聚乳酸及其共聚物脑靶向载药纳米粒的研究进展

目的：综述聚乳酸及其共聚物（PLA/PLGA）脑靶向载药纳米粒（NP）的研究进展。方法：查阅2005-2012年来国内外有关文献,对PLA/PLGA脑靶向载药NP的作用机制、制备方法、功能分子的连接方式、体外体内作用效果评价方法进行综述。结果与结论：受体介导入脑是目前最为成熟的脑靶向给药机制,鼻腔给药也是一种有效的入脑机制;脂溶性载药NP和水溶性载药NP的制备分别采用乳化溶剂挥发法和复乳法;而溶剂扩散法可加快微球的形成,用于制备粒径较小的NP;功能分子主要利用其上的巯基、氨基、羧基或马来酰亚胺等活性基团与PLA或PLGA对应基团进行共价结合,或利用生物素-亲和素体系脑靶向递药;体外效果评价常用大鼠脑微血管内皮细胞（BMVEC）单层培养模型及BMVEC-星形胶质细胞共培养模型;体内效果评价常用荧光显微镜和活体荧光成像、放射自显影法,前者用于考察以荧光素和香豆素等荧光染料标记的脑靶向NP,后者用于以125I、3H、14C等放射性核素标记的脑靶向NP。提高脑靶向的靶向效率、提高载药量、减少PLA/PLGA的用量、改善PLA/PLGA纳米粒体内降解性能和增加稳定性,是今后脑靶向PLA/PLGA载药NP研究的重点方向。     

紫杉醇PLA-PEG嵌段共聚物纳米粒腹腔注射的组织分布

分别以嵌段（聚乳酸-聚乙二醇）和非嵌段（聚乳酸）共聚物作为载体材料，采用乳化-液中干燥法制备包载紫杉醇的纳米粒。再以市售注射剂为对照，考察大鼠单剂量腹腔注射7．5mg／kg后，心、肝、脾、肺、肾、髂淋巴结等组织的药物分布情况。以相对摄取率Re、峰浓度比ce和靶向效率Te为指标评价制品的淋巴靶向性。结果表明，两亲性嵌段共聚物纳米粒可明显增强药物淋巴靶向性，并显著减少肝、脾等组织的分布。     

甘草酸表面修饰阿霉素壳聚糖纳米粒在小鼠体内的组织分布

目的：研究甘草酸表面修饰阿霉素壳聚糖纳米粒（GL-ADM-NPs）在小鼠体内的分布。方法：GL-ADM-NPs经小鼠尾静脉给药,采用液质联用（LC/MS/MS）法检测阿霉素在小鼠血浆、心、肝、脾、肺、肾中的浓度随时间的变化,并与游离阿霉素溶液（F-ADM）组和阿霉素壳聚糖纳米粒（ADM-NPs）组进行比较。以相对摄取率（Re）和峰浓度比（Ce）为指标评价其靶向性。结果：与F-ADM相比,ADM-NPs明显提高药物在肝脏中的浓度（Re和Ce分别为3.54和2.2） 经甘草酸修饰后GL-ADM-NPs对肝脏的靶向作用更强,Re和Ce分别达到5.83和3.42,在心和肾中药物分布显著降低,AUC分别为F-ADM的43.06%和62.58%。结论：GL-ADM-NPs改变了药物ADM的体内分布特征,具有明显的肝靶向性,并能显著降低心和肾毒性,有望成为肝癌治疗药物ADM的理想输送载体。     

冰片修饰卡马西平PLGA纳米粒的制备及其在小鼠体内的组织分布

该研究以PLGA为载体材料,采用溶剂扩散法制备了冰片修饰的卡马西平(1)纳米粒,并考察其在小鼠体内的分布情况。首先,采用Box-Behnken设计结合响应面法,以泊洛沙姆188浓度、PLGA用量、油-水相体积比、药脂质量比为自变量,以包封率、粒径为因变量进行处方优化。体外表征结果表明,照优化处方制得的冰片修饰的1纳米粒平均粒径为90～100 nm,包封率和载药量约为72%和6.7%。小鼠尾静脉注射给予自制冰片修饰的1纳米粒后,考察1在小鼠体内的分布,尤其是脑靶向性。结果表明,冰片修饰的1纳米粒显著延长了1的体内滞留时间,且冰片修饰可促进1纳米粒跨越血脑屏障,显示出冰片修饰的1纳米粒具有治疗癫痫的潜力。     

PELGE-克班宁纳米粒在家兔体内的药动学研究

目的:研究聚乙二醇-(聚乳酸-羟基乙酸)-聚乙二醇三嵌段共聚物(PELGE)-克班宁纳米粒(PELGE-Cre-NPs)在家兔体内的药动学。方法:取6只家兔,耳缘静脉注射PELGE-Cre-NPs(3.5 mg/kg),分别于给药后5、15、30、60、90、120、150、180、240、300min时,于其耳缘静脉采血1 m L。分离血浆,用乙酸乙酯萃取Cre,并采用高效液相色谱法,以盐酸维拉帕米为内标,测定Cre的血药浓度,然后采用DAS 2.0软件绘制血药浓度-时间曲线并计算药动学参数。色谱条件采用色谱柱为Agilent ZORBAX ExtendC18,流动相为甲醇-0.01%三乙胺溶液(75∶25,V/V),流速为1 m L/min,检测波长为280 nm,柱温为30℃,进样量为20μL。结果:Cre检测血药浓度的线性范围为45.0～3 600μg/L(R2=0.999 9),日内、日间精密度试验和稳定性试验的RSD均小于5%(n=6或n=12),准确度为(97.44±2.41)%～(98.45±3.87)%(n=6)。PELGE-Cre-NPs在家兔体内分布符合二室模型;...     

尼莫地平PEG-PLGA纳米粒的制备及其处方优化

目的：负载尼莫地平的聚乙二醇修饰的聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly （ethylene glycol-poly （lactin-co-glycolic acid）,PEG-PLGA）]纳米粒,并对其进行制备工艺、质量评价以及体外释放等相关性研究。方法：以PEG-PLGA为药物载体,采用乳化溶剂挥发法成功制备尼莫地平载药纳米粒。单因素实验和响应面法设计优化处方工艺,透射电子显微镜观察纳米粒形态,激光粒度仪测定其粒径和Zeta电位,HPLC法测定其包封率及载药量并考察其体外释药特性。结果：制备的尼莫地平纳米粒外观呈实心球体,大小均匀且分散性良好;平均粒径为（183.2±3.30） nm,PDI为（0.115±0.049）,Zata电位为（-11.78±2.16） mV;平均包封率为84.99%,平均载药量为2.45%;尼莫地平原料药在4 h时基本释放完全（达到95%左右）,而尼莫地平纳米粒在4 h时释放仅为43.9%,在第24 h时累计释放度达到（83.66±2.57）%。与对照组相比,制剂组释放缓慢,符合实验设计缓释的要求。结论：本实验成功制备了尼莫地平PEG-PLGA纳米粒,其体外释药具有明显缓释特征,为心脑血管疾病的治疗奠定了基础。     

纳米粒沉淀法制备阳离子载基因PLA-PEG纳米粒

目的建立纳米粒沉淀法制备阳离子PLA-PEG纳米粒的方法。方法采用单因素设计考察不同影响因素对纳米粒粒径大小的影响,在单因素考察的基础上采用正交设计优化处方,制备了粒径较小,正电荷适中的阳离子PLA-PEG纳米粒。并对纳米粒的物理性质如物理形态,平均粒径,粒度分布,Zeta电位,DNA结合率,体外细胞转染能力等进行了考察。结果采用纳米粒沉淀法,通过优化处方和工艺制得的纳米粒外观圆整,呈类球形,大小均匀,平均粒径为89.7 nm,粒径分布指数为0.185,表面荷较高的正电荷,Zeta电位为+28.9 mV,能够高效的结合DNA且能够成功的转染Hela细胞。结论优化确定了纳米粒沉淀法制备阳离子PLA-PEG纳米粒的处方和工艺,可以制备满足细胞转染要求的阳离子载基因纳米粒。     

聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚物载药纳米粒制备方法的研究进展

目的:为聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸(PEG-PLGA)嵌段共聚物载药纳米粒制备方法的进一步研究提供参考。方法:以聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚物载药纳米粒制备方法PEGPLGAPEG-PLGA等为关键词,组合查询1998年1月-2017年1月在Pub Med、Springer Link、Science Direct、中国知网、万方、维普等数据库中的相关文献,对溶剂挥发法、沉淀法、自乳化溶剂扩散法、盐析法等制备方法进行综述。结果与结论:共检索到相关文献246篇,其中有效文献28篇。虽然载药纳米粒制备方法已经解决了操作、耗能及环境污染上的一些难题,但仍然存在常使用毒性较大含氯有机溶剂和难以工业化大生产等问题。前者可通过寻找毒性较小的有机溶剂(如丙酮、乙酸乙酯)来代替和通过对PLGA结构修饰基团或合成方法的改进使其可溶于毒性较小的有机溶剂加以解决;后者可通过研发新型辅料,或是改进制备工艺(如冻干)来改善纳米粒的稳定性和研发新型生产设备来解决。     

大黄素固体脂质纳米粒在小鼠体内的组织分布研究

目的:研究大黄素(EMO)固体脂质纳米粒(SLN)在小鼠体内的组织分布情况和肝靶向性。方法:72只小鼠分为2组,分别尾ivEMO-SLN混悬液和EMO溶液,在给药0.083、0.250、0.500、1.000、2.000、6.000h时分别取样,以高效液相色谱法测定不同时间点血浆、心、肝、脾、肺、肾中EMO的浓度,计算EMO-SLN对EMO的药物总靶向效率摄取率(re)、总靶向性(Te)。结果:肝中所得r和Te值均为最高。结论:EMO-SLN具有较高的肝靶向性,且强于EMO。     

灯盏乙素-PEG-PLGA载药纳米粒的制备及质量评价

目的:制备灯盏乙素-聚乙二醇-聚乳酸/羟基乙酸共聚物(PEG-PLGA)载药纳米粒,优化其处方,并进行质量评价。方法:采用复乳-溶剂蒸发法制备灯盏乙素-PEG-PLGA载药纳米粒。以包封率为评价指标,以初乳与外水相的比例、灯盏乙素和PEG-PLGA质量浓度为因素,通过单因素试验和正交试验优化处方;测定最优处方所制纳米粒的表观形态、粒径、Zeta电位、载药量、包封率和稳定性。结果:最优处方为初乳与外水相的比例1∶15,灯盏乙素质量浓度10 mg/ml,PEG-PLGA质量浓度15 mg/ml。所制得纳米粒为圆形或椭圆形,平均粒径为(78.54±2.21)nm,Zeta电位为(-23.07±1.39)m V,载药量为(1.67±0.12)%,包封率为(45.32±1.29)%;纳米粒在4℃下保存3个月内粒径和包封率无明显变化。结论:成功制得具有较好理化性质和稳定性的灯盏乙素-PEG-PLGA纳米粒。     

Pharmacokinetic and Tissue Distribution Profile of Long Acting Tenofovir Alafenamide and Elvitegravir Loaded Nanoparticles in Humanized Mice Model

Pharmaceutical Research - Non-adherence to the antiretroviral (ARV) regimen is a critical factor in determining efficacy of ARV drugs for pre-exposure prophylaxis (PrEP). A long-acting parenteral...     

乙酰半胱氨酸纳米粒的制备及在小鼠体内的分布

以壳聚糖为载体,溶剂扩散法制备乙酰半胱氨酸纳米粒,制得的纳米粒呈大小均匀的球形,平均粒径(163.0±12.8)nm,包封率(81.2+1.2)%,载药量(28.9+0.4)%。用HPLC法测定了小鼠单剂量尾静脉注射乙酰半胱氨酸纳米粒或其注射液后各脏器(心、肝、脾、肺和肾)和血浆中的药物浓度,并以相对摄取量和靶向效率评价纳米粒的靶向性。结果表明,纳米粒明显改变了药物在小鼠体内的生物分布。与注射液组相比,纳米粒组在肝组织中乙酰半胱氨酸浓度明显提高,血浆、心和肾组织中的药物浓度显著降低。     

蟾酥固体脂质纳米粒冻干针剂小鼠体内分布的研究

分别对小鼠尾静脉注射给予蟾酥冻干固体脂质纳米粒（1-SLN）及其水溶液，采用HPLC法分别测定小鼠血浆和心、肝、脾、肺、肾、脑等各脏器中的华蟾酥毒基和脂蟾毒配基浓度，以药物靶向指数（DTI）和药物选择性指数（DSI）定量评价了1—SLN冻干针剂在小鼠体内的分布情况。结果表明，1-SLN组中肝脏的DTI值均大于1，且DSI值均大于1水溶液组的相应值，说明1-SLN具有较好的肝靶向性。     

伊曲康唑纳米粒的制备及其在小鼠体内的分布

用HPLC法测定了小鼠单剂量(20mg/kg)尾静脉注射伊曲康唑纳米粒及其市售注射剂后心、肝、脾、肺、肾、脑和血浆中的药物浓度.结果表明,伊曲康唑纳米粒在肺中的AUC为注射剂的32.94倍;在心、肾组织的蓄积量减少,在各组织中的半衰期延长,尤以肝、脾、肺为甚.说明伊曲康唑纳米粒的肺靶向性明显优于市售注射剂.     

In Vitro Antileishmanial Activity of Amphotericin B Loaded in Poly(ε-Caprolactone) Nanospheres

The activity of formulations for amphotericin B (AmB) associated with poly (ε -caprolactone) nanospheres and coated with variable amounts of a non ionic surfactant poloxamer 188, was evaluated against AmB-susceptible (WT) and AmB-resistant (AmB r) strains of Leishmania donovani amastigotes in thioglycolate-elicited peritoneal macrophages. AmB-nanospheres were more actives than free AmB only against amastigotes of wild strain. The activity was not influenced by the concentration of poloxamer 188 used to stabilize the nanospheres in spite of this surfactant was previously reported to synergy with AmB on the membrane of the resistant parasite. Similarly, this improvement was not mediated through macrophage activation. In fact, these nanoparticle formulations appeared to inhibit both NO and TNF- α production induced by the free drug. Therefore, we suggest that the association of AmB with nanospheres may improve the capability of the drug to interact with ergosterol. This hypothesis appears to be supported by the fact that nanospheres did not show any improvement of the AmB activity against the resistant strain (characterized by the absence of ergosterol).     

Enhanced Encapsulation of Amphotericin B into Liposomes by Complex Formation with Polyethylene Glycol Derivatives

Purpose. A highly efficient method was developed for the encapsulation of amphotericin B (AmB) in liposomes, and the mechanism involved was characterized. Methods. AmB was encapsulated in dipalmitoylphosphatidylcholine/cholesterol (DPPC/CH, 2:1) liposomes after complex formation with distearoyl-N-(monomethoxy poly(ethylene glycol) succinyl) phosphatidylethanolamine (DSPE-PEG). Hydration of lipids was done with 9% sucrose solution. Results. The encapsulated amount of AmB was 111 g/mg lipid, which was much higher than that obtained by the same method without DSPE-PEG (14 g/mg lipid). The amount encapsulated increased with amount of DSPE-PEG used and with PEG molecular weight. Encapsulation efficacy was also influenced by the type of PEG derivatives used and by the modification of AmB, suggesting the involvement of complex formation between AmB and DSPE-PEG. Absorption and ³¹P-NMR spectral analyses indicated that interactions between the amino and phosphate groups and between the polyene and PEG moieties in AmB and DSPE-PEG, respectively, play an important role in the complex formation. Conclusions. Complex formation of AmB with DSPE-PEG allows the highly efficient encapsulation of the drug in liposomes. This simple technique should be applicable to other hydrophobic drugs.     

Correction to: Pharmacokinetic and Tissue Distribution Profile of Long Acting Tenofovir Alafenamide and Elvitegravir Loaded Nanoparticles in Humanized Mice Model

Pharmaceutical Research - In the HELIOS trial, bendamustine/rituximab (BR) plus ibrutinib (BR-I) improved disease outcomes versus BR plus placebo in previously treated chronic lymphocytic...     

鼻腔给药NMFGF1纳米粒改善血管性痴呆小鼠认知功能障碍

目的 考察鼻腔给药包载非促分裂活性酸性成纤维细胞生长因子（non-mitogenic acid fibroblast growth factor,NMFGF1）的纳米粒（NMFGF1-NPs）对于血管性痴呆（vascular dementia,VD）小鼠认知功能改善作用及其机制。方法 应用水包水型乳化技术制备NMFGF1-NPs并进行质量表征。采用反复脑缺血再灌注法建立VD试验模型后分成假手术组、VD模型组、空白纳米粒组、NMFGF1溶液组及NMFGF1-NPs组,分别鼻腔给予相应形式药物干预。干预结束后,应用Morris水迷宫评价试验动物的学习及记忆功能,同时应用HE染色、FJB染色及Tunel凋亡染色等病理学方法评价试验动物海马神经元的形态、排列及凋亡指数（apoptosis index,AI）,另外应用ELISA及Western blotting等分子生物学方法探讨鼻腔给药NMFGF1-NPs改善VD的分子机制。结果 NMFGF1-NPs形态圆整,包封率（87.76±5.89）%。Morris水迷宫结果显示VD模型组小鼠的各项行为学指标均较假手术组有显著差异（P<0.01）,同时病理结果显示,VD模型组小鼠海马神经元CA1区域神经元排列紊乱、细胞形态结构缺失且AI较假手术组显著增加（P<0.01）,而经过鼻腔给药NMFGF1-NPs治疗组小鼠的各项行为学指标较VD模型组有显著改善,同时海马神经元细胞形态完整,排列整齐,AI指数较VD模型组及其他各个治疗干预组显著降低（P<0.01）。ELISA及Western blotting分析结果显示,鼻腔给药NMFGF1-NPs治疗组小鼠脑内MDA含量较VD模型组及其他各个治疗干预组显著下降（P<0.01）,同时SOD,NO含量及Nrf2,SOD-1,GSTO1/2表达显著增加（P<0.01）。结论 鼻腔给药NMFGF1-NPs给够通过激活Nrf2/ARE信号通路,发挥抗氧化应激损伤的作用,最终改善VD小鼠的学习及认知功能。