胰腺导管腺癌中HER2/neu和拓扑异构酶Ⅱα基因的变化及相关性分析

目的探讨胰腺导管腺癌（简称胰腺癌）中HER2／neu和拓扑异构酶ⅡαTOP2A）基因的变化及其意义。方法应用免疫组织化学（EnVision法）和多色荧光原位杂交技术,检测26例中国人胰腺导管腺癌及癌旁胰腺组织、10例慢性胰腺炎组织、10例正常胰腺组织中TOP2A和HER2／neu蛋白表达及基因状态的变化,分析蛋白表达与基因扩增间的关系,以及TOP2A和HER2／neu基因改变的相关性,并探讨二者与胰腺癌临床病理改变之间的关系。结果26例胰腺癌组织中免疫组织化学显示TOP2A阳性表达指数从0．5％至70％,12例（46．2％）胰腺癌组织HER2／neu蛋白阳性表达。荧光原位杂交结果显示TOP2A和HER2／neu基因扩增的胰腺癌各10例（38．5％）,其中9例为TOP2A和HER2／neu共同扩增,癌旁胰腺组织、慢性胰腺炎及正常胰腺组织均未检测到TOP2A和HER2／neu蛋白表达及基因扩增。TOP2A和HER2／neu蛋白表达水平与基因扩增无显著相关性（P〉0．05）。TOP2A和HER2／neu基因扩增具有显著的相关性（P〈0．01）。结论胰腺癌中TOP2A和HER2／neu的蛋白表达与基因扩增无相关性;TOP2A和HER2／neu基因的共同扩增可能在胰腺癌发生发展中起重要作用,联合检测TOP2A和HER2／neu基因状态对于胰腺癌的靶向治疗可能具有一定的指导意义。     

以HER2／neu为靶点抗肿瘤治疗研究进展

原癌基因 HER2 / neu编码一种分子量 185 k Da单链跨膜糖蛋白 - p185 ,即表皮生长因子受体 2。多种人类腺癌存在HER2 / neu扩增及过度表达。HER2 / neu过度表达与肿瘤病人不良总体预后及较短存活期相关。近年来以 HER2 / neu为靶点抗肿瘤治疗在 HER2 / neu抗体、肽疫苗、酪氨酸激酶抑制剂等方面取得很大进展     

进展期乳腺浸润性导管癌HER-2/neu蛋白表达的稳定性分析

目的探讨HER-2/neu蛋白在进展期乳腺浸润性导管癌原发灶和同期腋窝淋巴结转移灶中的表达,指导临床检测标本的选择以及检测报告的分析与应用。方法收集进展期乳腺浸润性导管癌标本100例制备全信息组织芯片,采用免疫组化法检测HER-2/neu蛋白表达,FISH法检测HER-2/neu基因扩增状态,分析其特点、稳定性及其相互关系。结果 69%病例HER-2/neu蛋白呈均质性表达,与同期腋窝淋巴结转移灶相比,原发灶蛋白均质阴性病例一致性最强,均质阳性病例次之,均质不确定病例最差;三者相比差异有统计学意义(P0.000 1)。36例HER-2/neu蛋白不确定和异质性病例的FISH检测显示20例为基因均质扩增,13例为基因均质非扩增,3例为基因异质性,其中31.65%的蛋白阴性位点HER-2/neu基因扩增。结论乳腺浸润性导管癌HER-2/neu蛋白表达在肿瘤原发灶和同期腋窝淋巴结转移灶之间稳定性较高,尤以阴性病例最稳定;免疫组化与FISH同步检测及对比分析可能为乳腺癌患者的治疗及预后提供更为精准的信息;应用全信息组织芯片更能全面检测HER-2/neu蛋白表达及基因状态,并可用于深入分析乳腺癌基因分型及其它相关指标在肿瘤进展中的变化。     

癌基因c-erb B2与胃肠道癌

癌基因异常已知有点突变、基因过度表达、扩增及重排等。属受体型酪氨酸激酶的c-erb B2的过度表达和基因扩增与癌的恶性程度有关,故可作为癌症预后的指标。作者对9例胃癌和30例结肠癌病例进行了c-erb B2癌基因的扩增、重排及点突变分析。对异常部位,基因扩增与蛋白的过度表达、细胞外区异常与跨膜区异常的相关性进行了探讨。 结果与讨论:作者证实了Erb B2蛋白过度表达,其原因可能因基因扩增使5’端启动子结构导演而致表达调控异常。Erb B2蛋白类跨膜型受体型蛋     

以HER2／neu为靶点抗肿瘤治疗研究进展

原癌基因HER2/neu编码一种分子量185kDa单链跨膜糖蛋白－p185，即表皮生长因子受体2。多种人类腺癌存在HER2/neu扩增及过度表达。HER2/neu过度表达与肿瘤病人不良总体预后及较短存活期相关。近年来以HER2/neu为靶点抗肿瘤治疗在HER2/neu抗体、肽疫苗、酪氨酸激酶抑制剂等方面取得了很大进展。     

HER—2／neu癌基因与肿瘤的生成及演进

HER－2/neu癌基因产物是185kD的酪氨酸蛋白激酶活性的待定生长因子受体，属于EGFR家族，HER－2在乳腺癌，NSC，LC卵巢癌，胃癌，结直肠癌中扩增并过量表达，与药物抗性及不良预后胶在。本综述了HER－2癌基因乳腺癌、卵巢癌的生成及演进关系研究进展。HER－2癌基因可能是WTP53、WTPRb基因作用的靶子，其生瘤作用与其对凋亡的抑制，对肿瘤新血管生成及对肿瘤细胞侵袭力的促进有关。     

HER-2/neu基因在肿瘤免疫治疗中的研究进展

原癌基因HER2 /neu是表皮生长因子受体家族中的一员 ,在多种人类恶性肿瘤中存在其扩增及过度表达 ,HER2 /neu的过表达与肿瘤病人不良总体预后及较短存活期相关。近年来以HER2 /neu为靶点的抗肿瘤免疫治疗发展较快 ,在抗HER2 /neu抗体 (Herceptin) ,多肽疫苗 ,DNA疫苗等方面取得了很大进展。     

HER-2／neu基因在肿瘤免疫治疗中的研究进展

原癌基因HER2／neu是表皮生长因子受体家族中的一员，在多种人类恶性肿瘤中存在其扩增及过度表达，HER2／neu的过表达与肿瘤病人不良总体预后及较短存活期相关。近年来以HER2／neu为靶点的抗肿瘤免疫治疗发展较快，在抗HER2／neu抗体(Herceptin)，多肽疫苗，DNA疫苗等方面取得了很大进展。     

eglA P-Her2/neu-IL-12融合基因穿梭载体的构建

目的:构建重组厌氧芽胞梭菌saccharobutylicum内源性β-1,4葡聚糖酶启动子(eglA p人)-表皮生长因子受体2胞外区(hHer2/neu ECD人)-白细胞介素12(rhIL-12)融合基因穿梭表达载体(pIMP1 eglA p-hHer2/neu ECD-rhIL-12),为进一步制备eglAp-hHer2/neu-rhIL-12融合基因修饰的厌氧芽胞梭菌,并探讨其对Her2/neu+实体肿瘤的基因治疗作用奠定基础。方法:以含有全长hHer2/neu序列的真核表达质粒(pcDNA3.1 hHer2/neu)为模板,采用PCR方法,扩增hHer2/neu ECD基因片段;将其插入重组rhIL-12真核表达质粒pcD-NA6 rhIL-12(p1)中的rhIL-12基因上游,获得pcDNA6 hHer2/neu ECD-rhIL-12(p2)真核表达质粒;设计合成eglAp基因中一段55 bp序列作为模板,通过连续PCR的方法,扩增eglAp片段(335 bp),并构建T-eglA p(p3)亚克隆质粒;通过酶切连接的方法,将eglA p片段插入p2质粒中的hHer2/neu ECD基因上游,...     

应用差别PCR检测肿瘤组织中癌基因的扩增

差别PCR（differentialPCR，D-PCR）是一种半定量PCR技术，用以检测基因拷贝数改变的、快速敏感的非同位素技术，其特点是在PCR系统中检测靶基因的同时设立一个单拷贝参照基因，从而确定靶基因扩增或缺失的程度。目前多用于石蜡包埋、新鲜癌组织中癌基因扩增的检测。现以检测乳腺癌组织中c－erbB－2（HER－2／neu）扩增为例，具体说明D－PCR的检测程序．引物设计是根据靶基因HER－2／neu及参照基因γ-IFNG序列分别设立一对引物：HER－2／neu（5'-CCTCTGACGTCCATCATCTC－3'；3'－ATCTTCTGCTGCCGTCGCTT－5'）；…     

HER-2/neu胞外配体结合区基因的克隆及原核表达

目的 克隆HER—2／neu配体结合区基因，并在大肠杆菌中获得高效表达。方法 用PCR技术扩增HER—2／neu脑外配体结合区的cDNA片段，并将该片段插入pET-28a(t)原核表达载体中，实现插入基因的融合表达；用SDS—PAGE和蛋白免疫印迹法分别测定表达产物的相对分子质量及特异性。结果 构建的重组质粒在大肠杆菌中获得高效稳定的表达，表达产物的相对分子质量与预期值一致，且所表达蛋白可被抗HER—2/neu的特异性抗体识别。结论 获得了HER—2／neu脑外配体结合区基因在原核系统中的表达，为HER—2／neu高表达肿瘤的疫苗研究奠定了基础。     

HER-2/neu与RECK mRNA在乳腺癌组织的表达及其意义

目的 探讨乳腺癌组织中HER-2/neu与RECK mRNA的表达及其与乳腺癌恶性程度相关性,为临床预后提供参考.方法 采用RT-PCR技术检测92例乳腺癌组织标本及正常同源癌旁组织标本中HER-2/neu、RECK mRNA表达水平,同时对乳腺癌组织与癌旁组织中两基因的表达以及不同TNM分期和分化程度的乳腺癌组织中HER-2/neu、RECK mRNA表达情况进行对比分析.结果 乳腺癌组织中HER-2/neu mRNA表达水平高于癌旁组织,RECK mRNA表达水平低于癌旁组织.不同TNM分期乳腺癌组织中HER-2/neu 、RECK mRNA表达水平存在显著差异,TNM分期越高,HER-2/neu mRNA表达越多,RECK mRNA表达相对较少;而高分化癌组织中HER-2/neu mRNA表达水平较低,RECK mRNA表达相对较多,否则反之.结论 HER-2/neu mRNA与RECK mRNA在乳腺癌组织中表达异常,这两者之间相互作用,共同参与乳腺癌的发生、进展.     

HER—2／neu癌基因信息传递途径研究进展

HER－2／neu癌基因编码的“P185^neu是“孤儿受体”，其配体至今尚未确定。HER－2引起生瘤机制的关键是其酪氨酸蛋白激酶活性的调节。HER－2的癌基因通过点突变、扩增有过量表达而活化，其活性由过表达时组成性的同源二聚体化调节，也可由与erbB1、erbB3及erbB4异源二聚体化为异源配体EGF、DNF、HRG等调节，通过促进降解调节等等。其下游信息传递由Shc-Grb2-Ras-Raf-MAPK及Shc-Grb2-Ras-Raf-PI-3′－K组成，前传递有丝分裂信号，后传递转化或致癌信号，信息传递途径的每一部份均可作为免疫治疗及基因治疗的分子靶。     

HER-2/neu超时表达与多转移位点表达的稳定性

HER-2/neu原癌基因在20％～30％的浸润性乳腺癌中存在扩增和过度表达。但是对HER-2/neu超时表达变化与肿瘤演进或不同转移位点表达的异源性程度的研究非常局限,为了确定原发肿瘤中HER-2/neu蛋白含量是否不同于浸润癌,浸润癌中HER-2/neu表达是否存在异源性,作者用免疫过氧化物酶技术和抗HER-2/neu基因185-kD蛋白产物(p185)单克隆抗体,对30例死于转移性乳癌患者的尸解组织(平均每例2～5个转移灶组织)进行了回顾性检测研究。30例尸解组织标本中有8例呈现所有转移位点p185弥散性的强染色;5削弱染色;15例组织标本染色阴性,最后一例表现出混乱的染色:     

HER-2/neu癌基因与肿瘤的生成及演进

HER- 2 / neu癌基因产物是 185 k D的具酪氨酸蛋白激酶活性的待定生长因子受体 ,属 EGFR家族。 HER- 2在乳腺癌、NSC、L C卵巢癌、胃癌、结直肠癌中扩增并过量表达 ,与药物抗性及不良预后有关。本文综述了 HER- 2癌基因与乳腺癌、卵巢癌的生成及演进关系研究进展。HER- 2癌基因可能是 WTP5 3、WTPRb基因作用的靶子 ,其生瘤作用与其对凋亡的抑制、对肿瘤新血管生成及对肿瘤细胞侵袭力的促进有关     

视网膜母细胞瘤中N-myc拷贝的扩增与染色体异常的关系

作者在1975年～1979年调查了596例视网膜母细胞瘤(RB)病人。细胞遗传学分析发现,定位在13ql4的Rb-1基因缺失可引起RB,由于抑制(或控制)这种基因的功能失活而导致癌基因激活。另一方面,癌基因激活常与染色体异常或基因扩增有关。以前曾报道在RB肿瘤细胞系和RB肿瘤组织细胞中出现N-myc癌基因扩增并证明与双微体(DM)及均质染色区(HSR)有密切关系。作者进一步研究了RB肿瘤癌基因激活和染色体异常之间的关系,并考虑到肿瘤类型和家族背景。取正常人的肝、脾及皮肤成纤维细胞的N-myc作为标准。扩增超过     

乳腺癌HER-2/neu的免疫组织化学检测

筛选乳腺癌患者进行新药Herceptin的辅助化疗必须明确患者肿瘤HER2／neu(c-erbB-2)状态。评价HER-2／neu状态最客观的方法是原位杂交(FISH或者CISH)检测基因扩增水平，但是原位杂交方法试剂昂贵、条件苛刻，国内很难开展。由于基因扩增和蛋白过度表达的实际符合率达90％以上，可以使用免疫组织化学来代替原位杂交达到相应的检测目的，但是影响免疫组织化学的主客观因素很多，     

前列腺癌的细胞遗传学和分子遗传学研究

近年来,前列腺癌的细胞遗传学和分子遗传学研究进展很快,已在前列腺癌组织或衍化的癌细胞株中发现染色体结构或数目异常,DNA相对含量改变,核仁组成区AgNORs数量增强,ras、c—myc和c—erbB—2等癌基因的激活和表达增强,染色体16q和10q的等位基因缺失(即抗癌基因失活)。其中癌基因的表达与前列腺癌的病理分级,诱发和转移有关。这些研究表明一些遗传变化在前列腺癌的发展中起着重要作用。     

口腔颌面部肿瘤细胞系中PTEN抑癌基因蛋白表达的研究

目的：研究口腔颌面部恶性肿瘤细胞系内源性PTEN蛋白的表达，比较高转移性癌细胞系与亲本细胞PTEN蛋白表达的差异。方法：应用ABC免疫组化染色法，检测8例癌细胞系PTEN蛋白的表达，包括舌癌细胞系Tca8113和HSC-3，口底癌细胞系HSC-2，颊癌细胞系BcaCD885，粘液表皮样癌细胞系MEC-1，腺样囊性癌细胞系SACC83以及高转移性舌癌细胞系Tb-TLP和高转移性粘液表皮样癌细胞系M3SP2。结果：5/8例癌细胞系PTEN蛋白的表达呈阳性，PTEN蛋白定位于靠近细胞核周围的细胞质中，3/8例癌细胞系PTEN蛋白的表达呈阴性，即BcaCD885细胞及高转移性Tb-TLP和M3SP2细胞。结论：PTEN蛋白表达缺失与癌细胞转移可能有定的关系。     

重组神经生长因子受体基因在受体缺乏的神经母细胞瘤细胞系中的表达

神经母细胞瘤是儿童期的常见恶性肿瘤之一。临床上,半数以上神经母细胞瘤有明显的N-myc癌基因扩增。神经生长因子(NGF)可使某些神经母细胞瘤细胞分化成神经元样的细胞。但对有N-myc扩增的神经母细胞瘤则可能因NGF受体缺乏而无明显促分化反应。本研究运用重组DNA技术将人NGF受体基因重组到有N-myc扩增,且NGF受体表达很低的神经母细胞瘤系(IMR-32)中,经克隆化培养、筛选,建立了稳定的细胞系—IMR-32/NGFR和对照细胞系IMR-32/NEO。经用抗NGFR的单克隆抗体检测用Flow cytometry技术证实IMR-32/NGFR系中有明显的NGF受体表达,而其母系IMR-32和空病毒对照系IMR-32/NEO则无表达迹象,说明NGF受体表达在IMR-32/NGFR系中是特异的,并能同抗NGFR单克隆抗体特异结合。用Northern B10ting技术亦测得IMR-32/NGFR中NGFR的mRN A明显表达。而其母系IMR-32和对照系IMR-32/NEO则无明显表达。这说明IMR-32/NGFR系中NGFR在mRNA水平上亦是特异的。N-myc和K-ras癌基因在IMR-32、IMR-32/NEO、IMR-32/NGFR三系中无明显变化。在NGF处理后,形态上三系均无明显的分化迹象。但IMR-32/NGFR在神经原纤维轻链的表达上轻度增高。c-fos癌基因的表达见于所有三个细胞系,IMR-32/NGFR略强些。这些说明,在恢复了NGFR基因和表达之后,对N-myc和K-ra