富马酸二甲酯对大鼠椎间盘退变髓核中低氧诱导因子-1α表达和功能的影响

目的 建立SD大鼠腰椎间盘退变模型采用测定低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在大鼠模型腰椎间盘髓核中的表达情况及作用,探讨富马酸二甲酯(DMF)对其表达及功能的影响.方法 对大鼠腰椎退变模型行磁共振成像(MRI)扫描后,取L4/L5节段髓核组织行蛋白多糖检测,石蜡包埋、切片后进行HIF-1α的免疫组化染色.结果 MRI结果显示模型对照组(B组)的椎间盘髓核存在明显的退变,T2加权相信号降低 (P<0.05).B组髓核中的HIF-1α呈强阳性,与另两组比较差异有统计学意义(P<0.05).对全部的髓核组织的进行蛋白多糖含量的检测,可见对照组B组的蛋白多糖成分(2.06±0.04) ng·g-1,流失最为严重,富马酸二甲酯用药组(C组)(2.06±0.05) ng·g-1相对较轻,正常对照组(A组)含量为(3.28±0.03) ng·g-1,三组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 HIF-1α在退变的腰椎间盘组织中表达增高,其表达与腰椎的退变密切相关.富马酸二甲酯作为HIF-1α的抑制剂能降低HIF-1α的表达,抑制和延缓腰椎间盘退变的形成和发展.     

腰椎间盘髓核切吸术和臭氧注射治疗腰椎间盘突出症的疗效比较

目的研究腰椎间盘髓核切吸术和臭氧治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法将100例患者随机分成两组,即对照组和实验组,每组50例,对照组采用腰椎间盘髓核切吸术,实验组采用臭氧注射治疗腰椎间盘突出症,比较两组患者的有效率及治疗前后生活质量的评分。结果实验组的有效率高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组治疗后生活质量评分高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);实验组治疗后生活质量评分高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);实验组治疗后生活质量评分略高于对照组治疗后,差异无统计学意义(P>0.05)。结论臭氧注射治疗腰椎间盘突出症的临床疗效优于腰椎间盘髓核切吸术,两种方法治疗后患者的生活质量均得到提高,臭氧注射是治疗腰椎间盘突出症的一种新方法。     

非酒精性脂肪性肝病兔肝功能影响因素探讨

目的以丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)为肝功能观察指标,探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)兔肝功能影响因素。方法 40只日本大耳白兔随机分为重度NAFLD模型组(重度组)、轻度NAFLD模型组(轻度组)、空白对照组(对照组)。重度组每只兔给予高脂饲料160 g/d,轻度组给予高脂饲料80 g/d+普通饲料80 g/d,对照组给予普通饲料160 g/d。饲养13周。饲养前耳中动脉采血5 mL于肝素管,离心、血浆保存于-20℃冰柜中。实验结束10%水合氯醛耳缘静脉麻醉,腹主动脉抽血5 mL于肝素管,离心、血浆保存于-20℃冰柜中。全部血浆按照设备、试剂操作常规检测甘油三酯、胆固醇、血糖、ALT、AST。在肝脏同一部位取1.5 cm×1.5 cm×1.5 cm组织1块,浸泡于10%甲醛固定液中固定,脱水石蜡包埋,切片,苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察肝脏组织形态学改变。结果①甘油三酯、胆固醇:饲养前重度组、轻度组、对照组甘油三酯、胆固醇比较差异无统计学意义(P>0.05)。饲养后甘油三酯、胆固醇重度组分别为(32.1±1.2)、(6.0±2.1)mmol/L,轻度组分别为(18.3±2.1)、(4.4±1.9)mmol/L,与饲养前比较差异有统计学意义(P<0.01);重度组高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.01)。②血糖:饲养前重度组、轻度组、对照组血糖比较差异无统计学意义;饲养后重度组(11.0±1.2)mmol/L、轻度组(9.2±2.0)mmol/L与饲养前比较差异有统计学意义(P<0.01和<0.05);重度组高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。③ALT、AST:饲养前重度组、轻度组、对照组ALT、AST差异无统计学意义(P>0.05),饲养后重度组ALT(122±9)U/L、AST(126±9)U/L,轻度组ALT(83±7)U/L、AST(85±9)U/L,与对照组ALT(71±7)U/L、AST(72±4)U/L比较差异有统计学意义(P<0.01),重度组与轻度组比较差异有统计学意义(P<0.01)。④肝脏病理学:重度组重度NAFLD,轻度组轻度至中度NAFLD,对照组正常肝脏。结论 NAFLD兔肝功能损害与血糖、甘油三酯、胆固醇代谢紊乱及NAFLD程度相关。     

白细胞介素6 mRNA在突出腰椎间盘中的表达及临床意义

目的探讨白细胞介素6(IL-6)mRNA在突出腰椎间盘组织的表达及临床意义.方法以RT-PCR技术测定不同类型椎间盘髓核、纤维环、软骨终板组织标本IL-6 mRNA表达.结果椎间盘突出症组IL-6 mRNA表达水平明显高于正常对照组,差异非常显著(P＜0.001).病变组髓核、纤维环、软骨终板不同部位IL-6 mRNA的表达有显著差异(P＜0.05).根据Norbet Boos的病理组织学分级,轻度病变者11例,重度者14例,重度组IL-6 mRNA的表达明显高于轻度者,有显著统计学意义.不同突出病理类型椎间盘突出类椎间盘型IL-6 mRNA的表达有显著差异,游离型高于突出型,突出型高于凸起型,有显著统计学意义.髓核组织中IL-6mRNA的表达与患者的直腿抬高程度(SLR)呈负相关(γ=-0.457,P=0.003).在不同病程阶段患者椎间盘组织中IL-6 mRNA的表达无明显差异.结论IL-6参与腰椎间盘突出的病理过程,随病情的加重而分泌增多.IL-6 mRNA高水平表达与腰椎间盘突出症患者腰腿痛发生有关.     

孕酮对Aβ_(25-35)诱导的阿尔采末病模型神经元凋亡的影响

目的研究神经甾体孕酮(PROG)对Aβ25-35诱导的AD模型神经元凋亡的影响。方法将原代培养的大鼠皮质神经元分为对照组、模型组及3个浓度PROG处理组。采用四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞存活率,Hoechest 33342核染色法检测神经元凋亡,Western blot检测胞质caspase-3蛋白表达水平。结果与模型组比较,PROG能剂量依赖地对抗Aβ25-35引起的大鼠神经元存活率的降低;且细胞凋亡率及胞质caspase-3表达水平均降低,细胞凋亡率分别为(53.0±4.2)%(P>0.05)、(31.8±2.1)%(P<0.01)和(11.8±1.2)%(P<0.01),caspase-3表达水平分别为(5.80±0.27)(P>0.05)、(4.98±0.48)(P<0.01)和(3.58±0.21)(P<0.01);其中0.1μmol.L-1 PROG处理组的细胞凋亡率及胞质caspase-3表达水平均与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PROG能通过抑制神经元凋亡对抗Aβ诱导的神经元损伤,产生保护作用。     

Fas及其配体在腰椎间盘组织中的表达及意义

目的了解Fas与FasL在正常椎间盘及椎间盘突出症患者椎间盘组织中的表达情况。方法收集20例腰椎间盘突出症患者的椎间盘组织(破裂型与非破裂型各10例)及8例脑死亡者的正常椎间盘组织,通过免疫组织化学观察FasL,Fas的表达情况。结果正常髓核组织中仅有FasL的表达,突出的椎间盘组织中存在FasL,Fas的表达,而且表达程度在正常组与腰椎间盘突出症患者组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论正常髓核组织中存在FasL的表达,提示FasL是使髓核组织产生免疫豁免效应的一个重要因素。当椎间盘突出时(纤维环破裂),则会在局部激发炎症反应,引起髓核细胞凋亡,而髓核细胞通过自分泌或旁分泌途径导致FasL表达增高是可能的机制之一。     

颅脑外伤大鼠急性期血清硫化氢浓度的变化及其意义

目的探讨颅脑损伤大鼠血清硫化氢的浓度变化及其临床意义。方法用分光光度法测定18只颅脑外伤雄性SD大鼠及6只正常对照和6只手术对照雄性SD大鼠的血清硫化氢浓度,并分析脑外伤不同临床亚组间血清硫化氢含量的差异及血清硫化氢含量与颅脑损伤程度的关系。结果轻度脑外伤大鼠血清中硫化氢浓度[(33±7)μmol/L]明显高于正常对照组[(15±5)μmol/L],差异有统计学意义(P<0.01),与假手术组[(17±6)μmol/L]比较,差异有统计学意义(P<0.05);在颅脑外伤大鼠中,重度损伤组[(64±11)μmol/L]与中度损伤组[(48±8)μmol/L]均高于轻度损伤组[(33±7)μmol/L],组间比较差异有统计学意义(P<0.05),且重度损伤组与中度损伤组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论急性颅脑损伤大鼠血清中硫化氢含量升高,脑实质损伤程度越重,其血清硫化氢含量升高越明显,检测血清中硫化氢含量变化对判断颅脑损伤病情有一定实用价值。     

微小RNA-107 调控内质网应激对喉癌Hep-2 细胞癌增殖及凋亡的影响

目的探讨微小RNA(miR-107)调控内质网应激对喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响。方法将miR-107类似物和阴性对照片段转染至对应组细胞中,以未转染组作为空白组。采用荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组Hep-2细胞中miR-107相对表达量,用蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组Hep-2 细胞中的内质网应激有关蛋白即蛋白激酶R 样内质网激酶(PERK)及活化转录因子4(ATF4)蛋白的表达,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定Hep-2细胞的增殖能力,用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果三组转染细胞miR-107相对表达量差异有统计学意义(χ2=11.50,P<0.05)。其中mimics组miR-107的相对表达量为(15.32±1.94),与mimics组相比较,NG组、空白组miR-107相对表达量均降低(P<0.05)。三组转染细胞的PERK和ATF4蛋白表达水平均差异有统计学意义(F=70.35、13.77,P<0.05)。其中mimics组PERK 和ATF4蛋白的相对表达量为(0.53±0.07)和(0.75±0.06),与mimics组相比较,NG组和空白组的PERK和ATF4蛋白相对表达量均降低(P<0.05)。MTT分析结果显示,三组细胞的增殖能力差异有统计学意义(F=21.44、28.38、59.14,P<0.05)。其中mimics组Hep-2细胞增殖能力在12、24、36 h时分别为(0.15±0.01)、(0.33±0.03)和(0.47±0.04),与mimics组比较,在12、24、36 h后NG组、空白组Hep-2细胞增殖能力均有显著升高(P<0.05)。三组转染细胞的细胞凋亡率比较差异有统计学意义(F=102.32,P<0.05)。其中mimics组Hep-2细胞凋亡率为(10.18±0.93),与mimics组相比较,NG组和空白组的细胞凋亡率均降低(P<0.05)。结论上调miR-107的表达能够抑制Hep-2细胞的增殖,促进Hep-2细胞凋亡,内质网应激可能在其中有重要作用。     

实验性兔腰椎间盘退变模型中Fas/FasL基因表达及意义

目的建立腰椎间盘退变模型,检测退变髓核中Fas/FasL基因表达水平,阐明Fas/FasL基因的过度表达是导致髓核细胞凋亡的主要因素之一,腰椎间盘在Fas/FasL基因的过度表达的情况下可能导致超常的凋亡,最终导致椎间盘退变甚或突出。方法选用20只清洁级成年日本大耳白兔,按体重编号,随机分为2组,即模型组和对照组。模型组：麻醉后,手术造成腰椎间不稳;并加以异常应力,以促进造模。对照组（n=10）：对照组同法麻醉,作皮肤切口后直接缝合;两组动物在相同条件下饲养,于术后1M、2 M随机各取5只兔子行病理学检查证明造模成功,同时检测两组动物髓核中Fas/FasL基因表达水平。结果 1术后2月模型组兔腰椎间盘2造模2月后,对照组兔腰椎间盘病理学检查无明显退变表现;而模型组造模2个月后,出现纤维环断裂,髓核向后突出,说明造模成功。2检测本实验提取的总RNA纯度高,RT-PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳后紫外透射仪下可见扩增之特异产物条带,且目的基因片段产物与引物设计之目的片段大小完全吻合;Fas mRNA、FasL mRNA在退变腰椎间盘组织中有过度表达,与正常腰椎间盘组织相比,其差异有显著性（P〈0.05）。结论腰椎间盘退变模型髓核中有Fas/FasL基因表达,其表达水平与正常腰椎间盘组织相比,其差异有显著性（P〈0.05）;说明Fas/FasL基因的过度表达是导致髓核细胞凋亡的主要因素之一,腰椎间盘在该基因的过度表达的情况下可能导致超常的凋亡,最终导致椎间盘退变甚或突出。     

2,3,7,8-四氯二苯-对-二噁英对BRL-3A细胞增殖、凋亡及胰岛素样生长因子2表达的影响

目的探讨2,3,7,8-四氯二苯-对-二噁英(TCDD)对大鼠肝BRL-3A细胞增殖、凋亡以及胰岛素样生长因子2(IGF2)表达的影响。方法培养BRL-3A细胞,TCDD 5,10,15和20 nmol.L-1作用24 h,MTT法检测细胞存活。BRL-3A细胞紫外线照射2 min或经无血清培养后,加入TCDD 10 nmol.L-1,流式细胞计数方法检测细胞凋亡。荧光定量PCR方法检测TCDD 10 nmol.L-1对BRL-3A细胞Igf2 mRNA表达的影响,Western印迹法检测IGF2蛋白表达。结果 TCDD 5,10,15和20 nmol.L-1作用24 h,BRL-3A细胞的存活率分别为(107.3±0.9)%,(122.6±1.2)%,(115.2±0.4)%和(112.3±1.1)%,明显高于正常对照组(P<0.05),TCDD 10 nmol.L-1对BRL-3A细胞增殖促进作用最强。紫外线照射2 min的溶剂对照组BRL-3A细胞的凋亡率为(26.4±5.0)%,加入TCDD 10 nmol.L-1细胞凋亡率明显降低为(12.2±3.2)%(P<0.05);无血清培养的溶剂对照组72和120 h BRL-3A细胞的凋亡率分别为(49.6±7.6)%和(51.6±9.1)%,加入TCDD 10 nmol.L-1组的细胞凋亡率显著降低,分别为(22.0±5.1)%和(31.0±5.5)%(P<0.05)。与溶剂对照组相比,TCDD 10 nmol.L-1组Igf2基因的表达随作用时间逐渐增高,TCDD作用24 h细胞Igf2 mRNA的表达增加了1.67倍,蛋白的表达增加了2.6倍(P<0.05)。结论 TCDD具有刺激BRL-3A细胞增殖和抑制该细胞凋亡的作用;TCDD可能通过上调BRL-3A细胞中IGF2的表达,调节细胞的增殖和凋亡。     

椎间孔镜腰椎间盘切除术与胶原酶髓核溶解术治疗单节腰椎间盘突出症的比较

目的 比较椎间孔镜腰椎间盘切除术(PTED)与胶原酶髓核溶解术治疗单节腰椎间盘突出症的临床疗效.方法 将本院2015年2月至2016年2月收治的78例单节腰椎间盘突出症患者随机分为两组,各39例.对照组应用胶原酶髓核溶解术治疗,观察组采用PTED治疗.比较两组手术疗效及术后疼痛情况.结果 两组手术优良率相近(92.31％比87.18％),差异无统计学意义(P＞0.05);观察组术后1月、3月及6月疼痛评分各为(2.16±1.04)分、(1.84±0.38)分、(1.43±0.25)分,均明显低于对照组的(3.97±1.28)分、(2.68±0.42)分、(1.82±0.31)分,两组比较差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).结论 PTED与胶原酶髓核溶解术均可有效治疗单节腰椎间盘突出症,但在短期疗效方面,PTED较胶原酶髓核溶解术可明显减轻术后疼痛.     

臭氧+经皮腰椎间盘髓核切割联合治疗农村社区人群椎间盘突出的临床疗效评价与干预

[目的]探讨臭氧+经皮腰椎间盘髓核切割联合治疗农村社区人群椎间盘突出的临床效果.[方法]将来自农村社区的54例椎间盘突出患者分为两组,对照组采用传统的方法以及药物进行治疗,观察组采用臭氧+经皮腰椎f盘髓核切割术进行治疗,然后观察两组治疗效果.[结果]观察组总有效率为96.3％,对照组总有效率为78.8％,差异有显著性(P＜0.05).[结论]臭氧+经皮腰椎间盘髓核切割术治疗椎间盘突出的临床效果明显,值得在农村社区人群中实施和推广.     

综合康复治疗腰椎间盘突出症的疗效观察

目的：探讨综合康复治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法：将本院2009年1月～2011年7月收治的腰椎间盘突出症患者100例,随机分为对照组与观察组,每组50例,对照组给予传统牵引、推拿以及卧床休息治疗;观察组在对照组基础上给予口服中药、针灸以及注射西药等综合康复治疗方法。评定两组患者的临床疗效,治疗前后采用Bridwell腰椎间盘突出症系统进行评分,随访1年,比较两组患者复发情况。结果：治疗后观察组的痊愈率以及总有效率均明显高于对照组（P〈0.05）;观察组的Bridwell评分明显高于对照组（P〈0.05）;观察组的1年内复发率明显低于对照组（P〈0.05）。结论：综合康复治疗腰椎间盘突出症的临床疗效确切,复发率低,临床症状改善明显,值得在临床中推广应用。     

二花地龙胶囊治疗兔腰椎间盘突出症的实验研究

目的 观察二花地龙胶囊对兔椎间盘突出症模型肿瘤坏死因子α (TNF-α)活性的影响,进一步研究其作用机制.方法 选取健康日本大耳白家兔80只,采用随机数字分组法分为正常对照组1、正常对照组2,造模l、2、3、4、5、6组(每组10只,雌雄各半).造模组采用纤维环穿刺法,建立兔腰椎间盘突出症动物模型.造模成功后,将造模1、2、3、4、5组分别作为:自然恢复组(即模型组)、阳性对照组(简称对照组)和二花地龙胶囊高、中、低剂量组.给药组给予二花地龙胶囊高、中、低剂量灌胃治疗,对照组给予戴芬胶囊、正常对照组1和模型组给予生理盐水灌胃.连续灌胃给药7d后,观察二花地龙胶囊对模型动物TNF-α的影响.结果 二花地龙胶囊高、中、低剂量组均能降低兔腰椎间盘突出症模型的TNF-d含量,其值分别为(6.74±0.89)、(7.45±0.93)、(8.06±0.75) ng/L.结论 二花地龙胶囊治疗椎间盘突出症与降低髓核组织中TNF-α含量有关.     

腰椎间盘突出髓核在腰椎间盘突出症中的作用机制

本文综述了腰椎间盘突出髓核在腰椎间盘突出症中发病机制的论证。研究的论点在于腰椎间盘突出症的发病机制,以及手法治疗对腰椎间盘突出髓核产生的影响。现在的误区是,学术界按西医手术治疗腰椎间盘突出症的思路及影像学在治疗前后的改变来研究保守治疗腰椎间盘突出症,只着眼于突出髓核的病理意义,而无视腰椎内外平衡失调与腰椎间盘突出症的作用机制,只研究突出髓核形态学的变化而未能关注脊椎内、外平衡力学的改变。     

髓核成形术与经皮腰椎间盘摘除术治疗腰椎间盘突出症的对比研究

目的探讨髓核成形术与经皮腰椎间盘摘除术治疗腰椎间盘突出症的疗效差异。方法回顾性分析浏阳市集里医院近年来收治的80例腰椎间盘突出症患者的临床资料。结果髓核成形术组与经皮腰椎间盘摘除术组患者治疗后的优良率比较,无明显差异性,P>0.05。且两组患者术后主要并发症的发生概率比较,也无明显差异性。但两组患者的手术时间及住院时间具有显著性差异,P<0.05。结论髓核成形术与经皮腰椎间盘摘除术在治疗腰椎间盘突出症方面,疗效确切,优良率无明显差异性,但髓核成形术组手术时间和住院时间更短,是值得推广的一种微创手术。     

小切口开窗式髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症38例临床疗效观察

目的：观察采用小切口开窗式髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症的疗效。方法：选取本院进行手术治疗的76例腰椎间盘突出症随机平均分为治疗组和对照组,两组各38例,治疗组采用小切口开窗式髓核摘除术,对照组采用全椎板切除或扩大椎板切除术,观察比较两组的疗效及术后切口长度、手术时间、术中出血量、卧床时间情况。结果：治疗组总有效率明显高于对照组,且治疗组切口小,手术用时少,术中出血少,患者卧床时间短,P〈0.05。结论：小切口开窗式髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症具有手术时间短,出血量少,卧床时间短等优点,正确选择手术适应证,可以广泛应用于临床。     

RSS椎弓根钉内固定结合植骨融合治疗腰椎间盘突出症的有效性探究

目的：探讨RSS椎弓根钉内固定结合植骨融合治疗腰椎间盘突出症伴腰椎不稳的临床效果。方法将本院2011年9月~2013年9月收治的44例腰椎间盘突出症伴腰椎不稳患者按不同手术治疗方案随机分为对照组21例和观察组23例,对照组采用髓核摘除＋经后路关节突单纯植骨融合手术治疗,观察组采用RSS椎弓根钉内固定＋植骨融合手术治疗,比较两组的围术期情况、JOA评分、植骨融合情况。结果两组的手术耗时、术中出血量及住院时间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。两组术后6个月的JOA评分均明显高于术前（P〈0.05）;观察组术后6个月的JOA评分高于对照组（P〈0.05）。两组植骨融合成功率比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论RSS椎弓根钉内固定结合植骨融合治疗腰椎间盘突出症伴腰椎不稳具有植骨融合率高、远期恢复效果显著等优点,值得临床推广应用。     

射频热凝联合臭氧髓核消融治疗腰椎间盘突出症的临床价值

目的探讨射频热凝联合臭氧髓核消融治疗腰椎间盘突出症的临床应用价值。方法对40例腰椎间盘突出症患者采用射频热凝联合臭氧髓核消融治疗,其中22例患者射频靶点热凝术后即刻行臭氧髓核消融术,18例视具体情况射频热凝与臭氧髓核消融间隔时间1～5 d不等。对治疗后的10例患者进行0.5～4月随访,并按MacNab腰腿痛疗效评价标准进行评价。结果40例患者全部顺利完成治疗,术后显效率100%,平均住院时间7.6 d。随访10例患者中,疗效优4例,良5例,优良率占90%（9/10）,疗效差1例,占10%（1/10）。结论射频热凝联合臭氧髓核消融治疗腰椎间盘突出症具有重要临床价值。