ELISA双抗原夹心法在梅毒检测中的重要性分析

目的：通过三种实验方法对梅毒进行检测。方法：应用TRUST、ELISA和TPPA实验检测80例献血者血液。结果：80例ELISA法阳性TRUST法阴性标本中TPPA阳性为72例(90％)，阴性8例(10％)。结论：实验结果说明ELISA法对梅毒检潮的检出率较高。     

ELISA双夹心法检测呼吸道合胞病毒抗原

用纯化的呼吸道合胞病毒(RSV)抗原,免疫豚鼠和家兔制备免疫血清,建立ELISA双夹心法检测RSV抗原,证明与其他病毒无交叉反应,能从感染RSV组织培养上清液中检出≥0.5TCID_(50)/0.1ml的RSV。检测临床急性下呼吸道感染患者的鼻咽抽出液31份,初步结果显示:本法的阳性率与病毒分离培养和IFA的阳性率无显著差别,可用于RSV感染的快速诊断。     

应用双抗原夹心ELISA法筛查献血员梅毒螺旋体抗体

目的：优选一种适宜于献血员梅毒筛查的试验方法。方法：采用检测梅毒特异性抗体的双抗原夹心ELISA法对献血员进行抗体检测，并与RPR检测结果进行比较，对两种方法检测结果不一致的标本，再用TPHA法进行确证。结果：ELISA法阳性检出率0．36％(4l，11271)、RPR法阳性检出率0．26％(29／11271)。ELISA法与TPHA法总符合率97．56％(40／41)、RPR法与TPHA总符合率63．41％(26／41)。结论：ELISA法优于RPR法，具有较高的灵敏度和特异性，适宜于献血员的筛查，有利于控制和减少梅毒的输血传播。     

ELISA双抗原夹心法检测抗-HIV室内质控探讨

ELISA双抗原夹心法检测抗-HIV是一种敏感性高、特异性强的试剂,易于在基层开展,因此常常作为艾滋病初筛的首选方法.近年来,艾滋病(AIDS)疫情迅速上升,流行速度明显加快,AIDS的预防、检测与控制显得日益重要.     

双抗原夹心ELISA法检测马尔尼菲青霉Mp1p抗体

目的建立一种检测马尔尼菲青霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法利用毕赤酵母系统表达重组马尔尼菲青
霉特异性甘露糖蛋白Mp1p,并利用改良过碘酸钠法标记Mp1p,经棋盘滴定法建立一种可检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体
的双抗原夹心ELISA法,并检测100例健康人群对照血清、21例血培养确诊其他真菌感染病人血清和15例血培养确诊马尔尼
菲青霉病人血清,联合本实验室前期建立的马尔尼菲青霉抗原检测方法评价其临床应用价值。结果成功建立一种检测马尔
尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,经健康人群对照及其他真菌感染病人血清评价特异度为100%（121/121）,
检测15例马尔尼菲青霉病人血清,Mp1p特异性抗体2例阳性,Mp1p特异性抗原12例阳性,Mp1p抗体与抗原联合检测可明显
提高灵敏度,达到93.3%（14/15）。结论双抗原夹心ELISA法检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体具有高度的特异性,联合抗
原检测可提高马尔尼菲青霉感染诊断率。
     

猴T淋巴细胞趋向性病毒1型双抗原夹心ELISA检测试剂盒的研制

目的研制灵敏度和特异性高的检测实验猴血清中T淋巴细胞趋向性病毒-1型（STLV-1型）／E体的双抗原夹心ELISA（dsELISA）检测试剂盒。方法采用经原核表达系统表达并纯化的人T淋巴细胞白血病病毒-1型（HTLV-1型）的Env蛋白作为包被用抗原，建立了检测STLV-1的dsELISA诊断方法。通过优化反应条件和筛选试剂，确定了dsELISA诊断试剂盒的相关条件，并经敏感性、特异性和重复性试验考查该试剂盒质量。结果试剂盒特异性好，批内重复试验变异系数（CV）〈7％，批间重复试验CV〈10％。对200份猴血清进行随机检测，与国际公认的诊断试剂盒（美国BioReliance公司）的符合率为97％。结论本试剂盒可初步应用于临床上实验猴STLV-1型抗体的检测。     

双抗原夹心ELISA法检测烟曲霉硫氧还蛋白还原酶抗体

目的：建立检测烟曲霉硫氧还蛋白还原酶（thioredoxin reductase GliT,TR）特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,同时对其临床应用进行评价。方法：利用基因工程技术制备重组TR作为包被抗原和酶标记抗原,采用棋盘滴定法优化双抗原夹心ELISA法的反应条件,并考察ELISA法的敏感性、特异性以及重复性。用双抗原夹心ELISA法测定273例住院患者（侵袭性曲霉病50例、侵袭性念珠菌病46例、念珠菌定植82例、细菌感染95例）以及200例健康人血清,并与实验室前期建立的间接ELISA法检测TR抗体的结果进行比较。结果：双抗原夹心ELISA法工作条件为TR抗原包被浓度为1.0 μg/mL,酶标抗原1∶500稀释;封闭液含50 g/L脱脂奶粉溶液的PBS?T,待测血清稀释度为1∶100。患者血清检测结果显示,高、中、低3份血清批内变异系数（CV）分别为11.2%、11.8%和12.3%;不同批次重复测定6次,其批间CV分别为10.9%、12.1%和13.5%。重组抗原对血清中相应抗体的阻断率为94.4%。通过ROC曲线确定吸光度的cut?off值为0.126。检测侵袭性曲霉病的敏感性和特异性分别为80.0%（40/50）和95.5%（404/423）,敏感性高于检测TR抗体的间接ELISA法（83.3% vs. 72.2%）。结论：建立了双抗原夹心ELISA法检测烟曲霉TR特异性抗体,可提高侵袭性曲霉病的诊断率,具有临床应用价值。     

双抗体夹心ELISA检测肺炎支原体抗原方法的建立及临床应用

目的　建立检测肺炎支原体抗原的双抗体夹心ELISA ,探讨其临床应用的可行性。方法　采用不同株Mp单抗 ,用双抗体夹心ELISA法检测Mp抗原 ,优化该方法检测Mp抗原的最佳实验条件。对Mp标准株及 14 7份临床标本进行测定 ,观察双抗体夹心ELISA方法的敏感度和特异度 ,以及该方法与聚合酶链反应 (PCR)检测法的符合率。结果　包被单抗量为 2 0 μg·ml-1,酶标记单抗 1∶2 0 0稀释时 ,阳性对照与阴性对照吸光度之比 (P/N值 )最大 ;检测Mp抗原敏感度达 2 μg·ml-1,和其它支原体没有交叉反应。 14 7份临床标本PCR检测阳性率为 13 .6% (2 0 /14 7) ;双抗体夹心ELISA法检测阳性率为 12 .2 % (18/14 7) ,两者符合率达 95 .9%。结论　建立的双抗体夹心ELISA法检测Mp抗原具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点。     

双抗原夹心ELISA法检测HCV抗体在无偿献血中的应用探讨

目的 探讨双抗原夹心ELISA法(简称夹心法)检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)在无偿献血中的应用.方法 对42份以往一种或两种间接法抗-HCV反应性的献血者标本及2 831份无偿献血者标本同时采用一种夹心法和两种间接法试剂进行抗-HCV检测,对任一试剂检测为反应性的标本通过重组免疫印迹法(RIBA)作进一步确证.3种...     

Anti-HIV ELISA试剂间接法与双抗原夹心法的比较

由于艾滋病目前既无疫苗预防又缺乏有效的治疗手段,使艾滋病在全球范围内迅速蔓延,这就使诊断艾滋病的试剂质量水平显得尤为重要。一个好的方法首先要考虑简单、快速、准确。笔者试用国产第三代HIV酶免检测试剂盒,一段时间后,认为其有很大优势,完全能替代目前一直延用的间接法酶免试剂。     

双抗原夹心ELISA法检测抗-HCV的临床价值研究

目的 研究双抗原夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的临床价值.方法 选取2018年1月至2019年12月在血站无偿献血的486份标本为研究对象.收集无偿献血筛查标本并均实施间接ELISA法、双抗体夹心ELISA法检查.观察间接ELISA法、双抗体夹心ELISA法诊断抗-HCV结果,并...     

白念珠菌Csa2蛋白双抗原夹心ELISA方法的建立及诊断价值

目的 建立以白念珠菌Csa2蛋白抗体为靶标的双抗原夹心ELISA,初步评价其鉴别诊断白念珠菌尿道感染的应用价值。方法 通过间接免疫荧光染色定位Csa2蛋白在白念珠菌菌体分布情况;应用棋盘滴度法优化反应条件,建立双抗原夹心ELISA并进行方法学评价;检测324例健康体检者血清,确定该方法的cutoff值;检测120例健康体检者及30例念珠菌属尿路感染患者血清,分析其诊断的灵敏性、特异性、阳性预测值、阴性预测值。结果 Csa2蛋白是一种特异性分布在白念珠菌菌丝态表面的蛋白;以0.1 μg/mL的rCsa2蛋白为包被抗原,1∶1 000稀释的rCsa2-HRP蛋白为检测抗原,建立双抗原夹心ELISA,可最低检测1∶16 000稀释的rCsa2蛋白免疫兔血清并不与正常兔血清发生反应;该方法的cutoff值为0.072,诊断白念珠菌尿路感染敏感性为65.2% (15/23),特异性为98.4% (125/127),阳性预测值88.2%（15/17）,阴性预测值为94.0%（125/133）。结论 成功建立检测白念珠菌特异性Csa2蛋白抗体双抗原夹心ELISA;初步评价该方法对诊断白念珠菌尿路感染具有较高的特异性,得出较高阳性预测值和阴性预测值;Csa2抗体靶标对区分白念珠菌感染和定植具有一定价值。     

双抗原夹心法检测抗—HIV的效果评价

<正> 从97年始,我院血库就用间接ELISA法对献血者进行抗—HIV(1+2)的筛选试验,发现间接ELISA法普遍存在特异性、重复性差及灰色带反应较多等缺点。近两年市场上推出了抗—HIV的第三代检测试剂—双抗原夹心法,该法以高纯度基因重组HIV抗原包被反应板、以酶标HIV特异性抗原代替间接ELISA法中的酶标二抗,具双重识别机制,可同时检测IgG和IgM抗体。我科从去年11月份起即用双抗原夹心法对献血者血液进行复检(包括间接法初检阳性的标本),经比较觉得双抗原夹心法的特异性和灵敏度均明显优于间接法。现把有关检测结果总结报告如下。     

不同组合快速双抗体夹心ELISA检测囊虫循环抗原的研究

用抗猪囊虫单克隆抗体和其特异性多克隆抗体的４种组合进行快速及抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测囊虫病人血清中的循环抗原。结果表明，双单抗法的检出率最高（６７．５％），其余依次为多抗－单抗法（５４．１７％）、单抗－多抗法（５０．８３％）和双多抗法（４９．１７％）。它们与包虫、弓形虫病人的交叉反应及正常人的假阳性反应无显著差异（Ｐ〉０．０５），但与肝吸虫病人的交叉反应有极显著的差异（Ｐ〈０．０１），以双单抗法最低     

单克隆抗体双夹心ELISA检测血吸虫循环抗原对抗血吸虫药…

应用日本务虫抗３１／３２ＫＤ单克隆抗体双夹关免疫吸附试验检测血吸虫循环抗原，用于城市急性血吸虫病经吡喹酮治疗５年后无再次感染患者的疗效考核，阳性率为１２．２％。与快速法ＥＬＩＳＡ检测循环抗原的符合率为９６．３４％。与常用检测抗体的ＩＨＡ、ＥＬＩＳＡ法平行对照，阳性率基本一致     

夹心法ELISA检测血吸虫循环抗原的研究

用抗血吸虫成虫抗原的多克隆抗体为捕捉抗体，抗虫卵抗原的单克隆抗体ＭＧ２为标记抗体的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测血吸虫循环抗原。对慢性血吸虫病的阳性率为９５．４％；检测正常人血清２２２份，１１例假阳性，对１７例肺吸虫病人和４０例其他寄生虫病人的交叉反应率分别为１１．７％和２．５％；检测血吸虫病中度流行区人群６２２名和低感染区人群１０９９名，阳性率分别为２２．５％和４．６％。对血吸虫病疗效考核的结果表明     

反向间接夹心ELISA法检测柯萨奇B组病毒的方法

建立反向间接夹心ＥＬＩＳＡ法，检测可疑为柯萨奇Ｂ组病毒性心肌炎患者血清中病毒特异性ＩｇＭ抗体，在对临床诊断为病毒性心肌炎的患者中，柯萨奇病毒ＩｇＭ抗体阳性率为２７％，结果说明该法在早期诊断病毒性心肌炎方面具有一定的价值。