针灸"肺俞""大椎""风门"对哮喘模型大鼠肺组织STAT6、血清IL-13表达的影响

目的:观察针刺和艾灸对哮喘模型大鼠血清中IL-13及肺组织中STAT6表达的影响,探讨"肺俞""大椎""风门"治疗哮喘的作用机理.方法:将40只SPF级SD大鼠按照随机数字表随机分为空白组、模型组、艾灸组和针刺组,每组各10只.采用卵蛋白(OVA)溶液致敏制备哮喘模型,空白组选用生理盐水代替卵蛋白造模.艾灸组和针刺组选...     

固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠肺组织STAT1的调控作用

目的:研究固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠肺组织中转录激活因子和信号转导子1(STAT1)的调控作用。方法:用卵蛋白(OVA)和RSV对BALB/c小鼠反复致敏刺激复制哮喘缓解期小鼠模型(正常组除外),随机分为模型组、预防组、固本防哮饮组和孟鲁司特钠组(每组15只)。观察各组小鼠的一般行为活动和病理学变化特点,用Real-time PCR法测定肺组织STAT1、IL-5 m RNA表达,Western Blot检测肺组织STAT1蛋白表达。结果:模型组小鼠肺组织可见支气管壁水肿、增厚,周围有嗜酸性粒细胞和中性粒细胞浸润。预防组、固本防哮饮组及孟鲁司特钠组小鼠肺脏病理改变显著改善,支气管壁充血水肿减轻,管壁和平滑肌厚度减小,且嗜酸性粒细胞和中性粒细胞浸润也显著减少。模型组肺组织中STAT1、IL-5 m RNA及STAT1蛋白显著高表达(P<0.01),预防组、固本防哮饮组及孟鲁司特钠组均能降低其表达,且孟鲁司特钠组降低肺组织STAT1 m RNA及蛋白表达更明显。结论:固本防哮饮可以降低哮喘缓解期小鼠肺组织IL-5、STAT1 m RNA及STAT1蛋白表达,减轻气道炎症,抑制哮喘发作并能预防哮喘的发作。     

针刺对慢性偏头痛大鼠趋化因子C-C配体2和C-X-C基序配体1的影响研究

目的：观察针刺对慢性偏头痛大鼠（CM）的足底机械痛阈、三叉神经脊束核尾侧亚核（Sp5C）中趋化因子C-C配体2（CCL2）、C-X-C基序配体1（CXCL1）水平的影响,为临床运用针灸治疗偏头痛提供一定依据。方法：将28只大鼠随机分为对照组、模型组、针刺组、非经非穴组,每组7只。采用隔日颈背部皮下重复注射硝酸甘油（NTG）建立慢性偏头痛大鼠模型。每日对针刺组和非经非穴组进行针刺治疗,20 min/次。采用Von Frey仪器测定大鼠足底机械痛阈,采用酶联免疫吸附测定法检测各组Sp5C中CCL2、CXCL1的水平。结果：与对照组比较,模型组大鼠足底机械痛阈明显降低（P<0.01）;与模型组比较,针刺组大鼠足底机械痛阈明显升高（P<0.01）。与对照组比较,模型组的Sp5C中CCL2、CXCL1的水平升高（P<0.01）;针刺组较模型组CCL2、CXCL1的水平降低（P<0.01）。结论：针刺可以通过下调CCL2、CXCL1趋化因子的表达,从而减轻偏头痛的疼痛程度,发挥对偏头痛的治疗作用。     

鸦胆子苦醇通过CC趋化因子配体2-C-C趋化因子受体2信号通路对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响

目的:探讨鸦胆子苦醇(BRU)调节CC趋化因子配体2(CCL2)-C-C趋化因子受体2(CCR2)信号通路对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:将骨肉瘤细胞系MG-63分为MG-63组(未处理的MG-63细胞)、L-BRU组(25 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63细胞)、M-BRU组(50 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63细胞)、H-BRU组(75 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63细胞)、GW0742组(1μmol/L CCL2-CCR2信号通路激活剂GW0742处理MG-63细胞)、H-BRU+GW0742组(1μmol/L GW0742和75 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63细胞),MTT法检测鸦胆子苦醇对正常人成骨细胞系hFOB1.19细胞的毒性,CCK8法检测MG-63细胞增殖,流式细胞仪检测MG-63细胞、CD8+T细胞凋亡,ELISA法检测外周血单个核细胞(PBMC)上清液IFN-γ、TNF-α水平,Western Blot法检测CCL2-CCR2通路蛋白以及凋亡相关蛋白水平。结果:0～500 nmol/L鸦胆子苦醇对hFOB1.19细胞无明...     

针灸"肺俞""大椎""风门"对哮喘模型大鼠肺组织中嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的:观察针灸"肺俞""大椎""风门"对哮喘模型大鼠肺组织中嗜酸性粒细胞凋亡的影响.方法:将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,每组10只.用卵蛋白对大鼠致敏、激发,建立哮喘模型,各组分别给予相应干预后,取大鼠右肺中叶组织,固定、包埋、切片.HE染色法观察各组大鼠肺组织病理形态变化;标记嗜酸性粒细胞的...     

黄芪对卵蛋白致敏大鼠肺组织中信号转导子和转录激活子6及mRNA表达的影响

 目的观察黄芪(Radix Astragali,RA)对支气管哮喘大鼠支气管信号转导子和转录激活子6(STAT6)及其mRNA表达的影响。方法用卵清白蛋白建立哮喘模型,SD大鼠随机分成4组:正常对照组、模型组、低剂量RA组和高剂量RA组。留取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行嗜酸性粒细胞(EOS)和分类计数;采用免疫组化法和原位杂交法分别检测STAT6蛋白和STAT6 mRNA的表达。结果①模型组BALF中EOS绝对值和EOS占细胞总数的百分比(EOS％)均显著高于正常对照组(P<0.01), 黄芪组上述指标均显著低于模型组(P<0.01);②免疫组化和原位杂交显示,模型组支气管STAT6蛋白和STAT6 mRNA表达均显著高于正常对照组,黄芪组较模型组均明显减弱(均为P<0.01),其主要表达细胞是上皮细胞;③支气管STAT6蛋白、STAT6 mRNA分别与BALF中的EOS绝对值呈显著正相关。结论黄芪有抑制哮喘气道EOS性炎症的作用,其机制可能与其下调 STAT6及其mRNA的表达有关。     

加减茵陈蒿汤联合布地奈德对哮喘大鼠气道反应性及肺组织中炎性细胞因子表达的影响

目的:研究加减茵陈蒿汤联合布地奈德对哮喘大鼠气道反应性及肺组织中炎性反应细胞因子表达的影响。方法:选择雄性SD大鼠作为实验动物,分为对照组、模型组、观察组,制作哮喘模型后给予加减茵陈蒿汤联合布地奈德治疗。测定气道阻力、肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞的数目以及肺组织中炎性细胞因子的表达水平。结果:模型组大鼠注射乙酰甲胆碱(MCh)后的气道阻力及BALF中中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞的数目及肺组织中白细胞介素(IL)-2、IL-6、干扰素-γ(IFN-γ)、嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)、CCL19、CCL21的mRNA表达水平均明显高于对照组(P 0. 05);观察组大鼠注射MCh后的气道阻力及BALF中中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞的数目及肺组织中IL-2、IL-6、IFN-γ、eotaxin、CCL19、CCL21的mRNA表达水平均明显低于模型组(P 0. 05)。结论:加减茵陈蒿汤联合布地奈德治疗哮喘大鼠能够降低气道反应性、抑制肺组织中的炎性反应,在哮喘治疗中展现出积极价值。     

针刺大鼠肺俞穴对肺组织中副交感神经受体M1含量的影响

目的 了解针刺"肺俞"穴治疗哮喘大鼠后,对大鼠肺组织中副交感神经受体M1含量的影响.方法 将健康雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、肺俞穴组和非经非穴组,每组10只.腹腔注射氢氧化铝和卵蛋白(OVA)混合液,雾化吸入OVA,建立哮喘大鼠模型,应用肺组织HE病理染色法确定造模成功,Real-timePC...     

补肾定喘汤对哮喘大鼠肺组织β肾上腺素能受体、气道阻力、肺顺应性的影响

目的：研究补肾定喘汤防治支气管哮喘的作用机制。方法：将大鼠随机分为正常组、模型组、必可酮组、补肾定噶汤组,用放射配基竞争结合分析法和放射免疫分析法分别测定各组动物肺组织β肾上腺素能受体(β-AR)结合位点和cAMP含量,用胸内压法测定气道阻力、肺顺应性。结果：模型组肺组织β-AR和cAMP均低于正常组,气道阻力增加,肺顺应性下降,补肾定喘汤可上调哮喘大鼠肺组织β-AR、cAMP,降低气道阻力,改善肺顺应性。结论：补肾定喘汤与糖皮质激素一样,可提高哮喘大鼠肺组织β-AR、cAMP,改善肺功能。     

麻杏二三汤对哮喘大鼠肺组织TGF-β1和ET-1表达的影响

目的：探讨麻杏二三汤对哮喘大鼠气肺组织 TGF-β1和 ET-1表达影响。方法：40只 SD 大鼠随机分为空白组、模型组、麻杏二三汤组、地塞米松组,各组共10只。除空白组,采用鸡卵清蛋白（Ovalbumin,OVA）＋氢氧化铝干粉联合致敏法造模2周,之后激发哮喘发作、分组给药,激发20 d 后处死大鼠,观察体重、肺系数、病理组织学变化和采用酶联免疫吸附试验（ELIEA）法检测肺组织 TGF-β1和 ET-1含量。结果：1）与空白组比,模型组大鼠体重较小、肺系数增大、支气管管壁和支气管平滑肌厚度增高以及肺组织 TGF-β1、ET-1表达升高（P ＜0.05）。2）与模型组比,两个药物干预组均可见肺系数、支气管壁和平滑肌厚度以及肺组织 TGF-β1、ET-1含量显著降低;麻杏二三汤组在降低支气管管壁和支气管平滑肌厚度上效果更佳（P ＜0.05）。结论：气道重塑构建中 TGF-β1、ET-1表达与其成正相关;麻杏二三汤可以延缓气道重塑进而治疗哮喘,其机制可能与下调 TGF-β1、ET-1含量有关。     

针灸对炎性反应中Toll样受体影响的实验研究进展

通过查阅针灸对炎性反应中Toll样受体(TLRs)影响的现代实验研究文献,从针刺、艾灸、其他疗法及联合疗法等方面综述不同针灸疗法对炎性反应中TLRs及其mRNA的影响,分析现存问题并提出解决思路。研究发现,不同针灸疗法均能下调炎性反应中病变部位TLRs及其mRNA的表达,通过调控炎症因子的释放,减缓炎症反应;隔药灸脐法能促进施术部位(神阙)TLRs的表达,以激发穴位的静息状态促进启动信息传导机制。本研究为开展相关实验研究及指导临床提供一定的参考。参考文献31篇。     

宣肺健脾法对哮喘大鼠转化生长因子-β1及其受体表达的影响

目的:观察宣肺健脾法中药哮逐平对支气管哮喘大鼠的治疗作用,探讨其可能的作用机制。方法:SPF级雄性Wistar大鼠32只随机分为正常对照组(A组)8只、哮喘模型组(B组)8只、地塞米松组(C组)8只、哮逐平组(D组)8只。除A组外,余组动物建立哮喘模型。HE染色,观察支气管-肺组织病理学改变,以医学图像分析软件测量支气管基底膜周径(Pbm)、支气管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度(Wam),支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞分类计数。免疫组化PV二步法染色,应用上述图像分析软件检测支气管-肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)及其受体Ⅰ(TβRⅠ)、受体Ⅱ(TβRⅡ)水平的积分光密度(IOD)。结果:与A组相比,B组EOS百分比、Wat、Wam和支气管-肺组织TGF-β1、TβRⅠ表达明显增加,具有非常显著性意义(P0.01)。经药物干预后,C和D组EOS百分比、Wat、Wam减少,支气管-肺组织TGF-β1、TβRⅠ表达显著降低(P0.05)。D组EOS百分比、Wat、Wam、TGF-β1和TβRⅠ减少尤为明显,与B组相比,均有显著差异(P0.05),其中Wat、Wam与A组相比,无显著性差异(P0.05)。与C组相比,D组EOS百分比、TGF-β1和TβRⅠ表达明显减少,具有非常显著性意义(P0.01)。结论:宣肺健脾法中药可能通过抑制哮喘大鼠支气管-肺组织TGF-β1及其受体的过度表达而影响平滑肌增殖、减轻气道壁增厚,干预气道重塑。     

麻杏石甘汤对哮喘大鼠肺组织中Sec1413表达的影响

[目的]研究麻杏石甘汤及其主要成分对哮喘模型大鼠肺组织中Secl413表达的影响。【方法】70只大鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、麻杏石甘汤组、麻黄组、杏仁组、甘草组,每组10只,第0、7天腹腔注射卵蛋白致敏,第14天开始雾化并给予药物,连续两周。最后一次雾化24h后测肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞数、病理观察气道炎症变化、实时定量聚合酶链反应（PCR）检测大鼠肺组织中Sec1413mRNA的水平。【结果】与正常组相比,模型组BALF中自细胞总数、嗜酸细胞、中性粒细胞数明显升高,肺组织中可见大量炎性细胞浸润及气道上皮细胞损伤,Sec1413mRNA表达量明显减少,有统计学意义差异;与模型组相比,麻杏石甘汤组、地塞米松组、甘草组BALF中白细胞总数、嗜酸细胞、中性粒细胞数目明显减少,肺组织中未见大量炎性细胞浸润及上皮细胞损伤,Sec1413mRNA量明显增加,差异有统计学意义,而麻黄组、杏仁组的上述各项指标与模型组相比无统计学意义差异。[结论]麻杏石甘汤及甘草能够有效减轻哮喘大鼠气道炎症的程度,其机制可能与调控Sec1413在肺组织的表达水平,增强气道保护作用有关。     

宣肺健脾中药对哮喘大鼠肺组织TGF-β1、TβR Ⅰ、TβRⅡ表达的影响

目的:观察宣肺健脾方对哮喘大鼠的治疗作用,探讨其可能的作用机制.方法:将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组和宣肺健脾方组.除正常对照组外,其余各组动物建立哮喘模型.观察支气管一肺组织病理学改变,测量支气管基底膜周径、支气管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度( Wam),支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞分类计数.免疫组化PV二步法检测TGF-β/Smads信号通路中配体(TGF-β)及其受体Ⅰ(TβR Ⅰ)、受体Ⅱ(TβRⅡ)水平.结果:模型对照组大鼠支气管肺组织有大量炎性细胞浸润,支气管腔内可见黏液栓和炎性细胞,支气管平滑肌层明显增厚;地塞米松组炎性细胞浸润减少,气管壁和平滑肌增厚明显减轻,黏膜结构较完整;宣肺健脾方组支气管黏膜上皮无明显增厚,管壁及其周围少量炎性细胞浸润.地塞米松组和宣肺健脾方组的Wat、Wam减少,宣肺健脾方组Wat、Wam较模型对照组低,差别有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01),但与正常对照组对比,差别无统计学意义(P＞0.05).与模型对照组对比,两药物组BALF中的嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(WEU)降低,巨噬细胞(MAC)升高,差别有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组相比,模型对照组支气管一肺组织TGF-β1、TβR Ⅰ表达增加,差别有统计学意义(P＜0.01);2药物组TGF-β1、TβR Ⅰ表达降低,与模型对照组对比,差别有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01);宣肺健脾方组TGF-1β1、TβRⅠ表达较地塞米松组低,差别有统计学意义(P＜0.01).结论:宣肺健脾法可能通过抑制哮喘大鼠TGF-β1及其受体的过度表达而干预气道重塑.     

咳喘宁对病毒诱发哮喘模型大鼠CD4+、CD8+T细胞内信号转导子和转录激活子6表达的影响

目的通过观察咳喘宁对呼吸道合胞病毒(RSV)诱发哮喘模型大鼠CD4+、CD8+T细胞内信号转导子和转录激活子6(STAT6)表达的影响,阐明咳喘宁防治RSV诱发支气管哮喘的机理。方法分别从磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、模型组大鼠外周血中提取单个核细胞,采用免疫磁珠法分离获得CD4+、CD8+T细胞并对其行纯度鉴定与活力检测。采用免疫荧光法,使用流式细胞仪测定T细胞内STAT6蛋白的表达水平,以中药咳喘宁进行干预,动态观察细胞培养过程中,咳喘宁对CD4+、CD8+T细胞中STAT6蛋白表达的调节作用。结果免疫磁珠法获得的CD4+、CD8+T细胞纯度与活力均支持实验的下行进展。与 PBS 对照组比较,模型组 CD4+T 细胞含量显著升高(P＜0.01),CD8+T 细胞含量升高不明显(P＞0.05)。模型组大鼠CD4+T与CD8+T细胞内STAT6的表达增高,咳喘宁治疗组CD4+与CD8+T细胞内STAT6的表达水平比模型组显著下降,差异有统计学意义(P＜0.01);与地塞米松、沙丁胺醇组比较,咳喘宁组 CD4+、CD8+T 细胞内 STAT6的表达水平略高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。结论咳喘宁通过下调哮喘模型大鼠CD4+、CD8+T细胞内STAT6的表达,纠正哮喘中Th2细胞的过度增殖分化,影响Th2免疫应答优势,从而减少伏痰的产生,达到防治支气管哮喘的目的。     

银杏叶提取物对大鼠哮喘模型中CyclinD1表达的影响

目的：探讨银杏叶提取物对大鼠哮喘模型中CyclinD1表达的影响及其机制。方法：将60只大鼠随机分为正常组、哮喘组和干预组,应用卵蛋白激发大鼠建立哮喘气道重塑模型。采用免疫组化技术检测大鼠气道中CyclinD1的表达。结果：哮喘组中可见气道壁有明显炎症细胞浸润,气道壁的厚度增加,CyclinD1表达水平显著高于正常组和干预组（P〈0．05）。干预组CyclinD1表达水平较哮喘组明显下降。结论：CyclinD1参与了哮喘气道重塑的发生,银杏叶提取物可能通过影响CyclinD1的表达进而影响气道重塑过程。     

艾灸“肺俞”“肾俞”对哮喘大鼠外周血T细胞及血清白介素的影响

目的:观察艾灸"肺俞""肾俞"对哮喘大鼠外周血T细胞及血清白介素的影响,探讨艾灸治疗哮喘的免疫学机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组,每组各10只。以卵白蛋白加氢氧化铝腹腔注射并给予雾化激发法制备哮喘模型。艾灸组大鼠间接灸双侧"肺俞""肾俞"穴,每次30min,每日1次,共治疗14d。用HE染色行肺组织病理学观察,用流式细胞仪检测全血CD 3~+、CD 4~+、CD 8~+T细胞水平,用酶联免疫吸附法检测血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra)水平。结果:模型组大鼠支气管壁肌层增厚,黏膜水肿,大量炎性细胞浸润,部分肺泡结构破坏明显;艾灸组大鼠肺泡壁结构完整,细支气管形态规则,管腔内无黏液栓形成及上皮细胞脱落等现象。模型组全血CD 8~+、CD3~+T细胞水平及血清IgE、IL-1β含量较正常组显著升高(P0.01)。艾灸组CD 8~+T细胞及血清IgE、IL-1β水平较模型组显著降低(P0.05,P0.01),CD 4~+T细胞水平、血清IL-1Ra水平较模型组显著升高(P0.01,P0.05)。结论:艾灸大鼠"肺俞""肾俞"穴能降低血清IgE、IL-1β水平,升高血清IL-1Ra水平,达到治疗哮喘的目的。     

针刺对哮喘大鼠气道重构及转化生长因子-β_1表达的影响

目的:探讨针刺治疗哮喘的作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组和药物组。采用卵蛋白致敏的方法制备哮喘模型。针刺组选用邵氏"五针法",即"肺俞""大椎""风门"穴进行治疗,留针20min,每日1次,共10次。药物组以100mg/kg的剂量腹腔注射氨茶碱注射液。治疗结束后,取肺组织HE染色,采用图像分析的方法测定气道壁和气道平滑肌厚度,评价气道重构程度;免疫组化法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)在各组大鼠小气道中的表达情况。结果:模型组大鼠支气管管壁和平滑肌厚度明显高于空白组(P0.01),肺组织中TGF-β1表达明显高于空白组(P0.01);经治疗,药物、针刺两组支气管管壁和平滑肌厚度较模型组均有降低(P0.05),TGF-β1表达较模型组明显减少(P0.01);针刺组和药物组比较,支气管管壁和平滑肌厚度的差异无统计学意义(P0.05),TGF-β1表达针刺组明显低于药物组(P0.05)。结论:邵氏"五针法"能下调小气道中TGF-β1的表达,进而干预气道结构的改变,这可能是针刺防治哮喘的作用机制之一。     

咳喘宁对支气管哮喘大鼠肺组织转化生长因子-β1表达的影响

支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞(EOS)、肥大细胞和淋巴细胞等多种炎症细胞参与的慢性气道炎症,本病反复发作,可导致气道重塑,致使病情缠绵难愈.     

“邵氏五针法”对哮喘大鼠肺组织FIZZ1、NOTCH1表达的影响

目的:观察针刺肺俞、大椎、风门穴对哮喘模型大鼠肺组织炎症区域分子1(FIZZ1)、NOTCH1含量表达的影响,探讨“邵氏五针法”对哮喘气道重塑的作用机制.方法:选取雄性SPF级SD大鼠40只随机分为空白组、模型组、针刺组和艾灸组4组,每组10只.实验第1、8天采用腹腔注射10％复合卵蛋白(OVA)抗原液1mL致敏,从实...