桑皮素对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨桑皮素对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制及其凋亡诱导作用。方法用10、15、20μmol/L桑皮素作用Hela细胞24 h后,在扫描电镜、透射电镜及倒置显微镜下观察细胞形态学变化;利用MTT法检测桑皮素对Hela细胞的增殖的影响;应用Hoechst单染实验检测Hela细胞的凋亡情况;采用qRT⁃PCR和Western blot检测Bax、Bcl⁃2 mRNA及蛋白的表达。结果桑皮素(2.5、5、7.5、10、15、20、25μmol/L)处理Hela细胞24、48 h,能明显的抑制Hela细胞增殖(P<0.05),且呈浓度依赖性。桑皮素(10、15、20μmol/L)处理Hela细胞24 h,细胞呈现早期凋亡。与0μmol/L桑皮素组比较,桑皮素(10、15、20μmol/L)能显著上调Bax mRNA及蛋白表达(P<0.05),下调Bcl⁃2 mRNA及蛋白表达(P<0.05)。结论桑皮素通过上调Bax表达和下调Bcl⁃2表达,从而诱导Hela细胞发生凋亡。     

紫草素对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的:研究紫草素(shikonin)对人宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:体外培养Hela细胞,分为对照组和紫草素组(浓度分别为4,8,16,32,64μmol·L-1),采用MTT法检测紫草素对Hela细胞增殖的抑制作用;紫草素处理Hela细胞24h后,采用流式细胞术观察细胞凋亡率的改变;Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移力的变化;Western blotting法分析黏着斑激酶(FAK)蛋白表达及FAK磷酸化水平的变化;实时荧光定量PCR技术检测FAK mRNA表达的情况。结果:紫草素对Hela细胞的增殖具有抑制作用,且具有浓度和时间依赖性;细胞凋亡率随着紫草素浓度的增加而逐步增高,其中32,64μmol·L-1的紫草素可明显抑制细胞增殖并诱导其凋亡(P<0.001)。4,8,16μmol·L-1的紫草素作用于Hela细胞后,能够显著降低Hela细胞的穿膜细胞数(P<0.05)。紫草素能够呈浓度依赖性的下调Hela细胞中FAK蛋白和mRNA的表达,使FAK磷酸化水平降低。结论:紫草素可显著抑制Hela细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能与抑制FAK磷酸化水平有关。     

洋椿苦素对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用研究

目的:研究洋椿苦素(cedrelone)体外对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用,并探讨其诱导细胞凋亡的作用机制。方法:采用CCK-8法计算不同浓度的洋椿苦素作用人宫颈癌Hela细胞后的IC50及增殖抑制率;Hoechst 33258荧光染色法和流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测洋椿苦素对Hela细胞凋亡的诱导作用;流式细胞术PI单染法检测洋椿苦素对Hela细胞生长周期的影响;Real-time PCR法测定CDK2、cyclinA mRNA表达。结果:不同浓度的洋椿苦素作用Hela细胞48小时后均能抑制其生长,其IC50值为1.4μg/ml。洋椿苦素作用24小时后,Hela细胞呈典型的凋亡形态学改变,细胞体积缩小,胞核致密浓染,呈半月状或呈碎块状。0.21μg/ml、0.42μg/ml、1.05μg/ml、1.47μg/ml、1.89μg/ml、4.22μg/ml的洋椿苦素作用Hela细胞24小时后的凋亡率分别为3%、4.1%、6.2%、7%、8.4%、58.5%。洋椿苦素作用于Hela细胞24小时后,可使细胞生长停滞在S期,即DNA合成期,并剂量依赖性地下调CDK2、cyclinA mRNA表达水平。结论:洋椿苦素对人宫颈癌Hela细胞增殖具有良好抑制作用,作用发挥与下调CDK2、cyclin A mRNA表达从而抑制Hela细胞S期DNA合成,诱导其凋亡有关。     

松油烯-4-醇通过线粒体途径诱导宫颈癌Siha细胞凋亡的机制研究

目的 探讨松油烯-4-醇对宫颈癌Siha细胞凋亡的影响以及其可能的机制。方法 采用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养Siha细胞,并将其分为对照组、顺铂组(10μmol/L)和5、7.5、10μmol/L松油烯-4-醇组。MTT法检测不同浓度松油烯-4-醇对Siha细胞增殖的影响,TUNEL荧光染色法和Annexin V-FITC/PI法检测Siha细胞凋亡情况,JC-1染色检测线粒体膜电位变化,RT-qPCR法检测Siha细胞Bax、cytochrome c、caspase9、HPV E6/E7 mRNA表达,Western blot法检测Siha细胞Bax、Bcl-2、cytochrome c、cleaved-caspase9蛋白表达。结果 松油烯-4-醇(5、7.5、10μmol/L)处理Siha细胞24 h后,细胞增殖能力减弱(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),线粒体膜电位降低(P<0.05),细胞Bax、cytochrome c、cleaved-caspase9蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),...     

乙酰紫草素联合奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨乙酰紫草素联合奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的影响。方法将人结肠癌HT29细胞分为空白组、乙酰紫草素组(10μmol/L)、奥沙利铂组(1μmol/L)和联合给药组(10μmol/L乙酰紫草素+1μmol/L奥沙利铂),MTT法检测HT29细胞增殖抑制率,流式细胞术检测HT29细胞凋亡率、qRT-PCR法检测HT29细胞Ki-67、Bcl-2及Bax mRNA表达,Western blot法检测磷酸化磷脂酰肌醇-3-羟激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)蛋白表达。结果人结肠癌HT29细胞经乙酰紫草素、奥沙利铂和联合给药处理24、48、72 h后,细胞增殖抑制率均增加,其中联合给药组细胞增殖抑制率最高(P<0. 05)。药物处理HT29细胞48 h后,与空白组比较,乙酰紫草素组、奥沙利铂组和联合给药组凋亡率、Bax mRNA表达增加(P<0. 05),而Ki-67、Bcl-2 mRNA表达及p-PI3K、p-Akt蛋白表达降低(P<0. 05);联合给药组的细胞凋亡率、Bax mRNA表达均高于乙酰紫草素组和奥沙利铂组,Ki-67、Bcl-2 mRNA表达及p-PI3K、p-Akt蛋白表达低于乙酰紫草素组和奥沙利铂组。结论乙酰紫草素和奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞均具有抑制增殖及诱导凋亡作用,可能与调控PI3K/Akt信号通路有关,且两者联用时效果更好。     

紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的研究紫草素(Shikonin)对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养Ishikawa细胞,设空白对照组、紫草素0.3μg/m L组、紫草素0.5μg/m L组、紫草素0.7μg/m L组和顺铂40μg/m L组,每组设10个复孔。各组给予相应干预48 h后,采用MTT比色法测定细胞增殖抑制率,Flow Cytometry法检测细胞周期和细胞凋亡状况并计算细胞凋亡率,RT-PCR法检测细胞中bcl-2 mRNA、bax mRNA表达情况并计算bax/bcl-2比值,Western blotting法检测细胞中Caspase-3蛋白表达情况并进行半定量分析。结果与空白对照组相比,紫草素0.5μg/m L组、紫草素0.7μg/m L组和顺铂40μg/m L组Ishikawa细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、bax mRNA表达量及bax/bcl-2比值、Caspase-3蛋白表达量均显著升高(P均0.05),而G2/M期细胞比例及bcl-2 mRNA表达量均显著降低(P均0.05);且紫草素0.7μg/m L组Ishikawa细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、bax/bcl-2比值和Caspase-3蛋白表达量均明显高于顺铂40μg/m L组(P均0.05),bcl-2 mRNA表达量明显低于顺铂40μg/m L组(P均0.05)。结论紫草素具有抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖并促进其凋亡的作用,机制可能与紫草素调节凋亡相关基因和蛋白表达有关。     

紫草素对感染HPV16的宫颈癌Caski细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究紫草素(shikonin)对感染HPV16的宫颈癌Caski细胞作用。方法:对宫颈癌Caski细胞进行HPV病毒基因鉴定,将紫草素配成不同浓度(0、5、10、20、40、80μmol·L~(-1))作用于体外培养的宫颈癌Caski细胞,用MTT方法检测不同浓度紫草素作用不同时间(12 h、24 h、36 h)后对Caski细胞增殖能力的影响;采用Annexin V/PI试剂染色不同浓度紫草素(5、10、20、40μmol·L~(-1))作用24 h后的宫颈癌Caski细胞,上流式细胞仪观察细胞凋亡改变;用DAPI染色观察5、10、20、40μmol·L~(-1)紫草素作用于Caski细胞24 h后的凋亡形态学变化。结果:紫草素对宫颈癌Caski细胞具有抑制增殖、促进凋亡作用,在一定范围内,随着浓度和时间增加,抑制增殖作用逐渐增加;凋亡数目逐渐增多,其中20、40μmol·L~(-1)的紫草素可明显抑制细胞增殖并诱导其凋亡,DAPI染色可观察到典型的细胞凋亡改变:细胞核碎裂、固缩;且细胞凋亡现象随紫草素浓度增加而愈加明显。结论:紫草素可抑制感染HPV16的宫颈癌Caski细胞增殖并促进其凋亡。     

隐丹参酮对宫颈癌Hela细胞增殖及细胞凋亡的影响

目的:研究隐丹参酮对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响。方法:MTT法检测不同浓度隐丹参酮分别在24,48,72 h对Hela细胞的抑制作用;流式细胞仪(FCM)检测隐丹参酮对Hela细胞周期和凋亡的影响;Western blot法检测E6,p53,p21蛋白的表达。结果:不同质量浓度(0.5~16 mg.L-1)隐丹参酮对Hela细胞的毒性均有明显剂量和时间依赖性,其24,48,72 h的IC50值分别为17.8,8.17,6.55 mg.L-1;隐丹参酮可使Hela细胞细胞周期的构成发生明显的变化并诱导细胞凋亡。Western blot表明,隐丹参酮作用Hela细胞后HPV E6的蛋白水平表达逐渐降低,p53和p21的蛋白水平表达逐渐升高。结论:隐丹参酮对宫颈癌Hela细胞有较强的细胞毒性,其作用机制可能是使Hela细胞生长停滞在G0/G1期并诱导细胞凋亡,使S期细胞比例降低;抑制HPV E6的蛋白的表达,使p53功能恢复,启动凋亡,从而起到杀伤肿瘤的作用。     

金荞麦提取物对人宫颈癌Hela细胞增殖和诱导凋亡的影响

目的:探讨金荞麦提取物对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡作用及可能机制。方法:经不同浓度金荞麦提取物(0.4、2、10、50、250 g/ml)处理体外培养的人宫颈癌Hela细胞,采用MTT法检测细胞增殖活性;经6 g/ml金荞麦提取物处理的Hela细胞,相差显微镜和荧光显微镜观察细胞形态,Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳法检测DNA碎片,ELISA法检测Caspase-1、3、8、9活性,Western blot法检测PARP、细胞色素C含量、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:与空白对照组比较,金荞麦提取物浓度为0.2 g/ml开始起效,24h内明显抑制Hela细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性;与空白对照组比较,6 g/ml金荞麦提取物处理的Hela细胞出现明显的核固缩、核碎裂,细胞凋亡率、DNA碎片明显增加;与金荞麦提取物组比较,金荞麦提取物与caspase抑制剂混合组DNA碎片明显减少,细胞成活率明显升高;与作用0h组比较,6 g/ml金荞麦提取物处理的Hela细胞PARP裂片、细胞色素C、Bax和Caspase-3、8、9明显增加,Bcl-2明显减少。结论:金荞麦提取物可抑制Hela细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与通过促进诱导凋亡蛋白Bax表达和抑制抗凋亡蛋白Bcl-2表达,从而增加细胞色素C和Caspases有关。     

天冬多糖低氧下抑制肝癌作用的体外实验研究

目的探讨低氧环境下天冬多糖对人肝癌细胞生长的影响及初步作用机制。方法氯化钴(CoCl2)化学模拟低氧下培养4种人肝癌细胞株(HepG2、Hep3B、SMMC-7721及Bel-7402),加入不同浓度的天冬多糖(0mg/m L、0. 9 mg/m L、1. 2 mg/m L、1. 8 mg/m L、2. 4 mg/m L、2. 7 mg/m L、3. 6 mg/m L)培养,CCK-8法检测天冬多糖对4种人肝癌细胞株细胞增殖的影响,根据IC50选取0. 9 mg/m L、1. 8 mg/m L、2. 7 mg/m L作为后续实验的天冬多糖低、中、高剂量浓度。后续实验4种细胞均设6组:常氧对照组只加入培养液培养;低氧对照组加入200μmol/L CoCl2培养;低氧低剂量组加入200μmol/L CoCl2+0. 9 mg/m L天冬多糖培养;低氧中剂量组加入200μmol/L CoCl2+1. 8 mg/m L天冬多糖培养;低氧高剂量组加入200μmol/L CoCl2+2. 7 mg/m L天冬多糖培养;常氧高剂量组加入2. 7 mg/m L天冬多糖培养。培养24 h后,Real-time PCR检测各组血管内皮生长因子(VEGF)、Bax、Bcl-2 mRNA表达情况,Western-blot方法检测各组缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、VEGF、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Cleaved Caspase-3蛋白表达情况。结果低氧下天冬多糖可明显抑制人肝癌细胞株的生长,且抑制作用呈剂量依赖性。天冬多糖可明显抑制HIF-1α、VEGF、MMP-9蛋白表达及VEGF mRNA、Bcl-2mRNA表达,促进Cleaced Caspase-3蛋白及Bax mRNA表达,且低氧下高剂量作用最明显。结论天冬多糖在体外低氧条件下能抑制肝癌细胞的生长,其可能通过抑制HIF-1α/VEGF表达及肝癌细胞的侵袭、促进肝癌细胞凋亡起到抗肝癌的作用。     

雷公藤红素通过下调Pin1抑制Hela细胞的机制研究

目的研究不同剂量雷公藤红素对宫颈癌Hela细胞增殖、周期、凋亡、迁移的影响及可能的作用靶点。方法将0,0.25,0.5,1,2,4μmol/L雷公藤红素处理Hela细胞12、24 h后,采用MTT试验考察细胞增殖情况;将0,0.25,0.5,1μmol/L雷公藤红素处理Hela细胞24 h后,采用流式细胞术检测细胞周期、凋亡、迁移变化情况,采用RT-qPCR、Western blot检测Pin1及Cdk2、Cdk6、Cyclin D1、Akt、P65、Jnk表达情况。结果雷公藤红素在12、24 h抑制Hela细胞增殖、迁移,且呈浓度依赖性(P0.05)。雷公藤红素可显著降低G_1期细胞比例(P0.05),升高G_2期细胞比例(P0.05),降低S期细胞比率(P0.05),且呈浓度依赖性。雷公藤红素可增加早期凋亡、晚期凋亡比例(P0.05)。雷公藤红素在mRNA、蛋白水平显著抑制Pin1及其下游Cdk2、Cdk6、Cyclin D1、Akt、P65、Jnk的表达(P0.05)。结论雷公藤红素可能通过下调Pin1发挥对Hela细胞的抗肿瘤作用。     

灰树花多糖对宫颈癌细胞增殖和转移的影响及机制

目的探讨灰树花多糖对宫颈癌Caski细胞增殖、凋亡、侵袭迁移及PI3K/AKT(磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B)信号通路的影响。方法 50、100、200μg/mL灰树花多糖处理Caski细胞48 h,通过MTT比色法、Transwell小室及Annexin V-FITC/PI双染法分别检测细胞增殖、侵袭迁移及凋亡率,Western blot检测AKT、p-AKT、PCNA(增殖细胞核抗原)、Cleaved caspase-3(裂解的半胱天冬酶3)和E-cadherin蛋白(上皮钙黏蛋白)表达。使用PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002(10μmol/L)单独或联合灰树花多糖(10μmol/L LY294002和200μg/mL灰树花多糖)处理Caski细胞48 h,检测各组细胞增殖、侵袭迁移、凋亡及AKT、p-AKT、PCNA、Cleaved caspase-3和E-cadherin蛋白表达。结果随着灰树花多糖质量浓度增加细胞增殖、侵袭和迁移能力降低,凋亡率升高,p-AKT和PCNA表达降低,Cleaved caspase-3和E-cadherin表达升高(P0.05)。LY294002可增强灰树花多糖对Caski细胞增殖、侵袭迁移、凋亡及p-AKT、PCNA、Cleaved caspase-3和E-cadherin表达的影响。结论灰树花多糖可通过阻断PI3K/AKT信号通路抑制宫颈癌Caski细胞增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡。     

鸦胆子油乳对HPV16亚型感染细胞的作用及机制研究

目的研究鸦胆子油乳（bruceajavanicaoilemulsion,BJOE）在体外对人乳头瘤病毒（hu-manpapillomavirus,HPV）16亚型感染细胞的抑制作用及其可能作用机制。方法选择人宫颈鳞状上皮永生化细胞系（Ectl／E6E7）与人宫颈癌CaSki细胞系作为HPV16亚型感染的宫颈癌前病变与宫颈癌体外实验模型。采用MTT法检测5、10、20及40#g／mLBJOE体外分别作用24、48及72h对HPV16感染细胞增殖活性的影响;Hoechst33258细胞核染色荧光显微镜下观察细胞凋亡形态学变化;AnnexinV-FITC／Pl双染色法检测细胞凋亡率;半定量RT．PCR法检测HPV16E6、E7基因mRNA的表达;免疫细胞化学染色（Elivison二步法）检测HPV16E6、E7、p53及Rb基因蛋白的表达。结果（1）5、10、20及40μg,mLBJOE体外分别作用24、48及72h对HPV16感染细胞的增殖具有明显抑制作用,且表现为浓度与时间的依赖性（P〈0．05）。（2）HPV16阳性细胞在BJOE作用后发生了细胞凋亡形态学变化,5、10及20μg／mLBJOE体外作用48h后细胞凋亡率逐渐升高（P〈0．05）。（3）5、10及20μg／mLBJOE体外作用HPV16阳性细胞48h后E6与E7基因mRNA的相对表达量逐渐降低（P〈0．05）。（4）5、10及20μg,mLBJOE作用后,HPV16E6、E7及突变型P53蛋白的表达逐渐减弱（P〈0．05）,而Rb蛋白的表达逐渐增强（P〈0．05）。结论BJOE在体外对HPV16亚型感染细胞具有明显的抑制作用,其作用机制可能与药物下调病毒癌基因E6、E7表达相关。     

高良姜素诱导人乳头瘤病毒阳性的宫颈癌细胞凋亡实验研究

目的研究高良姜素对人乳头瘤病毒(HPV)阳性人宫颈癌细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法选择2株HPV阳性人宫颈癌细胞(Si Ha、He La)和1株HPV阴性人宫颈癌细胞(C-33-A),用不同浓度的高良姜素(20、40、80μmol/L)分别处理24、48、72 h后,采用噻唑蓝(MTT)法测定高良姜素对3株宫颈癌细胞增殖的影响;不同浓度高良姜素处理宫颈癌细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;Western blotting法检测Bcl-2家族蛋白表达情况。结果高良姜素可以剂量和时间依赖性地降低HPV阳性宫颈癌细胞Si Ha和He La的活力;而对于HPV阴性的宫颈癌细胞C-33-A活力无明显影响;细胞周期检测显示高良姜素可以使Si Ha和He La细胞的生长阻滞在G1或G2/M期;流式细胞仪分析发现40μmol/L高良姜素作用于Si Ha和He La细胞48 h后,细胞出现明显凋亡,而C-33-A细胞仅有少量凋亡;Western blotting检测发现40μmol/L高良姜素处理后,HPV阳性宫颈癌细胞中促凋亡蛋白Bad、Bid、Bax表达量升高,而抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-w表达量降低。结论高良姜素能抑制HPV阳性宫颈癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2、Bcl-w基因的表达及上调Bad、Bid、Bax基因的表达有关。     

黄芩苷对Hela细胞凋亡的影响

目的探讨黄芩苷诱导Hela细胞的凋亡作用及对PI3K/AKT/mTOR通路的影响。方法培养Hela细胞后分为空白组、卡铂组(40μg/mL)及黄芩苷低、高剂量组(40、80μmol/L),处理24 h。MTT法检测细胞增殖,Annexinv-FITC/PI双染色和hoechst 33342染色检测细胞凋亡,Western blot法检测p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达。结果与空白组比较,黄芩苷(40、80μmol/L)能抑制细胞增殖(P<0.01),增加细胞凋亡率(P<0.01),抑制p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达(P<0.01),且细胞出现明显的染色质凝集、核萎缩、凋亡小体增多现象。结论黄芩苷可能通过下调PI3K/AKT/mTOR通路,从而具有抑制HeLa细胞增殖、促进凋亡的作用。     

常氧条件下姜黄素对肝癌Hep1细胞增殖及HIF-1α mRNA表达的影响

目的:研究常氧条件下姜黄素对Hep1细胞的增殖及HIF-1α mRNA表达的影响。方法CCK-8法检测常氧条件下不同浓度姜黄素(0、5、10、15、20μmol/L)对肝癌Hep1细胞增殖的影响;用终浓度为15μmol/L姜黄素对体外肝癌细胞系Hep1细胞进行干预,流式细胞术分析Hep1细胞凋亡的变化;常氧条件下不同浓度姜黄素(0、5、10、15、20μmol/L)对肝癌Hep1细胞作用24h后,RT-PCR检测Hep1细胞HIF-1α mRNA表达水平的变化。结果:5、10、15、20μmol/L的姜黄素在作用1周后,呈浓度依赖性抑制肝癌Hep1细胞增殖;流式分析显示15μmol/L的姜黄素使Hep1细胞凋亡率增高,差异具有统计学意义(P0.05);与空白对照组相比,10μmol/L姜黄素处理组的HIF-1α mRNA的表达水平升高,差异具有统计学意义(P0.05),15、20μmol/L姜黄素处理组的HIF-1α mRNA的表达水平升高更为显著(P0.01)。结论:常氧条件下,姜黄素呈浓度依赖性抑制肝癌Hep1细胞的增殖,促进Hep1细胞的凋亡和HIF-1α mRNA的表达,常氧条件下姜黄素抑制肝癌Hep1细胞增殖的机制可能与缺氧条件下姜黄素的抑瘤机制有所不同。     

银杏叶提取物对H2O2诱导的胰岛RIN-mβ细胞凋亡的影响

目的:探讨银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,EGb761)对过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)诱导的胰岛RIN-mβ细胞株凋亡的影响。方法:以500μmol/L H2O2作用于胰岛RIN-mβ细胞6 h建立凋亡模型;分别设空白对照组(Control)、阴性对照组(H2O2)、阳性对照组(槲皮素Que 100μmol/L)、EGb 761单用对照组(EGb 761100μmol/L),EGb 761给药组(EGb 761 10、30、100μg/ml);采用MTT检测细胞存活率,Hoechst 33258染色荧光显微镜观察细胞形态变化,PI单染色法和Annexin V-PI双染色法流式细胞术分析细胞凋亡情况。结果:与空白对照组比较,阴性对照组500μmol/L H2O2作用6 h后,细胞存活率明显降低、细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。与阴性对照组相比,EGb 761显著降低H2O2诱导的细胞凋亡(P<0.01),且呈剂量依赖性。结论:过氧化氢可诱导胰岛RIN-mβ细胞凋亡,EGb 761对H2O2诱导的RIN-mβ细胞损伤和凋亡具有明显的保护作用。     

苦参碱对宫颈癌细胞中Bcl-2/Bax表达水平及生物学行为的影响

目的:探讨苦参碱对宫颈癌细胞中Bcl-2/Bax表达水平及生物学行为的影响。方法:将宫颈癌Hela细胞分为宫颈癌组和药物组,宫颈癌组无药物干预,药物组采用三种1.0、1.5、2.0 g/L浓度干预,采用MTT法、Transwell法、流式细胞仪及免疫印迹分别检测Hela细胞活性抑制率、细胞侵袭数目、细胞凋亡及细胞中Bcl-2/Bax蛋白表达。结果:MTT结果显示,宫颈癌组Hela细胞活性抑制率低于药物组(P<0.05),2 g/L药物组Hela细胞活性抑制率高于1、1.5 g/L药物组(P<0.05),同一组中,72 h Hela细胞活性抑制率高于24、48 h(P<0.05),随着药物浓度及时间延长Hela细胞活性抑制率逐渐升高; 1 g/L药物组Hela细胞侵袭数目低于宫颈癌组(P<0.05),2 g/L药物组Hela细胞侵袭数目低于1、2 g/L药物组(P<0.05),四组细胞侵袭数目比较,差异有统计学意义(P<0.05); G₀-G₁期宫颈癌组细胞凋亡与药物组比较,具有统计学差异(P<0.05),G₀-G₁期、G₂-M期各组相差较小(P>0.05),2 g/L药物组Hela细胞凋亡率最高,宫颈癌组细胞凋亡率最低,四组Hela细胞凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.05); 1 g/L药物组Hela细胞下Bcl-2蛋白水平低于宫颈癌组(P<0.05),2 g/L药物组Hela细胞下Bcl-2蛋白水平低于1、1.5 g/L药物组(P<0.05),Bax表达与Bcl-2相反。结论:苦参碱抑制宫颈癌Hela细胞活性,加快Hela凋亡,减少Hela细胞侵袭,并具有浓度依赖性,其作用机制可能与抑制Bcl-2表达,增加Bax水平相关。     

常氧条件下姜黄素对肝癌Hep1细胞VEGF表达的影响

目的探讨常氧条件下姜黄素对肝癌Hep1细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 将肝癌Hep1细胞用不同浓度的姜黄素(终浓度分别为0,5,10,15,20 μmol/L)处理,置于常氧环境中培养24h.RT - PCR检测Hep1细胞中VEGF mRNA表达水平的变化,Western - blot检测Hep1细胞VEGF蛋白表达的变化.结果 姜黄素10,15,20 μmol/L组VEGF mRNA的表达与空白对照组相比均明显升高（P＜0.05或P＜0.01）,且呈浓度依赖性.姜黄素0,5μmol/L组VEGFmRNA的表达与空白对照组间差异无统计学意义(P＞0.05);姜黄素5,10,15,20 μmol/L组VEGF蛋白的表达与空白对照组相比均明显升高(P＜0.01),且呈浓度依赖性.姜黄素0 μmol/L组VEGF蛋白的表达与空白对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 常氧条件下,姜黄素呈浓度依赖性方式上调肝癌Hep1细胞VEGF的表达.     

木犀草素通过调控JAK2/STAT3信号通路对Hela细胞增殖和凋亡的影响

目的探究木犀草素通过调控JAK2/STAT3信号通路对Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法木犀草素(10、20、30、40μmol/L)、JAK2抑制剂AG490(40μmol/L)单独或共同处理Hela细胞24 h。利用MTT检测Hela细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测Bax、Bcl-2、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达。结果木犀草素(30、40μmol/L)处理24 h后可抑制Hela细胞的增殖,促进Hela细胞凋亡(P0.01)。与对照组比较,AG490、木犀草素(40μmol/L)单独处理Hela细胞24 h,p-JAK、p-STAT3及Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达增加。与AG490组相比, AG490与木犀草素(40μmol/L)共同处理Hela细胞,细胞增殖能力下降(P0.01)。结论木犀草素可能通过JAK2/STAT3信号通路来调控Hela细胞的增殖和凋亡。