艾灸对血管性痴呆大鼠海马神经营养因子及Notch信号通路表达的影响

目的:观察艾灸对血管性痴呆(VD)大鼠海马神经营养因子及Notch通路表达的影响,探讨艾灸治疗VD的作用机制。方法:SD大鼠随机分成假手术组、模型组、西药组、艾灸组,每组15只。采用双侧颈总动脉缺血再灌注法复制大鼠VD模型。艾灸组给予悬灸"命门""大椎""关元",每次15min,每日1次,每周治疗6d,治疗4周。西药组给予尼莫地平灌胃,每日1次,治疗4周。Morris水迷宫实验测定大鼠学习与记忆能力,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测大鼠大脑的梗死面积,HE染色法检测大鼠脑组织病理形态,实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组大鼠海马胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、Notch 1、碱性螺旋-环-螺旋转录因子3(Hes 3)mRNA和蛋白表达情况。结果:模型组水迷宫实验逃避潜伏期较假手术组延长(P0.05);治疗后,艾灸组和西药组逃避潜伏期较模型组明显缩短(P0.05)。TTC染色结果显示,模型组颜色较假手术组变浅,白色区域多;西药组、艾灸组白色区域较模型组减少。HE染色结果显示,模型组大鼠海马区神经元数量较假手术组明显减少,深染细胞排列紊乱,可见坏死的神经元;西药组、艾灸组细胞水肿较轻,细胞形态接近正常,细胞数量增加。模型组海马组织中BDNF、NGF、GFAP、Hes 3、Notch 1mRNA及蛋白表达均较假手术组明显升高(P0.05,P0.01);与模型组相比,艾灸组BDNF、NGF、GFAP、Hes 3、Notch 1 mRNA及蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01),西药组NGF、GFAP mRNA及蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01)。与西药组比较,艾灸组海马组织中GFAP、Hes 3、Notch 1mRNA表达明显升高(P0.05,P0.01)。结论:艾灸可以改善痴呆大鼠记忆和认知能力,调节神经营养因子表达,可能与调节Notch信号通路有关。     

艾灸对血管性痴呆大鼠海马炎性因子及微管相关蛋白表达的影响

目的:观察艾灸对血管性痴呆(VD)大鼠炎性因子及神经元再生标志物微管相关蛋白(DCX)表达的影响,探讨艾灸抑制炎性反应,促进神经元修复,改善VD的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、艾灸组、西药组,每组15只。用双侧颈总动脉缺血再灌注法建立VD大鼠模型。艾灸组给予悬灸"关元""命门""大椎"治疗,每穴15 min,每日1次,每周休息1 d,连续治疗4周;西药组给予尼莫地平灌胃治疗,每日3次,连续治疗4周。应用Morris水迷宫实验检测大鼠逃避潜伏期,HE染色法检测大鼠海马组织病理形态,免疫荧光双标记法检测大鼠海马DG区DCX与NeuN共表达强度,用免疫组织化学法检测DG区DCX阳性表达,Western blot法检测大鼠海马组织DCX、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、髓过氧化物酶(MPO)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达。结果:造模后模型组大鼠逃避潜伏期较正常组与假手术组延长(P0.01),治疗后艾灸组与西药组大鼠逃避潜伏期较模型组明显缩短(P0.01,P0.05)。模型组海马组织神经元较正常组、假手术组排列紊乱,可见大量坏死神经元及少量淋巴细胞浸润;艾灸组与西药组细胞形态接近正常。免疫荧光双标记检测显示,与正常组、假手术组比较,模型组大鼠DCX/NeuN共表达细胞数显著增加(P0.01);与模型组比较,艾灸组与西药组DCX/NeuN共表达细胞数均显著增加(P0.05,P0.01),艾灸组DCX/NeuN共表达细胞少于西药组(P0.05)。免疫组织化学染色结果显示,模型组DCX阳性表达高于正常组与假手术组(P0.01,P0.05),艾灸组、西药组高于模型组(P0.01),艾灸组略低于西药组(P0.05)。模型组海马组织促炎因子TNF-α、 MPO、NF-κB p65、IL-6、IL-1β及DCX蛋白相对表达量明显高于正常组和假手术组(P0.01);与模型组比较,艾灸组和西药组大鼠各炎性因子表达明显下降(P0.01),DCX相对表达量显著增加(P0.01);与西药组比较,艾灸组大鼠海马组织中促炎因子表达下降(P0.05,P0.01),DCX相对表达量下降(P0.01)。结论:艾灸可通过抑制炎性损伤,促进神经细胞修复再生,改善VD大鼠记忆与学习能力。     

针刺对抑郁模型大鼠皮层及海马脑源性神经营养因子基因和蛋白表达的影响

目的:观察针刺对慢性应激抑郁模型大鼠额叶皮层和海马脑源性神经营养因子(BDNF)基因和蛋白表达的影响,初步探讨针刺治疗抑郁症的机制。方法:将24只SD大鼠随机分为4组:空白组、空白+针刺组、模型组、模型+针刺组,每组6只。采用孤养结合慢性应激的方法造模。针刺干预选用"百会"透刺"印堂"穴,直刺单侧"内关"穴,留针20min,隔日1次。采用实时荧光定量PCR方法检测大鼠额叶皮层和海马BDNF mRNA表达,免疫印迹技术检测大鼠额叶皮层和海马BDNF蛋白表达水平。结果:与空白组相比,模型组大鼠额叶皮层、海马BDNF mRNA与蛋白表达水平明显下降(P<0.01,P<0.05);空白+针刺组大鼠额叶皮层、海马BDNF mRNA与蛋白表达水平无显著性变化(均P>0.05)。与模型组相比,模型+针刺组大鼠额叶皮层和海马BDNF mRNA与蛋白表达水平均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:慢性应激抑郁模型大鼠额叶皮层和海马内BDNF含量减少,针刺治疗可以上调额叶皮层和海马区BDNF的表达水平,这可能是针刺发挥抗抑郁治疗作用的途径之一。     

银杏叶提取物对衰老大鼠前额叶皮层和海马炎性细胞因子及胶质细胞超微结构的影响

目的 探讨银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract 50,GBE50)对衰老模型大鼠前额叶皮层和海马炎性细胞因子以及胶质细胞损伤的作用及可能的机制。方法 45只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（12只）、模型组（11只）、GBE50低剂量组（10只）和GBE50高剂量组（12只）。采用D-半乳糖腹腔注射42天的方法建立衰老大鼠模型;造模第22天开始,GBE50低、高剂量组分别给予GBE50 75、150mg/(kg·d)灌胃给药,持续21天。用药结束后采用放射免疫分析法和实时荧光定量聚合酶链反应检测各组大鼠前额叶皮层和海马IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白含量和mRNA表达;透射电镜观察海马CA1区胶质细胞的超微结构。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠前额叶皮层和海马IL-1β、TNF-α蛋白含量及mRNA表达均明显升高(P<0.05,P<0.01),海马IL-6蛋白含量明显降低(P<0.01)。与模型组比较,GBE50低、高剂量组前额叶皮层和海马IL-1β蛋白含量及mRNA表达明显下调;GBE50低、高剂量组前额叶皮层和低剂量组海马TNF-α蛋白含量明显下调(P<0.05,P<0.01);GBE50低剂量组前额叶皮层和GBE50高剂量组海马IL-6蛋白含量明显上调,GBE50低、高剂量组前额叶皮层IL-6 mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。GBE50低、高剂量对大鼠海马CA1区胶质细胞超微结构的损伤具有明显恢复作用。结论 GBE50对衰老大鼠神经炎症反应具有抑制作用,其机制可能与其对前额叶皮层和海马细胞因子、胶质细胞超微结构有不同程度的调节作用有关。     

艾灸对疲劳大鼠额叶皮层白细胞介素-6/信号转导及转录激活因子3信号通路的影响

目的:观察艾灸对疲劳大鼠额叶皮层白细胞介素-6(IL-6)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响,揭示艾灸缓解疲劳的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组,每组7只。采用21 d负重力竭游泳法制备疲劳大鼠模型。艾灸组在造模的同时,采用自贴式小艾炷艾灸大鼠双侧"足三里"穴,每穴各灸3壮,隔日1次,共11次。ELISA法检测大鼠额叶皮层IL-6的含量,Western blot法检测大鼠额叶皮层JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3及磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白的表达。结果:造模第21天,艾灸组力竭游泳时间较模型组显著延长(P0.01)。与正常组比较,模型组额叶皮层IL-6含量、p-STAT3蛋白表达及p-STAT3/STAT3显著升高(P0.01);与模型组比较,艾灸组额叶皮层IL-6含量、p-STAT3蛋白表达及p-STAT3/STAT3显著降低(P0.05)。各组之间额叶皮层JAK2、p-JAK2、STAT3蛋白表达及p-JAK2/JAK2比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:艾灸可能通过抑制IL-6/STAT3信号通路活化,减轻炎性损伤,从而缓解疲劳。     

益智汤对APP695转基因小鼠行为学及脑组织LRP-1和RAGE表达的影响

目的:观察益智汤对淀粉样蛋白前体蛋白(APP)695转基因小鼠行为学及脑组织低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP-1)和高糖基化终产物受体(RAGE)表达的影响,探讨益智汤治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:13月龄APP695转基因小鼠随机分为模型组、益智汤组、同月龄同背景转基因阴性小鼠正常组。益智汤组小鼠每天根据体质量以益智汤(1mL/100g)灌胃,模型组和正常组给予等体积蒸馏水。中药治疗3个月后,使用电迷宫检测各组小鼠学习记忆能力,使用免疫组化和Western Blot技术观察各组小鼠大脑LRP-1和RAGE的表达情况。结果:电迷宫检测发现模型组小鼠学习记忆能力低于正常组(P0.01),益智汤组小鼠学习记忆能力较模型组小鼠明显改善(P0.01)。免疫组化和Western Blot结果提示:与正常组相比,模型组小鼠脑组织LRP-1的表达降低,RAGE的表达增加(P0.01);益智汤治疗90d后,与模型组相比,益智汤组小鼠脑组织各LRP-1的表达增强,RAGE的表达降低(P0.05)。结论:APP695转基因小鼠脑组织LRP-1和RAGE的表达改变,益智汤通过调整LRP-1和RAGE的表达来改善其学习记忆能力。     

艾灸督脉对阿尔茨海默病转基因小鼠自噬水平及学习记忆能力的影响

目的:通过观察艾灸督脉对APPswe/PS1de9(APP/PS1)双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠大脑皮层和海马自噬功能和β-淀粉样蛋白(Aβ)表达的影响,探讨艾灸督脉改善AD小鼠认知功能的作用机制。方法:AD小鼠随机分为模型组、艾灸组、西药Ⅰ组、西药Ⅱ组,同龄同背景C57BL/6J雄性小鼠作为正常组,每组10只。艾灸组小鼠隔附子饼灸"百会",温和灸"风府""大椎",每次20min,1次/d,治疗2周;西药Ⅰ组腹腔注射雷帕霉素,2mg·kg-1·d-1,治疗2周;西药Ⅱ组在艾灸治疗的同时腹腔注射3-甲基腺嘌呤,1.5mg·kg-1·d-1,治疗2周。各组小鼠分别于治疗前后行Morris水迷宫行为学检测。治疗结束后,用透射电镜观察小鼠大脑海马中自噬体的形成,免疫组织化学法检测小鼠皮层和海马区Aβ1-42的表达水平,Western blot法检测小鼠海马微管相关蛋白轻链3(LC3)、sequestosome-1(SQSTM1/p62)、磷酸化核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(p-P70S6K)蛋白的表达水平。结果:模型组小鼠水迷宫实验逃避潜伏期较正常组延长(P0.01);艾灸组和西药Ⅰ组与模型组比较,逃避潜伏期明显缩短(P0.05)。透射电镜结果显示,模型组海马区神经元出现变形、不规则或萎缩,核膜粗糙不完整、双层结构模糊,胞质内自噬泡减少;艾灸组神经元仍有部分不规则变形、萎缩,胞质内可见自噬泡。免疫组织化学结果显示,与正常组比较,模型组大脑皮层和海马区Aβ1-42阳性细胞表达增多(P0.01),并可见较多的老年斑;与模型组比较,艾灸组和西药Ⅰ组大脑皮层和海马区Aβ1-42阳性细胞表达减少(P0.01)。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组海马区中LC3-Ⅰ、p62、p-P70S6K蛋白表达水平明显增高(P0.01),LC3-Ⅱ蛋白表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ明显降低(P0.01);与模型组比较,艾灸组、西药Ⅰ组海马区中LC3-Ⅰ、p62、p-P70S6K蛋白表达水平明显降低(P0.01),LC3-Ⅱ蛋白表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ明显升高(P0.01)。结论:艾灸督脉改善AD转基因小鼠学习记忆能力/认知功能的作用,可能与上调细胞自噬水平,加速Aβ1-42清除,进而减少Aβ1-42沉积导致的神经细胞毒性损伤有关。     

针刺干预对慢性束缚应激模型大鼠海马和额叶皮层γ-氨基丁酸A受体和B受体表达相关性研究

目的通过观察针刺对慢性束缚应激抑郁模型大鼠海马和额叶皮层γ-氨基丁酸A受体和B受体(γ-aminobuty ric acid A receptor and B receptor,GABAAR、GABABR)表达的影响,旨在深入揭示针刺干预抑郁状态可能存在的特殊机制和作用途径,为针刺抗抑郁之机制研究作出补充,为临床针刺治疗抑郁症提供实验依据。方法将24只SD大鼠采用随机数表法分为空白组、模型组、模型+针刺组、模型+氟西汀组,通过慢性束缚应激结合孤养的方式建立心理应激模型,针刺干预选取"百会"(GV20)、"印堂"(GV29)、双侧"三阴交"穴(SP6),平刺进针,深度0.5~1 cm,每次20分钟,每日1次,持续28天。采用体重和糖水实验评价模型大鼠行为学改变情况,运用蛋白质印迹法(Western Blot)检测海马和额叶皮层组织GABAAR和GABABR的蛋白表达水平。结果 (1)与空白组相比,模型组大鼠体重增长值以及糖水偏爱明显降低(P0.01);模型组大鼠海马和额叶皮层中GABAAR和GABABR蛋白含量明显降低(P0.01);(2)与模型组相比,针刺组大鼠体重增长值和糖水偏爱均明显升高(P0.01),同时上调海马中GABAAR蛋白含量及额叶皮层GABAAR和GABABR蛋白含量均明显升高(P0.05,P0.01,P0.01)。结论针刺可提高大鼠海马GABAAR和额叶皮层GABAAR,GABABR含量,逆转慢性束缚应激大鼠抑郁状态,提示这可能是针刺抗抑郁作用机制。     

艾灸“足三里”对疲劳模型大鼠海马炎症因子及小胶质细胞活化的影响

目的探讨艾灸足三里治疗疲劳的可能作用机制。方法 24只SD大鼠随机分为正常组、模型组和艾灸组,每组8只。模型组和艾灸组大鼠以慢性负重力竭游泳21天建立疲劳大鼠模型。艾灸组在造模同时艾灸大鼠双侧"足三里",隔日1次,共11次;正常组和模型组不予处理。干预前后比较各组大鼠力竭游泳时间。干预后观察各组大鼠旷场实验行为,采用实时荧光定量PCR法检测海马白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6 (IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA表达,采用免疫组化法检测海马(CA1区、CA3区)小胶质细胞标记物离子钙接头蛋白1 (Iba-1)表达。结果干预后艾灸组力竭游泳时间为(658. 00±250. 76) s,较模型组(263. 38±105. 87) s显著延长(P 0. 01)。各组大鼠旷场实验的水平移动距离、垂直移动距离差异均无统计学意义(P 0. 05)。与正常组比较,模型组大鼠海马IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达及Iba-1表达升高(P 0. 01);与模型组比较,艾灸组大鼠海马IL-6 mRNA表达及Iba-1表达降低(P 0. 05或P 0. 01)。结论艾灸"足三里"可改善大鼠运动性疲劳,其机制可能与抑制海马小胶质细胞的活化和炎症因子有关。     

松果菊苷对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马组织BDNF、TrkB表达的影响

目的通过建立血管性痴呆(VD)大鼠模型,观察松果菊苷(ECH)对VD大鼠学习记忆及海马组织脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶B(TrkB)表达的影响。方法取SD大鼠随机分为假手术组、模型组和ECH组(30 mg·kg~(-1)),每组30只。采用永久性结扎双侧颈总动脉建立大鼠VD模型,ECH组给予ECH治疗4周,采用Morris水迷宫检测学习记忆能力,处死大鼠取脑,分离皮层与海马组织,HE染色观察脑组织神经元损伤。RT-PCR法测定海马组织BDNF、TrkB mRNA表达,Western blot法检测BDNF、TrkB、AKT蛋白表达水平,免疫组化法测定N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数降低(P0.05),脑组织皮质及海马组织神经元损伤明显,海马组织BDNF、TrkB mRNA表达及BDNF、TrkB、AKT、NMDAR蛋白表达低于假手术组(P0.05);与模型组比较,ECH组大鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加(P0.05),脑组织皮质及海马组织神经元损伤明显改善,海马组织BDNF、TrkB的mRNA表达及BDNF、TrkB、AKT、NMDAR蛋白表达明显高于模型组(P0.05)。结论松果菊苷可能通过上调VD大鼠海马区BDNF、TrkB、AKT、NMDAR表达,减轻VD大鼠神经元缺血损伤,改善学习记忆能力。     

温阳补肾灸对血管性痴呆大鼠NF-κB信号通路的影响（英文）

目的:观察温阳补肾灸对血管性痴呆(VD)大鼠行为学、海马IL-1β、TNF-α及NF-κB相关基因与蛋白表达的影响,探讨温阳补肾灸抑制VD炎性反应的机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、艾灸组、西药组,每组10只。采用双侧颈总动脉缺血再灌注法制造VD大鼠模型。造模后,艾灸组大鼠悬灸"大椎""命门""关元",每次15 min,每日一次,连续治疗4周;西药组大鼠用尼莫地平灌胃(2 mg·kg~(-1)·d~(-1))连续治疗4周。运用Morris水迷宫测试对各组大鼠进行行为学检测。用HE染色观察其组织病理学改变。运用RT-qPCR法和Westernblot法检测海马IL-1β、TNF-α及NF-κB相关蛋白与基因的表达。结果:造模后手术组大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期较假手术组明显延长(P0.05)。HE染色显示模型组神经元细胞排列松散,细胞膜模糊,细胞质不均匀,核固缩,坏死量增多,炎细胞显著增加。与模型组相比,艾灸组与西药组炎细胞数目明显减少,神经元坏死减少。治疗后,与模型组比较,艾灸组、西药组大鼠海马组织TNF-α、p-IκB、NF-κBp65蛋白表达量显著降低(P0.05);与模型组比较,艾灸组、西药组大鼠海马组织IL-1β、TNF-α、NF-κBp65 mRNA表达显著降低(P0.05)。结论:温阳补肾灸可能通过降低脑内IL-1β、TNF-α及NF-κB相关基因的表达水平,抑制NF-κB信号通路,降低炎性反应,以达到治疗VD的目的。     

艾灸预处理对阿尔茨海默病模型大鼠海马CA1区NGF及其受体TrkA表达的影响

目的 探讨艾灸预处理防治阿尔茨海默病(AD)的作用机制.方法 健康雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、假手术组、模型组和预艾灸组.双侧海马一次性注射聚集态Aβ25-35制作AD模型,艾灸"百会"、"肾俞"、"足三里"进行防治,免疫组化SP法观察大鼠海马CA1区NGF及其受体TrkA的表达及艾灸干预的影响.结果 与正常组及假手术组比较,模型组大鼠海马CA1区NGF及TrkA的表达明显下降,表现为阳性神经元平均灰度值明显上升(P<0.01);与模型组比较,预艾灸组大鼠海马CA1区NGF及TrkA的表达明显增加,表现为阳性神经元平均灰度值明显下降(P<0.01).结论 预艾灸治疗可显著增加海马CA1区NGF及TrkA的表达,从而改善脑内神经元的损伤,起到保护脑细胞的作用.     

艾灸对APP/PS1小鼠海马及前额叶皮质线粒体嵴结构蛋白MIC10、MIC60的影响

目的:观察艾灸对APP/PS1双转基因小鼠海马及前额叶皮质线粒体嵴结构蛋白MIC10、MIC60的改善作用,探讨艾灸保护线粒体嵴结构,改善阿尔茨海默病(AD)等神经退行性病变小鼠脑区线粒体能量代谢的相关机制.方法:将6月龄APP/PS1小鼠随机分为模型组、艾灸组,同月龄野生型C57BL/6J小鼠设为正常对照组.艾灸组施...     

艾灸督脉组穴对血管性痴呆大鼠海马CA1区肌醇需要酶1/X-盒连接蛋白1通路的影响

目的：观察艾灸督脉组穴对血管性痴呆（VD）大鼠海马CA1区肌醇需要酶1(IRE1)/X-盒连接蛋白1(XBP1)通路的影响，探讨艾灸治疗VD的作用机制。方法：将雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、艾灸组和西药组，每组12只。采用双侧颈总动脉永久结扎法复制VD模型。艾灸组取“百会”“大椎”“风府”温和灸，20 min/次，1次/d，干预6 d休息1 d，治疗4周。西药组给予尼莫地平2 mg·kg-1·d-1分3次灌胃，连续4周。采用Morris水迷宫实验检测造模前后及干预后大鼠的学习记忆能力，TUNEL染色法检测海马CA1区神经细胞凋亡率，Western blot法和实时荧光定量PCR法检测海马CA1区IRE1、XBP1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白及mRNA的表达水平。结果：与假手术组比较，模型组大鼠平均逃避潜伏期明显延长（P<0.01），穿越原平台次数明显减少（P<0.01），海马CA1区神经细胞凋亡率明显升高（P<0.01）,IRE1、XBP1、Bax蛋白和mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,Bc...     

电针井穴对血管性痴呆大鼠海马CA1区ERK表达的影响

目的研究电针井穴(中冲、涌泉)对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力及海马CA1区细胞外调节蛋白激酶(ERK)表达的影响。方法采用4-VO法制备VD大鼠模型。随机分为假手术组、模型组、药物组、电针组,每组各8只,通过跳台试验检测各组大鼠的学习记忆能力,采用免疫组化的方法观察各组大鼠海马CA1区ERK表达的变化。结果模型组大鼠学习记忆能力低于假手术组(P0.01),电针组与药物组学习记忆能力明显优于模型组(P0.01),但不及假手术组(P0.05),电针组和药物组无差异(P0.05);ERK的表达模型组显著低于假手术组(P0.01)结论电针井穴可能通过增加VD大鼠海马CA1区ERK的表达,保护海马神经元,改善大鼠学习记忆能力。     

脑通胶囊对VD大鼠海马NMDA受体 mRNA表达及锥体细胞的影响

目的:观察脑通胶囊对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆、海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体及锥体细胞的影响.方法:随机抽取大鼠19只作为假手术组,其余采用改良的四血管法(4-VO)制备VD模型并随机分为模型组、尼莫地平组( 12 mg·kg-1·d-1)、脑通胶囊高剂量组(1 200 mg· kg-1·d-1)、脑通胶囊中剂量组(600 mg·kg-1·d-1)、脑通胶囊低剂量组(300mg·kg-1·d-1).Morris水迷宫测定各组大鼠学习记忆能力,实时荧光定量PCR检测NMDA受体1亚基和2B亚基mRNA的表达情况,光镜观察海马CA1区锥体细胞形态及数量变化.结果:与模型组比较,脑通胶囊高、中剂量组逃避潜伏期缩短(P＜0.01),穿越原平台次数增加(P＜0.01,P＜0.05),NMDA受体1亚基mRNA表达降低(P＜0.01),2B亚基mRNA表达升高(P＜0.01,P＜0.05);海马CA1区锥体细胞形态未见明显病变现象,锥体细胞数量增多,锥体细胞丢失比率减少.与尼莫地平组比较,脑通胶囊高、中剂量组穿越原平台次数增加(P＜0.01),NMDA受体1亚基mRNA相对表达量降低(P＜0.01),高剂量组NMDA受体2B亚基mRNA相对表达量增加(P＜0.05),CA1区锥体细胞增多(P＜0.01).结论:脑通胶囊可降低海马NMDA受体1亚基mRNA的表达,提高2B亚基mRNA的表达,减轻海马CA1区锥体细胞损伤,减少锥体细胞丢失比率,从而改善VD大鼠学习记忆能力,这可能是其治疗VD的作用机制之一.     

埋线联合艾灸对溃疡性结肠炎活动期大鼠结肠黏膜Notch信号通路的调控作用

目的:观察穴位埋线联合艾灸对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜组织Notch受体1及靶基因Hes 1、Math 1表达的影响,从Notch信号通路角度探讨其治疗UC的机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、埋线+艾灸组、埋线组、艾灸组,每组6只。采用5%三硝基苯磺酸+50%乙醇混合溶液灌肠法复制UC模型。模型成功次日开始治疗,穴位取"上巨虚""天枢""大肠俞"。艾灸组艾条温和灸10 min, 1次/d,共14次。埋线组用简易埋线针进行穴位埋线,1次/周,共2次。埋线+艾灸组于艾灸后6 h埋线。HE染色法观察结肠黏膜组织形态变化;q-PCR法和Western blot法检测结肠黏膜组织Notch 1、Hes 1和Math 1 mRNA及蛋白表达。结果:正常组大鼠结肠上皮完整、结构清晰,杯状细胞丰富,腺管结构正常。模型组大鼠结肠黏膜结构模糊,上皮大量破损、脱落,杯状细胞缺失,腺管破坏,大量炎性细胞浸润,各治疗组较模型组结肠损伤有不同程度改善,埋线+艾灸组最为明显。与正常组比较,模型组结肠黏膜组织Notch 1、Hes 1 mRNA及蛋白表达水平升高(P0.01),Math 1 mRNA及蛋白表达水平降低(P0.01);与模型组比较,各治疗组结肠黏膜组织Notch 1、Hes 1 mRNA及蛋白表达水平降低(P0.01,P0.05),埋线+艾灸组、埋线组Math 1 mRNA表达水平升高(P0.01),各治疗组结肠黏膜组织Math 1蛋白表达水平升高(P0.01)。埋线+艾灸组结肠黏膜组织Notch 1、Hes 1 mRNA及蛋白表达水平低于埋线组、艾灸组(P0.01,P0.05),Math 1 mRNA表达水平高于艾灸组(P0.01),Math 1蛋白表达水平高于埋线组、艾灸组(P0.01)。结论:穴位埋线+艾灸对UC大鼠结肠损伤修复具有促进作用,其可能通过降低结肠黏膜组织Notch 1、Hes 1表达水平,上调Math 1表达水平,抑制Notch信号通路的过度活化,从而调节结肠上皮分泌细胞系和吸收细胞系间分化的平衡而起效。     

补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马BDNF mRNA及受体TrkB mRNA表达的影响

目的探讨补肾活血方对血管性痴呆(VD)大鼠脑海马神经元保护机制。方法 70只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾活血高剂量组、补肾活血低剂量组、尼莫地平对照组,每组14只,采用两血管阻断法制备大鼠VD模型,补肾活血高剂量组、低剂量组分别以10.14、5.07 g生药/kg灌服补肾活血方,尼莫地平对照组以11.06 mg/kg灌服尼莫地平,给药30天后,检测各组大鼠水迷宫法行为学、脑海马神经元超微结构及海马组织BDNF mRNA和Trk B mRNA蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠空间学习记忆能力与探索能力下降,表现为逃避潜伏期明显延长,穿越原平台次数及在原平台停留时间均明显减少(P0.01),海马神经元BDNF mRNA和Tr KB mRNA及蛋白表达下降(P0.05,P0.01),脑海马神经元超微结构明显受损;与模型组比较,补肾活血高、低剂量组大鼠空间学习记忆能力与探索能力明显改善,表现为逃避潜伏期明显缩短,穿越原平台次数及在原平台停留时间均明显增加(P0.05,P0.01),海马神经元BDNF mRNA及受体Trk B mRNA及蛋白表达升高(P0.05,P0.01),改善脑海马神经元超微结构。结论补肾活血方可提高脑海马神经元BDNF及受体Trk B表达,保护脑海马神经元,改善VD大鼠学习与记忆能力。     

艾灸对疲劳大鼠外周及中枢细胞因子的影响

目的:观察艾灸"足三里"穴对疲劳大鼠外周和中枢白细胞介素(IL)-6、IL-10及IL-10/IL-6的影响,探讨艾灸缓解疲劳的调节机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组,每组7只。以21 d负重力竭游泳法制备疲劳大鼠模型。艾灸组大鼠造模第1天用小艾炷灸双侧"足三里",隔日治疗1次,每次每穴艾灸3壮,治疗11次。观测大鼠一般状态和体质量,用酶联免疫吸附法检测血清、腓肠肌与额叶皮层的IL-6、IL-10水平,并计算IL-10/IL-6比值。结果:造模第7、14、21天,模型组体质量较正常组显著降低(P0.05)。造模第14、21天,艾灸组体质量较模型组显著增加(P0.05)。与正常组比较,模型组血清、腓肠肌及额叶皮层IL-6水平明显升高(P0.05,P0.01)、IL-10水平明显降低(P0.05,P0.01);模型组血清、额叶皮层IL-10/IL-6明显降低(P0.01)。与模型组比较,艾灸组腓肠肌和额叶皮层IL-6明显降低(P0.05);艾灸组血清、额叶皮层IL-10明显升高(P0.05);艾灸组血清、额叶皮层IL-10/IL-6明显升高(P0.01)。结论:艾灸可明显缓解运动性疲劳,其作用可能是通过降低外周和中枢促炎因子IL-6、提高抗炎因子IL-10和IL-10/IL-6比值,减轻外周和中枢炎性反应,改善促炎因子及抗炎因子分泌失衡而实现的。     

安寐汤对失眠大鼠额叶皮质线粒体COXⅠ、ⅣmRNA和蛋白表达的影响

目的探讨安寐汤对失眠大鼠额叶皮质线粒体COXⅠ、ⅣmRNA和蛋白表达的影响。方法取6月龄大鼠进行造模,超活染色观察线粒体功能的完整性,实时荧光定量PCR检测COXⅠ、ⅣmRNA相对表达量,Elisa检测COXⅠ、Ⅳ蛋白表达浓度。结果 (1)与模型组比较,地西泮治疗组和安寐汤低、中、高剂量治疗组均可增加失眠大鼠额叶皮质线粒体COXⅠ、Ⅳ蛋白表达量,且都具有统计学意义(P0.01)。安寐汤中剂量治疗组对失眠大鼠额叶皮质线粒体COXⅠ、Ⅳ蛋白表达量的增加与低剂量相比有统计学意义(P0.05),与高剂量之间无统计学意义。(2)安寐汤中剂量治疗组大鼠额叶皮质线粒体COXⅠ、ⅣmRNA表达量明显高于安寐汤低、高剂量治疗组,且具有统计学意义(P0.05)。结论安寐汤改善大鼠失眠可能与增加额叶皮层线粒体COXⅠ、ⅣmRNA和蛋白表达有关,但剂量-效应关系不明显。