水中五种生物胺的柱前衍生固相萃取-高效液相色谱测定法

为建立水中五种生物胺的柱前衍生固相萃取-高效液相色谱测定方法,将水样中生物胺经苯甲酰氯衍生化后用OasisHLB柱固相萃取,乙腈洗脱,以乙腈-0.02 mol/L乙酸胺为流动相,C18柱分离,二极管阵列检测器检测.结果显示,在0.2～40.0 mg/L线性范围内,所得五种生物胺的回归方程均呈良好的线性关系,r＞0.997,方法的检出限均为0.1 mg/L,平均回收率为92.0％～103.5％,RSD为3.4％～13.5％.提示该法灵敏度和准确度较高,重复性较好,适用于水中五种生物胺的检测.     

柱前衍生-高效液相色谱法测定鱼类胶原肽中生物胺含量

目的建立鱼类胶原肽中精胺(Spm)、亚精胺(Spd)和腐胺(Put)的柱前衍生-高效液相色谱测定方法。方法样品经6 mol/L盐酸消化前处理,以10 mg/ml丹磺酰氯为衍生剂,在60℃下衍生,使用C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇和水为流动相,梯度洗脱。结果 3种生物胺在浓度范围内线性相关系数均≥0.999 1,方法的检出限(LOD)为0.028 3 mg/L~0.125 0 mg/L,定量限(LOQ)为0.094 5 mg/L~0.500 0 mg/L,加标回收率为87.1%~102.6%,RSD为0.11%~4.90%。结论该方法操作简单、准确灵敏,可用于鱼类胶原肽中生物胺含量的测定。     

水中双酚类化合物的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱检测法

目的 建立水中双酚A、双酚B、双酚F三种双酚类化合物固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱同时测定方法.方法 水样经C18小柱富集,乙腈洗脱,串联质谱仪检测,利用Acquity BEH C18色谱柱分离,以乙腈-0.1％氨水溶液为流动相梯度洗脱,流量0.3 ml/min,以双酚A-d16为内标.结果 三种双酚类化合物在1.0～100.0 μg/L线性范围内具有良好的线性关系,r≥0.999;该方法的检出限为0.75～1.0 ng/L,平均回收率为87.0％～106.9％,RSD为1.61％～3.67％.结论 该方法灵敏、准确,适用于水中痕量双酚A、双酚B、双酚F的同时检测.     

柱后衍生-液相色谱法快速检测发酵酒中的生物胺

目的建立发酵酒中色胺、2-苯乙胺、腐胺、组胺、尸胺、酪胺、精胺、亚精胺的柱后衍生-液相色谱分析方法,并探讨其在实际检测中的适用性。方法取2 ml样品经高氯酸涡旋提取,以离子对试剂和乙腈为流动相,高效液相色谱梯度洗脱,Atlantis-C_(18)柱分离,采用邻苯二甲醛(OPA)为柱后衍生试剂,二极管阵列检测器254 nm检测,以1,7-二氨基庚烷为内标进行定量。结果本法8种生物胺在1.0 mg/L~50 mg/L内线性关系良好,相关系数均≥0.998 2,在1.0 mg/L、5.0 mg/L、10.0 mg/L的3个添加水平的平均回收率为81.2%~106.0%,相对标准偏差为2.79%~5.21%,方法定量限为0.2 mg/L。结论采用柱后衍生-高效液相色谱法对发酵酒中的生物胺进行分离检测,方法快速、简便、灵敏度高,适用于批量实际样品检测。     

在线固相萃取液相色谱-线性离子阱质谱法同时测定尿中高香草酸及香草扁桃酸

采用在线固相萃取液相色谱-线性离子阱质谱法同时测定尿高香草酸(homovanillic acid, HVA)、香草扁桃酸(Vanillylmandelic acid, VMA)含量。样品经稀释、离心、过滤后直接进样,经在线固相萃取柱富集纯化;以C18柱为分析柱,0.01 mol/L乙酸铵溶液(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱;在电喷雾电离(ESI)负离子模式下,进行HVA三级扫描检测、VMA二级全扫描检测。HVA在1.0～20.0μg/ml范围内、VMA在0.5～10.0μg/ml范围内呈线性关系,相关系数分别为0.998和0.999,该法检出限分别为0.25和0.10μg/ml。以尿液为基体进行加标回收试验,回收率为93.6%～104.0%,相对标准偏差为2.0%～4.4%。     

高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用测定尿中河豚毒素的研究

目的 建立一种高效液相色谱-质谱联用快速检测尿样中河豚毒素(TTX)的方法.方法 采用以HLB为填料的固相萃取小柱对尿样进行预处理,以ZORBAX C18(100.0 mm×2.1 mm,直径3.5 μm)为色谱分析柱;体积分数为0.1%乙酸-水溶液:乙腈(35:65,V/V)为流动相;流速0.2 ml/min;紫外检测波长为200 nm.柱温25℃;质谱采用电喷雾离子源,以正离子模式进行定性定检测.结果 讨论了不同色谱、质谱参数下TTX分子离子,其碎片离子的响应值,特征离子峰及其子离子的断裂规律,方法采用TTX分子的二级碎片子离子(m/z 301.6)进行定性、定量.通过尿样中TTX的检测,该方法在0.5～100.0μg/L范围内有良好的线性关系,相关系数(r)>0.99,方法的回收率为65.4%～84.4%,相对标准偏差(RSD)=8.6%(n=5),方法检出限为0.1μg/L(按照3倍信噪比计算).结论 方法应用于尿样中加标检测,结果较满意,可为TTX中毒的快速定性、定量分析提供一种有效的手段,具有一定的临床诊断意义.     

超高效液相色谱串联质谱法测定人尿中美沙酮

目的建立快速测定人尿中美沙酮的超高效液相色谱串联质谱测定方法。方法尿样采用0.10 mol/L氢氧化钠溶液碱化后,经乙醚漩涡提取、离心,吸取上清液浓缩吹干,用80%甲醇定容后进液相色谱-质谱系统分析,同位素内标法定量。色谱柱采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸,流速为0.4 ml/min,柱温为35℃,进行梯度洗脱;质谱采用电喷雾离子源,在正离子多反应监测模式(MRM)下进行检测。结果美沙酮在1 ng/ml~100 ng/ml时线性关系良好(r0.999);检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.003 mg/L和0.01 mg/L;低、中、高3个浓度(2 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml)的回收率分别为99.8%、100.1%、100.3%,精密度(RSD)分别为1.51%、2.72%、2.25%。结论该方法简便、灵敏、准确、稳定,适用于人尿中美沙酮的测定,可满足美沙酮临床研究尿样监测的要求。     

HPLC-FLD法检测黄酒中9种生物胺

目的建立高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)检测黄酒中色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、酪胺、章鱼胺、组胺、亚精胺及精胺。方法生物胺与内标1,7-二氨基庚烷与衍生试剂丹磺酰氯在特定条件下进行衍生,衍生物用乙醚萃取、N2吹干,再用乙腈定容、混匀,过膜后进HPLC分析。以C18色谱柱为分离柱,FLD检测器检测,流动相为乙腈和水,梯度洗脱,流速为1 ml/min,柱温30℃,以保留时间定性,内标法定量。结果 9种生物胺在1.0 mg/L~75.0 mg/L范围内呈良好的线性关系,加标回收率在80%~121%,该法各组分检测限为0.06 mg/kg~0.71 mg/kg,回收率RSD值在0.69%~2.36%之间。结论本法操作简便、准确可靠,能够同时测定黄酒中9种生物胺的含量。     

葡萄酒中生物胺多组分的UVD/FLD串联HPLC方法研究

目的建立葡萄酒中多组分生物胺的柱前衍生反相高效液相色谱-荧光/紫外串联检测器的测定方法。方法以正丁醇/氯仿(1∶1)为萃取液提取葡萄酒中生物胺,丹磺酰氯为衍生剂,1,7-二氨基庚烷为定量内标,采用C18色谱柱分离,甲醇/水为流动相梯度洗脱,流速1.5ml/min,紫外检测波长254nm,荧光激发波长(Ex)350nm,发射波长(Em)520nm。结果色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、精胺和亚精胺在30分钟内得到良好分离。在给定的浓度范围内,各组分生物胺呈现良好线性相关(r>0.99)。在葡萄酒中添加生物胺混合标准溶液,平均回收率为79.2%~127.9%,相对标准偏差RSD小于10%。结论采用荧光/紫外检测器串联方法检测,满足了葡萄酒中多组分生物胺检测的需要。     

人尿中4种有机磷酸酯阻燃剂代谢物的固相萃取-高效液相色谱-串联质谱测定法

目的建立人尿中磷酸二(1,3-二氯异丙基)酯(BDCPP)、磷酸二(2-氯丙基)酯(BCPP)、磷酸二甲苯酯(BCP)和磷酸二苯酯(DPHP)4种有机磷酸酯阻燃剂代谢物(DAPs)的固相萃取-高效液相色谱-串联质谱检测方法。方法取尿样2ml,加2 ml水稀释,以Strata TM-X-AW弱阴离子交换柱富集净化,微弱氮气吹干后,25%甲醇-水复溶至400μl,过0.22μm尼龙滤膜,1 mmol/L乙酸铵水溶液-甲醇为流动相,经DIKMA HPLC Spursil C18色谱柱(250 mm×2.1 mm,3μm)梯度洗脱分离,电喷雾离子源负离子模式(ESI-),多反应监测(MRM)模式检测。结果 DPHP、BDCPP、BCP在0.05～200μg/L、BCPP在0.1～250μg/L的线性范围内,各目标化合物的回归方程均呈良好的线性关系,r0.999。该方法的检出限为0.01～0.4μg/L,定量下限为0.05～1.3μg/L;平均回收率为63.0%～109.4%,RSD为2.1%～13.1%。结论该方法操作简单,灵敏可靠,适用于人尿中4种有机磷酸酯代谢物的同时测定。     

超高效液相色谱-串联质谱测定尿中14种β-内酰胺类抗生素残留

目的 建立测定尿液中14种β-内酰胺类抗生素残留的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。 方法 尿液经酶解后,Oasis PRiME HLB(200 mg,6 ml)固相萃取柱净化,采用Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7 μm),0.01 mol/L乙酸铵的水-甲醇作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源电离,正离子扫描,多反应监测模式进行定性和定量分析。 结果 阿莫西林和头孢曲松的线性范围为10～1 000 ng/ml,其余12种β-内酰胺类抗生素为5～1 000 ng/ml,相关系数均大于0.99。阿莫西林和头孢曲松的定量限为10 ng/ml,其余的方法定量下限为5 ng/ml,检出限为0.5～2.9 ng/ml,3个加标水平下的回收率为79.8%～97.9%,相对标准偏差为2.1%～11.9%。 结论 该方法操作简便、具有较高的灵敏度、特异度和精确性,适用于尿中痕量14种β-内酰胺类抗生素残留量的测定。     

直接稀释-UHPLC-MS/MS同时测定黄酒中的9种生物胺

目的 建立黄酒中组胺、酪胺、色胺、腐胺、尸胺、苯乙胺、章鱼胺、吡哆胺和1,6-己二胺的直接稀释-超高效液相色谱串联质谱（UHPLC-MS/MS）同时检测方法。方法 黄酒样品中加入内标1,7-二氨基庚烷并用0.10mol/L HCl稀释后,过0.22 μm微孔滤膜,采用RRHD HILIC Plus色谱柱（2.1mm×100mm,1.8μm）为分离柱、甲醇-8mmol/L乙酸铵水溶液为流动相,梯度洗脱分离;并用多反应监测模式检测、内标法定量。结果 9种生物胺在10~500ng/mL浓度范围内呈现良好线性（相关系数r>0.99）。方法检出限（LOD）为0.21~0.51ng/mL,定量限（LOQ）为0.68~1.71ng/mL;除章鱼胺外,其余8种生物胺的加标回收率为61.68%~129.5%,相对标准偏差为0.32%~6.15%。应用本法对市售黄酒样品中的生物胺进行了分析,均未检出章鱼胺和吡哆胺,2-苯乙胺、1,6-己二胺、酪胺、尸胺、组胺、色胺的含量在1.01~24.6μg/mL范围内。结论 所建立的 UHPLC-MS/MS检测法具有简便、快速、灵敏、准确的优点,可用于黄酒中生物胺的检测。     

超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱法检测血清中12种全氟化合物

目的 建立血清中12种全氟化合物的超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱分析方法。方法 血清样品经乙腈沉淀蛋白质,2.0% 甲酸水溶液酸化后,经Oasis WAX 固相萃取柱净化,2.0% 氨化甲醇洗脱,氮吹至干后复溶于甲醇- 2 mmol/L乙酸铵溶液（40∶60, v/v）。采用Waters BEH C18色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）分离,2 mmol/L乙酸铵溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 ml/min。采用电喷雾负离子模式电离、多反应监测模式分段检测。结果 血清中12种全氟化合物在0.050 ~ 50 μg/L范围内有良好的线性关系,相关系数大于0.999;检出限、定量限分别为0.008 ~ 0.020 μg/L、0.026 ~ 0.066 μg/L;低中高三个水平的血清加标回收率为76.0% ~ 110.2%,相对标准偏差为0.4% ~ 7.3%;基质效应在72.0% ~ 117.6%之间。方法应用于20份人血清样本检测,PFOA、PFNA、PFHxS、PFHpS、PFOS均被检出,PFDA检出率为90.0%,中位数分别为:1.43、0.16、0.30、0.07、0.74和0.07 μg/L。结论 建立的方法快速简便、准确,适用于血清中12种全氟化合物的分析,为评估人群全氟化合物暴露情况提供技术支撑。     

食物中毒样品中的乌头碱的SPE—UFLC／MS／MS快速测定法

目的建立SPE．UFLC／MS／MS快速测定食物中毒事件中乌头碱、次乌头碱、中乌头碱的方法。方法各种食物样品及呕吐物经0．1mol／LHCl提取,SPE固相萃取小柱净化,经AgilentSBC182．1mm×50mm,1．8μm分离,在正离子模式下用串联质谱仪定性定量分析。结果食物样品及呕吐物中乌头碱、次乌头碱、中乌头碱的方法检出限为1—3μg／L,2个水平的加标回收率为79．8％～112．5％,相对标准偏差均小于9．4％。结论该方法测定各种食物样品及呕吐物中的乌头碱、次乌头碱、中乌头碱快速,准确,可靠,灵敏度高。     

高效液相色谱法同时测定糖果中6种合成着色剂及其铝色淀

目的 建立糖果中6种合成着色剂及其铝色淀的高效液相色谱（HPLC）分析方法。方法 样品经NaOH溶液浸泡超声提取,离心,上清液经PWAX柱富集净化;采用InertsilR ODS-3 C18为分离柱,以乙酸铵（0.02 mol/L）-乙腈为流动相,梯度洗脱,二极管阵列检测器检测,外标法定量。结果 6种目标化合物在0.1～50.0 mg/L范围内与峰面积呈线性关系,相关系数（r值）大于0.999,3个浓度水平加标回收率为70.3%～110%,相对标准偏差（RSD）为0.07%～11.4%,检出限为1.0 mg/kg。应用该方法检测了10件市售糖果样品,检出柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红和亮蓝,其含量为1.5～363 mg/kg。结论 该方法简便快速,灵敏度高,适合于糖果中6种合成着色剂的测定。     

固相萃取-超高效液相色谱/串联质谱法测定生物样品中8种杀鼠剂

目的 建立生物样品中鼠立死、杀鼠酮、杀鼠醚、杀鼠灵、氯杀鼠灵、鼠得克、溴敌隆和溴鼠灵8种杀鼠剂的固相萃取-超高效液相色谱/串联质谱测定方法。方法 血样经乙腈提取,尿样加水稀释后,采用MAX固相萃取柱进行净化,以BEH C18(2.1mm×100mm,1.7μm) 色谱柱分离,在电喷雾离子化多反应监测模式下检测,基质匹配标准曲线外标法定量。结果 8种杀鼠剂在0.5~50.0μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数均大于0.999,定量下限为0.18~1.00μg/L。低、中、高 3个加标水平下,全血和尿液中8种杀鼠剂的平均回收率分别在73.3%~106.5%和70.7%~112.5%之间,相对标准偏差分别为0.8%~4.9%和0.8%~8.5%。结论 该方法简便、灵敏度高、定量准确,适用于中毒生物样品中杀鼠剂的定性定量分析。     

同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱法测定尿液中的可替宁

目的建立一种超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法测定尿液中的可替宁,用于分析二手烟暴露儿童和成年吸烟者体内的尼古丁代谢情况。方法尿液样品加入可替宁d3同位素内标后用初始流动相稀释,涡旋混匀后过0.22μm滤膜进样分析。采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为0.01%甲酸的乙酸铵溶液(5 mmol/L)-乙腈,正离子扫描,多离子反应监测模式(MRM)检测,同位素内标法定量。结果方法的线性范围为0.1μg/L^150μg/L(r=0.9997),检出限为0.034μg/L(S/N=3)。样品加标回收率为97.0%~99.4%,相对标准偏差均<5.0%。利用该方法测定220份吸入二手烟的儿童和98份成年吸烟者尿液中可替宁的含量水平。结论本方法适用于尿液中可替宁的检测,具有操作简便、快速、灵敏、选择性好等特点。     

麻痹性贝类毒素的高效液相色谱-串联质谱测定方法研究

目的建立利用高效液相色谱-串联质谱法同时分析11种麻痹性贝类毒素的确证方法，用于实际样品的测定。方法采用0．1mol／LHAc提取海洋贝类或鱼类中的麻痹性贝类毒素，经OASISHLB固相萃取小柱净化后，以甲醇-乙酸铵溶液作为流动相，在Atlantis色谱柱（150mm×2．1mm×5μm）上，采用梯度改变乙腈在流动相中的比例和流速，一次进样同时定性及定量测定试样中的上述全部毒素组分。结果11种PSP线性相关系数均大于0．995，变异系数在1．2％～9．3％之间，高、中、低不同水平的加标回收率在80．9％～119．8％之间。定量检出限5μg／kg，回收率大于90％，相对标准偏差（RSD）小于10％。结论本方法对PSP毒素具有良好的分析测定效果。     

反相高效液相色谱荧光法测定大鼠血清和脑组织中茶氨酸含量

目的建立一种反相高效液相色谱荧光检测法,测定大鼠血清和脑组织中茶氨酸含量。方法用ODS-SP C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,粒径5μm),以磷酸二氢钾缓冲液(0.1 mol/L,pH6.0):四氢呋喃:甲醇体积比=62:3:35为流动相;高丝氨酸为内标;邻苯二甲醛柱前衍生;流速0.85 ml/min;荧光检测器激发波长340 nm、发射波长455 nm检测大鼠血清、脑组织中茶氨酸含量。结果茶氨酸浓度在1～20μmol/L范围内线性关系良好,相关系数为0.9997;浓度为1、10、20μmol/L时日内RSD(%)分别为3.51、1.58、0.75,日间RSD(%)分别为4.54,3.25,2.87;茶氨酸平均回收率范围为91.8%～99.1%;最低检测限为0.02μmol/L。SD大鼠给予200 mg/kg.bw茶氨酸灌胃后,血清中峰值出现在0.5～1.0 h之间,脑组织中浓度5 h达到峰值。结论该反相高效液相色谱荧光法灵敏度高,重复性好,能有效分离检测大鼠血清、脑组织中茶氨酸含量。