反义寡核苷酸技术的进展及应用

随着分子生物学和遗传工程的发展,基因治疗应运而生,得到广泛的肯定,其中包括反义核酸技术,简称反义技术。那些能与特定的ＤＮＡ或ＲＮＡ以碱基互补配对的方式结合,并阻止其转录和翻译的短核酸片段,称为反义寡核苷酸（ａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）。研究反义寡核苷酸作用机理和应用的技术叫反义技术。 反义技术概述 早在１９８４年,Ｊｏｈｎａｔｈａｎ Ｇ就报道了用反义ＲＮＡ抑制ＴＫ基因的表达取得了良好的效果~［１］。反义寡核苷酸抑制靶基因的作用途经包括：１．反义寡核苷酸与ＤＮＡ双螺旋形成三螺旋,…     

反义寡核苷酸技术研究进展

反义寡核酸技术，是应用反义寡核苷酸类药物通过Waston-Crick碱基配对与细胞内核酸（DNA或RNA）特异结合形成杂交分子，从而在转录和翻译水平抑制特定基因表达的基因治疗技术，是一种新的药物开发方法。其机制是：①反义寡核苷酸与靶mRNA结合形成DNA-RNA杂合分子，可以激活RNase H。该酶可以切割杂合分子中的RNA链，导致靶mRNA降解。②不能激活RNase H活性的反义寡核苷酸可以通过空间位阻效应阻止核糖体结合来抑制靶mRNA的翻译：另外还可以通过封闭剪接位点有选择的促进蛋白某个可变剪接体的表达，从而纠正错误的剪接。     

反义寡核苷酸治疗白血病的研究现状

反义核酸技术是近十年来肿瘤治疗研究的热点,它包括反义寡核苷酸(又称反义DNA,Antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)、反义RNA、核酶及RNA干扰等技术.其中反义寡核苷酸技术的主要作用原理是根据碱基互补配对原则,利用合成的寡核苷酸选择性地与靶基因mRNA互补结合,干扰或阻止其基因产物的形成,从而达到治疗肿瘤的目的.     

反义寡核苷酸治疗应用的文献研究

利用MEDLINE CD-ROM数据库检索有关反义寡核苷酸治疗应用方面的文献，对其年代分布、语种分布、国家分布、期刊分布及主要主题词等五个方面进行统计。     

反义寡核苷酸的抗病毒效果

寡核苷酸因其所具有的精巧特异性，已被推荐用作包括癌症，微生物感染和自身免疫病在蛤内的多人类疾病的治疗制剂，目前约有１６个临床试验正在实验，本文从下述三方面评述了反义寡聚脱氧核苷酸（ＯＤＮ）的抗病毒效果，（１）序列特异性抗病毒效果；（２）非序列特异性抗病毒效果，（３）序列特异性反义非依赖性效果。     

细胞间粘附分子1反义寡核苷酸对小鼠肾小管间质病变的治疗作用

目的 探讨细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）在肾小管间质炎性病变中的作用。方法 将劳光标记的ＩＣＡＭ－１反义寡核苷酸经静脉注射至正常小鼠体内,观察其分布状况。小鼠在行单侧输尿管梗阻术后从尾静脉注射ＩＣＡＭ－１反义寡核苷酸（７只）,术后第７天留取输尿管梗阻侧肾脏检测肾组织ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ的表达并作病理检查。同时设立对照寡核苷酸（８只）和注射用水组（６只）作为空白对照。结果 ＩＣＡＭ－１反义寡核苷     

反义寡核苷酸和小分子干扰RNA作为端粒酶抑制剂的研究进展

端粒酶是真核生物染色体末端的核蛋白结构,能够指导合成重复的端粒序列TTAGGG,而细胞的复制与端粒长度的维持有关。已有大量关于端粒酶的研究,很多临床前试验已将抑制端粒酶活性作为治疗恶性肿瘤的一个新的治疗方案。本文综述了反义寡核苷酸(ASODN)和小分子干扰RNA(siRNA)作为端粒酶抑制剂的研究进展,并进一步讨论了携载ASODN及siRNA基因载体的应用及其优缺点。     

反义，RNA干扰，基因沉默策略用于疾病治疗是否可行

反义寡核苷酸能调节基因表达,调控细胞功能和分化及细胞对于内外刺激的反应。虽然其作为治疗手段在临床前和临床研究中均已取得了令人鼓舞的结果,但实际运用中,仍有几大难点有待解决,包括效价、脱靶效应、转运及不良反应等。从反义寡核苷酸研究中获得的经验有助于其他基于寡核苷酸药物的研发,如CpG寡核苷酸、RNA干扰和微小RNA等。     

乳腺癌反义寡核苷酸治疗的研究进展

反义寡核苷酸技术(ASODN)作为一种新的分子生物学工具及新型药物受到医疗界越来越多的关注.许多反义药物作为抗肿瘤药物已进入临床试验,并取得了令人欣喜的效果.     

以存活素为靶点的反义寡核苷酸在胰腺癌治疗中的研究

反义寡核苷酸具有高特异性、靶向性、无毒性等特有的优点,近年来一直是抗肿瘤、抗病毒领域研究的热点。为恶性肿瘤的治疗提供了一种新方法。本文就以survivin为靶点的反义寡核苷酸的作用机制及与胰腺癌关系进行综述。     

活体生物光学分子成像技术研究进展

活体生物体内光学成像技术是近年发展起来的新兴技术,在生命科学研究中占有重要地位。其原理为采用荧光报告基团或荧光染料标记的目的细胞,通过灵敏的光学成像仪器,检测活体生物体内细胞生物学行为。按发光模式可分为生物自发光和荧光激发光两类。相对于传统光学成像技术,具有无创、可多次重复、实时活体成像、灵敏、安全等优势,目前已成为肿瘤诊断、治疗、疗效判断及抗肿瘤药物筛选等研究领域中不可缺少的工具。     

核素示踪反义寡核苷酸在荷人淋巴瘤裸鼠中的分布及显像研究

目的研究^125I标记反义寡核苷酸在正常小鼠内的生物分布,比较脂质体介导^131I标记正义及反义寡核苷酸在荷人淋巴瘤裸鼠体内的显像,以探讨核素标记的AS0N作为反义显像剂及反义治疗药物的可能性。方法通过氯胺-T法进行^125I与^131I标记含酪胺的18聚体寡核苷酸,制作荷瘤裸鼠模型,将148kBq ^125I标记反义寡核苷酸（2μg～3μg）,尾静脉注入正常小鼠,于不同时间处死小鼠,测定不同组织及标准源的放射性计数。荷瘤裸鼠瘤内注入脂质体介导335MBq^131I标记反义寡核苷酸（7μg～9μg）,分别与注射后不同时间进行SPECT显像,以脂质体介导正义寡核苷酸作为对照,24h显像后处死全部裸鼠,取出血液、重要器官和肿瘤组织,测定各组织的放射性计数,并记算肿瘤与非肿瘤组织（T／NT）比值。结果^125I标记反义寡核苷酸注入正常小鼠体内后1h,各脏器达高峰,24h基本清除。肝、胃和肠放射性分布最高,骨、肌肉、脑中放射性分布较少。荷瘤裸鼠瘤内注入脂质体介导的^131I标记反义寡核苷酸后立即用SPEcT成像仅见肿瘤部位,1、2h成像可见示踪剂从肿瘤到腹腔,24h仍见肿瘤显像。比较24h正义组与反义组肿瘤的％1D／g、肿瘤／血液、肿瘤／肌肉,差异有统计学意义。结论^131标记AS0N对淋巴瘤肿瘤组织有很强的特异性,可用于淋巴瘤反义显像和反义治疗的研究,但仍需进行大量的临床应用前研究。     

分子影像学研究进展

分子影像学是当前的研究热点,本文就其概念、基本原理、成像技术、关键问题和发展方向进行综述,旨在提高对其的认识,推动该领域的研究进展.     

脂质体介导的99mTc标记c-myc mRNA反义寡核苷酸的反义作用效果的研究

目的探讨脂质体介导的99mTc标记癌基因c-myc mRNA的反义寡核苷酸能否抑制癌细胞的生长和癌蛋白的表达.方法合成15 bp的癌基因c-myc mRNA的反义、正义及无义寡核苷酸,用99mTc标记后(简称99mTc-DNA),一部分用脂质体包裹,以不同放射性强度的99mTc-DNA及脂质体包裹的99mTc-DNA转染细胞,于转染后不同时间测定细胞摄取率,在转染后18 h测定细胞返流比率,用四唑盐比色实验检测反义抑制细胞的生长状况,用流式细胞术测定癌蛋白的表达.结果在1～5 h内,细胞的摄取率随时间的延长而增加,脂质体包裹的99mTc-DNA的细胞摄取率明显高于未用脂质体包裹的99mTc-DNA.四唑盐比色实验,随着脂质体介导的99mTc-反义DNA剂量的增加,细胞数量逐渐减少,而正义、无义寡聚核苷酸组,细胞数量则没有减少的趋势.细胞的返流比率,反义、正义、无义寡核苷酸分别为39.51%、44.12%、63.92%.测定癌蛋白的荧光强度,反义寡核苷酸组2.9860±0.3733、正义寡核苷酸组4.2600±0.2218、无义寡核苷酸组5.2620±0.8562,反义寡聚核苷酸组的荧光强度明显低于正义和无义寡聚核苷酸组.结论脂质体介导的99mTc标记的反义寡核苷酸能抑制癌细胞的生长和癌蛋白的表达.     

前列腺癌分子显像的相关进展

前列腺癌是男性常见的恶性肿瘤之一,其严重危害着男性的身体健康。以往的前列腺癌诊断方法对于疾病的位置、分期及负荷程度的评估具有一定局限性,这种局限性导致该类患者临床治疗不足或过度的情况发生。然而,随着近年来分子代谢显像技术的快速发展,前列腺癌的诊断水平有所提高,治疗效果亦有所改善。分子显像的诸多技术对组织代谢较敏感,为前列腺癌的诊断、分期及治疗提供了更准确的依据,其中正电子发射断层显像/计算机断层扫描、磁共振波谱成像及多参数磁共振成像已广泛用于临床实践及研究中。     

ERCC1反义寡核苷酸对肺癌铂类药物敏感性的研究进展

ERCC-1基因是目前恶性肿瘤基因治疗研究中的新靶点.采用反义寡核苷酸技术可以抑制ERCC1基因的表达,从而降低肿瘤细胞DNA修复的能力,增强对铂类化疗药物的敏感性.为肺癌特别是非小细胞肺癌(NSCLC)的治疗提供了新的思路.     

端粒酶反义寡核苷酸对肝癌细胞生长抑制作用

目的本研究将互补于hTR模板区的全硫代修饰型反义寡核苷酸（PS-ASODN）经lipotap脂质体转染作用于肝癌细胞系BEL-7402,观察其对肝癌细胞端粒酶活性的影响,同时检测其对癌细胞的生长抑制作用,旨在探讨PS-ASODN对肝癌的治疗价值,为临床治疗肝癌提供一定的试验数据。方法分别采用MTT法、流式细胞术、酶联免疫吸附（ELISA）法检测不同浓度PS-ASODN对bel-7402的细胞增殖、细胞凋亡和端粒酶活性的作用。结果PS-ASODN能抑制BEL-7402细胞的生长,降低其端粒酶活性并诱导细胞凋亡。结论端粒酶与BEL-7402增殖活性有关,抑制端粒酶活性可能成为肝癌基因治疗的新靶点。     

分子成像在超声显影技术和临床方面的应用

分子(或靶向)诊断成像已广泛应用于细胞生物学和核医学(PET和SPECT).近几年来人们对医用超声的分子成像做了大量的研究.超声的靶向成像之所以受到医学界的关注是因为作为诊断成像技术,超声比磁共振、CT和核医学成像更普及,更方便并且更安全--对人体几乎没有任何伤害性.由于超声对超声微泡造影剂高度的敏感性使其成为继核医学之后最有发展前途的分子成像技术.本篇综述将介绍一些有关超声分子成像的基础知识、目前的研究方向以及未来在临床方面的应用.     

反义DNA技术研究进展及其在动物学研究中的应用

随着人类基因组计划的迅速推进．越来越多的基因被测序,对新基因功能的确定变得更为迫切：反义DNA技术由于它在多种生物体中的高效性、抑制基因表达的可逆性、相对的低成本和在疾病治疗上的潜力．在基因功能的研究中已受到了广泛的关注。在这篇章里,作总结了反义DNA技术的进展及其在动物学研究中的府用。