食源性肥胖大鼠下丘脑弓状核NPY表达上调

目的:通过观察食源性肥胖(diet-induced obese,DIO)大鼠的摄食量、体重变化和下丘脑弓状核神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)的表达,探讨NPY在大鼠发展为D IO中的作用。方法:SD大鼠给予高能饲料喂养14周后,根据体重筛选出D IO组和肥胖抵抗(diet-resistant,DR)组,记录体重和摄食量,利用免疫组织化学方法半定量分析下丘脑弓状核NPY的表达。结果:约50%的SD大鼠发展为DIO,DIO大鼠的摄食量明显增加,下丘脑弓状核N PY的表达上调,明显高于DR组(P<0.001)和对照组(P<0.05),具有显著性差异。结论:在长期高能饲料喂养下,D IO大鼠下丘脑弓状核N PY的表达上调可能是导致其摄食量和体重增加的重要原因之一。     

吴茱萸碱对大鼠下丘脑弓状核NPY蛋白表达的影响

目的:研究吴茱萸碱(Evo)对大鼠下丘脑弓状核神经肽Y(NPY)蛋白表达水平的影响。方法:选用雄性5周龄Sprague-Dawly大鼠36只,分为对照组、Evo 4mg/kg组、40mg/kg组。Evo灌胃25d后取材;采用免疫组织化学和蛋白免疫印迹的方法,观察Evo对下丘脑弓状核中NPY免疫阳性产物的表达和NPY蛋白水平的影响。结果:吴茱萸碱40mg/kg干预后,下丘脑弓状核NPY-IR阳性细胞数显著减少,同时NPY蛋白表达水平显著降低。结论:Evo可显著降低大鼠下丘脑弓状核促食欲肽NPY蛋白水平,提示下丘脑可能是Evo调节摄食行为的重要中枢。     

不同膳食对大鼠下丘脑弓状核NPY表达的影响

目的:研究不同膳食对大鼠下丘脑弓状核神经肽Y(NPY)表达的影响。方法:以高能饲料饲养大鼠建立膳食诱导肥胖(DIO)大鼠模型,采用SP免疫组织化学染色法观察大鼠下丘脑弓状核NPY蛋白的表达。结果:DIO组大鼠、饥饿组大鼠下丘脑弓状核NPY蛋白的表达明显高于对照组大鼠(P<0.01,P<0.05);DIO组大鼠与饥饿组大鼠比较,下丘脑弓状核NPY蛋白的表达无明显差别(P>0.05)。结论:禁食和高能饲料喂养均可上调大鼠下丘脑弓状核NPY的表达。     

甜味觉对大鼠弓状核NPY及FOS表达的影响

目的:观察给SD大鼠摄入蔗糖甜味觉溶液后对弓状核内NPY及FOS表达的影响。方法:给实验组SD大鼠摄入15ml蔗糖溶液,给对照组SD大鼠摄入15ml蒸馏水,2h后应用免疫组织化学方法观察弓状核内NPY及FOS表达。应用统计软件分析实验组与对照组NPY及FOS表达情况的差异性。结果:与对照组相比,给大鼠蔗糖甜味觉溶液后引起弓状核NPY及FOS表达的显著增多。结论:甜味觉食物的促食欲作用可能与其激活了弓状核内的NPY能神经元,使NPY表达上调有关。     

高脂血症对大鼠下丘脑弓状核神经肽Y免疫阳性神经元的影响

目的　观察高脂饮食对下丘脑神经肽Y(NPY)的影响 ,探讨弓状核与脂质代谢的关系。方法　采用免疫组化ABC方法 ,结合计算机图像分析系统对高脂血症大鼠下丘脑弓状核NPY免疫阳性神经元的光密度进行测定 ,并将平均光密度 (MOD)值与平均血清总胆固醇 (TC)浓度的关系作以描述。结果　血清TC :对照组 (1 2 95± 0 398)mmol/L ,高脂饮食 4周组升高为 (1 941± 0 493)mmol/L(与对照组比较 ,P <0 0 1 ) ,8周组降低为 (1 92 9± 0 51 9)mmol/L(与对照组比较 ,P <0 0 1 ) ,1 2周组降至 (1 350± 0 2 1 0 )mmol/L ,1 2周组接近于正常对照组的水平 (P >0 0 5)。NPY免疫阳性神经元的MOD ,对照组为 0 2 0 2 2± 0 0 1 0 2 ,高脂饮食4周组为 0 1 2 3 5± 0 0 36 5 ,8周组为 0 1 34 7± 0 0 2 4 8,1 2周组为 0 2 34 6± 0 0 31 6(与 4、8周比较 ,P <0 0 1 ;与对照组比较 ,P <0 0 5)。经曲线拟合后发现血清TC浓度与弓状核NPY阳性神经元MOD值呈负相关关系。结论　高脂血症可影响下丘脑弓状核神经元内NPY的表达 ,提示下丘脑弓状核可能通过其NPY免疫阳性神经元参与脂质代谢的调节     

谷氨酸钠刺激下丘脑弓状核区对大鼠血浆唾液酸水平的影响

①目的探讨弓状核（ＡＲＣ）区神经元兴奋对大鼠血浆唾液酸（ＳＡ）水平的影响。②方法紫外分光光度法，测定ＡＲＣ区注射不同浓度谷氨酸钠（Ｇｌｕ）对大鼠血浆ＳＡ水平的影响，并与对照组进行比较。③结果ＡＲＣ区注射Ｇｌｕ后，血浆ＳＡ水平较对照组明显降低（ｔ＝２．７１７～５．２０８，Ｐ均＜０．０５），且呈明显的量效依赖关系，此效应可被静脉注射多巴胺受体阻断剂（螺哌啶酮）阻断。④结论下丘脑ＡＲＣ区神经元兴奋导致血浆ＳＡ水平降低，可能与多巴胺能神经元兴奋释放多巴胺（ＤＡ）有关，且通过ＤＡ－Ｄ２受体起作用。     

谷氨酸钠刺激下丘脑弓状核区对大鼠和因浆唾液酸水平的影响

探讨弓核区神经元兴奋对大鼠血浆唾液酸水平的影响。方法，紫外分光光度法，测定ＡＲＣ区注射不同浓度谷氨酸钠对大鼠血浆ＳＡ水平的影响，并与对照组进行比较。结果ＡＲＣ区注射Ｇｌｕ后，血浆Ｓ水平较对照组明显降低，且呈明显的量效依赖关系，此效应可被静脉注射多巴胺受体阻断剂。     

大鼠脑干DVC区注射ghrelin对弓状核NPY mRNA及AgRP mRNA表达的影响

目的 探讨脑干迷走神经复合体(DVC)区微量注射ghrelin对摄食的影响及其可能机制.方法 72只雄性SD大鼠随机分成给药组和正常对照组,每组36只大鼠,行DVC区埋管手术,术后恢复7 d.7 d后给药组大鼠DVC区微量注射20 pmol的ghrelin,正常对照组大鼠DVC区微量注射等体积生理盐水.两组分别于给药后1、2、3 h取大鼠下丘脑提取RNA,应用荧光定量PCR方法检测大鼠下丘脑弓状核神经肽Y(NPY)及刺鼠色蛋白相关蛋白(AgRP)mRNA的表达情况.结果 给药组大鼠给药后1、2、3 h下丘脑NPY mRNA和AgRP mRNA的表达水平均明显高于正常对照组,差异有显著性(t=2.79～9.12,P<0.05).给药组大鼠给药后2 h下丘脑NPY mRNA和AgRP mRNA的表达水平明显高于给药后1 h及3 h组(F=16.55、10.45,q=3.89～4.45,P<0.05),但给药后1 h与3 h下丘脑NPY mRNA和AgRP mRNA的表达水平比较差异无显著性(P>0.05).结论 作用于大鼠DVC区的ghrelin可能通过下丘脑弓状核NPY、AgRP神经通路促进摄食活动.     

褪黑素对急性癫痫大鼠弓状核神经肽Y变化的影响

目的：探讨神经肽Y（NPY）在急性癫痫的变化和褪黑素（MLT）对其影响。方法：30只大鼠随机分为对照组（C）、癫痫组（E）和治疗组（T）,采用免疫组织化学（ABC法）和图像分析技术对急性癫痫大鼠弓状核进行定量研究。结果：①三组间NPY阳性反应区的面积和NPY阳性反应神经元胞体的直径无显著性差异（P＞0．05）。②E组和C组间NPY阳性反应神经元的面数密度明显增加,灰度明显下降（P＜0．05）。③T组与E组和C组间NPY阳性反应神经元的面数密度明显增加,灰度明显下降（P＜0．05）。结论：①急性癫痫大鼠弓状核神经元NPY增加。②MLT的作用可能与刺激神经元合成NPY有关。     

谷氨酸钠肥胖大鼠下丘脑腹内、外侧核胃动素的表达研究

目的 研究谷氨酸钠诱导的肥胖大鼠下丘脑腹内侧核区和腹外侧核区胃动素阳性细胞的表达情况.方法 2014年11月—2015年6月期间从山东鲁抗制药有限责任公司购买60只刚出生的雄性Wistar大鼠随机平分为实验组和对照组(各30只),在第2、4、6、8、10天分别皮下注射等量谷氨酸钠和生理盐水.大鼠饲养至90 d时,取下丘脑行免疫组化染色,观察胃动素在下丘脑腹内侧核区、腹外侧核区的表达情况.结果 实验组有29只大鼠呈肥胖状态,显示谷氨酸钠诱导大鼠有98%因能量失衡呈肥胖状态;同时免疫组化评分显示:实验组和对照组的腹内侧核区、腹外侧核区阳性细胞率和中位数分别为(2.68±1.61)和2.12、(4.79±2.92)和4.67、(1.52±1.31)和1.44、(2.14±1.13)和1.62,实验组腹内侧核和腹外侧核胃动素阳性细胞与对照组相比均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);实验组腹外侧核比腹内侧核胃动素阳性细胞增加明显,差异有统计学意义(P<0.05);对照组大鼠下丘脑腹内侧核和腹外侧核胃动素阳性细胞之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 谷氨酸钠诱导的肥胖大鼠可以引起下丘脑腹内侧核区、腹外侧核区胃动素的表达增强.     

谷氨酸钠诱导雌性大鼠肥胖后对其生殖-内分泌的影响

目的 探讨谷氨酸钠诱导雌性大鼠肥胖后对其生殖-内分泌的影响.方法 给新出生雌性Wistar大鼠皮下注射谷氨酸钠,连续5 d,以建立肥胖模型.通过持续阴道涂片确定肥胖不孕模型,动物存活至90日龄,自股动脉取血,测定血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、瘦素(leptin)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)的水平.结果 80%的注射谷氨酸钠大鼠呈能量失衡致肥胖不孕状态;血清E2、T、leptin水平较对照组明显升高(P＜0.05),FSH、LH水平较对照组明显降低(P＜0.05).结论 谷氨酸钠诱导大鼠肥胖后由于生殖内分泌改变而引起功能失调性无排卵,导致不孕.     

电针上调食源性肥胖大鼠弓状核α-MSH的表达

目的：研究电针对食源性肥胖(diet-induced obesity，DIO)大鼠体重及摄食量的影响并探讨其中枢神经化学机制。方法：通过高能饲料喂养，建立DIO大鼠模型，分为：(1)2Hz电针组，(2)100Hz电针组，(3)束缚对照组，(4)DIO组，(5)肥胖抵抗(diet resistance，DR)组，(6)普通饲料对照组。电针参数：0．5、1.0、1．5mA各10min。穴位：双侧足三里和三阴交。每周电针3次。每日记录体重及摄食量，共4周。免疫组织化学方法观察下丘脑弓状核α-黑色素细胞刺激素(α-melanocyte-stimulating hotmone，α-MSH)免疫阳性细胞数变化。结果：与DR组和普通饲料对照组相比，DIO组的体重及摄食量增加，而α-MSH免疫阳性细胞数则明显降低。与束缚对照组和DIO组相比，2Hz电针组、100Hz电针组的体重和摄食量明显降低，弓状核内α-MSH免疫阳性细胞数明显增多。结论：高能食物饲养导致的肥胖可能与下丘脑弓状核α-MSH水平降低有关。电针治疗肥胖的机制之一，可能是通过刺激下丘脑弓状核前阿黑皮素(pro-opiomelanocortin．POMC)神经元释放α-MSH，抑制摄食，降低体重。     

神经肽Y拮抗去甲肾上腺素在杏仁核的心血管效应

为了解杏仁内侧核内神经肽Ｙ（ＮＰＹ）和去甲肾上腺素（ＮＡ）的相互关系，向杏仁内侧核（ＭＡＮ）内微量注射ＮＰＹ，或微电泳ＮＰＹ，观察神经元单位放电和测量动脉血压，并在血压改变的条件下测量血浆中ＮＡ含量。结果发现，ＮＰＹ可以对抗ＮＡ的升压作用，微电泳ＮＰＹ到ＭＡＮ也得到相同结论。向ＭＡＮ注入ＮＰＹ后血浆中ＮＡ的含量明显减少，这可能是ＮＰＹ拮抗ＮＡ作用的原因之一。     

大白鼠下丘脑室旁核CRF免疫反应神经元与NPY、ACTH、SOM神经元间的相互关系

本研究应用双抗原免疫细胞化学染色方法观察了大白鼠下丘脑室旁核(PVN)含促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)神经元的分布,以及与神经肽(NPY)、ACTH和生长抑素(SOM)等肽能神经元间的关系。提示这些神经肽系统可在PVN选择性地刺激CRF神经元。     

细菌感染后大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素样和β－内啡肽样免疫反应阳性细胞的相应变化

采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠，雌雄兼用，老龄鼠（２０个月）９只，壮龄鼠（８个月）１０只。经腹膜腔注入致病量福氏痢疾杆菌Ｆ１ｂ（活菌４９２×１０４·ｇ－１），２４ｈ后，处死取材，应用石蜡切片，ＡＢＣ法染色，ＤＡＢ显色。光镜观察下丘脑弓状核促肾上腺皮质激素样和β－内啡肽样免疫阳性细胞形态、分布和计数。采用图像分析仪测其灰度值。结果发现多数感染鼠第三脑室室周层出现许多β－内啡肽样免疫反应强阳性细胞。弓状核促肾上腺皮质激素样免疫阳性细胞数量老龄组显著低于壮龄组；β－内啡肽样免疫阳性细胞数量老、壮龄组相近。两类阳性细胞的灰度值老龄组均高于壮龄组。与正常大鼠相比较，感染老龄鼠弓状核促肾上腺皮质激素免疫阳性细胞灰度值显著上升，壮龄鼠则下降；感染组老、壮龄鼠弓状核β－内啡肽免疫阳性细胞灰度值均高于正常组之相应龄鼠。提示：促肾上腺皮质激素和β－内啡肽与抗感染密切相关。     

模拟不同海拔高度和缺氧时间对大鼠下丘脑中神经肽Y mRNA表达的影响

目的探讨急性缺氧对大鼠下丘脑组织神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)mRNA表达的影响.方法 78只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和缺氧组.缺氧组大鼠被置于低压氧舱内模拟高原急性缺氧,其海拔高度分别为3 000、4 000、5 000、6 000 m,同一海拔高度观察的时相点分别为1、2、3 d.采用RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)方法,检测急性缺氧条件下大鼠下丘脑组织中NPY mRNA的表达.结果①缺氧组和对照组大鼠下丘脑组织中均存在NPY mRNA的表达;②在相同缺氧时间下,大鼠下丘脑组织中NPY的mRNA表达随着海拔高度的上升呈逐渐下降的趋势;③在相同海拔高度下,大鼠下丘脑组织中NPY的mRNA表达随着缺氧时间的增加呈逐渐下降的趋势.结论急性缺氧可降低大鼠下丘脑组织中NPYmRNA的表达.     

NKx2.5基因在孕鼠肥胖致胚胎心脏畸形中的表达及意义

目的探讨NKx2.5基因mRNA及其蛋白在肥胖孕鼠胚胎畸形心脏中的表达水平及相关意义。方法 3周龄SPF级SD雌鼠100只,随机分为两组:正常组(40只)给予基础饲料;高脂组(60只)给予高脂饲料。8周后,以高脂组体重超过正常组平均体重的20%且血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量显著高于正常组的作为肥胖雌鼠,随机抽取20只肥胖雌鼠和正常雌鼠分别与雄鼠交配获取肥胖组孕鼠和对照组孕鼠。取孕13、15、17、19 d胚胎鼠心脏,通过切片进行组织学观察以确定心脏畸形情况,采用RT-PCR法检测NKx2.5基因的mRNA表达,采用Western blot方法检测NKx2.5蛋白表达。结果肥胖组孕鼠胚胎心脏畸形率显著高于对照组孕鼠(P<0.01);肥胖组孕鼠各孕龄胚胎畸形心脏NKx2.5基因mRNA及其蛋白表达比对照组孕鼠正常胚胎显著降低(P<0.05)。结论孕鼠肥胖导致胚胎心脏畸形率升高;孕鼠肥胖抑制胚胎心脏NKx2.5基因和蛋白表达,可能导致心脏发生发育缺陷从而造成先天性心脏畸形。     

电针对代谢综合征大鼠下丘脑nNOS、NPY表达的影响

目的:观察电针对代谢综合征大鼠下丘脑神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、神经肽Y(NPY)表达的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组。采用高脂、高糖饲料喂养,制备代谢综合征模型大鼠。电针组取足三里和中脘穴给予电针刺激,频率2 Hz,持续30 min,每天1次,连续14 d。观察大鼠血糖、甘油三酯和胆固醇的变化,免疫组织化学方法检测下丘脑nNOS、NPY的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血糖、甘油三酯和胆固醇增高(P<0.05),与模型组比较,电针组大鼠血糖、甘油三酯和胆固醇降低(P<0.05);与正常组比较,模型组大鼠下丘脑室旁核nNOS、弓状核NPY免疫阳性细胞数均增加(P<0.05),平均灰度值降低(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠下丘脑室旁核nNOS、弓状核NPY免疫阳性细胞数均减少(P<0.05),平均灰度值增高(P<0.05)。结论:电针对代谢综合征大鼠有治疗作用,可能与其下调下丘脑室旁核nNOS、弓状核NPY的过表达有关。