甲状腺过氧化物酶抗体TRFIA技术的建立及临床应用

目的:建立甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)竞争检测法。方法:用TPO抗原包板,用Eu3+标记羊抗鼠IgG做标记物,TRFIA检测人血清中的TPOAb。结果:TPOAb-TRFIA的灵敏度为1.0IU/ml;批内CV为3.2%～5.3%,批间CV为3.6%～5.6%;平均回收率为97.95%;热稳定性好;与电化学发光分析技术(ECLIA)比对,相关系数达0.9861;女性TPOAb测定值显著高于男性(P<0.01),且人群中TPOAb的阳性率女性也显著高于男性;TPOAb的正常值范围为≤32.6IU/ml。结论:本法建立的TPOAb-TRFIA是一个高灵敏和可靠的检测,有助于甲状腺疾病的临床诊断。     

非Graves甲亢和Graves'病FT3、FT4、TSH、TGA、TPO-Ab的变化及意义

目的探讨FT3、FT4、s-TSH(超灵敏)、甲状腺过氧化物酶抗体(antithyroid peroxidase antibody, TPO-Ab)、抗甲状腺球蛋白抗体(antithyroidglubulin antibody, TGA)水平在甲亢疾病和Graves'病中的改变及其临床意义.方法对43例非Graves'病患者和29例Graves'病患者、40例正常人分别检测血清TF3、FT4、s-TSH、TPO-Ab、TGA的水平.结果非Graves'病甲亢患者的FT3(15.01±11.01pg/ml)、FT4(38.30±19.82pg/ml)均明显高于正常人(分别为4.27±0.73pg/ml,16.16±2.58pg/ml,P＜0.01),s-TSH(0.25±0.25mIU/L)明显低于正常人(2.24±1.26mIU/L,P＜0.01),TPO-Ab(1319.74±1037.78IU/ml)明显高于正常人(0.01±0.01,P＜0.01)、TGA(33.39±22.43%)明显高于正常人(6.76±2.01,P＜0.01).Graves'病患者FT3(15.23±9.57pg/ml)、FT4(38.57±17.39pg/ml)均明显高于正常人(P＜0.01),s-TSH(0.79±0.46mIU/L)明显低于正常人(P＜0.01),TPO-Ab(2023.24±621.00IU/ml)明显高于正常人(P＜0.01)、TGA(49.72±20.55)明显高于正常人(P＜0.01),甲亢患者和Graves'病患者FT3、FT4、s-TSH无明显差别,但TGA和TPO-Ab明显低于Graves'病患者(P＜0.05).结论FT3、FT4、s-TSH(超灵敏)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)、抗甲状腺球蛋白抗体(TGA)在判断甲亢和Graves'病患者中有重要的临床鉴别诊断意义.     

TPOAb酶放大发光分析的临床意义

目的 :为了加强对自身免疫性甲状腺疾病的认识和提高其阳性检出率。现行的检测方法有TPOAb定量分析和TMA、TGA分析 ,两者之间的灵敏度差异颇大 ,需要进行比较和评价。方法 :本文对 998例甲状腺疾病 (甲亢 30 7例 ,桥本甲状腺炎 193例 ,甲状腺肿大 4 98例 )同步检测TPOAb和TMA、TGA ,辅以甲状腺细针穿刺细胞学诊断以比较其检测灵敏度。结果 :TPOAb的三组阳性率分别为 81 7%、96 89%和 4 2 97% ,而TMA测定仅为 5 4 72 %、6 5 80 %和 2 2 0 9% ,约有 1/ 3病例未能检出。结论 :为此建议有条件的单位应以高纯度的TPOAb定量分析替代TMA、TGA分析。     

393例孕妇促甲状腺激素及甲状腺过氧化物酶抗体筛查结果分析

目的探讨孕妇妊娠早期促甲状腺激素(TSH)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)筛查的重要性。方法以TSH值0.25～4.00μIU/mL为正常范围,根据TSH测定结果,将393例孕妇(孕周16～24周)分为甲状腺功能紊乱组141例,非甲状腺功能紊乱组252例。采用免疫放射法(IRMA)检测血清TSH,用电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测TPOAb。结果甲状腺功能紊乱组TPOAb阳性率高达75.18%,非甲状腺功能紊乱组TPOAb阳性率达17.06%;149例TPOAb阳性的孕妇,其中有52例TSH异常(34.90%),244例TPOAb阴性的孕妇,其中23例TSH异常(9.43%)。结论 TPOAb阳性的孕妇甲状腺功能紊乱明显增加,TPOAb阳性孕妇的甲状腺功能有向亚临床甲状腺功能减退的趋势。     

Graves病131I治疗前后甲状腺自身抗体的变化及其临床意义

测定放射性131I治疗前后Graves病患者血清甲状腺球蛋白抗体(TGAb)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)的变化,探讨131I治疗Graves病的疗效及影响早发甲低的因素.将334例Graves病患者按131I治疗前TGAb、TPOAb水平分为阳性组202例(TGAb＞115IU/mL,TPOAb＞34IU/mL)和阴性组132例(TGAb＜115IU/mL,TPOAb＜34IUmL),并对其治疗前及治疗后3、6、9及12个月的血清FT3、FT4、TSH及TGAb、TGAb水平进行动态观察.治疗后1年, 甲低发生率分别为阳性组23.8%,阴性组11.4%, 两组间甲低发生率有显著差异(P＜0.01).并且随着131I治疗后时间的推移, TPOAb、TGAb的阳性率逐渐降低.早发甲低与治疗前TGAb、TPOAb水平有关, 测定血清中TGAb、TPOAb浓度对Graves病患者131I治疗前调整给药剂量可提供参考, 并且131I治疗Graves病可以降低患者甲状腺激素自身抗体水平, 促进其自身免疫状态的改善和恢复.     

水源性高碘地区健康人群甲状腺自身抗体阳性筛查分析

目的:探讨沧州市健康体检人群甲状腺自身抗体的阳性率及其与甲状腺功能异常的相关性。方法:采用电化学发光免疫分析技术测定沧州市3 218 名健康体检人群血清促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)和甲状腺球蛋白抗体(TgAb),分别以TPOAb>34 U/ ml 和TgAb>115 U/ ml 为阳性,对检测结果进行统计分析。结果:健康人群甲状腺自身抗体的总阳性率为16.19%,且随年份增加呈明显的增高趋势,不同性别之间的阳性检出率有显著性差异(P <0.001),其中TPOAb、TgAb、TPOAb 和TgAb 同时阳性的检出率分别为14.57%、12.74%和11.12%,1 686 名女性的阳性检出率(21.53%、19.16%、16.67%)显著高于男性(6.92%、5.68%、5.03%),差异有统计学意义(P 均<0.001),且随年龄增加阳性检出率逐渐升高,女性阳性率高峰在逸70 岁年龄组,男性阳性率高峰在50 ~59岁年龄组。甲亢和亚甲亢、甲减和亚甲减甲状腺自身抗体的阳性检出率和OR 均有显著性差异(P<0.001)。结论:沧州市健康体检人群甲状腺自身抗体的阳性率较高,对甲状腺功能正常而自身抗体阳性者进行动态监测、随访或早期干预,有利于甲状腺疾病的早期诊断、鉴别诊断及其防治。     

甲状腺球蛋白抗体和甲状腺过氧化物酶抗体定量检测在甲状腺肿大患者病因诊断上的应用

目的探讨甲状腺球蛋白抗体(TGAb)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)定量检测在甲状腺肿大患者病因诊断上的应用。方法对291例甲状腺肿大患者血清和86例正常人血清用直接化学发光定量检测TGAb和TPOAb,并对甲状腺肿大患者检测甲功5项。结果甲状腺肿大患者TGAb和TPOAb浓度分别为(254±417)U/ml和(1001±1108)U/ml,有124例确诊为自身免疫性甲状腺炎(AITT),90例诊断为单纯性甲状腺肿大;AITT患者TGAb和TPOAb浓度和抗体检出率明显高于非AITT患者,P<0.01。结论定量检测血清TGAb和TPOAb对甲状腺肿大患者在病因诊断上有重要意义。     

甲状腺自身抗体的两种方法检测结果的比较及临床价值的探讨

目的对比两种方法检测甲状腺球蛋白抗体(TGA)、甲状腺微粒体抗体(TMA)、甲状腺过氧化酶抗体(TPoA)结果及其临床价值.方法对7例桥本氏病(HD)和甲状腺功能亢进40例,采用RIA法检测TGA、TMA及 CLIA法测定其TGA、TPoA的水平.结果 HD患者RIA法检测TGA、TMA和 CL IA法检测TGA、TPoA均高于正常水平,21例甲亢患者两种方法的检测结果均有1项以上增高;7例CLIA法检测TGA、TPoA有1项以上增高,但RIA法检测TGA、TMA均为阴性;其余11例两种方法测定结果均为正常水平.相关系数比较:方法内TGA 和TMA r=0.94(RIA法),TGA和TPoA r=0.15(CLIA法);RIA法和CLIA法TGA r=0. 55,TMA和TPoA r=0.63.结论①对于HD,TGA和TMA或TGA和TPoA 的同时检测;②对于甲亢CLIA法检测TGA和TPoA的阳性率明显优于RIA法检测TGA和TMA. 采用CLIA法直接测定TPoA更有临床价值.     

促甲状腺激素、甲状腺过氧化物酶抗体和促甲状腺激素受体抗体检测在甲状腺疾病中的应用价值

探讨促甲状腺激素（TSH）、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）、促甲状腺激素受体抗体（TRAb）在甲状腺疾病中的诊断价值。对44例Graves病（GD）、29例桥本甲状腺炎（HT）、13例亚甲炎患者和26例正常对照,采用电化学发光免疫分析法测定TSH、TPOAb、TRAb的含量,分析其在几组病例中的意义。三病例组的TSH、TPOAb、TRAb含量与正常对照组比均有显著差异（P〈0.01）;HT组TPOAb的测值和阳性率又显著高于GD组,而GD组TRAb的测值和阳性率都显著高于HT组,经统计学检验两者均有显著意义（P〈0.05）。结果说明,TSH是甲状腺功能的非常敏感的特异性参数,TPOAb、TRAb的检测对鉴别诊断GD和HT有着重要意义。     

TGA、TPOAb、TRAb测定对甲状腺疾病的诊断价值

近年来，甲状腺疾病的患病率呈上升趋势，女性发病率明显高于男性。甲状腺激素的检测只能对初诊病人的甲状腺功能状态进行区分，而甲状腺球蛋白抗体（TGA）、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）、甲状腺激素受体抗体（TRAb）的检测对于多种甲状腺疾病鉴别诊断、指导治疗和疗效预测具有重要价值。为此，我们对近几年来我院门诊和住院治疗的295例甲状腺疾病患者根据临床诊断、甲状腺激素水平进行分组检测TGA、TPOAb、TRAb含量，并将检测结果和阳性率进行组间比较分析，并探讨其临床价值，现报道如下。     

TRAb放射受体分析在甲状腺疾病中的临床应用

目的 :探索TRAb放射受体分析在甲状腺疾病中的临床价值。方法 :采用放射受体法 (RRA)对 2 95例 (5组 )甲状腺疾病患者血清中TRAb进行测定 ,测定结果分别与 4 5例正常对照组进行比较。结果 :Graves’病症状未控制组、Graves’病症状控制组及原发性甲减组TRAb均高于正常对照组 (P <0 0 1～ 0 0 0 1) ;而自主性高功能腺瘤组、单纯性甲状腺肿组与正常对照组比较 ,差别无显著性 (P均 >0 0 5 ) ;Graves’病症状未控制组与Graves’病症状控制组比较 ,差别亦无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :Graves’病患者和原发性甲减患者的发病可能与TRAb有关 ,TRAb可作为病因诊断的一种指标 ,但不能用来评价Graves’病的甲亢严重程度。     

甲状腺过氧化物酶抗体在甲亢、甲状腺占位性病变诊治中的临床意义

目的观察不同临床治疗阶段甲亢、甲状腺占位性病变患者血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)浓度的变化,探讨其临床指导价值。方法采用固相化学发光酶免疫分析法观察血清TPOAb浓度变化与甲状腺功能减退(化验室检查结果)的关系。结果89例患者中,有50例患者治疗前TPOAb正常或仅轻度增高,治疗后呈现阳性者31例,其中19例发生了甲减或亚临床型;39例治疗前TPOAb阳性,治疗后转阴2例,26例浓度降低,发生甲减3例,29例患者服用不同剂量的甲状腺片而未出现甲减或亚临床型。结论甲亢和甲状腺占位性病变患者在治疗过程可伴有TPOAb浓度的变化,TPOAb的明显增高,预示出现甲减的可能性大,TPOAb阳性的患者应被关注,高滴度TPOAb的甲亢患者治疗方案的选择要慎重。     

Tg与TGA在分化型甲状腺癌术后监测及其疗效观察中的应用价值

目的：探讨甲状腺球蛋白（thyroglobulin,Tg）在分化型甲状腺癌（differentiated thyroid carcer,DTC）诊断及术后疗效观察中的应用价值。方法：采用放射免疫分析,对198例行甲状腺全切及次全切的DTC患者进行术后及术后半年血清Tg水平的追踪检测,同时行甲状腺球蛋白抗体（thyroglobulin antibody,TGA）的检测,并与正常对照组与转移组进行比较。结果：160例Tg〈20ng/ml的DTC患者阴性组术后1周血清Tg水平与对照组比较无明显差异（P〉0.05）;Tg水平〈10ng/ml者为56例,占35%。38例Tg〉20ng/ml阳性组术后1周时Tg水平明显高于阴性组和正常对照组（P〈0.01）。术后半年Tg水平随着病情好转逐渐下降,与术前1周之间呈明显正相关（t=4.951,P〈0.01）。23例远处转移癌的Tg水平明显高于颈部淋巴结转移组（P〈0.01）。术后Tg阴性患者其TGA增高者为25例,占20%。术后Tg阳性组TGA增高阳性率为42%。远处转移组TGA增高阳性率为56%。结论：Tg作为DTC的肿瘤标志物,在监测DTC手术效果、预后判断、复发、转移的诊断和鉴别治疗效果中具有重要的指导作用。     

TPO-Ab在甲状腺自身免疫性疾病中的应用

目的：探讨甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）在甲状腺功能亢进（甲亢）、甲状腺功能减退（甲减）、单纯性甲状腺肿大患者的临床价值。方法：采用放射免疫分析检测甲状腺疾病患者血清TGA、TMA、TPO-Ab浓度及血清FL、FT4、TSH水平,分析TPO-Ab在69例甲亢、53例甲减及45例单纯性甲状腺肿的阳性率。结果：TPO-Ab的阳性率（82％-92．5％）明显高于同组的TGA（44．2％）、TMA（69．8％）,甲减组TPO-Ab的阳性值（平均57．4％）明显高于甲亢组（31．2％）和单纯甲状腺肿组（17．6％）,差异有显著意义（P〈0．01）。结诊!TPO-Ab对自身角癌件甲状腺疾病的诊断、治疗和预后评估具右一定的临床价值．     

Localization of key amino acid residues in the dominant conformational epitopes on thyroid peroxidase recognized by mouse monoclonal antibodies

Autoantibodies to thyroid peroxidase (TPO), the major target autoantigen in autoimmune thyroid diseases, recognize conformational epitopes limited to two immunodominant regions (IDRs) termed IDR-A and -B. The apparent restricted heterogeneity of TPO autoantibodies was discovered using TPO-specific mouse monoclonal antibodies (mAbs) and later confirmed by human recombinant Fabs. In earlier studies we identified key amino acids crucial for the interaction of human autoantibodies with TPO. Here we show the critical residues that participate in binding of five mAbs to the conformational epitopes on the TPO surface. Using ELISA we tested the reactivity of single and multiple TPO mutants expressed in CHO cells with a panel of mAbs specifically recognizing IDR-A (mAb 2 and 9) and IDR-B (mAb 15, 18, 64). We show that antibodies recognizing very similar regions on the TPO surface may interact with different sets of residues. We found that residues K713 and E716 contribute to the interaction between mAb 2 and TPO. The epitope for mAb 9 is critically dependent on residues R646 and E716. Moreover, we demonstrate that amino acids E604 and D630 are part of the functional epitope for mAb 15, and amino acids D624 and K627 for mAb 18. Finally, residues E604, D620, D624, K627, and D630 constitute the epitope for mAb 64. This is the first detailed study identifying the key resides for binding of mAbs 2, 9, 15, 18, and 64. Better understanding of those antibodies' specificity will be helpful in elucidating the properties of TPO as an antigen in autoimmune disorders.     

TPO-Ab及TGA与淋巴细胞亚群联检在AITD中的临床价值

目的:探讨自身免疫性甲状腺疾病(AITD)发病与甲状腺自身抗体之间存在的作用关系.方法:分别采用电化学发光法(ECL)检测了甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)水平,采用放射免疫分析检测了89例男性及81例女性AITD患者和相应正常对照组的甲状腺球蛋白抗体(TGA),并采用免疫荧光标记单克隆抗体和流式细胞仪联检T淋巴细胞亚群(CD4 /CD8 )的活性.结果:AITD患者TPO-Ab以及TGA的水平均显著高于对照组(P＜0.01),相关分析显示,抗体水平与淋巴细胞T细胞亚群(CD4 /CD8 )活性变化没有明显相关(P＞0.05).结论:甲状腺自身抗体的水平变化可作为AITD部分病因的推测和提示.     

抗髓过氧化物酶及乳铁蛋白抗体对自身免疫性肝炎检测的临床研究

目的:探讨抗髓过氧化物酶抗体(AMPA)及抗乳铁蛋白抗体(ALA)对自身免疫性肝炎(AIH)检测的临床意义及评估.方法:对63例AIH(53例AIH-Ⅰ和10例AIH-Ⅱ)、206例非AIH患者和50例健康体检者均采用ELISA法检测AM-PA和ALA;间接免疫荧光法(IIF)检测抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(ASMA)和抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA),观察临床评价指标,并对结果进行回顾性分析.结果:63例AIH和206例非AIH检测AMPA阳性率分别是61.9％(39/63)和3.40％(7/206),经x2检验,P ＜0.01；AIH组中AIH-Ⅰ组阳性率73.6％(39/53).63例AIH患者检测ALA阳性12例(19.0％),AIH-Ⅰ中阳性11例(20.8％).AIH自身抗体临床评价指标显示ALA敏感性最低为19.05％,但其特异性最高为99.6％,AM-PA特异性为97.27％.结论:AMPA、ALA与AIH的发生发展存在相关性,两者联合其他自身抗体检测对AIH的诊断及其亚型的鉴别有重要意义.     

TMA与TGA检测对甲状腺疾病的临床诊断价值

根据174例疑诊患者的TMA、TGA，T3，T4放射免疫测定结果及其临床表现进行诊断，结果表明桥本氏甲状腺炎和甲亢所占的比例(分别为38．51％及31．61％）显著高于甲减和亚急性甲状腺炎(分别为6．32％和4．02％)，P＜0．05。甲减患者TGA TMA的阳性率（81．82％)显著高于甲亢(50．91％)，桥本氏甲状腺炎(50．75％)及亚急性甲状腺炎(57．14％)，P＜0．05。单项抗体阳性者以TMA较TGA为多。本文结果提示在甲状腺疾病中TMA，TGA的阳性结果存在相互重叠现象，与T3、T4联检并结合临床表现进行综合分析有助于甲状腺疾病的鉴别诊断并正确指导治疗。     

Mutational analysis of the RET proto-oncogene in 71 Japanese patients with medullary thyroid carcinoma

Multiple endocrine neoplasia types 2A and 2B (MEN2A and MEN2B) and familial medullary thyroid carcinomas (FMTC) are caused by germline mutations in the RET proto-oncogene. To investigate the spectrum of RET mutations among Japanese patients, we screened the RET gene in 71 patients with thyroid carcinomas. The panel included representatives of 44 families carrying FMTC or MEN2, 22 sporadic medullary thyroid carcinomas (MTCs), and five MTCs without familial information. Mutations in nucleotide sequences encoding one of three specific cysteine residues in the extracellular domain of the RET protein were found in 33 of the 34 MEN2A patients and in five of the six FMTC patients examined. A mutation at codon 918, causing the substitution of threonine for methionine in the tyrosine kinase domain of the protein, was found in germline DNAs of all four patients with MEN2B and in two of the 22 patients with sporadic MTCs; codon 918 was mutated somatically in tumor DNAs from three other sporadic cases. Germline mutations of codon 768, GAG to GAC (Glu to Asp), were detected in one FMTC, in one patient with sporadic MTC, and in one of the patients without familial information. Two somatic mutations, an Asp to Gly substitution at codon 631 and a Cys to Arg substitution at codon 634, had not been reported previously. Of five germline mutations found among the 22 sporadic cases, four were confirmed as de novo mutations since in each case neither parent carried the mutation. As nearly one-fourth of the patients with sporadic MTCs carried germline mutations and 50% of their children are expected to develop MTC and other endocrine tumors, these results indicated the importance of careful clinical surveillance of family members of any patient with MTC. Received: August 22, 1997 / Accepted: October 22, 1997     

白癜风患者血清免疫球蛋白、补体、自身抗体检测及分析

目的 检测白癜风患者血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM,补体C3、C4,抗核抗体(ANA)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(A-TPO)、抗甲状腺球蛋白抗体(A-TG)的水平并进行比较分析.方法 收集门诊确诊为白癜风的患者血清168例和正常体检人群血清88例,性别、年龄分布无统计学差异,采用速率散射比浊法检测白免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和补体C3、C4,采用ELISA法检测抗核抗体,采用电化学发光免疫分析法检测A-TPO、A-TG,结果用SPSS19.0统计软件进行分析.结果 白癜风患者组血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM,补体C3、C4表达水平与正常人对照组差异不具有统计学意义(P＞0.05);白癜风组与正常对照组ANA阳性率分别为8.1％和5.7％,经比较差异不具有统计学意义(P＞0.05);两组间A-TPO的阳性率分别为18.8％和10.2％,差异有统计学意义(P＜0.05);两组A-TG阳性率分别为25.8％和4.5％,经比较差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 部分白癜风患者存在体液免疫紊乱,在发病机制上可能与自身免疫性甲状腺疾病有相似之处;免疫球蛋白、补体及抗核抗体等免疫指标的检测在白癜风诊治中评价的意义不大.