组比较差异有显著性（P〈0.05）。结论补肾活血法联合中药保留灌肠是治疗盆腔炎性疾病后遗症的有效方法。     

四妙丸对高脂饮食胶原诱导关节炎大鼠血脂及关节的影响简

目的 比较四妙丸和甲氨蝶呤对高脂饲料胶原诱导关节炎（CIA）大鼠的影响,明确四妙丸对关节炎和血脂的影响.方法 选用Wistar大鼠建立高脂饲料的关节炎模型,观察四妙丸和甲氨蝶呤两种治疗4周后大鼠关节炎指数积分、滑膜HE染色以及检测血清中血脂和炎症因子的浓度.结果 CIA大鼠经甲氨蝶呤和四妙丸治疗后关节炎指数积分均明显下降,病理切片的滑膜增生层次和炎症细胞浸润均明显改善.与甲氨蝶呤组比较,四妙丸组血清中总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平明显降低（P＜0.01）,而高密度脂蛋白胆固醇则明显升高（P＜0.01）;前炎症因子肿瘤坏死因子-α浓度下降（P＜0.05）,而白介素-17浓度则明显升高（P＜0.05）.结论 四妙丸可能兼具有抑制免疫和降低血脂的作用来阻止CIA的进展.     

白细胞介素-17对人牙周膜成纤维细胞表达RANKL、OPG的影响

目的 研究白细胞介素17(IL-17)水平对人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)中细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)表达的影响,探讨IL-17与正畸牙根吸收的相关性.方法 采用组织块培养法,在体外建立人牙周膜成纤维细胞系.以不同水平(0、5、10、20、40 ng/mL)的IL-17作用HPDLF 24 h.采用RT-PCR和ELISA法,分别检测RANKL和OPG的mRNA、蛋白的表达.结果 (1)在0 ng/mL组中,HPDLF表达RANKL、OPG.(2)0～20 ng/mL各组中,HPDLF中RANKL的mRNA、蛋白表达量与IL-17水平呈正相关性.(3)5～20 ng/mL各组中,OPG的mRNA、蛋白表达量与IL-17水平呈负相关性.(4)0～20 ng/mL组中,RANKL/OPG的mRNA、蛋白的比值与IL-17水平呈正相关性.结论 在无IL-17刺激时,HPDLF可表达RANKL、OPG.IL-17能够促进HPDLF表达RANKL,同时抑制HPDLF表达OPG,上调RANKL/OPG的比值.