基于PI3K/AKT/mTOR通路研究杜仲总黄酮对多囊卵巢综合征大鼠性激素水平及卵巢组织自噬的影响

目的:探讨杜仲总黄酮基于磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠性激素水平及卵巢组织自噬的影响。方法:55只SD大鼠随机取10只作为正常对照组,其余建立PCOS大鼠模型,40只大鼠建模成功,随机分为模型对照组、PI3K抑制剂BKM120 40 mg/kg组、BKM120 40 mg/kg+杜仲总黄酮200 mg/kg组、杜仲总黄酮200 mg/kg组,各组灌胃生理盐水或相应药物,连续干预3 w。Elisa法检测血清促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、抗苗勒氏管激素(AMH)水平;HE染色观察卵巢病理学变化;流式细胞术检测卵巢组织颗粒细胞自噬率;Western blot检测卵巢组织中PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白及微管相关蛋白1轻链3 II(LC3 II)表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠AMH、LH、T含量显著升高,FSH含量显著降低P<0.01);大鼠卵巢组织颗粒细胞自噬率显著升高(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值显著降低,LC3 II/LC3 I比值显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,抑制剂组大鼠AMH、LH、T含量显著升高,FSH含量显著降低(P<0.01),卵巢组织颗粒细胞自噬率显著升高,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值显著降低,LC3 II/LC3 I比值显著升高(P<0.01);杜仲总黄酮+抑制剂组、杜仲总黄酮组大鼠AMH、LH、T含量明显降低,FSH含量明显升高(P<0.05或P<0.01),卵巢组织颗粒细胞自噬率显著降低(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值显著升高,LC3 II/LC3 I比值显著降低(P<0.01)。模型对照组卵巢表面苍白,黄体减少,出现多个囊状扩张卵泡;杜仲总黄酮+抑制剂组、杜仲总黄酮组卵巢体积减小,表面色泽较红,黄体有所增加,囊状扩张卵泡减少;抑制剂组卵巢体积更大、黄体更少,囊状扩张卵泡更多。结论:杜仲总黄酮可能通过激活PI3K/AKT/mTOR通路降低PCOS大鼠卵巢组织自噬水平,改善其性激素水平。     

补肾益气安神方剂对来曲唑诱导的PCOS大鼠卵泡中AMH表达的影响

目的:探讨补肾益气安神方剂对来曲唑诱导的PCOS大鼠卵泡中AMH表达的影响。方法:采用来曲唑诱导法建立PCOS大鼠模型45例,分为模型组、对照组(给予达英-35)、治疗组(给予补肾益气安神方剂)。比较各组大鼠血清中E_2、P、T、LH、FSH、AMH的表达差异,从而观察检测指标在PCOS中的作用以及补肾益气安神方剂对PCOS的治疗效果。结果:与模型组相比,治疗组大鼠血清E_2、P水平明显升高(P<0.05),血清LH、T、FSH、AMH水平显著降低(P<0.01)。与对照组相比,治疗组大鼠血清LH、FSH、T、AMH水平略偏高(P<0.01),血清E_2水平略低(P<0.05),而血清P水平无显著差异(P>0.05)。结论:补肾益气安神方剂对来曲唑诱导的PCOS大鼠有显著治疗效果,可能因其参与了大鼠内分泌调节,对卵巢的局部微循环有改善作用,有利于卵泡发育、成熟及排卵,从而改善卵巢的多囊状态。     

基于PI3K/AKT和MAPK/ERK通路探讨左归丸治疗多囊卵巢综合征机制的实验研究

目的探讨左归丸作用于PI3K/AKT和MAPK/ERK通路防治多囊卵巢综合征的具体环节及可能相关机制。方法未成年21日龄健康SD大鼠50只,随机选取10只为正常对照组;造模成功后随机分为PCOS组、左归丸组、达英35组,每组10只。采用放免法检测空腹葡萄糖(FBG)和胰岛素(FINS),计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),ELISA检测血清T、LH、FSH,HE染色观察模型组卵巢组织,免疫组化法检测AKT和p-ERK1的表达。结果模型组较正常对照组FINS、HOMA-IR明显升高,使用达英35组后,FINS显著降低,左归丸组较模型组FINS、HOMA-IR均明显降低,具有统计学意义(P 0.05)。与正常对照组相比,模型组LH、T、LH/FSH表达增多,E2表达减少(P 0.05),达英35、左归丸组LH、T、LH/FSH水平降低,FSH、E2水平升高(P 0.05)。结论左归丸可以通过上调卵巢局部组织中PI3K/AKT通路中相关重要因子的基因表达,抑制MAPK/ERK通路中相关重要因子的基因表达,改善多囊卵巢综合征大鼠的胰岛素抵抗和卵巢形态。     

紫仙助孕汤对多囊卵巢综合征不孕症大鼠卵巢超微结构的影响及作用机制探讨

目的：探讨紫仙助孕汤对多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症大鼠卵巢超微结构的影响及作用机制。方法：取60只SD大鼠采用随机数字表分为正常对照组(10只)、PCOS造模组(50只),后者通过来曲唑法复制PCOS大鼠模型,并将建模成功大鼠按照随机数字表分为模型组、二甲双胍组及紫仙助孕汤低、中、高剂量组。观察各组大鼠受孕率;ELISA法检测血清E₂、T、LH、FSH水平;HE染色观察大鼠卵巢组织病理学变化;透射电镜下观察大鼠卵巢超微结构改变;RT-qPCR法检测卵巢组织PI3K、AKT、GLUT4、Foxo3a mRNA表达;Western Blot法检测卵巢组织PI3K、AKT、p-AKT、GLUT4、Foxo3a蛋白表达。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠卵巢组织各级卵泡、黄体数目及卵泡颗粒细胞层数明显减少,颗粒细胞呈明显凋亡形态,囊状卵泡和闭锁卵泡增加,卵泡膜细胞内脂滴和线粒体明显增多,存在大量的滑面内质网,受孕率、血清E₂水平和卵巢组织PI3K、AKT、GLUT4 mRNA及蛋白表达显著降低,血清T、LH、FSH水平及卵巢组织Foxo3a mR...     

克罗米芬联合调经固冲汤治疗多囊卵巢综合征不孕临床研究

目的:探析克罗米芬与调经固冲汤联合治疗多囊卵巢综合征(PCOS)所致不孕对患者卵巢储备功能、卵巢动脉血流动力学和妊娠结局的影响。方法:将PCOS致不孕者78例,经数字标注行完全随机化分为2组各39例,观察组采取克罗米芬与调经固冲汤联合治疗,对照组仅给予克罗米芬单药干预。检测2组治疗前后睾酮(T)、雌二醇(E_2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、抗缪勒管激素(AMH)、子宫内膜厚度、卵巢体积等指标,评价卵巢储备功能变化,比较卵巢动脉血流动力学参数,记录治疗半年排卵与妊娠情况。结果:2组治疗前后E2无明显变化,差异无统计学意义(P 0.05)。2组治疗后LH、FSH、T、AMH、卵巢体积及子宫内膜厚度均改善(P 0.05)。治疗后,观察组LH、FSH、T、AMH、卵巢体积及子宫内膜厚度与对照组比较,差异有统计学意义(P 0.05)。观察组治疗后卵巢血流阻力指数(RI)低于对照组,动脉收缩期最大血流速度(PSV)高于对照组(P 0.05);2组治疗前后搏动指数(PI)比较,差异无统计学意义(P 0.05)。观察组排卵率、妊娠率高于对照组(P 0.05)。早期流产率、用药不良反应率低于对照组(P 0.05)。结论:克罗米芬与调经固冲汤联合治疗PCOS不孕可有效弥补单一用药的不足,改善调节卵巢储备功能及卵巢动脉血流动力学,提高排卵率、妊娠率。     

电针对D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病大鼠认知功能及海马神经元自噬的影响

目的:观察电针对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马区自噬相关蛋白表达的影响,从神经元自噬的角度探讨电针"百会""肾俞"穴治疗AD的机制。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、电针组和假电针组,每组12只。除空白对照组外,其余各组予D-半乳糖连续腹腔注射6周建立AD大鼠模型。电针组大鼠于每日腹腔注射后给予电针"百会""肾俞"穴,假电针组仅刺入"百会""肾俞"穴区皮肤且电针仪不通电,每次20 min,1次/d,共6周。干预结束后,采用Morris水迷宫和开放旷场实验评估各组大鼠的学习记忆和认知能力,透射电镜观察海马区突触数密度,用免疫组织化学染色法观察海马区双螺旋细丝蛋白-1(PHF-1)表达水平,用Western blot法检测海马区自噬相关蛋白磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的相对表达量。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠第2天至第5天逃避潜伏期增长,经过原平台象限时间比率减小(P0.01),旷场实验运动距离、直立次数、中心区域运动时间比率均减少(P0.01),海马区突触数密度降低(P0.01),PHF-1的阳性表达及PI3K、AKT、p-AKT、 mTOR相对表达量均增加(P0.01)。与模型组和假电针组比较,电针组大鼠第2天至第5天逃避潜伏期缩短,经过原平台象限时间比率升高(P0.01),旷场实验运动距离、直立次数、中心区域运动时间比率,以及海马区突触密度增高(P0.01),PHF-1的阳性表达及PI3K、AKT、p-AKT、mTOR相对表达量均减少(P0.01)。与模型组比较,假电针组PI3K表达降低(P0.05)。结论:电针能改善AD样大鼠的学习记忆和认知障碍,其机制可能是与调控PI3K/AKT/mTOR信号通路,诱导自噬,促进神经原纤维缠结清除有关。     

中西医结合治疗多囊卵巢综合征排卵障碍性不孕对子宫内膜容受性的影响

目的:观察中西医结合治疗多囊卵巢综合征排卵障碍性不孕对子宫内膜容受性的影响。方法:89例随机分为两组,对照组44例予以常规西医治疗,观察组45例在常规西医治疗基础上加用补肾化痰活血方治疗。结果:观察组Em、E_2、LH高于对照组(P0.05),PI、RI低于对照组(P0.05),排卵率及受孕率高于对照组(P0.05)。结论:中西医结合治疗PCOS排卵障碍性不孕效果较好。     

电针不同穴位对多囊卵巢综合征大鼠卵泡发育及相关因素的影响

目的:观察电针不同穴位对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵泡发育、促性腺激素、促性腺激素相关受体表达及卵巢抗苗勒氏管激素(AMH)、抑制素B(INHB)水平的影响,探讨电针治疗PCOS的可能机制。方法:雌性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、足三里组、关元组、三阴交组、综合组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠用来曲唑连续灌胃21 d诱导PCOS模型,足三里组、关元组、三阴交组分别选取"足三里""关元""三阴交"进行电针干预,综合组3穴同时进行电针干预,均干预14 d。干预结束后用HE染色法进行大鼠卵泡计数,用酶联免疫吸附法检测血清促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、INHB、AMH水平,用免疫组织化学法检测卵巢FSH受体(FSHR)和LH受体(LHR)的表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠的生长期卵泡数及血清LH、LH/FSH、AMH、INHB水平均明显升高(P<0. 05,P<0. 01),而FSH水平、早期卵泡中FSHR和LHR表达明显降低(P<0. 01,P<0. 05)。与模型组比较,三阴交、关元和综合组的生长期卵泡数明显下降(P<0. 05,P<0. 01),关元、足三里和综合组INHB水平明显下降(P<0. 01),4个电针组的LH、LH/FSH、AMH水平均明显下降(P<0. 01),而4个电针组的FSH均明显升高(P<0. 01),足三里组大鼠早期卵泡FSHR阳性表达明显升高(P<0. 05),足三里组和关元组大鼠早期和晚期卵泡LHR阳性表达均明显升高(P<0. 01,P<0. 05)。结论:电针"关元""三阴交""足三里"及电针3穴均可减少PCOS大鼠生长期的卵泡数量并调节大鼠性腺激素的表达水平。在上调血清FSH和下调LH/FSH比值、AMH、INHB及改善促性腺激素受体表达方面,电针"关元"和电针"足三里"的作用明显优于电针"三阴交";而在下调LH水平方面,电针"三阴交"的作用明显优于电针"关元";但3个穴位之间没有协同作用。     

电针神庭、百会穴对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及自噬相关蛋白表达的影响

目的:观察电针神庭、百会穴后对缺血再灌注大鼠的学习记忆能力的影响,和自噬相关蛋白表达的数值分析。方法:线栓法制备SD大鼠脑缺血再灌注模型。将造模成功的45只SD大鼠采用随机数字表法分成3组,即电针组(n=15)、模型组(n=15)和假手术组(n=15)。通过神经行为学评分评估各组大鼠脑神经损伤程度。电针组大鼠模型制备成功后行电针神庭、百会穴干预治疗14 d。Morris水迷宫实验进行行为学观测;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法观察脑梗死的区域及脑梗死的体积;RT-PCR检测PI3K、AKT、Beclin-1的表达水平。结果:神经功能缺损评分:电针组评分明显低于模型组和假手术组,差异具有统计学意义(P0.05);Morris水迷宫实验:与模型组相比,电针组穿越逃生平台的次数明显增多,差异具有统计学意义(P0.001),其逃避潜伏期明显降低,差异具有统计学意义(P0.001);TTC染色:电针组脑梗死体积较模型组和假手术组明显缩小,差异具有统计学意义(P0.001);RT-PCR法:与模型组相比,电针组大鼠皮质及海马区PI3K、AKT、Beclin-1蛋白表达水平升高,差异显著(P0.05)。结论:电针神庭、百会穴可明显改善脑缺血再灌注大鼠的学习及记忆能力,且可调控自噬相关蛋白PI3K、AKT、Beclin-1的表达,从而达到保护大鼠脑组织的作用,同时可从一方面说明细胞自噬调控机制在具有认知障碍的脑卒中患者中发挥着至关重要的作用。     

调经助孕胶囊对不孕大鼠卵巢FSHR、LHR的影响

目的建立SD大鼠ASR模型,探讨调经助孕胶囊对排卵障碍性不孕模型大鼠性周期、卵巢组织形态、血清Inhibin-B(抑制素B)及卵巢FSHR(卵泡刺激素受体)、LHR(黄体生成素受体)的影响。方法给幼年雌性SD大鼠注射雄激素可导致其成年后不孕,这种雄激素致不孕的大鼠不排卵。结果调经助孕组大鼠阴道上皮细胞有明显的周期性变化;调经助孕组大鼠卵巢各级卵泡总数大于模型组(P0.05),调经助孕组大鼠卵巢病理性囊性卵泡个数小于模型组(P0.05);调经助孕组大鼠血清抑制素B含量高于模型组(P0.05);调经助孕组大鼠卵巢FSHR、LHR表达水平高于模型组(P0.05)。结论调经助孕胶囊有使排卵障碍性不孕症的大鼠恢复性周期趋势的作用,增加模型大鼠血清Inhibin-B含量,提升卵巢储备功能,增强模型大鼠卵巢FSHR、LHR的表达水平,促进卵泡的发育与成熟。     

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠Beclin1/PI3K-AKT-mTor的影响

目的观察佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜中自噬相关基因5、7、12(Atg5,7,12)mRNA、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、自噬标志物Beclin1、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶向蛋白(m Tor)及血清细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10的表达水平变化及新风胶囊对其的影响。方法将48只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、西药组(来氟米特,5.0 mg/kg)和中药组(新风胶囊,3.0 g/kg),每组12只。干预30天后,观察各组大鼠体质量、足趾肿胀度(E%)、关节炎指数(AI)及踝关节病理及超微结构变化;检测大鼠滑膜中Atg5、7、12 mRNA表达;检测滑膜LC3-Ⅱ、Beclin1、PI3K、AKT、m Tor蛋白表达;检测大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10含量。结果与正常组比较,模型组E%、AI、IL-1β、TNF-α升高,体重、IL-4、IL-10、Atg5 mRNA、Atg12 mRNA、LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达降低(P0.01,P0.05),PI3K、AKT、m Tor蛋白表达升高(P0.01)。与模型组比较,两个给药组E%、AI、IL-1β、TNF-α、Atg12 mRNA、PI3K、AKT、m Tor蛋白表达降低(P0.01,P0.05),IL-4、IL-10、LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达升高(P0.01,P0.05);西药组Atg5降低(P0.01),Atg7 mRNA升高(P0.05)。与西药组比较,中药组体重、IL-4、Atg5 mRNA、Atg12 mRNA、PI3K、m Tor蛋白表达升高(P0.01,P0.05)。结论AA大鼠滑膜细胞自噬水平下降,导致滑膜细胞的过度增生,引起关节肿胀,致炎因子上升,抑炎因子下降,引起关节的炎症反应。中药新风胶囊可以改善关节炎指数、足趾肿胀度,改善滑膜自噬相关基因及蛋白表达。     

雷公藤甲素通过PI3K/AKT/m TOR通路诱导卵巢颗粒细胞自噬的实验研究

研究雷公藤甲素(triptolide,TP)诱导卵巢颗粒细胞(ovarian granulosa cells,OGCs)自噬所需的浓度、时间及对PI3K/AKT/m TOR通路的影响。采用CCK-8法比较不同浓度的TP对原代培养大鼠OGCs的抑制作用并计算IC50; Western blot法检测不同浓度、时间点下TP对OGCs自噬相关因子蛋白表达的影响,同时检测TP、自噬诱导剂(brefeldin A)、PI3K/m TOR抑制剂(NVP-BEZ235)分别干预OGCs对PI3K/AKT/m TOR通路及自噬相关因子蛋白表达的影响。结果显示,不同浓度TP作用于大鼠OGCs的IC50为14. 65μmol·L-1,其中最小抑制浓度为0. 1μmol·L-1(100 nmol·L-1);与空白对照组相比,各组beclin1,LC3Ⅱ蛋白表达水平均升高,LC3Ⅰ及p62蛋白表达水平均下降,其中100 nmol·L-1TP作用于大鼠OGCs 12 h,各指标变化显著(P0. 05或P0. 01); TP,brefeldin A,NVP-BEZ235分别处理大鼠OGCs 12 h后,与空白对照组相比,TP可显著促进下游自噬效应分子beclin1,LC3Ⅱ蛋白表达水平并抑制LC3Ⅰ,p62蛋白表达水平(P0. 05或P0. 01),且TP组beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达高于brefeldin A组,p62的表达低于brefeldin A组(P0. 05或P0. 01)。同时,TP能显著抑制p-PI3K,p-AKT,p-mTOR蛋白表达水平,且TP抑制效果优于NVP-BEZ235组。因此,该研究提示100 nmol·L-1TP作用于离体培养大鼠OGCs12 h,可成功诱导OGCs自噬; TP可能是通过抑制PI3K/AKT/m TOR信号通路诱导OGCs自噬。     

地骨皮煎煮液对多囊卵巢大鼠胰岛素信号传导途径中PI3K/PKB分子表达的影响

实验主要观察地骨皮煎煮液对多囊卵巢模型(PCOS)大鼠胰岛素信号传导途径中PI3K,PKB分子表达的影响。大鼠按Poretsky方法建立PCOS模型,造模成功后大鼠随机分为模型组、二甲双胍片组(0.45 g·kg^-1)、地骨皮高、低剂量组(10,2.5 g·kg^-1)。各组大鼠分别灌胃相应的药物14 d;另外设置空白对照组,给予生理盐水。给药14 d后大鼠通过阴道涂片观察发情周期,并测定体重,血清中睾酮(T)和空腹胰岛素(FINS)水平及卵巢组织PI3K,PKB的mRNA及其磷酸化蛋白水平。结果可见,与正常组比较,模型组大鼠排卵周期不规则,体重增加明显,血清T及空腹FINS水平显著提高;同时卵巢组织PI3K,PKB的mRNA及其磷酸化蛋白表达水平显著下降。地骨皮干预后能维持PCOS大鼠动情周期、降低大鼠体重增加,显著提高卵巢组织中PI3K及PKB的mRNA及其磷酸化蛋白表达水平,且呈现明显的剂量依赖关系。西药二甲双胍片也有较好的治疗作用。地骨皮能缓解PCOS大鼠体重增加,降低血清激素水平,对PCOS大鼠一定程度上具有恢复排卵作用,其机制可能与PI3K/PKB通路有关。     

当归芍药散通过PI3K/AKT信号通路抗血管性痴呆的作用机制

目的探讨当归芍药散(DSS)通过PI3K/AKT信号通路抗血管性痴呆(VD)的作用机制。方法 SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、阳性药组(尼莫地平组,9.45 mg·kg-1)及DSS高、中、低剂量组(6.4、3.2、1.6g·kg-1);采用双侧颈总动脉永久性结扎法建立VD大鼠模型;大鼠按上述剂量灌胃给药,给药体积10mL·kg-1,空白组、假手术组、模型组给予等量生理盐水,每天1次,连续灌胃1个月。采用Morris水迷宫实验检测VD大鼠的学习记忆能力;采用ELISA法检测海马组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子-κB(NF-κB)含量;采用WesternBlot法检测海马组织PI3K、AKT、p-AKT及LC3蛋白的表达;采用qPCR法检测海马组织PI3K、AKTmRNA的表达水平。结果与假手术组比较,模型组第1～4天的逃避潜伏期均明显延长,穿越平台的次数明显减少(P 0.01);海马组织中的TNF-α、NF-κB含量均显著增加(P 0.01),PI3K、AKT、pAKT蛋白表达量均显著降低(P 0.05,P 0.01),LC3-II/LC3-I值明显增高(P 0.01),PI3K、AKT mRNA表达水平均明显降低(P 0.01)。与模型组比较,DSS高、中剂量组第1～4天的逃避潜伏期均明显缩短,穿越平台的次数明显增加(P 0.05,P 0.01);DSS高剂量组的TNF-α、NF-κB含量均显著降低(P 0.05,P 0.01);DSS高剂量组的PI3K蛋白表达量显著升高(P 0.05),DSS高、中剂量组的AKT蛋白表达量显著升高(P 0.05),DSS高、中、低剂量组的p-AKT蛋白表达量均显著升高(P 0.05,P 0.01),DSS高、低剂量组的LC3-II/LC3-I值明显降低(P 0.01);DSS高、中剂量组的PI3K mRNA表达水平显著提高(P 0.05,P 0.01),DSS中剂量组的AKT mRNA表达水平显著提高(P 0.01)。结论 DSS能改善VD大鼠的学习记忆能力,可能通过PI3K/AKT信号通路发挥对VD的治疗作用。     

补肾化痰活血法对多囊卵巢综合征排卵障碍性不孕患者性激素、脂肪因子及子宫内膜容受性的影响

目的:观察补肾化痰活血法对多囊卵巢综合征(PCOS)排卵障碍性不孕患者子宫内膜容受性的影响。方法:选取我院诊收治的PCOS排卵障碍性不孕患者92例,按随机分对照组46例和研究组46例。对照组采用克罗米芬治疗;研究组采用克罗米芬联合补肾化痰活血法治疗,1个月经周期为1个疗程,共治疗3个疗程,治疗前后采用经阴道彩超(TV-CDFI)记录子宫内膜容受性,采取肘部静脉血测定性激素和脂肪细胞因子,同时对比临床疗效及安全性状况。结果:与治疗前比较,两组患者治疗后平均卵巢体积、子宫内膜PI、子宫内膜RI降低,子宫内膜厚度升高,治疗后血清LH、T降低,血清FSH、E_2升高,治疗后血清VF、LEP降低,血清APN升高(P0.05);与对照组比较,研究组患者治疗后平均卵巢体积、子宫内膜PI、子宫内膜RI较低,子宫内膜厚度较高,治疗后血清LH、T较低,血清FSH、E_2较高,治疗后血清VF、LEP较低,血清APN较高(P0.05);对照组治疗有效率为76.09%(35/46),研究组治疗有效率为91.31%(42/46),研究组高于对照组(P0.05)。结论:补肾化痰活血法对于PCOS排卵障碍性不孕患者,显著改善子宫内膜容受性,调节内分泌水平,提高妊娠率,值得临床广泛推广。     

健脾化痰中药联合有氧运动对肥胖型PCOS大鼠胰岛素抵抗及胰岛素信号通路的影响

目的:建立多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗(PCOS-IR)动物模型,观察健脾化痰中药联合有氧运动对PCOS-IR大鼠胰岛素、性激素及卵巢组织PI3K/PKB/mTOR蛋白表达的影响。方法:大鼠造模成功后随机分为有氧运动组、中药加有氧运动组、模型对照组,经不同干预治疗28天后,检测大鼠体重、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(Homa IR);检测大鼠血清LH、FSH、T;Western Blot法检测大鼠卵巢组织PI3K/PKB/mTOR蛋白水平的表达。结果:中药加有氧运动组体重、FPG、FINS、胰岛素抵抗(IR)、LH、FSH、T、PI3K/PKB蛋白表达量较模型对照组显著升高(P0.05),mTOR蛋白表达量显著降低(P0.05)。中药加有氧运动组FINS、IR、T、mTOR蛋白表达量较有氧运动组显著下降(P0.05),PI3K/PKB蛋白表达量显著升高(P0.05)。结论:健脾化痰中药联合有氧运动能减轻肥胖型PCOS-IR大鼠体重,改善IR及性激素异常,其机制可能通过影响胰岛素信号通路PI3K/PKB/mTOR的活性来发挥作用。     

补肾活血法调控PI3K/AKT/mTOR通路修复卵巢颗粒细胞自噬损伤机制研究

目的:观察补肾活血法调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路对体外培养大鼠卵巢颗粒细胞(OGCs)自噬损伤的影响。方法:将原代培养的大鼠卵巢颗粒细胞分为六组：空白对照组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、果纳芬组。采用ELISA法检测各组中雌二醇(E₂)、孕酮(P)分泌量;Western blot法和免疫荧光法分别检测各组OGCs中PI3K、AKT、mTOR及自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin 1)、微管相关蛋1轻链3(LC3)、自噬受体蛋白p62的蛋白表达。结果:模型组E₂含量显著降低,中药各剂量组E₂含量均上升(均P<0.05),且中药高剂量组与果纳芬组E₂含量相当;各组对P的含量均没有影响(均P>0.05)。中药各剂量组及果纳芬组p-PI3K、p-AKT、p-mTOR水平和p62的表达上调,Beclin 1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达下调,且中药高剂量组效果优于果纳芬组(均P<0.05)。结论:补肾...     

归肾丸合逍遥散联合克罗米芬治疗多囊卵巢综合征排卵障碍性不孕临床观察

目的:观察归肾丸合逍遥散联合克罗米芬治疗多囊卵巢综合征(PCOS)排卵障碍性不孕的临床疗效。方法:将90例PCOS排卵障碍性不孕患者随机分为对照组和观察组各45例,2组均予枸橼酸氯米芬胶囊口服治疗,观察组在此基础上应用中药周期疗法,服用归肾丸合逍遥散加减,总疗程均为3个月经周期。治疗前后检测性激素水平,并在治疗过程中观察患者排卵、妊娠、并发卵巢过度刺激症(OHSS)情况;疗程结束后当月进行宫颈黏液评分,比较2组的临床疗效。结果:观察组总有效率为88.89%,对照组总有效率为66.67%,2组相比,差异有统计学意义(P0.01)。疗程结束后,2组黄体生成激素(LH)、睾酮(T)及雌二醇(E2)均较治疗下降,促卵泡激素(FSH)较治疗前上升,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);观察组LH及T水平均较对照组下调(P0.05),FSH及E2水平虽较对照组有所改善,但差异均无统计学意义(P0.05)。2组排卵率接近(P0.05)。观察组妊娠率达24.44%,高于对照组的11.11%,差异有统计学意义(P0.01)。对照组有3例并发OHSS,观察组仅1例并发OHSS。观察组宫颈黏液评分高于对照组(P0.01)。结论:归肾丸合逍遥散联合克罗米芬治疗PCOS排卵障碍性不孕能有效改善患者的激素水平,提高排卵率及妊娠率,缓解临床症状,减少并发症,临床疗效满意。     

荷芪散对多囊卵巢综合征大鼠内分泌代谢及PI3K/AKT信号通路的影响

目的观察荷芪散对多囊卵巢综合征大鼠内分泌代谢的影响和对PI3K/AKT信号通路的调控作用,探讨荷芪散防治多囊卵巢综合征的可能作用机制。方法从60只健康雌性SD中随机选取15只作为正常组,其余大鼠均采用颈背部皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)的方法建立多囊卵巢综合征模型,将造模成功大鼠随机分为模型组、荷芪散组、二甲双胍组,每组15只。荷芪散组和二甲双胍组分别给予相应药物灌胃,正常组和模型组均给予生理盐水灌胃。灌胃8周后,检测各组大鼠血糖指标[空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]、血脂指标及性激素[黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)]水平,同时用HE染色法观察各组大鼠卵巢组织形态,采用RTPCR方法检测胰岛素受体底物-1(IRS-1)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶AKT-2(AKT-2)、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、葡萄糖转运蛋白因子-4(GLUT-4)、人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)mRNA表达水平。结果荷芪散组、二甲双胍组FPG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、LH、LH/FSH、T均明显低于模型组(P均0.05),而HDL-C变化不明显(P0.05);荷芪散组FPG、FINS、HOMA-IR与二甲双胍组比较差异均无统计学意义(P均0.05),TG、LDL-C、LH、LH/FSH、T均明显低于二甲双胍组(P均0.05),而TC、FSH明显高于二甲双胍组(P均0.05)。荷芪散组、二甲双胍组大鼠卵巢组织接近正常。荷芪散组、二甲双胍组大鼠卵巢组织中IRS-1、AKT、GSK-3β、GLUT-4mRNA相对表达量均明显高于模型组(P均0.05),PTENmRNA相对表达量均明显低于模型组(P均0.05);荷芪散组大鼠卵巢组织中IRS-1、AKT、GSK-3β、GLUT-4mRNA相对表达量均明显高于二甲双胍组(P均0.05),PTENmRNA相对表达量明显低于二甲双胍组(P0.05)。结论荷芪散可通过上调局部卵巢组织PI3K/AKT信号通路中相关重要信号传导分子的基因表达,下调拮抗因子的基因表达,改善多囊卵巢综合征模型大鼠的糖脂代谢、胰岛素抵抗及卵巢组织形态。     

电针不同穴位对多囊卵巢综合征大鼠高雄激素血症及卵巢雄激素受体表达的影响

目的:观察电针不同穴位对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠高雄激素血症和卵巢雄激素受体(AR)表达影响的作用差异,探讨电针治疗PCOS的可能机制。方法:SD大鼠随机分为对照组、模型组、足三里组、关元组、三阴交组、综合组,每组10只。采用来曲唑灌胃诱导PCOS模型。足三里组、关元组、三阴交组电针干预相应穴位,综合组同时电针所有穴位,每次20min,每日1次,连续14d。治疗后测量大鼠体质量、卵巢质量,HE染色观察卵巢形态结构,酶联免疫吸附法检测血清性激素水平和性激素结合球蛋白(SHBG),计算游离雄激素指数(FAI),免疫组化法检测卵巢卵泡AR的表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠体质量和卵巢质量明显增加(P0.01),血清睾酮(T)和FAI水平明显升高(P0.01),雌二醇(E2)和SHBG水平明显降低(P0.01),卵巢晚期卵泡AR蛋白表达增加(P0.05)。各电针组与模型组比较,体质量均明显减轻(P0.05),卵巢形态改善,T和FAI显著降低(P0.01),足三里组、关元组和综合组E2、SHBG明显升高(P0.01,P0.05),关元组卵巢质量明显降低(P0.01)。关元组和三阴交组晚期卵泡AR蛋白表达较模型组降低(P0.05,P0.01)。结论:电针不同穴位对PCOS大鼠高雄激素血症和卵巢多囊形态均有改善作用,不同穴位对PCOS大鼠的干预特点不同,临床可根据PCOS患者不同的临床表现选穴。