促肝细胞生长素对肺纤维化大鼠的干预作用及其途径

目的：观察早期和晚期给予促肝细胞生长素对大鼠肺纤维化模型的干预作用，并分析其可能作用途径。 方法：实验于2005—05／09在哈尔滨医科大学附属第二医学院实验中心完成。选择雄性Wistar大鼠85只，按随机数字表法分为5组，正常对照组、博来霉素模型组、地塞米松治疗组及促肝细胞生长素早期治疗组每组各20只，促肝细胞生长素晚期治疗组5只。除正常对照组外，其他大鼠均经气管内灌注博来霉素A5（5mg／kg）生理盐水溶液0.2-0．3mL，诱导肺纤维化。地塞米松治疗组和促肝细胞生长素早期治疗组于造模后第2天开始腹腔注射地塞米松3mg／kg和促肝细胞生长素lmg／kg，1次／d。正常对照组和博来霉素模型组注射等体积生理盐水。各组分别于气管内灌注后的第3，7，14，28天经麻醉腹主动脉放血法处死5只大鼠。促肝细胞生长素晚期治疗组于造模后第14天开始腹腔注射促肝细胞生长素1mg／kg，1次／d，于造模后第28天经麻醉腹主动脉放血法处死5只大鼠。分离肺组织，用免疫组化方法检测转化生长因子β1和基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶抑制剂1蛋白在大鼠肺组织的表达水平。通过苏木精-伊红染色、Masson胶原染色及测定肺组织羟脯氨酸浓度来评价治疗效果，肺泡炎及肺纤维化程度分为4级（1分：无肺泡炎或无纤维化；4分：重度肺泡炎或纤维化，受累面积〉50％）。 结果：85只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①促肝细胞生长素早期治疗组造模后第7，28天肺组织羟脯氨酸含量均显著低于博来霉素模型组（P〈0．05～0．01）。②促肝细胞生长素早期治疗组造模后第28天肺纤维化评分显著低于博来霉素模型组（P〈0.05）。③促肝细胞生长素早期治疗组造模后第7，28天肺组织转化生长因子β1蛋白表达水平显著低于博来霉素模型组（P〈0．05）。④促肝细胞生长素早期治疗组造模后第3，7，14天基质金属蛋白酶抑制剂1蛋白表达水平均显著低于博来霉素模型组（P〈0．05）；造模后第14，28天基质金属蛋白酶9蛋白表达水平均显著高于博来霉素模型组（P〈0．05）。⑤促肝细胞生长素早期治疗组和晚期治疗组各项指标比较差异无显著性意义（P〉0．05）。 结论：早期和晚期应用促肝细胞生长素能减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化，这种作用可能通过抑制转化生长因子β1和调节基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶抑制剂l蛋白的表达而实现。     

促肝细胞生长素对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的干预作用

目的研究促肝细胞生长素（pHGF）对肾间质纤维化大鼠肾组织中HGF、TGF-β1的表达的影响及其改善肾小管间质纤维化可能的机制,为临床防治肾间质纤维化提供实验性理论依据。方法采用单侧输尿管结扎术（unilateral ureteral obstruction UUO）建立肾小管间质纤维化大鼠模型。将54只大鼠随机分为三组：假手术组,UUO组,pHGF干预组。术后3、7、14天分3批处死各组大鼠,分别经免疫组化方法观察各组大鼠肾组织HGF、TGF-β1的表达情况,HE及Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果UUO组TGF-β1的表达及肾小管间质损伤程度明显高于假手术组（P〈0．05）;而pHGF干预组明显低于UUO组（P〈0．05）;UUO组HGF于第3天表达最高,第7天稍有回落,第14天表达最弱;pHGF干预组术后第3天、第7天、第14天HGF的表达均显著高于同时期UUO组（P〈0．05）,肾小管间质病变程度明显减轻,肾间质相对面积显著减小（P〈0．05）。结论pHGF能够减轻单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的程度,这种作用可能通过有效抑制肾间质中TGF-β1的过度表达、促进肾间质HGF的表达而实现。     

芪丹颗粒剂对大鼠肺纤维化的干预作用与氢化可的松比较

背景特发性肺纤维化治疗反应性差,首选治疗药物为糖皮质激素,仅对30%的患者有效.中药对肺纤维化的防治作用是研究热点,许多中药已经在临床中试用,并且取得了一定的治疗效果.转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α是致肺纤维化的重要细胞因子,抑制其表达可能对治疗肺纤维化有效.目的探讨芪丹颗粒剂对博莱霉素A5所致大鼠肺纤维化的干预作用及对肺组织转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α蛋白表达的影响,并与糖皮质激素氢化可的松进行比较.设计随机区间分组设计.单位山东大学山东省立医院呼吸内科.对象实验于2003-05/2004-03在山东省医学科学院病理实验室进行.取雄性SD大鼠105只,随机分为4组正常对照组(n=15),模型组、芪丹组和氢化可的松组,每组30只;各组又分为7,14,28 d 3个时间点,正常对照组每个时间点5只,其他3组每个时间点10只.方法[1]造模正常对照组经气管内一次性灌注生理盐水0.25 mL,其他3组经气管内一次性灌注博莱霉素A5 0.25 mL左右(5 mg/kg,4g/L)制备肺纤维化模型.[2]给药造模次日开始,芪丹组每天给于芪丹颗粒剂灌胃(黄芪、丹参、川芎等组成,3 125 mg/kg);氢化可的松组每天给于腹腔注射氢化可的松(25 mg/kg);正常对照组和模型组每天给于生理盐水灌胃(2 mL/只).[3]观察指标各组动物均于给药后第7,14,28天麻醉状态下处死,取肺组织,用苏木素-伊红染色评价肺组织病理学变化、免疫组化测定转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α蛋白的表达.主要观察指标各组大鼠不同时间点肺组织病理学观察和转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α表达情况.结果100只大鼠进入结果分析.[1]肺组织病理学观察结果正常对照组结构正常,模型组第7天表现为肺泡炎;14 d肺泡炎加重,28 d广泛纤维化;芪丹组经治疗后肺泡炎和肺纤维化病变明显轻于模型组,有正常肺泡结构存在;氢化可的松组第7,14天肺泡炎较模型组轻,但肺纤维化与模型组比较无差异.[2]肺组织转化生长因子β1蛋白表达模型组第28天表达最多,显著高于正常对照组(3.6±0.4,1.2±0.4,P＜0.01),芪丹组和氢化可的松组均显著低于模型组(1.7±0.5,2.5±0.4,P＜0.01),且芪丹组低于氢化可的松组(P＜0.01).[3]肺组织肿瘤坏死因子α蛋白表达模型组各时间点均持续高表达,芪丹组和氢化可的松组均少于模型组,差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01),而且而且芪丹组明显少于氢化可的松组(P＜0.01).结论芪丹颗粒剂可明显减轻博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化的程度,降低肺组织转化生长因β1、肿瘤坏死因子α蛋白的表达,其效果较氢化可的松好.     

异甘草酸镁对博来霉素诱导肺纤维化大鼠治疗作用及其机制

目的 探讨异甘草酸镁(MgIG)对博来霉素(BLM)诱导肺纤维化大鼠治疗作用及其机制.方法 选择24只成年雄性SD大鼠,随机将其分为Control组、BLM组、BLM+MgIG组和BLM+甲泼尼龙琥珀酸钠(MTH)组4组各6只大鼠.BLM组、BLM+MgIG组和BLM+MTH组予BLM构建肺纤维化大鼠模型,Contro...     

肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中基质金属蛋白酶表达与地塞米松的干预效应

目的：探讨炎症细胞与地塞米松对基质金属蛋白酶活性的影响及基质金属蛋白酶在肺纤维化中的作用。方法：①实验于2004-04／07在解放军兰州军区总医院动物实验中心和呼吸内科实验室、血液科实验室完成。选用32只普通Wistar大鼠。随机将动物分为3组：对照组（n=8），肺纤维化组（n=12），治疗组（n=12）。②肺纤维化组和治疗组按5mg／kg经气管内灌注博莱霉素溶液0．3mL制备大鼠肺纤维化模型，对照组则给予0．3mL生理盐水，治疗组每日腹腔注射地塞米松0．4mL（5mg／kg），对照组及肺纤维化组则每日腹腔注射0.4mL生理盐水。（3）在实验第3，7，14、27天分别处死后，收集肺泡灌洗液，行细胞计数和分类；聚丙烯酰胺明胶酶谱法鉴定肺泡灌洗液中基质金属蛋白的活性变化；羟脯氨酸法测定肺组织胶原含量的变化。结果：大鼠32只均进入结果分析。①病理组织切片示肺纤维化组肺损伤明显，出现典型肺纤维化改变；治疗组肺损伤和纤维化程度明显减轻。②治疗组肺泡灌洗液粒细胞学分类在第7，14天分别比肺纤维化组降低了51．6％和62．4％（P〈0．05）；第14天治疗组肺胶原总量比肺纤维化组降低了17．8％（P〈0．05）。（3）聚丙烯酰胺明胶酶谱示基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9在两组中活性带均增强，但治疗组活性带的强度比肺纤维化组明显减弱。结论：炎症细胞能增强基质金属蛋白酶的活性，基质金属蛋白酶活性增强进一步促进了纤维化的发展，而地塞米松则抑制了基质金属蛋白酶活性增强，减轻了肺纤维化程度。     

实验性大鼠肺纤维化模型与干扰素α-1b和氢化可的松的干预效应

目的：探讨干扰素α-1b和氢化可的松对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的影响。方法：实验于2003-12／2004-02在南京医科大学动物实验中心及南京大学医学院附属南京鼓楼医院科研部完成。①选用SPF级雄性SD大鼠80只。将大鼠随机分为4组，每组20只：模型对照组，干扰素α-1b干预组．氢化可的松干预组，正常对照组。②模型对照组、干扰素α-1b干预组、氢化可的松干预组均于实验开始时气管内一次性注射博莱霉素5mg/kg，以造成肺纤维化模型。模型对照组于造模后次日起隔日皮下注射生理盐水0．2mL。干扰素α-1b干预组于造模后次日起隔日皮下注射干扰素α-1b 10万IU。氢化可的松干预组于造模后次日起每日腹腔注射氢化可的松10mg／kg。正常对照组：实验开始时气管内一次性注射生理盐水2mL／kg，次日起隔日皮下注射生理盐水0．2mL。③各组大鼠均于实验第3，7，14和28天以腹主动脉放血法各处死5只。收集支气管肺泡灌洗液10mL，用于测干扰素γ和转化生长因子β含量，该含量测定双抗体夹心法测定，根据标准曲线计算含量。④取右肺中下叶投入液氮中，过夜后转入-70℃保存，准备检测羟脯氨酸含量，该含量测定采用南京建成生物工程研究所提供的羟脯氨酸检测试剂盒完成。(9确定各组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度[肺泡炎分4级：(-)：无肺泡炎，评0分。(+)：轻度肺泡炎，表现为单核细胞浸润使肺泡隔增宽，仅限于局部和近胸膜部，面积小于全肺的20％，肺泡结构正常，评1分。(++)：中度肺泡炎，受累面积占全肺的20％～50％，近胸膜部较重，评2分。(+++)：重度肺泡炎，面积大于50％，偶见肺泡腔内有单核细胞及出血造成实变，评3分。肺纤维化分4级：(-)：无纤维化，评0分。(+)：轻度纤维化，受累面积小于20％，纤维化累及胸膜及胸膜下的肺间质，肺泡的结构发生紊乱，评1分。(++)：中度纤维化，病变范围约占全肺的20％～50％，纤维化区域从胸膜延伸，仍属局部性，评2分。(+++)：重度纤维化，病变范围大于50％，融合损失可见大小不等的囊气腔，评3分]。⑥计量资料差异性测定采用方差分析，组间比较行LSD-τ检验。结果：大鼠80只均进入结果分析。①肺纤维化大鼠肺泡炎和纤维化评分：模型对照组、干扰素α-1b干预组、氢化可的松干预组大鼠造模后7d肺泡炎最重，随后逐渐减轻，而纤维化于造模后第14天开始明显加重，第28天纤维化程度最重，各组的肺泡炎和纤维化程度始终较正常对照组严重(P&;lt;0.05～0．01)，说明肺纤维化模型成立。干扰素α-1b干预组于造模后第7和14天时肺泡炎明显重于模型对照组(P&;lt;0．05,0．01)。而干扰素α-1b干预组纤维化程度虽重于模型对照组，但无明显差异(P&;gt;0．05)。氢化可的松干预组肺泡炎和纤维化程度虽轻于模型对照组，但始终与模型对照组相近(P&;gt;0．05)。②大鼠支气管肺泡灌洗液中干扰素γ含量：模型对照组、干扰素α-1b干预组于造模后开始升高，第7天达到高峰，随后逐渐下降。干扰素α-1b干预组造模后第3～28天始终明显高于模型对照组（P&;lt;0．01)。氢化可的松干预组相对比较稳定，第7天时显著低于模型对照组(P&;lt;0．05)。③大鼠支气管肺泡灌洗液中转化生长因子β水平：模型对照组、干扰素α-1b干预组、氢化可的松干预组于造模后开始升高，于造模后第7天达到高峰，随后下降，但始终高于正常对照组(P&;lt;0．01)。干扰素α-1b干预组于造模后第3和7及14天时显著高于模型对照组(P&;lt;0．01)，第3天时氢化可的松干预组显著低于模型对照组(P&;lt;0．05)。结论：①早期应用干扰素α-1b能够加重博莱霉素诱导的肺纤维化，加重肺泡炎。②干扰素α加重肺纤维化的现象可能与其诱导干扰素γ的产生促进肺部炎症反应有关。③糖皮质激素可能是通过减少前炎症因子干扰素γ及纤维化相关的细胞因子转生长因子β的表达，抑制早期炎症，达到减轻肺纤维化的目的。     

三参保肺颗粒对吸烟致大鼠虚喘模型的抗肺纤维化作用及其机制

目的:建立慢性阻塞性肺病合并肺间质纤维化大鼠模型,观察三参保肺颗粒对虚喘模型肺组织转化生长因子β1、转化生长因子β受体1和碱性成纤维细胞生长因子蛋白表达的影响。方法:实验于2001-06/09在北京中医药大学病理实验室进行。取雄性Wistar大鼠30只,随机分为3组(n=10):①模型组:熏香烟烟雾,每周6d,连续4周,第29天气管内注入弹性蛋白酶(300U/kg),第35天气管内注入博来霉素(5mg/kg),继续饲养4周。②三参保肺组:同模型组造模,模型制作开始每日三参保肺颗粒(北京中医药大学药学院提供,由党参、丹参、蛤蚧、炙麻黄、汉防己、紫菀等组成)水溶液灌胃(14g/kg)。③对照组:于第29,35天气管注入生理盐水(2mL/kg)。各组于第9周末处死,取右肺下叶,通过免疫组织化学方法检测大鼠支气管肺组织转化生长因子β1、转化生长因子β受体1和碱性成纤维细胞生长因子蛋白表达。结果:25只大鼠进入结果分析。①三参保肺组及模型组转化生长因子β1、转化生长因子β受体1和碱性成纤维细胞生长因子蛋白在支气管黏膜、肺泡和肺血管内皮细胞、肺泡巨噬细胞、肺间质细胞、成纤维细胞均有表达,三参保肺组表达的程度较模型组为弱。②经图像分析显示三参保肺组碱性成纤维细胞生长因子表达的灰度值低于模型组(P<0.01)。结论:三参保肺颗粒可抑制支气管肺组织转化生长因子β1、转化生长因子β受体1和碱性成纤维细胞生长因子蛋白表达,起到减轻肺血管内皮细胞、成纤维细胞增殖、抗肺纤维化的作用。     

肝细胞生长素在体外对大鼠肾小球系膜细胞生物活性的影响

目的 观察低分子肝细胞生长素(HPN)对炎症因子刺激下的大鼠肾小球系膜细胞增殖及产生TGFβ的影响。方法 用^3H—TdR掺入法检测肾小球系膜细胞(GMC)增殖变化，用ELISA法检测肾小球系膜细胞培养上清中TGFβ的水平。结果 在无IL-1β存在时，浓度为400u/孔的低分子肝细胞生长素对常规培养的系膜细胞增殖有明显抑制作用(P＜0．01)，而对TGFβ的产生无影响；但它对IL-β刺激下的大鼠系膜细胞增殖和TGFβ产生均有明显抑制作用(均P＜0．01)。低分子肝细胞生长素在100u/孔浓度时无上述作用。结论 高剂量HPN可抑制体外培养的大鼠系膜细胞增殖，降低IL-β刺激系膜细胞产生TGFβ。低分子肝细胞生长素无种属特异性和组织特异性。     

肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中基质金属蛋白酶表达与地塞米松的干预效应

目的探讨炎症细胞与地塞米松对基质金属蛋白酶活性的影响及基质金属蛋白酶在肺纤维化中的作用。方法①实验于2004-04/07在解放军兰州军区总医院动物实验中心和呼吸内科实验室、血液科实验室完成。选用32只普通W istar大鼠。随机将动物分为3组对照组(n=8),肺纤维化组(n=12),治疗组(n=12)。②肺纤维化组和治疗组按5m g/kg经气管内灌注博莱霉素溶液0.3m L制备大鼠肺纤维化模型,对照组则给予0.3m L生理盐水,治疗组每日腹腔注射地塞米松0.4m L(5m g/kg),对照组及肺纤维化组则每日腹腔注射0.4mL生理盐水。③在实验第3,7,14,27天分别处死后,收集肺泡灌洗液,行细胞计数和分类;聚丙烯酰胺明胶酶谱法鉴定肺泡灌洗液中基质金属蛋白的活性变化;羟脯氨酸法测定肺组织胶原含量的变化。结果大鼠32只均进入结果分析。①病理组织切片示肺纤维化组肺损伤明显,出现典型肺纤维化改变;治疗组肺损伤和纤维化程度明显减轻。②治疗组肺泡灌洗液粒细胞学分类在第7,14天分别比肺纤维化组降低了51.6%和62.4%(P<0.05);第14天治疗组肺胶原总量比肺纤维化组降低了17.8%(P<0.05)。③聚丙烯酰胺明胶酶谱示基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9在两组中活性带均增强,但治疗组活性带的强度比肺纤维化组明显减弱。结论炎症细胞能增强基质金属蛋白酶的活性,基质金属蛋白酶活性增强进一步促进了纤维化的发展,而地塞米松则抑制了基质金属蛋白酶活性增强,减轻了肺纤维化程度。     

芪丹颗粒剂对大鼠肺纤维化的干预作用与氢化可的松比较

背景：特发性肺纤维化治疗反应性差,首选治疗药物为糖皮质激素,仅对30%的患者有效.中药对肺纤维化的防治作用是研究热点,许多中药已经在临床中试用,并且取得了一定的治疗效果.转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α是致肺纤维化的重要细胞因子,抑制其表达可能对治疗肺纤维化有效.目的：探讨芪丹颗粒剂对博莱霉素A5所致大鼠肺纤维化的干预作用及对肺组织转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α蛋白表达的影响,并与糖皮质激素氢化可的松进行比较.设计：随机区间分组设计.单位：山东大学山东省立医院呼吸内科.对象：实验于2003-05/2004-03在山东省医学科学院病理实验室进行.取雄性SD大鼠105只,随机分为4组：正常对照组（n=15）,模型组、芪丹组和氢化可的松组,每组30只;各组又分为7,14,28 d 3个时间点,正常对照组每个时间点5只,其他3组每个时间点10只.方法：[1]造模：正常对照组经气管内一次性灌注生理盐水0.25 mL,其他3组经气管内一次性灌注博莱霉素A5 0.25 mL左右（5 mg/kg,4g/L）制备肺纤维化模型.[2]给药：造模次日开始,芪丹组每天给于芪丹颗粒剂灌胃（黄芪、丹参、川芎等组成,3 125 mg/kg）;氢化可的松组每天给于腹腔注射氢化可的松（25 mg/kg）;正常对照组和模型组每天给于生理盐水灌胃（2 mL/只）.[3]观察指标：各组动物均于给药后第7,14,28天麻醉状态下处死,取肺组织,用苏木素-伊红染色评价肺组织病理学变化、免疫组化测定转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α蛋白的表达.主要观察指标：各组大鼠不同时间点肺组织病理学观察和转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α表达情况.结果：100只大鼠进入结果分析.[1]肺组织病理学观察结果：正常对照组结构正常,模型组第7天表现为肺泡炎;14 d肺泡炎加重,28 d广泛纤维化;芪丹组经治疗后肺泡炎和肺纤维化病变明显轻于模型组,有正常肺泡结构存在;氢化可的松组第7,14天肺泡炎较模型组轻,但肺纤维化与模型组比较无差异.[2]肺组织转化生长因子β1蛋白表达：模型组第28天表达最多,显著高于正常对照组（3.6&;#177;0.4,1.2&;#177;0.4,P＜0.01）,芪丹组和氢化可的松组均显著低于模型组（1.7&;#177;0.5,2.5&;#177;0.4,P＜0.01）,且芪丹组低于氢化可的松组（P＜0.01）.[3]肺组织肿瘤坏死因子α蛋白表达：模型组各时间点均持续高表达,芪丹组和氢化可的松组均少于模型组,差异有显著性（P＜0.05或P＜0.01）,而且而且芪丹组明显少于氢化可的松组（P＜0.01）.结论：芪丹颗粒剂可明显减轻博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化的程度,降低肺组织转化生长因β1、肿瘤坏死因子α蛋白的表达,其效果较氢化可的松好.     

布地奈德雾化吸入干预博菜霉素致大鼠肺纤维化实验研究

目的探讨布地奈德（budesonide,BUD）雾化吸人对博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型的干预作用。方法60只SD大鼠随机分为雾化吸入BUD 0．5mg／kg者为干预1组、雾化吸入BUD 1mg／kg者为干预2组、肺纤维化模型组（模型组）、生理盐水对照组（对照组）各15只。干预1组,干预2组和模型组采用气管内滴注博来霉素建立肺纤维化大鼠模型,对照组采用生理盐水滴注。0～6d每天雾化吸入,干预1组和干预2组雾化吸人BUD,模型组和对照组雾化吸人生理盐水。分别于7,14,28d后每组各处死大鼠5只,进行肺组织形态学观察、肺系数测量、病理HE和Masson染色评价其肺组织肺泡炎及肺纤维化程度。结果肺系数、肺泡炎和肺纤维化程度干预1组第7天与模型组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,第14,28天低于模型组（P〈0．05）;干预2组各时间点大鼠肺系数、肺泡炎和肺纤维化程度均明显低于模型组及干预1组（P〈0．05）。结论雾化吸人BUD可减轻中、后期博莱霉素致大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,加大BUD雾化吸入剂量可减轻前期肺泡炎,缓解后期肺纤维化的产生。     

布地奈德雾化吸入干预博莱霉素致大鼠肺纤维化实验研究

目的探讨布地奈德(budesonide,BUD)雾化吸入对博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型的干预作用。方法 60只SD大鼠随机分为雾化吸入BUD 0.5mg/kg者为干预1组、雾化吸入BUD 1mg/kg者为干预2组、肺纤维化模型组(模型组)、生理盐水对照组(对照组)各15只。干预1组,干预2组和模型组采用气管内滴注博来霉素建立肺纤维化大鼠模型,对照组采用生理盐水滴注。0～6d每天雾化吸入,干预1组和干预2组雾化吸入BUD,模型组和对照组雾化吸入生理盐水。分别于7,14,28d后每组各处死大鼠5只,进行肺组织形态学观察、肺系数测量、病理HE和Masson染色评价其肺组织肺泡炎及肺纤维化程度。结果肺系数、肺泡炎和肺纤维化程度干预1组第7天与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05),第14,28天低于模型组(P<0.05);干预2组各时间点大鼠肺系数、肺泡炎和肺纤维化程度均明显低于模型组及干预1组(P<0.05)。结论雾化吸入BUD可减轻中、后期博莱霉素致大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,加大BUD雾化吸入剂量可减轻前期肺泡炎,缓解后期肺纤维化的产生。     

自发性高血压大鼠左室心肌纤维化与黄连清降合剂的干预效应

目的:观察清热解毒复方(黄连清降合剂)抑制自发性高血压大鼠心肌纤维化的作用,并探讨其作用机制。方法:实验于2005-01/12在山东中医药大学细胞分子生物学实验室完成。①实验分组:将自发性高血压大鼠30只随机分为4组,即模型对照组6只、牛黄降压丸组8只、卡托普利组8只、黄连清降合剂组8只,并设Wistar大鼠8只作为正常对照组。②实验方法:牛黄降压丸组、卡托普利组、黄连清降合剂组分别给于牛黄降压丸混悬液、卡托普利混悬液、黄连清降合剂混悬液10mL/kg体质量,分别相当于0.75g牛黄降压丸/(kg·d)、35mg卡托普利/(kg·d)、22g中药生药/(kg·d)(均相当于临床用量的14倍量),灌服10mL/kg体质量;正常对照组和模型对照组给等量的生理盐水,不给任何药物。根据每周的体质量变化调整给药量。1次/d,每周用药6d,连续用药8周。③实验评估:采用套尾法测定各组大鼠清醒状态下尾动脉收缩压;采用苦味酸-天狼猩红染色法标记心肌胶原分布,并测定心肌胶原容积分数和血管周围胶原面积/管腔面积比;采用免疫组化法测定心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达;采用放射免疫分析法测定心肌血管紧张素Ⅱ的含量。结果:清热解毒复方(黄连清降合剂)能够降低自发性高血压大鼠清醒状态下尾动脉收缩压,而且无反弹和快速耐受性,能够减轻心肌间质和心肌内血管周围胶原纤维的沉积,能够降低心肌胶原容积分数和血管周围胶原面积/管腔面积比,能够降低心肌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的蛋白表达,能够降低心肌组织血管紧张素Ⅱ的含量,各指标效应与卡托普利组相近,均明显优于模型对照组(P<0.05)。结论:清热解毒复方(黄连清降合剂)具有良好的抗高血压心肌纤维化的作用,其机制与降低心肌组织血管紧张素Ⅱ的含量、抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统活性有关。     

神经营养因子4及其受体TrkB在肺纤维化大鼠中的表达

探讨神经营养因子4(NT4)及其受体酷氨酸激酶受体B(TrkB)与大鼠肺纤维化发生发展的关系,为肺纤维化发病机制的研究开辟新的途径.方法:取Wistar健康雄性大鼠30只作为研究对象,分为对照组(气管内注射生理盐水)、模型组(气管内灌注博来霉素).两组大鼠分别于造模后第7、14、28天各处死5只,取出肺组织,用HE染色及Masson染色来比较造模的程度,用PCR和免疫组化检测模型组及对照组中NT4及TrkB的含量.结果:模型组造模后第7、14、28天NT4及TrkB均有不同程度的增高,且均随肺纤维化程度的增高而增高(P＜0.05),二者呈正相关(P＜0.001);对照组在对应时间段二者无明显变化(P＞0.05).结论:NT4及其受体TrkB在肺纤维化大鼠中表达增加,可能与肺上皮细胞增生及TrkB/NT4轴的信号传导被扰乱等因素有关,说明NT4及其受体参与肺纤维化的发生发展过程.     

黄芩苷对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的保护作用及其机制

目的观察黄芩苷对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的保护作用及其机制。 方法将18只小鼠分为对照组、博来霉素组和黄芩苷组,每组6只。博来霉素组和黄芩苷组小鼠给予博来霉素（5 mg/kg）气管内给药以建立小鼠肺纤维化模型,对照组小鼠给予等量等渗NaCl溶液。建模后3 d黄芩苷组小鼠给予黄芩苷（25 g/kg）隔天腹腔注射,对照组和博来霉素组小鼠分别于相同时间点腹腔注射等量等渗NaCl溶液,均持续25 d。建模28 d后处死小鼠取肺组织,采用苏木素-伊红（HE）染色及Masson染色观察小鼠肺组织炎症和纤维化情况,并比较各组小鼠间肺组织纤维化评分及羟脯氨酸含量;采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测纤维胶原蛋白基因[Collagen 1a1信使RNA（mRNA）、Collagen 3a1 mRNA],Wnt3a/β-catenin信号通路相关基因[Wnt3a mRNA、基质金属蛋白酶3（MMP-3）mRNA、MMP-9 mRNA和Cyclin D1 mRNA]表达水平;采用Western-blotting检测上皮细胞-间充质细胞转分化（EMT）相关蛋白[Vimentin、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）]和β-catenin蛋白的表达水平。 结果光镜下观察发现,对照组小鼠肺组织结构完整,未见炎症细胞浸润;博来霉素组小鼠肺组织结构破坏,炎症细胞浸润,呈弥漫性肺纤维化改变;而黄芩苷组小鼠肺组织炎症细胞浸润及肺纤维化程度较博来霉素组小鼠均明显减轻。3组小鼠间肺纤维化评分、羟脯氨酸含量、Collagen 1a1 mRNA、Collagen 3a1 mRNA、Wnt3a mRNA、MMP-3 mRNA、MMP-9 mRNA、Cyclin D1 mRNA、Vimentin、α-SMA及β-catenin蛋白的比较,差异均有统计学意义（F = 12.012、8.414、46.224、30.179、85.912、125.435、19.521、40.247、72.731、58.169、70.471,P均< 0.001）。且进一步两两比较发现,博来霉素组小鼠上述指标较对照组均明显升高,而黄芩苷组小鼠上述指标较博来霉素组小鼠均显著降低（P均< 0.05）。 结论黄芩苷对于博来霉素诱导的肺纤维化小鼠具有保护作用,该保护作用与抑制Wnt3a/β-catenin信号通路和EMT相关蛋白的活化有关。     

肝细胞生长因子对腹膜透析腹膜纤维化防治作用的研究

目的探讨肝细胞生长因子对腹膜透析腹膜纤维化的防治作用及其机制。方法①MTT法测定肝细胞生长因子对腹膜间皮细胞增殖的影响；②酶联免疫（ELISA）法检测细胞培养液中纤连蛋白（FN）、转化生长因子-β1（TGF-β1）及纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1）水平；⑧逆转录-聚合酶链反应（RTPCR）法检测FN、PAI-1及TGF-β1 mRNA的表达。结果肝细胞生长因子浓度〉30ng／ml时，可以改善高糖对腹膜间皮细胞增殖的抑制作用。腹膜透析液组FN、PAI-1、TGF-β1蛋白水平显著升高，肝细胞生长因子组FN、PAI-1、TGF-β1蛋门水平均显著减少。腹膜透析液组高糖上调腹膜间皮细胞FN、PAI-1、TGF-β1 mRNA的表达，肝细胞生长因子组使FN、PAI-1、TGF-β1 mRNA的表达水平下调。结论肝细胞生长因子能改善高糖对腹膜间皮细胞增殖的抑制作用，同时可以使腹膜间皮细胞FN、PAI-1、TGF-β1的表达水平下调。     

促肝细胞生长因子对ConA致小鼠肝损伤保护机制探讨

目的探讨促肝细胞生长因子（pHCF）对ConA所致肝损伤的保护机制。方法将80只小鼠随机分成对照组、模型组和保护组。对照组经尾静脉注射生理盐水0．3ml／只，模型组和保护组刀豆蛋白A（ConA）注射等体积的ConA（20mg／kg），但保护组在实验前24h和1h经腹腔注射pHGF（300μg/kg／次）。观察各组小鼠的血清IL-18、NO浓度及ALT活性。结果模型组IL-18、NO浓度及ALT活性均显著高于对照组，模型组NO浓度及ALT活性均显著高于保护组，保护组IL-18浓度显著高于对照组；模型组IL-18、NO浓度与ALT活性呈显著正相关，IL-18与NO浓度也呈显著正相关。结论IL-18在ConA诱发肝损伤过程中具有重要作用但不是唯一途径，pHGF对ConA诱发肝损伤的保护作用是复杂的，可能是经过其它未知的途径降低NO以及对肝脏发挥保护作用的。